全 文 ：粘毛黄芩丛生芽的诱导及快速繁殖
王淑芳，李凤华，窦全丽 (遵义师范学院生物系，贵州遵义 563002)
摘要 ［目的］为粘毛黄芩种质保存和工厂化繁育提供理论依据。［方法］以粘毛黄芩无菌苗的幼茎为外植体，MS为基本培养基，分别
对其进行启动、丛生芽及生根培养，建立粘毛黄芩离体培养再生体系。［结果］粘毛黄芩最佳丛生芽诱导培养基 MS + 6-BA 2． 0 mg /L +
IAA 0． 2 mg /L，丛生芽分化率可达 94． 8%，平均丛生芽倍增数为 11． 6;试管苗生根培养基以 1 /2 MS + IAA 0． 5 mg /L最好，生根率高达
97． 8%。［结论］该研究建立了粘毛黄芩的快速、高效无性繁殖体系。
关键词 粘毛黄芩;丛生芽诱导;快速繁殖
中图分类号 S567 文献标识码 A 文章编号 0517 －6611(2011)23 －14022 －01
Induction and Rapid Propagation of Scutellaria viscidula Shoots
WANG Shu-fang et al (Biology Department，Zunyi Normal College，Zunyi，Guizhou 563002)
Abstract ［Objective］To provide theoretical basis for the germplasm cryopreservation and factory propagation of Scutellaria viscidula Bunge． ．
［Method］With the tender stems of Scutellaria viscidula Bunge as explants and MS as basic medium for their starting，shoots and rooting cul-
ture，the regeneration system for its in vitro culture was constructed．［Result］The optimal induction medium for Scutellaria viscidula shoots was
2． 0 mg /L 6-BA and 0． 2 mg /L IAA，the average differentiated rate of shoots was 94． 8% with the average reproduction multiples of 11． 6;the
best rooting culture medium was 1 /2MS + IAA 0． 5 mg /L，with the highest rooting rate of 97． 8% ．［Conclusion］The study established a rapid
and high-efficient asexual regeneration system for Scutellaria viscidula Bunge．
Key words Scutellaria viscidula Bunge;Shoots induction;Rapid propagation
基金项目 遵义市科技局资助项目“根癌农杆菌介导的 CryIA抗虫基因
转化生姜的研究”(【2010】16 号)。
作者简介 王淑芳(1980 －) ，女，山西临汾人，讲师，硕士，从事植物生
物技术方面的研究，E-mail:wangsf525@ 163． com。
收稿日期 2011-05-16
粘毛黄芩(Scutellaria viscidula Bunge)属于唇形科(Labi-
atae)黄芩属(Scutellaria)多年生药用草本植物［1］，作为黄芩
药用者约有 7种左右［2］，粘毛黄芩就是其中的一种，其药用
成分主要分布于根部。现药理上已证实其中主要成分黄酮
类化合物黄芩苷有抑菌、清热、降压、镇静、利尿、利胆、抗炎、
解毒及对 HIV病毒逆转录酶有明显抑制等作用［3］。
迄今为止，对于粘毛黄芩组织鉴定、化学成分等方面的
研究报道较多，但对组织培养方面的研究报道至今未见。同
时近几年，由于粘毛黄芩需要量逐年增加，而且超限采挖，野
生资源破坏严重，商品的质量也明显下降，栽培粘毛黄芩已
成为主要商品来源［4］。因此探讨其快速繁殖有十分重要的
意义。该研究通过从无菌苗的幼茎诱导丛生芽，经生根培养
获得再生植株，建立粘毛黄芩的快速、高效无性繁殖体系，为
粘毛黄芩种质保存、工厂化育苗及遗传改良奠定基础。
1 材料与方法
1． 1 材料 粘毛黄芩的种子(购买于山西省绛县远博农副
产品公司，由西南大学生命科学学院孙敏教授鉴定)。
1． 2 无菌苗的获得 选取饱满种子用自来水浸泡 5 h，流
水冲洗3 h，75%乙醇浸泡20 s，用浓度为0． 1%的HgCl2 溶液
分别浸泡处理 12 min，然后无菌水冲洗 3 ～ 5次，无菌滤纸吸
干水分，接种在 MS 固体培养基上，置于恒温培养箱中暗培
养;约 10 d后种子开始萌发，萌发的种子移入温度为(25 ±
1． 0)℃，光周期为 12 h，光强为 55 μmol /(m2·s)的恒温培
养箱中继续培养。苗龄约 25 d的幼茎段用于丛生芽的诱导。
1． 3 培养基与培养条件 丛生芽诱导培养基为 MS +6-BA
1． 0 ～2． 0 mg /L + IAA 0． 1 ～ 0． 8 mg /L;生根培养基为1 /2MS
+ IAA 0． 2 ～1． 0 mg /L，1 /2MS + IBA 0． 2 ～1． 0 mg /L。培养基
均含蔗糖 30 g /L，琼脂 7 g /L，pH 5． 8，121 ℃灭菌 20 min。温
度(25 ±1)℃，1 800 lx光照，12 h /d培养。
2 结果与分析
2． 1 不同激素配比对丛生芽分化的影响 无菌苗的茎段
剪成的 1 cm长的外植体(带腋芽) ，接种于 MS + 6 － BA 1． 0
～2． 0 mg /L + IAA 0． 1 ～0． 8 mg /L的培养基中，黑暗培养 15
d，茎段切口及腋芽处膨大突起，整个愈伤组织呈透明状，转
入(25 ±1)℃、12 h /d光照培养，28 d左右，腋芽处愈伤组织
膨大变绿，并出现了芽点，随着时间的延长，约 40 d左右形成
簇生绿色芽丛(图 1)。
从不同浓度的 6 － BA和 IAA对幼茎段诱导的结果可以
看出，当 6 － BA浓度分别固定为 1． 0和 2． 0 mg /L时，在 IAA
浓度为 0． 2 mg /L时，幼茎段丛生芽的诱导率和平均芽倍增
数达到最高;在 0． 1 ～ 0． 8 mg /L的范围内，随着 IAA 浓度的
增加，幼茎段的平均诱导率和平均芽倍增数均呈现出先上升
后下降的趋势(表 1)。由此可见，6 － BA是诱导丛生芽增殖
的主要因素，同时添加适当的 IAA可以增加丛生芽的诱导率
和平均芽倍增数，以低于 0． 2 mg /L为好。
由表 1还可以看出，IAA浓度为 0． 2 mg /L时，6 － BA浓
度 2． 0 mg /L比 1． 0 mg /L更适合幼茎段诱导丛生芽，诱导率
达到最高，为 94． 8%，平均芽倍增数为 11． 6;因此，幼茎段诱
导丛生芽分化的最佳培养基为MS + 6 － BA 2． 0 mg /L + IAA
0． 2 mg /L。
2． 2 不定芽生长及生根培养 选择初代培养成功的芽丛切
割成单芽，继续转入芽诱导培养基 MS +6-BA 2． 0 mg /L + IAA
0． 2 mg /L中继代培养，芽苗生长健壮，当芽苗长至 3 ～5 cm时，
转入 1 /2 MS及附加 0． 2 ～1． 0 mg /L IAA和 IBA的生根培养基
中诱导生根，25 d后即可诱导出不定根，进一步培养可形成完
整植株。结果表明，粘毛黄芩试管苗生根以 IAA处理的效果
好于 IBA，并且 0． 5 mg /L 的 IAA最适合根的诱导，平均生根率
可达 97． 8%(表 2)，较高浓度的生长素反而不利于其生根。因
此，最适合的生根培养基为 1 /2 MS + IAA 0． 5 mg /L。
(下转第 14097页)
责任编辑 张彩丽 责任校对 李岩安徽农业科学，Journal of Anhui Agri． Sci． 2011，39(23):14022，14097
DOI:10.13989/j.cnki.0517-6611.2011.23.185
(3)根据油茶生长适宜的生态条件分析，结合现有传统
种植面积，农户生产积极性等因素，贵州还有很大一部分适
宜发展油茶产业的县、市没有纳入国家的油茶产业发展规
划，使贵州适宜于油茶林种植的土地面积近 50%闲置，限制
了贵州油茶产业发展，减缓了农民脱贫致富的步伐。因此，
应考虑在油茶生态适宜区增加油茶产业发展重点县，加大政
府扶持力度，激发农民生产积极性，使种植油茶真正成为农
民致富的一种途径。
参考文献
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46 －78．
(上接第 14022页)
注:A．黑暗条件培养 15 d的茎段;B．光照条件下培养 28 d时出现了芽点;C．培养 40 d时形成绿色芽丛。
Note:A． Stem cultured in darkness for 15 days;B． Buds induction in light for 28 days;C． Green shoots formed after the induction for 40 days．
图 1 粘毛黄芩丛生芽诱导过程
Fig． 1 Induction process of Scutellaria viscidula Bunge shoots
表 1 不同浓度 6-BA和 IAA对幼茎诱导丛生芽的影响
Table 1 Effect of different concentrations of 6-BA and IAA on bulblets
induction of stems
培养基
Medium
幼茎段
Number
of young
stems∥个
平均丛生芽
诱导率
Average
induction
rate of
shoots∥%
平均芽
倍增数
Average
buds
increase
multiples∥个
MS +6-BA 1． 0 mg /L + IAA 0． 1 mg /L 30 65． 8 5． 1
MS +6-BA 1． 0 mg /L + IAA 0． 2 mg /L 30 80． 0 7． 2
MS +6-BA 1． 0 mg /L + IAA 0． 4 mg /L 30 52． 0 4． 2
MS +6-BA 1． 0 mg /L + IAA 0． 8 mg /L 30 39． 1 3． 5
MS +6-BA 2． 0 mg /L + IAA 0． 1 mg /L 30 83． 9 8． 0
MS +6-BA 2． 0 mg /L + IAA 0． 2 mg /L 30 94． 8 11． 6
MS +6-BA 2． 0 mg /L + IAA 0． 4 mg /L 30 63． 9 6． 3
MS +6-BA 2． 0 mg /L + IAA 0． 8 mg /L 30 56． 2 4． 7
表 2 不同 IAA和 IBA浓度对生根的影响
Table 2 Effect of different concentrations of IAA and IBA on roots in-
duction
培养基
Medium
外植体
Explants
个
平均
生根率
Average
rooting rate∥%
根生长
情况
Growth
of root
1 /2MS 30 19． 6 细长
1 /2 MS + IAA 0． 2 mg /L 30 62． 8 细长
1 /2 MS + IAA 0． 5 mg /L 30 97． 8 均匀生长
1 /2 MS + IAA 1． 0 mg /L 30 70． 9 粗而短
1 /2 MS + IBA 0． 2 mg /L 30 46． 3 细长
1 /2 MS + IBA 0． 5 mg /L 30 79． 5 均匀生长
1 /2 MS + IBA 1． 0 mg /L 30 50． 6 粗而短
2． 3 炼苗与移栽 当苗高 5． 0 cm以上，根长达 2． 5 cm以
上时，将瓶盖打开，置于室内锻炼 7 d后，用镊子取出生根苗，
洗去基部培养基，栽培于土壤中，土壤采用蛭石∶河砂∶腐叶土
=1∶2∶1的混合基质，成活率达 92． 3%。
3 讨论
在植物器官发生过程中，生长激素与细胞分裂素的浓度
比适合与否是影响组培的一个重要因素。一般诱导不定芽
的形成时，细胞分裂素与生长素的浓度比大于 1;而诱导不定
根发生只用生长素或配合使用较低浓度的细胞分裂素［5］。
这与该试验的研究结果是一致的。6 － BA 在诱导过程中起
着关键作用，而配合一定浓度的 IAA，芽诱导率进一步提高，
在较低浓度范围内，芽诱导率与 IAA 浓度呈正相关，但超出
一定的浓度范围，则会抑制芽的诱导和分化。因此，在诱导
芽时，应调节好细胞分裂素和生长素的配比［6］。
该研究通过对植物生长素、细胞分裂素及使用浓度的比
较选择，探索出一套高效的粘毛黄芩组培快繁技术。以带腋
芽的粘毛黄芩幼茎为外植体，在附加 6 － BA 2． 0 mg /L + IAA
0． 2mg /L的 MS 培养基上，诱导芽的效果最好;在附加 IAA
0． 5 mg /L的 1 /2MS培养基上，试管苗的生根效果最好。该
研究结果为粘毛黄芩种苗的种质保存、遗传转化奠立了基
础，同时为应用生物新技术培育粘毛黄芩优良品种及培育成
功的优良品种今后在生产上的克隆化快速繁殖和示范推广
提供了有效的技术手段。
参考文献
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7904139 卷 23 期 马帅兵等 贵州省油茶的生态适宜性评价及种植区划研究