全 文 ：表 1 两组患者临床疗效比较(n)
组别 治愈 好转 无效 有效率(%)
观察组 14 15 1 96． 67*
对照组 5 23 2 93． 33*
注:与对照组相比，* P ＜ 0． 05。
4 讨论
临床上与脊柱相关的疾病常导致失眠，多因为颈
部不适而使局部交感神经受刺激，进一步使得大脑兴
奋性增高，或者由于颈动脉由于颈椎增生，颈椎关节错
位或者颈部肌肉痉挛受刺激而引起失眠，从中医来讲，
属于“不寐”范畴［2 － 3］。当今临床中推拿已然作为最
为常用的干预手段，通过颈部推拿，可以有效地缓解肌
肉痉挛，从而改善头部血液供应，因此有助于患者临床
症状的改善，在很大程度上提高患者的睡眠质量。常
规推拿手法中头部推拿可以加强阳气的激发，平衡阴
阳，养心安神;颈部推拿则可以直接作用于颈部肌肉以
及椎间关节，通过解除颈肌痉挛，改善颈痛从而改善睡
眠。本科室通过加强颈中推拿，重点松解斜方肌以及
胸锁乳突肌，减少对椎动脉和交感神经的压迫，改善血
流速度，改善局部血液循环，提高脑血流量，从而改善
睡眠。
参考文献:
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檲檲檲檲檲檲檲檲檲檲檲檲檲檲檲檲檲檲檲檲檲檲檲檲檲檲檲檲檲檲檲檲檲檲檲檲檲檲檲檲檲檲檲檲檲檲檲檲檲
111 － 112．
综 述
浅谈蝙蝠葛酚性碱对胰腺癌 BxPC － 3
荷瘤抑制机理的研究
仲丽丽1，周忠光2，尹丽颖2
(1．黑龙江中医药大学附属第一医院，黑龙江 哈尔滨 150040;
2．黑龙江中医药大学，黑龙江 哈尔滨 150040)
摘 要:近年来，对蝙蝠葛酚性碱抗肿瘤作用及机制开展了大量研究，结果证明蝙蝠葛酚性碱对人胰腺
癌细胞株 BxPC －3 尤为敏感( 剂量为 20mg /ml 的蝙蝠葛酚性碱对 BxPC － 3 的抑制率高达 80． 54% ) 。
在此基础上，建立人胰腺癌细胞株 BxPC － 3 裸鼠移植瘤模型，对蝙蝠葛酚性碱抗胰腺癌的相关基因和
细胞因子进行了大量基础研究。结果表明，蝙蝠葛酚性碱对胰腺癌细胞株 BxPC － 3 裸鼠移植瘤表现出
明显抑制作用 ( 剂量为 10mg /kg 的蝙蝠葛酚性碱对人胰腺癌细胞株 BxPC － 3 移植瘤裸鼠抑瘤率为
52. 83% ) ，并且可影响细胞凋亡、细胞增殖和侵袭转移相关基因和细胞因子的表达。初步探讨蝙蝠葛
酚性碱( PAMD) 的抗肿瘤机制，为寻求中医药防治恶性肿瘤的新途径和研制新药提供实验和理论依据。
关键词:胰腺癌;蝙蝠葛酚性碱( PAMD) ;抑制机理
中图分类号:Ｒ285． 5 文献标识码:A 文章编号:1002 － 2406(2014)02 － 0105 － 03
基金项目:国家自然科学基金项目(No． 81173599)
作者简介:仲丽丽(1979 －)，女，副主任，主治医师，博士研究生，主要
研究方向:中药抗肿瘤。
通讯作者:周忠光(1957 －)，男，医学博士，教授，博士研究生导师，主要
研究方向:中药抗肿瘤的研究。
收稿日期:2013 － 06 － 19
修回日期:2013 － 07 － 12
胰腺癌是一种恶性程度很高的消化道肿瘤，由于
发病隐匿，侵袭性强，手术切除率低，放疗、化疗、内分
泌和免疫治疗等治疗手段疗效有限，5 年生存率仅有
3%，被称为肿瘤界中最骇人的“杀手”。近年来，胰腺
癌发病率在国内外均呈上升趋势，在我国居癌症死亡
率的第 6 位［1］。关于胰腺癌的治疗，世界各国研究颇
多，但至今仍无有效的治疗措施。因此，寻找有效的治
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疗药物，挽救胰腺癌患者的生命和提高其生活质量是
医药工作者迫在眉睫的任务。
1 胰腺癌治疗的现状及存在问题
目前，外科手术是能够根治胰腺癌的唯一手段，但
多数患者诊断时已达晚期，手术切除率仅 10%。胰腺
癌的非手术治疗主要包括化疗、靶向治疗、放疗和中医
药治疗。目前为止，吉西他滨依然是胰腺癌的一线标
准化疗方案，许多以其为基础的联合化疗，效果有一定
程度的提高，但仍然不够理想。由于全身静脉化疗的
严重毒副作用，限制了剂量的增加，影响了疗效的提
高。近年来，改全身静脉化疗为区域灌注化疗或间质
化疗，使药物在胰腺癌局部具有较高的浓度和作用时
间，临床疗效有所提高，但给药不便限制了临床使用。
分子靶向治疗仍然存在技术不够完善、疗效不够理想
的困境，还不能单独作为晚期胰腺癌的一线治疗药物。
2 中医药治疗胰腺癌的现状分析
中医药治疗肿瘤的历史悠久，在 2000 多年的实践
中，形成了独特的理论体系。中药多成分、多靶点、多
效应的特点和毒副作用小、协同作用强和整体调节的
优势，在胰腺癌这种难治性疾病的治疗中具有独特的
优势。据文献报道，中医药对胰腺癌，特别是中晚期患
者，在预防手术后肿瘤复发、减少放化疗毒副作用、缓
解和控制其症状、提高患者生活质量、延长生存期等方
面具有较好疗效。然而，中医药针对胰腺癌的研究，仍
以临床疗效观察为主，而相关的基础研究，尤其是中药
作用机制研究尚比较薄弱［2］。
蝙蝠葛酚性碱(phenolic alkaloids from Menispher-
mum dauricum，PAMD)是从中药北豆根中提取的多种
脂溶性生物碱的混合物，主要含有蝙蝠葛碱(Dau-
ricine，Dau)和蝙蝠葛苏林碱(Daurisoline，DS)，其他成
分含量甚微。关于蝙蝠葛酚性碱的药理作用，以往多
集中在抗心律失常、抗心肌缺血、抗脑缺血和抗炎镇痛
等方面，而近年研究报道，蝙蝠葛酚性碱对泌尿系肿
瘤、胃癌、白血病等具有抗肿瘤活性［3］。在对蝙蝠葛
酚性碱抗肿瘤的初步筛选时发现，该药对人胰腺癌细
胞株 BxPC － 3 尤为敏感［4 － 5］，并建立胰腺癌细胞株
BxPC － 3 裸鼠移植瘤模型，对蝙蝠葛酚性碱抗胰腺癌
的相关基因进行了大量基础研究。结果表明，该药对
胰腺癌细胞株 BxPC －3 裸鼠表现出明显抑瘤作用，并
且可影响细胞凋亡、细胞增殖和侵袭转移相关基因和
细胞因子(包括 DPC － 4 /Smad4)的表达［6 － 8］。然而，
蝙蝠葛酚性碱抗胰腺癌的分子调控机制仍有待于深入
研究。
3 抑癌基因 DPC4 与胰腺癌
现有资料表明，胰腺癌的发生是多基因参与、多阶
段累积渐进的复杂过程。癌基因激活和抑癌基因失活
是肿瘤发生最基本的分子事件，这会导致细胞生长失
控而发生癌变。DPC4 基因(deleted in pancreatic carci-
noma locus 4)是近年来研究得较多的一种抑癌基因。
DPC4 基因是在胰腺癌中首次被发现的，命名为胰腺
癌缺失基因(DPC4)［9］。目前认为，DPC4 基因在胰腺
癌中的变异率约为 50%，而它在其它肿瘤总的变异率
通常小于 10%，这表明 DPC4 基因是胰腺癌发生的较
特异的肿瘤抑制基因。DPC4 /Smad4 的变异可概括为
以下 3 种情况:1)染色体杂合性缺失或纯合性缺失;
2)基因突变;3)基因表达水平低下或缺乏［10］。
关于 DPC4 基因与胰腺癌发病机理的研究，以往
研究者主要集中在 TGF － β 信号传导通路方面。
DPC4 基因编码产物为 Smad4 蛋白。Smad4 为 Smads
蛋白家族成员之一。Smads 蛋白家族共有 8 个成员，
其中有 6 种 Smads 蛋白即 Smad2 ～ 7 参与 TGF － β 信
号传导过程。而 DPC4 /Smad4 蛋白在 TGF － β 信号传
导途径中处于中枢地位。胰腺癌中 DPC4 基因的改变
将阻断 TGF － β 传导的抑制胰腺肿瘤细胞生长的信
号，进而导致肿瘤细胞失去抑制，迅速生长。也有人认
为，TGF － β 抵抗的产生和 Smad4 改变可能是相互独
立的事件，因某些 Smad4 缺陷的细胞系仍可获得
TGF － β转录效应，且有的 Smad4 缺陷的肿瘤细胞依
然可以通过 TGF － β刺激抑制其生长，而某些 TGF －
β效应缺陷的细胞系，恢复 Smad4 后，TGF － β 信号并
不能恢复［11］。DPC4 基因是一种抑癌基因，且它的失
活发生在胰腺癌的较晚的阶段。因此，DPC4 基因与
胰腺癌的预后有密切关系［12］。Shen W［13］等将含有
DPC4 的逆转录病毒载体转染至人胰腺癌细胞株
BxPC －3 中，发现能够抑制肿瘤细胞生长，并且抑制其
侵袭转移，并下调 VEGF 表达水平。由此可见，DPC4
作为胰腺癌的特异性抑癌基因，与胰腺癌的发生、发展
和预后有密切关系。这些文献对于阐明胰腺癌发病机
制和抗胰腺癌的新药开发提供了新思路。同时，关于
DPC4 具体的分子调控机制仍需要进一步深入研究。
本课题组前期工作证实，蝙蝠葛酚性碱对 BxP － 3
移植瘤裸鼠具有抑瘤作用，并可上调瘤组织 DPC4 基
因和蛋白的表达水平［13 － 14］，同时下调 VEGF的表达水
平。有文献报道，VEGF 是 DPC4 的靶基因之一［13］。
由此我们大胆推测，蝙蝠葛酚性碱是通过上调 DPC4 /
Smad4 的表达来抑制胰腺癌，而 DPC4 /Smad4 是其作
用靶点。
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4 ＲNA干扰技术辅助药物靶点的确证
这一推测还有待进一步研究来证实，原因在于蝙
蝠葛酚性碱作用的靶分子比较多，不只作用于 DPC4，
对于 K － ras、MMP －2、MMP －9、VEGF等都有作用，而
这些分子都与胰腺癌密切相关。因此，DPC4 是否为
蝙蝠葛酚性碱抗胰腺癌的作用靶点尚未最终明确。近
年来兴起的 ＲNA干扰技术为我们实现研究目标提供
了技术手段［14］。ＲNA干扰(ＲNAi)是指在真核细胞中
引入 dsＲNA(双链 ＲNA)，从而使与引入的 dsＲNA 序
列同源的基因 mＲNA(信使 ＲNA)产生特异性降解的
现象。由于 ＲNAi对靶基因表达的抑制具有高效性和
特异性，所以 ＲNAi 技术在疾病相关基因的功能研究
以及药物作用机制研究中发挥着越来越重要的作
用［15］。
5 基因芯片和蛋白质组学技术有利于深入探讨药物
作用机制
由于细胞的行为最终由其遗传背景决定，研究药
物处理后基因表达的改变有利于探明药物的作用机制
和证实抗肿瘤药的药效和安全性。DNA 微阵列技术
(又称为基因芯片技术)作为检测基因表达的有力工
具，其突出特点在于能够对样本中的基因表达信息进
行快速、高通量的检测和分析［16］。尽管基因芯片可以
提供细胞内表达的信息，然而最终调节和介导细胞功
能的不是 mＲNA，而是由 mＲNA 翻译的蛋白质。仅仅
依靠基因水平分析是不够全面的。而使用蛋白质组学
方法探讨和阐明药物处理前后蛋白表达谱的变化，能
更直接准确地阐明药物作用的分子机理。但是蛋白质
组学技术仍存在许多缺陷，目前，低丰度，难溶性蛋白，
大分子蛋白难以被检测等技术问题还没有得到很好地
解决，而基因芯片技术不存在这些问题。因此，基因芯
片技术和蛋白质组学技术存在互补，同时运用这两项
技术将更为准确和全面地阐明药物的作用机理。
6 小结
综上所述，胰腺癌是一种恶性程度很高的消化道
肿瘤，至今仍无有效的治疗措施。前期工作证实，蝙蝠
葛酚性碱对 BxPC －3 移植瘤裸鼠具有抑瘤作用，并可
上调瘤组织 DPC4 基因的表达，同时下调 VEGF 的表
达。而据文献报道，VEGF是 DPC4 的靶基因之一。由
此我们大胆推测，蝙蝠葛酚性碱是通过上调 DPC4 的
表达来抑制胰腺癌。我课题组拟采用 ＲNA 干扰技术
建立稳定的 DPC4 沉默表达的 BxPC － 3 细胞株，并建
立胰腺癌细胞和裸鼠移植瘤模型，以蝙蝠葛酚性碱进
行干预，从体内和体外不同角度，通过观察蝙蝠葛酚性
碱对其生物学特性的影响，来探讨蝙蝠葛酚性碱抑制
胰腺癌作用与 DPC4 表达的相关性;在此基础上，以基
因芯片和蛋白质组学技术，结合生物信息学技术，从基
因和蛋白质水平上，进一步全面系统地探讨蝙蝠葛酚
性碱抗胰腺癌中的作用和分子调控机制。本研究将有
助于阐明蝙蝠葛酚性碱抗胰腺癌的作用靶点及其分子
调控机制，为蝙蝠葛酚性碱应用于胰腺癌的临床治疗
提供更加充分的理论依据，并为开发高质量的抗胰腺
癌中药新药奠定坚实的基础，具有重要的理论意义和
广阔的应用前景。
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