全 文 ：2012 年 3 月第 19 卷第 3期 中国中医药信息杂志 ·49·

四川若尔盖产麻花艽药材 HPLC 指纹图谱研究
李清峰 1,吴靳荣 1,赵志礼 1,尕让甲 2
1.上海中医药大学,上海 201203；2.西藏自治区藏医药研究院,西藏 拉萨 850000
摘要：目的 建立四川若尔盖地区产麻花艽 Gentiana straminea Maxim.药材 HPLC 指纹图谱。方法 以龙胆苦
苷为内参照物,分析 10 批麻花艽药材的 HPLC 色谱行为,同时以当地产近缘种黄管秦艽 Gentiana officinalis
H.Smith 及国家药典品种粗茎秦艽 Gentiana crassicaulis Duthie ex Burk.为外类群进行比对。色谱条件：Ultimate
XB-C18(250 mm×4.6 mm,5 µm)；流动相：乙腈-0.02%乙酸水梯度洗脱；体积流量：1 mL/min；检测波长：240 nm；
柱温：30 ℃；进样量：10 µL。结果 标定 16 个共有峰,确定其中 2 个峰的归属,建立了可与上述 2 个外类群相区
别的麻花艽指纹图谱。结论 该图谱基本反映了四川若尔盖地区产麻花艽化学背景特征,可为道地药材评价及相关中
藏药品种鉴定提供基础资料。
关键词：四川若尔盖；麻花艽；高效液相色谱法；指纹图谱；道地药材
DOI：10.3969/j.issn.1005-5304.2012.03.019
中图分类号：R284.1 文献标识码：A 文章编号：1005-5304(2012)03-0049-03
HPLC Fingerprint of Radix Gentianae Stramineae from Ruoergai, Sichuan LI Qing-feng1, WU Jin-rong1,
ZHAO Zhi-li1, GA Rang-jia2 (1.Shanghai University of TCM, Shanghai 201203, China；2.Tibet Institute of Traditional
Tibetan Medicine, Lhasa 850000, China)
Abstract：Objective To establish HPLC fingerprint of Radix Gentianae stramineae from Ruoergai,
Sichuan. Methods Ten samples of Radix Gentianae stramineae were determined on an Ultimate XB-C18
column (250 mm×4.6 mm, 5 µm) eluted with the mobile phase of water containing 0.02% acetic acid and
acetonitrile in gradient elution mode, and volume flow was 1 mL/min. The detection wavelength was set at
240 nm and the temperature was 30 ℃. Also, a parallel determination of the roots of Gentiana officinalis H.
Smith and Gentiana crassicaulis Duthie ex Burk. was carried out. Results Sixteen common peaks were
fixed, two of which were identified and HPLC fingerprint of Radix Gentianae stramineae was established.
The fingerprint is differentiated from those of the two other species. Conclusion The fingerprint describes
the chemical background of Radix Gentianae stramineae from Ruoergai, Sichuan, and provides the basic
information of evaluation of geoherb and identification of the related species.
Key words：Ruoergai, Sichuan；Radix Gentiana straminea；HPLC；fingerprint；geoherb

基金项目：上海市教育委员会科研创新项目(09ZZ131)
通信作者：赵志礼,Tel：021-51322202,E-mail：zhilzhao@
sohu.com
若尔盖县位于四川阿坝藏族羌族自治州北部,青藏高原东
缘地带,境内药用植物资源丰富,盛产多种中藏药材,而麻花艽
Gentiana straminea Maxim.是常见品种之一。我们在实地考
察及标本采集中注意到,该产区内还常见形态与麻花艽颇为相

氯甲烷-浓氨试液(30∶1)提取,三氯甲烷-甲醇-浓氨试液
(20∶4∶0.2)为展开系,效果理想,重复性好。显色剂茚三酮试
液配好后,应不超过 24 h,并且用滤纸过滤。
在供试品溶液制备过程中,参照文献[4-5],对提取溶剂经
行了筛选,分别采用甲醇和流动相(乙腈∶水＝13∶87)作为溶
媒进行提取。结果发现,选甲醇作为提取溶媒时,分离效果好。
对提取时间的考察超声处理 5、10、20、30、40 min,测定结
果显示,20～40 min 含量无明显变化,表明超声处理 20 min 溶
出也达到平衡,故定为样品处理方法。
参考文献：
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(收稿日期：2011-05-24,编辑：陈静)
·50· Chinese Journal of Information on TCM Mar.2012 Vol.19 No.3

似的近缘种黄管秦艽 Gentiana officinalis H. Smith；同时,
四川阿坝州还分布有粗茎秦艽 Gentiana crassicaulis
Duthie ex Burk.等其他近缘种类[1]。
中药秦艽为多来源品种,基源植物除麻花艽 Gentiana
straminea Maxim.外,还包括龙胆科其他 3 种植物：秦艽
Gentiana macrophylla Pall.、粗茎秦艽Gentiana crassicaulis
Duthie ex Burk.及小秦艽 Gentiana dahurica Fisch.[2]。但
实际情况较为复杂,一些非国家药典品种在不同地区亦作秦艽
药用[3-4],同时,药典部分品种以及近缘种类作为藏药解吉的原
植物在我国藏区广泛使用[5],品种呈现多样化。
为此,我们在前期工作基础上[6-9],收集10批当地产麻花艽
及 1 批黄管秦艽样品,并以黄管秦艽及国家药典品种之一粗茎
秦艽为外类群,拟建立可反映该道地产区化学特征、并具有一
定种间鉴别意义的麻花艽药材高效液相色谱(HPLC)指纹图谱,
以期为该地区产麻花艽药材品质评价及相关中藏药品种鉴定
提供基础资料。
1 仪器及试药
Agilent1100 高效液相色谱仪(美国 Agilent 公司)；超声
仪(上海之信有限公司)。龙胆苦苷对照品(上海中药标准化中
心提供),马钱苷酸对照品(购自上海同田生物技术有限公司)。
乙腈为色谱纯(LEDA),水为娃哈哈纯净水；其余试剂均为分析
纯(国药集团化学试剂有限公司)。
2 试验样品来源与凭证标本
所有样品均为自采,原植物经上海中医药大学赵志礼教授
鉴定为麻花艽 Gentiana straminea Maxim.、黄管秦艽
Gentiana officinalis H. Smith 及粗茎秦艽 Gentiana
crassicaulis Duthie ex Burk.(见表 1),凭证标本保存于上
海中医药大学中药学院药用植物标本室。
表 1 样品来源及凭证标本
样品号 原植物 来源 采集日期 凭证标本
1 麻花艽 四川若尔盖县 2010-08-22 尕让甲 2010SC002
2 麻花艽 四川若尔盖县 2010-08-25 尕让甲 2010SC003
3 麻花艽 四川若尔盖县 2010-09-03 尕让甲 2010SC004
4 麻花艽 四川若尔盖县 2010-09-03 尕让甲 2010SC005
5 麻花艽 四川若尔盖县 2010-09-03 尕让甲 2010SC006
6 麻花艽 四川若尔盖县 2010-09-03 尕让甲 2010SC007
7 麻花艽 四川若尔盖县 2010-09-05 尕让甲 2010SC009
8 麻花艽 四川若尔盖县 2010-09-06 尕让甲 2010SC010
9 麻花艽 四川若尔盖县 2010-09-06 尕让甲 2010SC011
10 麻花艽 四川若尔盖县 2010-09-08 尕让甲 2010SC012
11 黄管秦艽 四川若尔盖县 2010-09-05 尕让甲 2010SC008
12 粗茎秦艽 云南玉龙纳西族
自治县鲁甸乡
2008-10-31 赵志礼 2008LD09
3 方法与结果
3.1 色谱条件
色谱柱：Ultimate XB-C18(250 mm×4.6 mm,5 µm)；流动
相：乙腈(A)-0.02%乙酸水(B),A 为 0～20 min(10%～13%),
20～40 min (13%～45%),40～50 min(45%～90%)；体积流量：
1 mL/min；检测波长：240 nm；柱温：30 ℃；进样量：10 µL。
3.2 对照品溶液的制备
分别取龙胆苦苷和马钱苷酸适量,加甲醇溶解,制成
0.26、0.16 g/L 的混合对照品溶液,冷藏备用。
3.3 供试品溶液的制备
取药材粉末约0.5 g,精密称定,置于25 mL具塞锥形瓶中,
精密加入甲醇 20 mL,称重,超声处理(功率 120 W,频率 40 kHz)
30 min,取出,冷却后补重,摇匀,静置,取续滤液即得。
3.4 方法学考察
3.4.1 精密度试验 取 8 号(2010SC010)同一样品供试液连
续进样6次,测得各共有峰相对保留时间RSD＜1.0%,各共有峰
相对峰面积 RSD＜3.0%。表明仪器精密度良好。
3.4.2 稳定性试验 取 8 号(2010SC010)同一供试液,分别在
0、4、12、24、48 h 测定,测得各共有峰相对保留时间 RSD＜
1.0%,各共有峰相对峰面积 RSD＜3.0%。表明供试液在 48 h 内
检测是可行的。
3.4.3 重复性试验 取 8 号(2010SC010)同一样品 5 份,分别
制备并测定,测得各共有峰相对保留时间 RSD＜1.0%,各共有
峰相对峰面积 RSD＜3.0%。表明该方法重复性良好。
3.5 指纹图谱及技术参数
3.5.1 样品测定 按“3.1”项下色谱条件对 10 批麻花艽供
试液及混合对照品溶液分别进行色谱测定；同时测定外类群
11 号黄管秦艽(2010SC008)及 12 号粗茎秦艽(2008LD09)供试
液。
3.5.2 参比峰的选择 在各批次图谱中,龙胆苦苷色谱峰(6
号峰)分离良好,峰位居中,峰面积较大,且为所有样品共有,故
确定龙胆苦苷为参照物。
3.5.3 指纹图谱的建立 分析 10 批麻花艽样品的色谱行为,
并与外类群相比较,以参照物龙胆苦苷峰的保留时间计算各指
纹峰的相对保留时间,由此标定出 16 个共有指纹峰,其中 1 号
峰确定为马钱苷酸,6 号峰为龙胆苦苷(见图 1、图 2),各指纹
峰相对保留时间见表 2,指纹图谱见图 3。






t/min
图 1 马钱苷酸及龙胆苦苷混合对照品 HPLC 图






t/min
图 2 麻花艽 1 号样品 HPLC 指纹图谱
2012 年 3 月第 19 卷第 3期 中国中医药信息杂志 ·51·

表 2 麻花艽药材指纹图谱共有指纹峰的相对保留时间
批号 1 2 3 4 5 S 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16
1 0.446 0.571 0.644 0.702 0.747 1 1.073 1.372 1.415 1.615 1.719 1.812 1.854 2.135 2.203 2.411
2 0.445 0.571 0.644 0.701 0.747 1 1.073 1.372 1.415 1.614 1.719 1.812 1.854 2.134 2.202 2.409
3 0.449 0.572 0.647 0.702 0.748 1 1.073 1.373 1.417 1.616 1.725 1.814 1.857 2.136 2.204 2.413
4 0.447 0.571 0.645 0.701 0.747 1 1.073 1.373 1.418 1.618 1.725 1.815 1.858 2.139 2.207 2.415
5 0.448 0.572 0.646 0.702 0.748 1 1.073 1.374 1.418 1.619 1.726 1.818 1.861 2.141 2.209 2.418
6 0.446 0.571 0.644 0.701 0.747 1 1.073 1.374 1.418 1.619 1.725 1.818 1.861 2.141 2.209 2.418
7 0.447 0.571 0.645 0.701 0.747 1 1.073 1.373 1.416 1.615 1.721 1.813 1.855 2.136 2.204 2.412
8 0.446 0.568 0.644 0.701 0.744 1 1.074 1.369 1.411 1.605 1.708 1.801 1.841 2.121 2.187 2.393
9 0.447 0.571 0.645 0.701 0.747 1 1.074 1.373 1.417 1.616 1.721 1.814 1.855 2.136 2.204 2.413
10 0.448 0.571 0.645 0.702 0.748 1 1.073 1.371 1.414 1.611 1.719 1.809 1.851 2.131 2.199 2.407
RSD(%) 0.251 0.167 0.158 0.094 0.121 0 0.031 0.128 0.164 0.261 0.304 0.281 0.295 0.284 0.287 0.297









t/min
图 3 10 批麻花艽药材及 2 个外类群的 HPLC 指纹图谱
3.5.4 相似度评价 应用“中药色谱指纹图谱相似度评价系
统(2004 A 版)”对所建指纹图谱进行相似度评价。以 8 号
(2010SC010)样品图谱做为参照图谱,中位数法形成对照指纹
图谱,并进行相似度计算(见表 3)。
表 3 样品相似度评价
批号 相似度 批号 相似度
1 0.997 7 0.999
2 0.997 8 0.995
3 0.998 9 0.998
4 0.997 10 0.998
5 0.998 对照指纹图谱 1
6 0.998
3.6 外类群比对分析
对 10 批麻花艽药材样品进行色谱峰匹配并构建指纹图谱
时,考虑了 11、12 号 2 个外类群的色谱峰异同,初步确定 2 个
鉴别指纹区。
4 讨论
对提取溶剂进行了考察,比较了甲醇、二氯甲烷、乙酸乙
酯及水,结果表明,甲醇提取的样品中,色谱峰较多,且峰面积
较大,故提取溶剂选择甲醇。考察超声、回流方法及提取时间
和提取溶剂量,结果表明,甲醇 20 mL 超声 30 min 可提取完全,
故确定此法。
考察了甲醇-水、乙腈-水、乙腈-0.02%磷酸水、乙腈-0.02%
乙酸水、乙腈-0.02%甲酸水 5 个溶剂组合,结果以乙腈-0.02%
乙酸水作为流动相系统,基线比较平稳,各峰之间分离度较好。
用 DAD 检测器进行紫外区全波长扫描,在 240 nm 处,小极
性部位的峰响应较大,故选择 240 nm 为检测波长。
本研究建立了包括16个共有指纹峰的麻花艽HPLC指纹图
谱,10 批样品图谱与标准对照图谱的相似度均大于 0.99,所建
立的指纹图谱基本反映了四川若尔盖地区产麻花艽化学背景
特征。通过与外类群比对,初步发现 2 个区域存在明显差异,
可以作为物种间辨识的指纹区：粗茎秦艽不具有 10.8 min 处
共有指纹峰(2 号峰)；黄管秦艽不具有 25.982 min(8 号峰)及
26.796 min (9 号峰)2 个共有指纹峰。所建立的指纹图谱具有
一定的种间鉴别意义。
下一步将加大外类群种类数及样本量,以评价该指纹区的
普适性。在此基础上进行相关化合物的分离与结构鉴定,有望
获得可用于相关中藏药品质评价的指标性成分。
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(收稿日期：2011-08-29,编辑：华强)