全 文 :中国中医急症 2013 年 10 月第 22 卷第 10 期 JETCM. Oct. 2013,Vol. 22,No.10
·研究报告·
病毒性肺炎是流感病毒感染后较严重的并发症,
病死率较高。 石荠苧(Mosla Scabra)为江浙民间常用中
草药,具有清热解毒,理气化湿之功效,主治夏日感冒、
疮毒和慢性支气管炎等。 研究表明, 石荠苧含有挥发
油、黄酮类化合物等成分,具有显著的抗菌、抗流感病
毒、抗炎、镇痛、抗氧化等多种药理作用[1-8]。 本研究采用
甲型流感病毒 (H1N1亚型)PR8 株感染小鼠造成病毒
性肺炎模型, 观察小石荠苧总黄酮预防性给药后各组
对小鼠肺指数、死亡率、生存时间的影响。 现报告如下。
1 材料与方法
1.1 材料 (1)动物。 清洁级 ICR 小鼠,体质量 18~
22 g, 雌雄各半。 由浙江中医药大学实验动物中心提
供。实验动物许可证号:SCXK(浙)-2009-0022。 (2)病
毒株。甲型 H1N1流感病毒鼠肺适应株 PR/8/34 株,浙
江省疾病预防控制中心病毒所保留毒种, 血凝效价为
1∶1024,-80 ℃超低温保存。 (3)药物。 根据前期研究结
果[3],取石荠苧药材粉末适量,石油醚索氏回流脱脂,
加 20 倍量 65%乙醇,80 ℃水浴回流提取 2 次, 每次
1 h,过滤,合并滤液,回收乙醇至无乙醇味,乙酸乙酯
萃取,得石荠苧总黄酮(TFS),冷藏备用。 以芦丁为对
照品,采用比色法测定总黄酮含量为 81%,临用前用
吐温-80混悬成相应的浓度。
1.2 分组与给药 将小鼠随机分成空白组、 模型组、
阳性组、TFS高、中、低剂量组,共 6组。 每组 15只。 各
组于攻毒前预先灌胃给药 2~3 d,阳性组按临床等效剂
量 0.02 g/(kg·d)给利巴韦林,TFS 低、中、高剂量组分
别给予 150、300、450 mg/kg(低剂量组给药量相当于成
人每日临床用量), 空白组和模型组给予等剂量蒸馏
水,连续给药至攻毒后第 7日。
1.3 病毒感染 给药后第 2 日,除正常组外,各组小
鼠用乙醚轻度麻醉后, 以 10 个 LD50流感病毒滴鼻感
染小鼠,每只 20 μL。
1.4 指标测定 (1)小鼠行为状态及死亡率。 感染小鼠
后记录不同时间的小鼠体质量,观察小鼠的行为状态,
石荠苧总黄酮治疗流感病毒性肺炎小鼠的
实验研究*
徐义云 1 陈 京 1△ 徐 攀 2 陈蕊蕊 1
(1.浙江中医药大学,浙江 杭州 310053;2.浙江省中医药研究院,浙江 杭州 310007)
中图分类号:R285.5 文献标志码:A 文章编号:1004-745X(2013)10-1705-02
【摘要】 目的 观察石荠苧总黄酮对甲型 H1N1 流感病毒 PR8 株感染小鼠肺炎的影响。 方法 滴鼻感染小鼠
建立流感病毒性肺炎模型,采用预防性给药,以利巴韦林为阳性对照,观察给药后各组对小鼠死亡率、生存时
间、肺指数的影响。 结果 石荠苧总黄酮给药后能明显降低流感病毒 PR8 株感染后小鼠的肺指数、减少死亡
率并延长生存时间(P< 0.05 或 0.01)。 与阳性组比较,差异无统计学意义(P > 0.05)。 结论 石荠苧总黄酮在体
内对甲型 H1N1 流感病毒 PR8 株感染小鼠造成的病毒性肺炎具有明显的治疗作用。
【关键词】 石荠苧总黄酮 H1N1 流感病毒 病毒性肺炎
Effect of Flavonoids from Mosla Scabra on Pneumonia Model Infected by Influenza Virus in Mice XU
Yi-yun1,CHEN Jing1,XU Pan2,et al. 1 Zhejiang Chinese Medical University,Zhejiang,Hangzhou 310053,Chi-
na;2 Zhejiang Academy of Traditional Chinese Medicine,Zhejiang,Hangzhou 310007,China
【Abstract】 Objective: To investigate the effect of flavonoids from Mosla Scabra on treatment of influenza H1N1
virus (PR8) in mice. Methods: The nasal dropping method was adopted to infect normal mice to establish pneu-
monia model of influenza viral infection.The pulmonary index,the mortality and the life span of mice were com-
pared among groups after medication. Results: The flavonoids from Mosla Scabra of 3 doses markedly decreased
pulmonary index and mortality after infection in normal mice,as well as prolonged life span. There was no signifi-
cant difference statistically as compared between flavonoids from Mosla Scabra and Ribavirin. Conclusion: The
flavonoids from Mosla Scabra can treat pneumonia of influenza viral infection remarkably.
【Key words】 Flavonoids in Mosla Scabra;Influenza H1N1 virus;Pneumonia
*基金项目:浙江省自然科学基金资助项目(Y2111058)
△通信作者
1705· ·
中国中医急症 2013 年 10 月第 22 卷第 10 期 JETCM. Oct. 2013,Vol. 22,No.10
表 1 感染后第 7 日各组死亡率比较(%)
组 别 n
空白组 15
模型组 15
阳性组 15
死亡数(n) 死亡率 死亡保护率 生命延长率
0 0 — —
11 73.33 26.67 —
2 13.33△△ 86.67△△ 28.27
TFS高剂量组 15 4 26.67△△ 73.33△△ 19.23
TFS中剂量组 15 3 20.00△△ 80.00△△ 21.73
TFS低剂量组 15 4 26.67△△ 73.33△△ 17.88
与模型组比较,△P< 0.05,△△P< 0.01。 下同。
表 2 各组肺指数及肺指数抑制率比较
组 别 n
空白组 15
模型组 15
阳性组 15
肺指数(%,x±s) 肺指数抑制率(%)
0.69±0.03 —
1.43±0.13** —
1.12±0.04**△ 41.74
TFS高剂量组 15 1.08±0.05**△ 47.52
TFS中剂量组 15 1.03±0.04**△ 54.56
TFS低剂量组 15 1.10±0.07**△ 45.13
与空白组比较,*P< 0.05,**P< 0.01。
记录小鼠死亡数和死亡时间。每日观察直至感染后7 d。
计算死亡率、 死亡保护率、 平均存活天数和生命延长
率。 死亡率=死亡动物数/动物总数×100%; 死亡保护
率=(模型组死亡率平均值-实验组死亡率平均值)/模
型组死亡率平均值×100%; 生命延长率=(给药组平均
存活天数-模型组平均存活天数)/模型组平均存活天
数×100%。 (2)肺指数与肺指数抑制率:测定感染 7 d
后,称重,处死小鼠,取肺组织,以生理盐水洗涤 2 次,
用滤纸吸干肺组织表面水分,称重,按下式计算肺指数
与肺指数抑制率。 肺指数=小鼠肺湿质量(g)/小鼠体质
量(g)×100%;肺指数抑制率=(模型组平均肺指数-实
验组平均肺指数)/(模型组平均肺指数-正常对照组平
均肺指数)×100%
1.5 统计学处理 应用 SPSS17.0 统计软件。 计量资
料以(x±s)表示,采用 χ2及 t检验。 P < 0.05为差异有统
计学意义。
2 结 果
2.1 TFS 对小鼠行为状态的影响 空白组小鼠精神
状态良好,活动敏捷,毛发有光泽,体质量自然增加。模
型组小鼠在感染病毒 24 h 后,出现行动迟缓、呼吸短
促、蜷缩、毛发无光泽、食差消瘦等,第 3 日开始有死
亡。 各药物组在感染病毒 48 h后,出现毛发无光泽、行
动迟缓、蜷缩、呼吸急促、体质量下降等,有死亡发生。
第 7日后小鼠状态开始好转,体质量增加。
2.2 TFS 对小鼠死亡率的影响 见表 1。 模型组小鼠
7 d 内死亡率为 73.33%,阳性组小鼠死亡率降低,平均
存活时间延长;TFS 各组死亡率较模型组都有降低的
趋势, 平均存活时间较模型组都有延长的趋势 (P <
0.01)。
2.3 对肺指数及肺指数抑制率的影响 见表 2。 经流
感病毒感染后模型组小鼠肺指数明显增高,与空白组相
比,差异有统计学意义(P<0.01);TFS 各剂量组小鼠肺
指数均显著降低,与模型组比较,差异有统计学意义(P<
0.05),但与阳性组对照,差异无统计学意义(P>0.05)。
3 讨 论
流感病毒感染后直接侵犯呼吸道上皮, 引起上皮
细胞脱落坏死,黏膜充血水肿,肺泡壁毛细血管扩张充
血,从而引起肺病变。因而肺指数的测定可以在一定程
度反应肺部炎症的轻重[9]。
近年来, 中草药抗病毒作用的研究引起了国内外
学者的关注。唇形科石荠苧属植物为一年生草本植物,
在浙江省资源丰富,分布广阔,有 7 个种,1 个变种,如
石香薷、 苏州荠苧和石荠苧等。 但该属植物仅石香薷
Mosla chinensis Maxim为药典收载, 其他均为民间常
用中草药。本实验结果显示,TFS能降低流感病毒甲型
FMI株感染小鼠导致的肺炎死亡率, 并能延长感染小
鼠的生存时间; 能显著改善小鼠感染甲型流感病毒的
肺指数和肺指数抑制率,具有体内抗流感病毒作用。
参 考 文 献
[1] 浙江省卫生局 . 浙江民间常用草药:第 3 集[M]. 杭州:浙
江人民出版社,1972:306.
[2] 吴晓宁,吴巧凤,陈京. 浙江产石荠苧属植物研究进展[J].
浙江中医学院学报,2005,29(4):92-93.
[3] Wu QF,Yu CH,Yan YL,et al. Antiviral flavonoids from
Mosla scabra[J]. Fitoterapia, 2010,81(4):429-433.
[4] 曾晓艳,吴巧凤,程东庆. 石香薷、苏州荠苧不同提取物体
外抑菌作用的比较研究 [J]. 中国中医药科技 ,2007,14
(1):20.
[5] Yu C.H.,Yan Y.L.,Wu Q.F.,et al. Anti -influenza virus ef-
fects of the aqueous extract from Mosla Scabra[J]. Journal of
Ethnopharmacology,2010,127(15):280-285.
[6] 聂犇,余陈欢,王芳芳,等. 石荠苧总黄酮抗炎作用及其作
用机制研究[J]. 时珍国医国药,2008,19(2):31-32.
[7] 聂犇,余陈欢,王芳芳,等. 石荠苧总黄酮镇痛作用及其作
用机制研究[J]. 中国实用医药,2007,2(21):116-117.
[8] 吕佩惠,余陈欢,俞冰,等. 石荠苧属植物酚性物质组成及
抗氧化活性研究[J].中华中医药学刊,2008,26(11):2442-
2444.
[9] Nagai T,Shimizu Y,Shirahata T,et al. Oral adjuvant activity
for nasal influenza vaccines caused by combination of two tri-
hydroxy fatty acid stereoisomers from the tuber of Pinellia ter-
nata[J]. International immunopharmacology,2010,10 (6):
655-661.
(收稿日期 2013-05-07)
1706· ·