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第 36 卷 第 5 期 湖南科技学院学报 Vol.36 No.5
2015年 5月 Journal of Hunan University of Science and Engineering May.2015


石香薷中对聚伞花素测定方法的研究

张 杨
(湖南邵阳师范，湖南 邵阳 422000)
摘 要：采集人工栽培的石香薷，利用 CO2 超临界萃取技术提取挥发油，研究探讨挥发油中对聚伞花素的测定方法。
对挥发油中的对聚伞花素进行高效液相色谱(HPLC)分析,确定 HPLC 分析条件。对聚伞花素 HPLC 条件为色谱柱为
YWG-SiO2(250 mm×4.6mm,5μm)，流动相为甲醇，流速为 1.0mL/min。对聚伞花素在 0.089mg/mL～0.949 mg/mL 和 2.68
mg/mL～11.53 mg/mL 范围内线性关系良好，平均回收率为 88.4%，相对标准偏差 RSD 为 2.1%(n=10)。
关键词：石香薷；对聚伞花素；CO2 超临界萃取；高效液相色谱
中图分类号：O69 文献标识码：A 文章编号：1673-2219（2015）05-0054-04

1 前 言
1.1 石香薷性质与作用
石香薷（Moslem chinensis Maxim）别名细叶香薷、土荆芥，是唇形科石荠苧属Moslem一年生草本；株高20～40cm，全
株香气甚浓；茎细，多分枝，灰绿色或紫色；叶对生，条状矩圆形或条状披针形，两面有柔毛和透明腺点；轮伞花序密集成
穗状花序，紫红色或白色；小坚果球形，褐色，有深雕纹；花期9～11月，果期10～11月；广泛分布于江苏、浙江、福建、
湖南、湖北、江西、贵州、广东、广西等地，喜生于山坡、旷野、路旁的干旱地[1]。
过去，国内对石香薷提取工艺的研究多限于蒸馏法、有机溶剂浸提法等传统提取工艺[13，16～19]。孙凌峰等[18-19]还对石香
薷有机溶剂浸膏提取做过中试工艺研究。二氧化碳超临界萃取技术，是近 20 年来才在我国快速发展起来的一种新型分离技
术，无毒，无溶剂残留，无污染，适合于生物资源有效成分的分离，被公认为“绿色提取技术”。郑尚珍等[13]、曾虹燕等[16]、
王放银等[17]对石香薷挥发油的二氧化碳超临界萃取工艺做了初步探讨。
研究表明，石香薷挥发油对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、伤寒杆菌、肺炎杆菌、变形杆菌、绿脓杆菌以及脑膜炎球菌均
有显著的抗菌作用[20-23],可作为天然的的食品防腐剂开发利用。
1.2 对聚伞花素性质与作用
对聚伞花素，别名百里香素，对-伞花烃，英文名称为 p-cymene， Dolcymene， Cymol ，化学名称 Benzene，
1-methyl-4-(1-methylethyl)，分子式为 C10H14O 分子量为 150 物理性质液体，沸点 177.10°，熔点-67.94℃。几乎不溶于水，与
乙醇、乙醚可混溶，是挥发性成分。其药理作用有防、杀昆虫和杀真菌作用，其杀真菌活性比标准抗真菌抗生素制真菌素为
强。动物口服时，有明显的祛痰作用。临床证实其祛痰作用确切，并有起效快、副作用小的优点。
1.3 对聚伞花素的分析方法
方颖等[24]利用高效液相色谱法对不同产地牛至药材中对-聚伞花素的含量进行了分析测定。
张凤荣等[25]采用气相色谱法测定了对-伞花烃及其胶丸的含量。
以往对石香薷挥发油的分析研究多集中在主要成分百里香酚、香荆芥酚上，石香薷挥发油中的对聚伞花素的分析研究尚
未见相关报道。
本课题利用超临界 CO2 萃取技术提取挥发油，对挥发油中的对聚伞花素进行 HPLC 分析，确定 HPLC 分析条件。

2 材料与方法
2.1 材料仪器与试剂

收稿日期：2014－12－05
作者简介：张杨（1975－）女，湖南邵阳人，主治医师，研究方向为人体营养。
DOI:10.16336/j.cnki.cn43-1459/z.2015.05.016
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实验材料：石香薷（邵阳学院七里坪校区外岭上采集，放入阴凉干燥处贮存）
仪器：FSJ-114 植物粉碎机（牧渔业扶沟科技仪器厂）
P99 液相色谱仪（北京温分分析仪器有限公司）
FY121-50-01 型超临界 CO2 萃取装置（南通市飞宇石油科技开发有限公司）
LabTech ΜV 紫外—可见分光光度计（北京莱伯泰科仪器有限公司）
超低温冰箱（青岛海尔电冰箱股份有限公司）
FSJ-114 植物标本粉碎机（牧渔业扶沟科技仪器厂）
多功能红外水分测定仪 DHS-16(上海精密科学仪器有限公司)
AΜY220 电子分析天平（SHIMADZΜ CORPORAT ON JAPAN）
202-1A 型 电热恒温干燥箱（上海东星建材实验设备有限公司）
试剂：甲醇（色谱纯，天津市科密欧化学试剂有限公司）
乙腈（色谱纯，天津市科密欧化学试剂有限公司）
对聚伞花烃（p-cymene≥99%）
2.2 实验方法
2.2.1 样品处理
将石香薷采回洗净去掉根系泥，阴干，用刀切成 7～8cm 长，并用粉碎机粉碎，过 40 目的筛，密封保存备用。
2.2.2 水分测定
用多功能红外水份测定仪测定水分，控制水分在 18%左右。如果没有达到要求，用常温干燥法或均湿法使其达到所要
求的水分。
2.2.3 超临界 CO2 流体萃取工艺流程
准确称取 150g 经 2.2.1、2.2.2 处理过的石香薷材料，装入萃取釜中在萃取压力 15Mpa、温度 40℃；分离Ⅰ压力 8Mpa、
温度 55℃；分离Ⅱ压力 4MPa 温度 30℃的条件下，萃取 2 小时获得石香薷的萃取物。
2.2.4 待测样品溶液的配制
取萃取出来的石香薷挥发油样品约 0.1mg，用甲醇溶解后，再用甲醇定容至 100mL,用 0.45μm 滤膜过滤,备用。
2.2.5 标准溶液的配制
准确取适量标准样品于已称重的一次性样品管中，称重后，加入甲醇 1mL，此时，样品重量为 0.024g,标样的浓度为
24mg/mL。在此浓度下逐步稀释分别配制标准溶液浓度为 2.4mg/mL 、0.24mg/mL、0.12mg/mL、0.48mg/mL、0.72mg/mL、
0.96mg/mL、1.2mg/mL、4.8mg/mL、7.2mg/mL、9.6mg/mL、12mg/mL 的标准溶液备用。
2.2.6 最大吸收波长的确定
取标准溶液适量于 LabTech ΜV 紫外—可见分光光度计上测不同波长下其吸光度，根据吸收曲线得其最大吸收波长。
2.2.7 液相色谱分析条件的确定
分别取 20μL 配好的标准溶液、待测样品溶液于色谱仪上进样，根据标准样品中对聚伞花素的保留时间确定待测样品溶
液中对聚伞花素峰的位置，根据色谱峰的峰形确定确定分离效果。以单因素的实验方法，分别改变流动相，流速进行测定。
比较得到的色谱图，确定色谱分析条件。
2.2.8 加标回收实验
在确定的色谱分析条件下，取试样样品溶液分别加入相同浓度体积不同的标准样品，然后进行高效液相色谱测定，得到
高效液相色谱图以及相应的峰面积，计算回收率。
2.2.9 精密度实验
分别吸取同一浓度的标准样品，于确定的色谱分析条件下重复进样 10 次，每次进样 5μL，进行高效液相色谱测定，测
得其峰面积，算出相对标准偏差（RSD）。

3 结果和分析
3.1 最大吸收波长的确定
取 0.24mg/mL 标准溶液适量于 LabTech ΜV 紫外—可见分光光度计上测不同波长下其吸光度，根据吸收曲线得其最大吸
收波长为 218nm。
3.2 色谱柱的选择
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根据对聚伞花素的性质、实验室条件和文献资料色谱柱为 YWG-SiO2(250mm×4.6mm,5μm)。
3.3 流动相的确定
在流速为 1.0mL/min 的条件下，改变流动相，根据 2.2.7 进行高效液相色谱分析得到相应的色谱图。不管是标准溶液还
是试样溶液以甲醇为流动相，色谱峰的峰形最好，也就是其分离的效果好，而且乙腈的市面价格贵又有毒性，所以选用甲醇
为流动相。
3.4 流速的确定
吸取 20μL 对聚伞花烃标准溶液，以甲醇为流动相，在流速分别为 0.5mL/min 、1.0mL/min、1.5mL/min 的条件下进行
高效液相色谱测定。
3.5 加标回收实验
取待测样品溶液 400μL(记为 Vx)，分别加入 12.0mg/mL 的标准样品溶液 0μL、10μL、15μL、20μL(记为 Vs)，用甲醇定
容至 1mL。然后进行于选定的色谱条件下进行高效液相色谱测定，测出其峰面积，计算回收率。得到的峰面积值和计算出
的回收率见表 1。
表 1. 加标回收率实验
序号 加标体积 Vs（μL） 原有量 m (mg)
加标量 mx
（mg）
峰面积 A 回收率 P
1 0 3.176 0 4061118
2 10 3.176 0.12 4074924 76.4%
3 15 3.176 0.18 4112427 91.0%
4 20 3.176 0.24 4152350 97.9%
注：加标前后试样的浓度根据 AC C
A
 标
标

加标后测出对聚伞花素的质量： m ( )x sC V V   
待测溶液中对聚伞花素原有的质量： m x XC V 
加入对聚伞花素的质量： s s sm C V 
回收率：
s
m mP
m
 
计算其平均回收率为 1 2 3 88.4%P P PP
n
  
3.6 精密度实验
分别吸取浓度为 0.05mg/ml 标准样品，于选定的色谱条件下，重复进样 10 次，每次 5μL，进行高效液相色谱测定，测
得其峰面积数据见表 2。
表 2. 各标准样品的峰面积
编 号 峰面积 编 号 峰面积
1 125567 6 125821
2 121930 7 126896
3 128035 8 120377
4 128454 9 126366
5 125722 10 127772
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由表 2 数据可得，峰面积的平均值为 1 125694 
n i
i
x
A
n
；
标准方差
2
1
( )
1


 
n i
i
A A
S
n
2548；
相对标准差 100% 2.1%  SRSD
A
。

4 结 论
（1）对聚伞花素在紫外—可见分光光度计 218nm 的检测波长下，有最大的吸收峰。
（2）测定石香薷中的对聚伞花素最佳的高效液相色谱条件为：流动相为甲醇，流速为 1.0mL/min,色谱柱为 YWG-SiO2，
5μm，250×46nm(250mm×4.6mm,5μm)。
（3）对聚伞花素在 0.089mg/mL～0.949 mg/mL 和 2.68 mg/mL～11.53 mg/mL 范围内，线性关系良好，平均回收率为
88.4%，RSD 为 2.1%(n=10)。
高效液相色谱可以用作石香薷中对聚伞花素含量的分析测定。

参考文献：
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(责任编校：何俊华)