全 文 ：下方法平行制备供试品溶液 5份 , 分别取供试品溶液 2 ml, 按标
准曲线的绘制项下操作 ,依法显色后测定吸收度 , 计算总黄酮平
均含量为 3.91%, RSD为 1.13%, 表明实验重现性良好。结果见
表 3。
表 2　精密度实验结果
检测编号 吸收值 RSD(%)
1 0.280
2 0.281
3 0.286 1.70
4 0.283
5 0.281
6 0.281
表 3　重复性实验结果 %
样品 含量 平均含量 RSD
1 3.87
2 3.98
3 3.88 3.91 1.13
4 3.90
5 3.93
2.2.6　回收率测定 精密称取已知总黄酮含量的药材样品 5
份 , 分别加入一定量芦丁对照品 , 按供试品溶液的制备项下方法
制备供试品溶液 , 按样品的测定项下方法依法显色后测定吸收
度 , 计算平均回收率为 99.7%, RSD为 2.3%。
3　讨论
3.1　 采用紫外分光光度法建立测定紫玉盘药材中总黄酮含量
的方法 ,该方法快速 、简便 、准确 、可靠 ,为今后紫玉盘中总黄酮含
量的检测提供了便捷方法 ,同时为深入开发利用紫玉盘中黄酮类
成分的研究奠定了基础。经检测的紫玉盘中 ,叶与枝中的总黄酮
含量分别高达 10.53%和 5.60%, 因此 , 药材紫玉盘中黄酮类化
合物具有非常重要的开发利用价值。
3.2　 本实验仅考察了不同部位对紫玉盘中总黄酮含量的影
响 , 产地 、采收期等因素对紫玉盘中总黄酮及其它活性物质的动
态变化影响还有待进一步研究 。
参考文献:
[ 1 ] 　江苏新医学院 , 中药大辞典 [ M] .上海:上海人民出版社 ,
1997:3955.
[ 2 ] 　LiHuuang, Maonroe, E.Wal, MansukhC.Wai.etal.NewCom-
poundswithDNAStrand-ScissionActivityfromtheCombinedleafand
StemofUvariahamiltoni[ J] .JNatProd.1998, 61(4):446.
[ 3 ] 　NkunyaMH, WeenenH, BrayDH, etal.Aneimalarialactirityof
Tanzanianplantsandtheiractireconstituents:thegenusUraria[ J] .
PlantaMed, 1991, 57(4):341.
收稿日期:2005-11-28;　修订日期:2006-06-08
作者简介:王焕弟(1977-),女(汉族),河北定州人 ,博士学位,主要从事天
然产物分离与生物活性研究工作.
藏药湿生扁蕾的抑菌作用研究
王焕弟 1, 2 ,谭成玉1, 2 ,白雪芳 1, 2 ,杜昱光1, 2 ,林炳承 1, 2
(1.中国科学院大连化学物理研究所 ,辽宁 大连　116023;　2.中国科学院研究生院 ,北京　100049)
摘要:目的 探讨湿生扁的体外抑菌作用。方法 用 K-B纸片扩散法和生长速率分别研究了湿生扁蕾对细菌和真菌的抑
制作用。结果 湿生扁蕾的提取物和各部位对供试菌都有一定的抑制作用 , 其中对辣椒疫霉的抑制作用最强;氯仿部位
的抑菌作用则最好。结论 湿生扁蕾在体外有明显的抑菌作用。
关键词:湿生扁蕾;　抑菌作用
中图分类号:R285.5　　文献标识码:A　　文章编号:1008-0805(2006)10-1901-01
StudiesoftheAntimicrobialActivityofGentianopsispaludosa
WANGHuan-di1, 2 , TANCheng-yu1, 2 ,BAIXue-fang1, 2 , DUYu-guang1, 2 , LINBing-cheng1, 2
(1.DalianInstituteofChemicalPhysics, ChineseAcademyofSciences, Dalian116023, China;2.Graduate
SchoolofChineseAcadenyofSciences, Beijing100049, China)
Abstract:ObjectiveTostudytheantimicrobialactivityofGentianopsispaludosa.MethodsK-Bpaperdiffusionandmycelial
growthratemethodswereusedtodetermineantibacterialactivity, respectively.ResultsTheethanolextractionandfractionsof
Gentianopsispaludosashowedinhibitoryefectsonthetestedmicrobe, andtheinhibitoryefectonPhytophthoracapsiciwasthe
strongest.Futhermore, thechloroformfractionshowedthebestactivity.ConclusionGentianopsispaludosahassignificantantimi-
crobialactivity.
Keywords:Gentianopsispaludosa;　Antimicrobialactivity
　　湿生扁蕾 GentianopsispaludosaMa为龙胆科扁蕾属植物 ,具
有清热解毒的功效 , 主治急性黄疸肝炎 、结膜炎 、高血压病 、急性
肾盂肾炎 、痔疮肿毒 、肠胃炎 、腹泻等。藏医用全草治疗流行性感
冒及胆病引起的发烧 [ 1, 2] 。虽然湿生扁蕾在民间的药用价值很
大 , 但关于其生物活性的研究却很少。因此 , 我们对湿生扁蕾活
性进行了研究 , 为其开发利用提供科学的依据。
1　材料
以下菌种均为本实验室保存。细菌:枯草芽孢杆菌 , 白菜软
菌病菌 ,柑桔溃疡菌 , 金黄色葡萄球菌。真菌:毛霉 , 辣椒疫霉 , 玉
米大斑病菌 ,番茄早疫病菌 , 烟草炭疽。琼脂粉购于北京奥博星
生物技术责任有限公司。湿生扁蕾采自青海 ,由西北高原生物研
究所张宝琛研究员鉴定为 GentianopsispaludosaMa。
2　方法
2.1　湿生扁蕾乙醇提取物及各部位的制备 湿生扁蕾用 75%乙
醇回流提取 3次 , 合并提取液 , 减压蒸馏得粗提物。粗提物悬浮
在水中 ,依次用石油醚 , 氯仿 , 正丁醇反复萃取 , 减压蒸馏得到石
油醚部位 ,氯仿部位 , 正丁醇部位 ,水部位。
·1901·
LISHIZHENMEDICINEANDMATERIAMEDICARESEARCH 2006VOL.17NO.10 时珍国医国药 2006年第 17卷第 10期
2.2　药液的制备 抑制细菌的药液:分别取湿生扁蕾粗提物
(E),石油醚部位(P), 氯仿部位(C), 正丁醇部位(B), 水部位
(W)适量溶于 DMSO中配成 20 mg/ml的药液备用。
抑制真菌的药液:分别取湿生扁蕾粗提物 ,各部位适量加到
灭菌后的 PDA固体培养基中 ,配成不同浓度的悬浊液。
2.3　K-B纸片扩散法 制备 LB培养基 [ 3] ,将上述细菌菌种在 LB
液体培养基中活化后 ,以无菌操作用移液枪移取致平铺到平板表
面 , 将在药液中浸泡过的滤纸片(直径 6 mm)贴到培养基上 , 用
DMSO浸泡过的滤纸片作为对照。在温箱中培养 24 h(金黄色葡
萄球菌在 37℃下培养),观察并测量抑菌圈直径 。
2.4　生长速率法 制备 PDA培养基 [ 3] , 将不含药物的 , 含药物的
培养基分别平铺在夹板上 , 上述真菌菌种活化后 , 在无菌条件下 ,
将供试菌种用直径 6 mm的打孔器打出一定数量的菌饼。将菌
饼移至培养基上 ,菌丝面朝下 , 每皿中央放一块菌饼 , 置 28℃温
箱中培养。将不含药物的培养基作为对照。待对照皿中菌落长
满皿时 , 测量其余处理的菌落直径 , 求出抑菌率。
　抑制率 =对照皿中菌落直径-处理皿中菌落直径对照皿中菌落直径-打孔器直径直径 ×100%
3　结果
3.1　湿生扁蕾对细菌的抑制作用 从表 1中可以看出 , 除了枯草
芽孢外 , 湿生扁蕾 75%的乙醇提取物 、氯仿 、石油醚 、正丁醇对其
它 3种细菌都有抑制作用 , 对柑桔溃疡的作用最显著。而氯仿部
位的活性要好于其他部位。水部位只对柑桔溃疡有作用。 DM-
SO对细菌无作用。
表 1　湿生扁蕾对细菌的抑制作用 mma
细菌 E C P B W
柑桔溃疡菌 13.7±0.6 15.3±0.6 12.7±1.3 11.7±0.8 8.5±0.5
白菜软腐菌 7.8±0.2 8.7±0.3 7.0±0.1 -b
金黄色葡萄球菌 10.8±1.0 13.3±0.6 9.2±0.3 -
枯草芽孢菌 - - - - -
　　a3次平均值;-无作用
3.2　湿生扁蕾对真菌的抑制作用 湿生扁蕾提取物对所测的真
菌都有抑制作用 , 且对辣椒疫霉的作用最强。结果见表 2。 EC
50(mg/ml)分别为 0.967, 0.297, 0.941, 2.985, 0.562, 0.839。对湿
生扁蕾的部位只测定了对毛霉和辣椒疫霉的作用 ,从表 3中可以
看出 , 石油醚和氯仿部位的作用比较明显 , 且对辣椒疫霉的作用
比对毛霉要强。在 1.0 mg/ml时 ,氯仿部位对辣椒疫霉的抑制作
用达到了 95%。
表 2　湿生扁蕾 75%乙醇提取物对真菌的抑制作用
浓度
C/mg·ml-1
抑制率(%)
毛霉 辣椒疫霉
玉米大
斑病菌
瓜类
枯萎
番茄
早疫
烟草
炭疽
0.6 33.8±1.6 60.7±1.1 40.2±1.0 34.9±4.1 49.6±2.3 40.9±4.3
0.8 43.6±0.8 67.4±1.9 45.2±1.6 35.7±2.8 55.3±2.0 46.2±2.7
1.0 53.1±1.2 79.6±4.8 53.0±1.4 39.3±2.8 73.0±1.4 56.5±0.8
　　a3次平均值
表 3　湿生扁蕾各部位对真菌的抑制作用
浓度
/mg· ml-1
抑制率(%)
　　毛霉　　　　　辣椒疫霉　　
P 31.1±4.7 43.2±3.7
0.2 C 32.2±4.8 49.3±5.1
B - 38.9±2.5
W - -
P 52.7±2.0 67.4±8.2
0.6 C 44.0±3.0 69.9±6.1
B - 53.2±4.4
W - -
P 57.6±1.0 76.0±3.7
1.0 C 57.4±1.5 95.1±5.1
B 8.0±3.0 72.8±1.9
W - 4.7±1.6
　　a3次平均值;-无作用
4　讨论
从以上结果可以看出 ,湿生扁蕾对供试菌都有一定的抑制作
用(枯草芽孢除外), 且对辣椒霉的作用最强;氯仿部位的抑菌效
果最好 。供试菌中除金黄色葡萄球菌外都为植物致病菌 ,这就提
示了湿生扁蕾对一此植物致病菌有一定的抑制作用。 本实验为
扩大湿生扁蕾的应用提供了科学依据 , 使其开发更具有广阔的
前景。
参考文献:
[ 1 ] 　张宝琛 ,甄润德 ,胡柏林 ,等.湿生扁蕾化学成分的研究 [ J] .中草
药 , 1980, 11(4):149.
[ 2 ] 　屠兰英 ,曹长年 ,赵启英.正交设计法研究湿生扁蕾药效成分的优
化提取工艺 [ J] .青海师范大学学报(自然版), 2005, 1:69.
[ 3 ] 　方中达.植病研究方法 [ M] .北京:中国农业出版社 , 1996:46.
临床报道
收稿日期:2005-12-14;　修订日期:2006-05-10
作者简介:蔡少峰(1974-),男(汉族),湖北十堰人 ,现任东风汽车公司总
医院主治医师 ,硕士学位 ,主要从事中医心脑血管疾病的防治工作.
心脑超声配合耳穴治疗失眠 50例
蔡少峰
(郧阳医学院附属东风医院 ,东风汽车公司总医院 ,湖北 十堰　442008)
摘要:目的 观察心脑超声配合耳穴治疗失眠疗效。方法 对患者采用超声扫描心脑血管治疗仪治疗 , 1次 /d, 10次为 1
疗程。配合耳穴治疗 , 10 d为 1疗程 ,病程后观察疗效。结果 治愈 12例 ,有效 21例 , 无效 4例。总有效率 92.0%。结论
心脑超声配合耳穴治疗疗效显著 ,值得推广。
关键词:心脑超声;　耳穴;　失眠;　睡眠障碍
中图分类号:R246.1　　文献标识码:B　　文章编号:1008-0805(2006)10-1902-01
　　随着生活节奏的加快 ,人们来自生活 、工作等方面的压力的
增大 , 睡眠障碍已成为一类威胁人们身心健康的主要疾病之一。
笔者近一年来运用心脑超声配合耳穴治疗失眠症取得良好的疗
效。现报道如下。
1　临床资料
门诊及住院失眠症病人 50例 , 男 23例 , 女 27例;年龄 29 ～
73岁。均因夜间入睡困难 ,睡而不稳或醒后不能再睡 , 以及晨醒
过早 , 每晚睡眠不足 5h,导致白天头晕 、头痛 、记忆力减退及心烦
心慌 、体倦乏力 , 影响日常工作和生活。
诊断标准按照《中药新药临床研究指导原则》 [ 1]中失眠的诊
断标准 。排除有严重心脑肝肾疾病患者。轻度:睡眠常觉醒 , 或
睡而不稳 , 晨醒过早 ,但不影响工作;中度:睡眠不足 4 h, 但尚能
·1902·
时珍国医国药 2006年第 17卷第 10期 LISHIZHENMEDICINEANDMATERIAMEDICARESEARCH 2006VOL.17NO.10