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藏药螃蟹甲的镇痛抗炎作用



全 文 :华西药学杂志
W C J·P S 2011,26(2)∶135 ~ 137
分析显示其具有促进 U2OS 凋亡的作用,并随浓度
的增加而增加;细胞周期分析发现:黄芩素主要阻滞
U2OS于 G0 /G1 期,阻滞其向 S 期进程,凋亡机制作
为下一步的研究工作。黄芩苷对 U2OS 细胞株有一
定的抑制效果,但是其活性明显弱于黄芩素,相对于
U2OS细胞株,U2OS /MTX
300细胞株对黄芩素出现耐
药现象,耐药的机制作为下一步的研究工作。通过
比较发现:黄芩苷在体外效果明显弱于黄芩素,其可
能在体内会通过代谢成为黄芩素而起作用。黄芩素
对骨肉瘤 U2OS细胞株有生长抑制作用,有时间、剂
量依赖性。
参考文献:
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收稿日期:2010 - 07 - 01
作者简介:张超 (1983—) ,男,河北张家口,正攻读药理学专业的硕士学位。Email:zhchao03@ 126. com
* 通信作者(Correspondent author) ,Email:limaox2005@ yahoo. com. cn
藏药螃蟹甲的镇痛抗炎作用
张 超1,2,李茂星2,尚小飞1,2,何希瑞2,3,贾正平1,2,3*
(1.兰州大学生命科学学院,甘肃 兰州 730000;2. 兰州军区兰州总医院,甘肃 兰州 730050;3. 兰州大学药学院,甘肃 兰州
730000)
摘要:目的 研究螃蟹甲的镇痛抗炎作用。方法 以螃蟹甲水提取物为研究对象,采用小鼠醋酸扭体法、热板法、耳肿胀法、
足肿胀法及毛细血管通透性实验等方法来观察其镇痛抗炎作用。结果 螃蟹甲水提取物能显著减少小鼠扭体反应的次数,
高剂量组能明显延长热板所致的小鼠舔后足的时间,对小鼠耳肿胀及足肿胀均有显著的抑制作用,且能降低毛细血管的通透
性,显著抑制醋酸所致的小鼠腹腔炎症渗出。结论 螃蟹甲水提取物具有较好的镇痛抗炎活性。
关键词:螃蟹甲;水提取物;镇痛;抗炎
中图分类号:R96 文献标志码:A 文章编号:1006 - 0103(2011)02 - 0135 - 03
Analgesic and anti - inflammatory activities of Phlomis younghusbandii
ZHANG Chao1,2,LI Mao - xing2,SHANG Xiao - fei1,2,HE Xi - rui2,3,JIA Zheng - ping1,2,3*
(1. College of Life Science,Lanzhou University,Lanzhou,Gansu,730000 P. R. China;2. Lanzhou General Hospital of PLA,Lanzhou,
Gansu,730050 P. R. China;3. College of Pharmacy,Lanzhou University,Lanzhou,Gansu,730000 P. R. China)
Abstract:OBJECTIVE To study the analgesic and anti - inflammatory effects of Phlomis younghusbandii in mice. METHODS
Administered the extracts of Phlomis younghusbandii by intraperitoneal injection,the acetic - acid induced writhing times,the hot plate
pain threshold,xylene - induced ear swelling and carrageenan - induced hind paw edema,and acetic acid induced the peritoneal capil-
lary permeability in mice were observed and determined. RESULTS The water extracts of Phlomis younghusbandii could remarkably
reduce the times of writhing reaction induced by acetic acid in mice and the high dose could prolong the leg - licking time in mice pro-
voked by hot plate. It could significantly inhibit mice auricula swelling and paw edema induced by xylene and carrageenan respectively,
it also reduced peritoneal capillary permeability and inflammatory peritoneal exudation induced by acetic acid. CONCLUSION The
water extracts of Phlomis younghusbandii showed a certain analgesic and anti - inflammatory activities.
Key words:Phlomis younghusbandii Mukerjee;Water extracts;Analgesic;Anti - inflammatory
CLC number:R96 Document code:A Article ID:1006 - 0103(2011)02 - 0135 - 03
DOI:10.13375/j.cnki.wcjps.2011.02.007
螃蟹甲为唇形科糙苏属多年生草本植物螃蟹甲
Phlomis younghusbandii Mukerjee 的干燥块根,广泛
分布于西藏、青海海拔 2. 7 ~ 4. 8 km的地区,藏语称
“露木尔”,为藏医习用药材。广泛用于治疗感冒、
咳嗽、疮疥肿毒、风湿性关节炎、肺炎、支气管炎等疾
病[1 - 3]。现采用几种经典的实验模型初步研究了螃
蟹甲水提取物的镇痛和抗炎活性,可为开发螃蟹甲
的药用价值提供依据。
1 实验部分
1. 1 动物与试药
Balb /C小鼠 (兰州生物制品研究所实验动物
中心,实验动物合格证号:甘肃省医动字第 14 - 002
号)体重 18 ~ 22 g,♀♂兼用。螃蟹甲药材(市售)
由兰州大学药学院马志刚教授鉴定为螃蟹甲 Phlo-
mis younghusbandii Mukerjee 的干燥块根;阿司匹林
(合肥久联制药公司,批号:20061003) ;吗啡(沈阳
第一制药厂) ;角叉菜胶、伊文思兰(美国 Sigma) ;其
余试剂为分析纯。
1. 2 方法与结果
1. 2. 1 水提取物的制备 取干燥的螃蟹甲块根,粉
碎后加 8 倍量水煎煮(1. 5 h × 3) ,合并滤液,浓缩,
真空干燥,得螃蟹甲水提取物。
1. 2. 2 水提取物对小鼠扭体反应的影响 参照文
献[4],将 50 只♂小鼠随机均分为 5 组,分别 ip 生理
盐水(100 mL·kg -1)、螃蟹甲水提取物(100、50、25
mg·kg -1)、阳性对照药阿司匹林(100 mg·kg -1)。
给药 30 min后,每只小鼠均 ip 0. 7 %冰醋酸(0. 01
mL·g -1)。观察和统计小鼠在 0 ~ 30 min 内出现扭
体反应的次数,并计算药物对扭体反应的抑制率。
结果表明:螃蟹甲水提取物各剂量和阿司匹林均能
显著抑制醋酸引起的小鼠疼痛,减少小鼠的扭体次
数,与生理盐水组比较差异有显著性(P < 0. 05,P <
0. 01) (表 1)。
表 1 螃蟹甲水提取物对醋酸引起小鼠的扭体反应(珔x ± s,n =10)
Table 1 Effect of water extracts on the writhing response induced
by acetic acid in mice(珔x ± s,n =10)
Groups Dose /mg·kg -1 扭体次数 抑制率 /%
NS - 32. 00 ± 13. 08 -
螃蟹甲 25 18. 43 ± 6. 73* 42. 41
50 12. 33 ± 6. 10** 61. 47
100 4. 80 ± 4. 80** 85. 00
阿司匹林 100 7. 10 ± 2. 30** 76. 57
Compared with NS group:* P < 0. 05,**P < 0. 01
1. 2. 3 水提取物对小鼠热板痛阈值的影响 参照
文献[4],将 50 只♀小鼠随机均分为 5 组,分组与给
药方式同“1. 2. 2”项方法,阳性对照药为盐酸吗啡
(5 mg·kg -1)。实验前在热板上(55 ± 1 ℃)筛选小
鼠,以小鼠舔后足或跳跃反应的潜伏期为痛阈指标,
剔除反应潜伏期 < 5 s 或 > 30 s 的动物。测定给药
后 30、60 min 的痛阈值。实验表明:螃蟹甲水提取
物高剂量和吗啡能明显延迟小鼠的舔后足时间,提
高小鼠的痛阈值,与生理盐水组小鼠比较差异有显
著性(P < 0. 05,P < 0. 01) ,而中、低剂量的作用不明
显(表 2)。
表 2 螃蟹甲水提取物对小鼠热板痛阈的影响(珔x ± s,n =10)
Table 2 Effects of water extracts on the pain threshold of mice in
the hot plate test(珔x ± s,n =10)
Groups Dose /mg·kg -1
反应时间 / s
0 min 30 min 60 min
NS - 22. 35 ± 5. 00 16. 66 ± 5. 43 16. 60 ± 6. 52
螃蟹甲 25 21. 75 ± 6. 36 23. 71 ± 6. 74 26. 14 ± 8. 30
50 22. 02 ± 4. 85 21. 14 ± 5. 58 24. 84 ± 9. 86
100 19. 12 ± 6. 27 30. 60 ± 8. 49* 32. 41 ± 8. 20**
吗啡 5 14. 74 ± 2. 60 41. 01 ± 6. 40** 43. 68 ± 7. 50**
Compared with NS group:* P < 0. 05,**P < 0. 01
1. 2. 4 水提取物对二甲苯致小鼠耳廓肿胀的影响
参照文献[4],将 50 只♂小鼠按“1. 2. 2”项方法分
组、给药。给药 30 min 后,在每只小鼠右耳的背侧
面涂抹 30 μL二甲苯,涂抹 1 h后,于颈椎脱臼处死
小鼠,沿耳廓基线剪下两耳,用直径 6 mm 打孔器取
两耳对称处的圆耳片,称重,以左右耳片重量差表示
肿胀度,并计算致炎率和抑制率。实验表明:螃蟹甲
水提取物各剂量和阿司匹林均能抑制二甲苯诱发的
小鼠耳廓肿胀,与生理盐水组小鼠比较差异有显著
性(P < 0. 05,P < 0. 01) (表 3)。
1. 2. 5 水提取物对角叉莱胶所致小鼠足肿胀的影
响 参照文献[4],将 50 只♂小鼠按“1. 2. 2”项方法
分组、给药。实验前先用游标卡尺测量小鼠右后足
的厚度,给药后 30 min,向小鼠右后足皮下注入 25
μL 2 %角叉菜胶,分别测定 1、3、5 h 时小鼠右后足
的厚度,并计算肿胀率和抑制率。实验表明:螃蟹甲
水提取物各剂量能抑制角叉莱胶诱发的小鼠足肿
胀,与生理盐水比较差异有显著性(P < 0. 05,P <
0. 01)。考虑到药物的抑制率可能与药物代谢有
关,抑制率随时间延长而减小。阿司匹林能显著抑
制各时间段的足肿胀(表 3)。
1. 2. 6 水提取物对小鼠腹膜毛细管通透性的影响
参照文献[5],将 40 只♀小鼠随机均分为 4 组,各
组小鼠分别 ip 生理盐水(100 mL·kg -1)、螃蟹甲水
提物(100、50、25 mg·kg -1)。10 min 后于尾静脉注
射 0. 5 %伊文思蓝(10 mL·kg -1) ,作为腹膜毛细管
通透性标记,10 min 后 ip 1. 2 % 冰醋酸(0. 01
mL·g -1) ,20min后,于颈椎脱臼处死小鼠,剖开腹
631 华 西 药 学 杂 志 第 26 卷
表 3 螃蟹甲水提物对二甲苯所致小鼠耳廓肿胀和角叉莱胶所致小鼠足肿胀的影响(珔x ± s,n =10)
Table 3 Effects of water extract on the xylene - induced ear swelling and the carrageenan - induced paw edema in mice(珔x ± s,n =10)
Groups Dose /mg·kg -1
二甲苯的影响
肿胀度 /mg 致炎率 /%抑制率 /%
1 h
肿胀率 /% 抑制率 /%
3 h
肿胀率 /% 抑制率 /%
5 h
肿胀率 /% 抑制率 /%
NS - 6. 28 ± 0. 78 45. 36 - 39. 50 ± 6. 90 - 53. 55 ± 8. 34 - 27. 90 ± 8. 57 -
螃蟹甲 25 4. 11 ± 1. 81* 33. 20 34. 59 37. 66 ± 6. 85 4. 66 51. 41 ± 6. 19 4. 01 27. 02 ± 4. 60 3. 15
50 3. 85 ± 2. 03* 32. 94 38. 76 35. 46 ± 4. 93* 10. 23 48. 90 ± 8. 83* 8. 69 26. 59 ± 6. 68 4. 70
100 2. 92 ± 1. 23** 27. 63 51. 67 28. 88 ± 4. 52** 26. 89 40. 08 ± 7. 32** 25. 15 22. 61 ± 6. 40 16. 06
阿司匹 100 1. 82 ± 1. 20** 23. 18 65. 10 19. 79 ± 5. 54** 50. 60 23. 56 ± 8. 45** 56. 50 13. 14 ± 7. 69** 52. 91
Compared with NS group:* P < 0. 05,**P < 0. 01
部,用生理盐水分数次冲洗腹腔,用吸管吸出洗涤
液,合并后加入生理盐水至 5 mL。以 3 × 103 r·
min -1离心 15 min,测定 A610。以吸光度表示伊文思
蓝的含量,计算抑制率。实验表明:螃蟹甲水提物各
剂量均能明显抑制冰醋酸所致小鼠腹膜毛细血管通
透性的增高,减少伊文思蓝的渗出量,并且与生理盐
水组小鼠比较,差异有显著性(P < 0. 05,P < 0. 01)
(表 4)。
表 4 螃蟹甲水提物对小鼠腹膜毛细管通透性的影响(珔x ± s,n =10)
Table 4 Effects of water extracts on the peritoneal capillary perme-
ability in mice(珔x ± s,n =10)
Groups Dose /mg·kg -1 A610 抑制率 /%
NS - 1. 9181 ± 0. 5427 -
螃蟹甲 25 1. 5205 ± 0. 3244 20. 73
50 1. 3841 ± 0. 3168* 27. 84
100 1. 2761 ± 0. 3367** 33. 47
Compared with NS group:* P < 0. 05,**P < 0. 01
1. 2. 7 统计学方法 实验数据使用 SPSS 10. 0 软
件处理,均以 珋x ± s表示,数据采用 t检验统计处理。
2 讨论
小鼠镇痛实验表明:100、50、25 mg·kg -1螃蟹甲
水取提物于腹腔一次给药后,能显著减少冰醋酸所
致小鼠扭体反应的次数;高剂量组能显著延长热板
所致小鼠舔后足的潜伏期,提高了小鼠的痛阈值,而
中、低中、低剂量组的作用不明显。说明螃蟹甲水取
提物的外周镇痛作用强于中枢镇痛作用。小鼠炎症
实验表明:螃蟹甲水取提物各剂量对由二甲苯所致
小鼠耳肿胀、角叉莱胶所致足肿胀和冰醋酸所致毛
细血管通透性增高均有较好的抑制作用,存在一定
的剂量依赖性。总之,螃蟹甲的抗炎作用优于其镇
痛作用,这与其在临床上的应用基本相符。
研究发现:螃蟹甲中的主要成分是环烯醚萜苷
类、二萜类和黄酮类物质[6 - 7]。因其近属植物独一
味中的环烯醚萜苷类成分具有较好的镇痛抗炎作
用[5],因此,作者推测螃蟹甲水提物的镇痛抗炎作
用可能与其含有的环烯醚萜苷类成分有关,但其镇
痛抗炎作用的具体机制尚不清楚,有待研究。
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731第 2 期 张 超,等。藏药螃蟹甲的镇痛抗炎作用