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第 1 2 卷 第 1 0 期
2010 年 10 月
辽 宁 中 医 药 大 学 学 报
JOURNAL OF LIAONING UNIVERSITY OF TCM
Vol. 12 No. 10
Oct .，2010
姜味草（Micromeria biflora benth.），唇形科姜
味草属植物，别名小姜草、小香草 ；主要分布于贵
州、云南、广西等地，是西南地区布依族、苗族常用
草药[1]。万庆家等对姜味草的化学成分进行了研
究[2]，李坤平等利用超临界CO2萃取技术和水蒸汽
蒸馏法提取姜味草精油，采用GC-MS联用法对其化
学成分进行了分析和鉴定[3] ；并对姜味草中熊果酸
和齐墩果酸的超声波强化溶剂提取工艺进行了优化
并建立了其RP-HPLC定量分析方法[4-5] ；但尚未见
有关姜味草精油及其提取物生物活性研究的报道。
本实验采用1，1-二苯基-2-苦基肼（DPPH）自由基
清除活性分析模型[6-7]，对其清除自由基活性进行了
研究，发现其精油和提取物有较强的自由基清除活
性，结果报道如下。
1 材料与方法
1.1 实验材料
姜味草全草，2007年8月采自贵州省兴义市下
午屯镇郊，经广东药学院生药教研室老师鉴定为唇
形科姜味草属植物姜味草Micromeria biflora benth.，
阴干，粉碎，过筛，备用。
1.2 仪器与试剂
数控超声波清洗器（KH-400KDB，昆山禾创超
声仪器有限公司）；紫外可见分光光度计（TU-1810
型，北京普析通用仪器有限责任公司）；电子分析天
平（AY120型，日本岛津公司）。1，1-二苯基-2-苦
基肼（DPPH，Sigma公司） ；甲醇、乙醇为市售分析
纯。
1.3 DPPH溶液的配制及其标准曲线的绘制
精密称取2.5mg DPPH，用95%乙醇（体积分
数，下同）溶解，定容至100mL，摇匀，得到25.0mg/L
DPPH标准溶液。准确移取1.0、2.0、4.0、6.0、8.0和
10.0mL DPPH标准溶液分别置于6个10mL的容量
瓶中，用95%乙醇稀释至刻度，摇匀，在517nm波长
处测其吸光度A ；以DPPH质量浓度为横坐标，吸光
度A为纵坐标绘制标准曲线。
1.4 姜味草精油和提取物供试品的制备[3-4，8]
按照《中华人民共和国药典》（2005版）I部
附录XD法提取姜味草精油，用乙醇溶解，即为精
油供试品溶液。准确称取提取过精油的姜味草
残渣2.500g，加入50mL甲醇或95%乙醇，采用频
率40kHz功率320W超声波室温强化提取20min，
过滤，滤液定容至50mL，即得提取物供试品溶
液。
1.5 姜味草精油和提取物清除DPPH活性及其EC50值
的测定
准确吸取2.5mL DPPH标准溶液，加入0.5mL
适当稀释供试品溶液，混匀，间隔一定时间后测
定517nm波长处吸光度At，清除率E=（A0-At）
/A0×100%（A0 ：DPPH标准溶液的吸光度 ；At ：加
入供试品溶液后t时刻的吸光度）。取姜味草精油
姜味草精油与提取物清除DPPH自由基活性研究
潘天玲，李坤平，陈潮珠，劳碧婷
（广东药学院药科学院，广东 广州 510006）
摘 要 ：目的 ：对姜味草精油与提取物清除自由基活性进行研究。方法 ：选择1，1-二苯基-2-苦基肼自由
基（DPPH）体外清除活性模型，采用分光光度法，测定其DPPH清除率曲线，以EC50 值评价其清除DPPH活性。结
果 ：姜味草精油DPPH清除活性EC50 值为0.21％ ；其甲醇和乙醇提取物清除DPPH的EC50 分别为0.052mg·mL-1 和
0.554mg·mL-1。结论 ：姜味草精油及其提取物具有较强的清除DPPH活性。
关键词 ：姜味草 ；精油 ；提取物 ；自由基清除活性 ；1，1-二苯基-2-苦基肼
中图分类号 ：R281.5 文献标识码 ：A 文章编号 ：1673-842X (2010) 10- 0193- 02
收稿日期 ：2010-04-18
作者简介 ：潘天玲（1977-），女，贵州兴义人，实验师，硕士，主要从事药用植物资源开发与利用研究。
通讯作者 ：李坤平（1978-），男，讲师，博士，研究方向 ：中药制药工程。E-mail ：lkpchina@hotmail.com。
Scavenging Capacity on Free Radical of Essential Oil and Extract from Micromeria Biflora Benth
PAN Tian-ling，LI Kun-ping，CHEN Chao-zhu，LAO Bi-ting
（Department of Pharmacy，Guangdong Pharmaceutical University，Guangzhou 510006，Guangdong，China）
Abstract ：Objective ：To evaluate the scavenging capacity on free radical of essential oil and extract of
Micromeria biflora benth. Methods ：The scavenging activities towards 1，1-diphenyl-2-picryhydrazyl radical
（DPPH·）were determined by spectrophotometric method on in vitro systems. Results ：The essential
oil and extract from Micromeria biflora benth. by menthol and ethanol and all had scavenging effects on
DPPH·，and the EC50 were 0.21%，0.052mg·mL-1 and 0.554mg·mL-1 respectively. Conclusion ：The
essential oil and extract from Micromeria biflora benth all exhibited excellent scavenging effect on DPPH·
radical.
Key words ：Micromeria biflora benth. ；essential oil ；extract ；radical-scavenging activity ；DPPH
DOI：10.13194/j.jlunivtcm.2010.10.195.pantl.071
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辽 宁 中 医 药 大 学 学 报 1 2 卷
和甲醇及乙醇提取物供试品溶液，配制成不同浓
度，测定每个浓度的自由基清除率E，对样品浓度
C和清除率E进行线性回归，根据回归方程计算
出EC50值。
2 结果与分析
2.1 DPPH溶液标准工作曲线
DPPH自由基较稳定，在517nm波长呈强
吸收，其醇溶液呈特征紫色[6-7]。按照1.3节方
法，以吸光度A对DPPH质量浓度C 进行线性回
归，标准工作曲线方程为 A=0.024 4C+0.0003（r
=0.9991），表明在质量浓度为2.5~25.0mg/L范围
内，DPPH溶液吸光度和质量浓度具有良好的线
性关系。
2.2 姜味草精油的清除率曲线
当自由基清除剂存在时，使得DPPH单电子配
对而导致其特征吸收逐渐消失，其褪色程度与其
接受的电子数量成定量关系，所以可用分光光度
计进行快速的定量分析[6-7]。表1是按1.5节方法
测定的不同浓度的姜味草精油清除自由基活性分
析结果。根据1.5节方法，清除率E 与精油浓度C
之间的回归方程为 ：E=3.9507C +49.155（r =0.988
7），其EC50为 0.21％（体积分数）。研究过程中发
现，其浓度超过20％以后，随着质量浓度增大清除
率呈下降趋势，说明为充分发挥其功效，姜味草精
油宜稀释后使用。
表1 姜味草精油清除自由基活性分析结果
样品号 精油浓度(%，体积分数)
活性测试
反应体系
清除率
(％ )
EC50
(%，体积分数)
1 0.05
供试品0.5mL
DPPH标准
溶液2.0mL
46.8
0.21
2 0.25 50.2
3 1 54.7
4 2.5 60.9
5 5 68.2
6 10 88.4
2.3 姜味草甲醇和乙醇提取物清除DPPH·活性
EC50值是指清除率为50%时供试品浓度，
常作为自由基清除能力大小的评价指标。EC50
值越小，清除自由基的能力越强[7]。根据1.4节
方法，甲醇和95％乙醇提取物的得率分别是
3.14％和2.87％。按照1.5节方法，分别测定了
0.003、0.039、0.052、0.078、0.157mg·mL-1等5个
不同浓度的甲醇提取物和 0.036、0.048、0.072、
0.144、1.435mg·mL-1等5个不同浓度的乙醇提
取物清除DPPH·的活性。从图1的姜味草提
取物供试品溶液自由基清除活性时间－效应曲
线可以看出，加入甲醇提取物的反应体系的吸
光度A值在最初的20min内下降得较快，随后
变化缓慢，到30min时几乎保持不变，因此选择
DPPH与甲醇提取物的反应时间为30min。根
据不同浓度甲醇提取物自由基清除率结果，清
除率E与甲醇提取物浓度C之间的回归方程
为 ：E=329.83C+32.913（r=0.9922）， 其EC50为
0.052mg·mL-1。
从图1还可以看出，加入乙醇提取物的反应
体系吸光度A 值在最初的5min内迅速下降，之后
趋缓，至20min后基本不再变化 ；因此乙醇提取物
清除DPPH活性的测定过程中，反应时间选择为
20min。其清除率E 与乙醇提取物浓度C之间的线
性方程为 ：E=45.544C+24.729（r =0.9978），其EC50
为0.554mg·mL-1。

图1 姜味草提取物清除DPPH·活性时间－效应曲线
3 讨 论
自由基是生物体内化学性质极其活跃的物质，
研究表明，其大量存在与某些疾病的发生有着重要
的关联，活性氧自由基也是皮肤衰老的重要原因之
一[6-7]。国内植物精油产品开发方兴未艾，但其所宣
传的大多数生物活性功能尚未进行科学的实验研
究 ；从姜味草精油清除DPPH的结果得知，低浓度的
姜味草精油对DPPH具有较强的清除能力，其EC50
仅为0.21％，为其精油类功能性护肤产品的开发提
供了科学依据。
另外，抽提精油后的姜味草药材，其甲醇和乙
醇提取物都表现出明显的清除DPPH的活性，其中
EC50分别为0.052mg·mL-1和0.554mg·mL-1，这说
明两种提取物均具有很强的清除自由基活性，但甲
醇提取物活性更强，这可能与提取物的组分有关，
具体有待进一步研究 ；这同时也为姜味草提取物在
医药、保健品、化妆品等行业的开发应用提供了参
考。◆
参考文献
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术出版社，2000.
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吸
光
度
A