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水苏多糖对小鼠胃肠道调节作用研究



全 文 :2016年4月
第32卷第2期
皖西学院学报
Journal of West Anhui University
Apr.,2016
Vol.32 No.


水苏多糖对小鼠胃肠道调节作用研究
姜雪萍1,2,谷仿丽2,刘 枫1,2,司华阳1,2,陈乃富2,韩邦兴2
(1.安徽中医药大学药学院,安徽 合肥230012;
2.皖西学院生物与制药工程学院中药研究与开发工程技术研究中心,安徽 六安237012)
摘 要:采用盐酸洛哌丁胺建立小鼠便秘模型和肠蠕动抑制模型,通过小鼠排便实验和小肠推进实验,观察记录小鼠排便粒
数、重量、首次排黑便时间及小肠推进率。研究结果发现,水苏多糖各剂量组均能明显增加便秘小鼠排黑便粒数及重量,缩短首
次排黑便时间,中剂量组能够提高便秘小鼠小肠推进率。
关键词:水苏;便秘;小肠推进率;胃肠道调节
中图分类号:R28    文献标识码:A    文章编号:1009-9735(2016)02-0016-03
 * 收稿日期:2016-02-28
基金项目:安徽省优秀青年人才支持计划;安徽省自然科学基
金(1508085KH203)。
作者简介:姜雪萍,女,安徽霍邱人,硕士研究生,研究方向:天
然产物开发与利用。
通讯作者:韩邦兴,男,安徽枞阳人,博士,副教授,研究方向:中
药资源开发与利用。
  水苏Stachys japonica Miq.是唇形科水苏属多
年生草本植物,具有疏风理气,止血消炎功效,主治感
冒、百日咳、扁桃体炎和咽喉炎等[1]。化学研究发现
多种水苏属植物均含有水苏糖[2],药理学研究表明,
水苏糖对人体胃肠道内的双歧杆菌、乳酸杆菌等有益
菌群有着极明显的增殖作用,改善人体消化道内环
境,调节微生物菌群平衡[3-5],并具有促进胃肠蠕动,
润肠通便功效[6,7]。
水苏属很多植物可作蔬菜食用,如甘露子、蜗儿
菜等,也有很多植物被开发为保健食品、功能饮料和
药品。大别山地区有悠久的食用水苏历史,调查发现
水苏可增强胃肠道蠕动功能,促进消化吸收。目前国
内尚未见水苏多糖对便秘及胃肠道调节作用的报道。
本文通过建立盐酸洛哌丁胺致小鼠便秘模型和肠蠕
动抑制模型,利用水苏多糖进行干扰,探讨水苏多糖
对实验小鼠便秘及小肠推进的影响,旨在为水苏开发
利用提供实验依据。
1 材料
1.1 实验动物
实验动物:昆明种雄性小白鼠,体重18~22g,安
徽医科大学动物研究所动物实验中心提供。
1.2 药品及试剂
盐酸洛哌丁胺胶囊(西安杨森制药有限公司),阿
拉伯胶(西陇化工),活性炭(西陇化工),5%活性炭墨
汁配制:准确称取阿拉伯明胶100g,加水800ml,煮
沸至溶液透明。称取活性炭50g,加至上述溶液中煮
沸3次,待溶液冷至室温后,加水定容至1 000ml,
4℃保存,备用。
水苏:采集于安徽省霍山县落儿岭镇。60℃烘
干,保存,备用
2 方法
2.1 水苏多糖制备
水苏根状茎60℃烘干,粉碎,过60目筛。精密
称取10g置索氏提取器中,加入无水乙醚100ml,
40℃回流提取1h,脱脂,抽滤,滤渣挥干溶剂后,加
蒸馏水140ml,40℃回流提取2次,合并水提液。减
压浓缩至20ml。加入等体积Sevage试剂(氯仿:正
丁醇=4:1)除蛋白,反复三次至无蛋白层,离心,取上
层液,加入无水乙醇使乙醇终浓度为80%,于4℃冰
箱中过夜,醇沉12h。再离心分离(4 000r,10min),
沉淀依次用无水乙醇、丙酮、乙醚洗涤3次,挥干溶
剂,冷冻干燥至恒重,即得水苏多糖,备用。
2.2 小鼠排便实验
选取健康雄性小鼠50只,随机分为空白对照组、
模型组和水苏多糖高、中、低剂量组 (400、200、
100mg/kg·d),每组10只。给药组按0.2ml/10g
灌胃给予水苏多糖,空白组及模型组灌胃等量蒸馏
水。连续灌胃14d,然后各组小鼠禁食16h。自由
饮水,至第15天,高、中、低剂量组及模型组分别灌胃
易蒙停(4mg/kg)造便秘模型,空白组灌胃等量蒸
馏水,30min后,每只小鼠按0.2ml/10g灌胃5%
的活性碳。随后单笼单只观察记录每只小鼠首次
排出黑便时间以及8h内排出黑便的总粒数及总
重量[8]。
2.3 小肠推进实验
选取健康雄性小鼠50只,随机分为空白对照组、
模型组和水苏多糖高、中、低剂量组(100、200、400
mg/kg·d),每组10只。药物组按0.2ml/10g灌胃
给予水苏多糖,空白组及模型组灌胃等量蒸馏水。连
续灌胃14d,然后各组小鼠禁食16h。实验开始前
高、中、低剂量组给予水苏多糖,空白和模型对照组给
予等量蒸馏水。灌胃给药1h后,除空白组外均给易
蒙停(4mg/kg)造便秘模型,30min后,每只小鼠均
按0.2ml/10g灌胃5%的活性碳。15min后颈椎脱
臼处死小鼠,打开腹腔分离肠系膜,取自幽门到盲肠
部位的整段小肠,自然平铺成直线计算小肠推
进率[9]。
小肠推进率(%)=活性炭推进长度(cm)/小肠
总长度(cm)×100%
2.4 统计方法
数据采用珚x±s表示,t检验进行组间差异比较,
以P<0.05为差异具有统计学意义。
3 结果
3.1 水苏多糖对小鼠体重的影响
给予小鼠不同剂量的水苏多糖14d,各给药组小
鼠体重增长量与空白对照组小鼠体重增长量相比较,
高剂量组的小鼠体重增长量明显高于空白对照组(p
<0.05),中、低剂量组无明显差异。提示服用高剂量
的水苏多糖可以促进小鼠体重的增长,而服用中低剂
量的水苏多糖对小鼠的体重则无明显影响。结果见
表1。
表1 水苏水提物对便秘小鼠体重的影响(珚x±s,n=10)
组别 剂量(mg/kg·d) Δ体重/g
空白组 - 4.50±1.86
模型组 - 5.43±3.01
高剂量组 400  6.36±2.05*
中剂量组 200  4.88±1.27
低剂量组 100  5.21±3.25
  与空白组比较 *p<0.05。
3.2 水苏多糖对便秘小鼠排便功能的影响
在连续灌胃水苏多糖14d后,与空白对照组相
比较,模型组小鼠首次排黑便时间延长,排便粒数减
少,黑便重量减轻(P<0.01)。与模型组小鼠相比
较,各剂量组小鼠的排黑便粒数增多,排便重量增大
(P<0.01)。首次排黑便时间缩短(P<0.05)。结果
见表2。
表2 水苏水提物对便秘小鼠排便的影响(珚x±s,n=10)
组别 剂量(mg/kg·d) 黑便重量/mg 首次排黑便时间/min 排黑便粒数/粒
空白组 - 61.06±19.80  121.40±22.18  4.6±1.5
模型组 - 12.41±7.98△△ 227.70±58.47△△ 1.5±0.97△△
高剂量组 400  38.57±14.62** 161.20±54.50* 2.8±1.03**
中剂量组 200  48.09±16.89** 129.70±17.87** 3.9±1.37**
低剂量组 100  76.64±17.95** 157.6±37.69* 7.1±1.66**
      与模型组比较 **p<0.01,与空白对照组比较 △△p<0.01。
3.3 水苏多糖对小鼠小肠推进的影响
与正常对照组小鼠相比较,模型组小鼠小肠推进
率显著降低(P<0.01)。与模型组小鼠相比较,中剂
量组小鼠的小肠推进率明显提高(P<0.01),说明中
剂量的水苏多糖对小鼠小肠推进运动有明显的促进
作用,低剂量组无明显差别,高剂量组小鼠小肠推进
率则比模型组显著降低(P<0.01),这表明高剂量的
水苏多糖对小鼠小肠推进运动有明显的抑制作用。
结果见表3。
表3 水苏提取物对小鼠小肠推进的影响(珚x±s,n=10)
组别
小鼠数
(只)
剂量C
/mg·kg-1
小肠推进率
(%)
空白组 10 - 83.91±10.49
模型组 10 - 35.04±5.86△△
高剂量组 10  400  29.66±3.98**
中剂量组 10  200  42.76±6.04**
低剂量组 10  100  33.38±3.60
  与模型组比较 *p<0.05,**p<0.01,与空白对照组
比较 △△p<0.01。
71第2期 姜雪萍,等:水苏多糖对小鼠胃肠道调节作用研究
4 讨论
本实验采用盐酸洛哌丁胺造小鼠便秘模型和肠
蠕动抑制模型。盐酸洛哌丁胺为阿片受体激动剂,通
过激动肠壁的μ-阿片受体和阻止乙酰胆碱和前列腺
素的释放,拮抗平滑肌收缩,而减少肠蠕动和分泌,延
长肠内容物的滞留时间[10]。
实验通过对便秘小鼠的首次排黑便时间,黑便粒
数,黑便重量等指标的观察记录,及对小肠推进率和
体重增加量的计算,研究了不同浓度的水苏多糖对小
鼠排便和小肠推进运动的影响。实验结果发现,高剂
量的水苏多糖对小鼠体重的影响具有明显的促进作
用,中低剂量的水苏多糖对小鼠的体重则无影响。在
对小鼠排便实验的研究中发现,水苏多糖能够增加排
黑便粒数,增大排便重量,缩短首次排黑便时间,说明
水苏多糖能够改善小鼠的便秘情况。高剂量水苏多
糖对小鼠首次排黑便的时间长于中低剂量组小鼠,排
便粒数及黑便重量也低于中低剂量组,表明尽管各给
药组均能改善小鼠的便秘情况,但在改善小鼠便秘的
情况中,中低剂量的水苏多糖要优于高剂量。在小肠
推进实验中,低剂量的水苏多糖对小鼠的胃肠运动无
影响,中剂量的水苏多糖对小鼠的胃肠运动有明显的
促进作用,而当水苏多糖浓度达到400mg/ml时则
对小鼠的胃肠运动有起抑制作用,提示水苏多糖对小
鼠胃肠运动中可能存在双向调节作用。
实验结果表明水苏根状茎能增加胃肠蠕动,促进
胃肠道运动。下一步,我们将对水苏多糖对胃肠推进
作用的机制开展深入研究。
参考文献:
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[10]许履正,徐妙娣.洛哌丁胺的药理作用和临床应用[J].新
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Study on Impact of Stachys japonica Miq.polysaccharide
on the Regulation of Gastrointestinal Tract in Mice
JIANG Xueping1,2,GU Fangli 2,LIU Feng1,2,
SI Huayang1,2,CHEN Naifu2,HAN Bangxing2
(1.College of Pharmacy,Anhui University of Chinese Medicine,Hefei 230012,China;
2.College of Biological and Pharmaceutical Engineering,West Anhui University,Engineering Technology,
Research Center of Research and Development of Traditional Chinese Medicine,Luan237012,China)
Abstract:By intragastric administration of loperamide hydrochloride to establish a mouse model of constipation and intestinal
peristalsis inhibition model.Mouse defecation test and Smal intestine propulsion experiment were performed.The number of
black stool,black stool weight,the first row of black stool time and smal intestinal propulsion rate of constipation mice were
observed and recorded.Compared with the model group,the high dose group could significantly improve the body weight of mice,
and the amount and weight of the black stool in the mice with constipation were significantly increased in al the dose groups,The
middle dose group could improve the smal intestinal propulsion rate.
Key words:Stachys japonica Miq.;coprostasis;smal intestinal propulsion rate;gastrointestinal tract
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