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藏药螃蟹甲镇咳祛痰平喘有效部位研究



全 文 :第17卷 第2期
Vol.17 No.2
2011年 2月
February.2010Guiding Journal of Traditional Chinese Medicine and Pharmacy
藏药螃蟹甲镇咳祛痰平喘有效部位研究
刘 敬1,赵 斌2,王 琼2
(1.成都中医药大学,四川 成都 610075;2.中山火炬职业技术学院,广东 中山 528436)
[摘要] 目的:对藏药螃蟹甲的镇咳祛痰平喘作用的有效部位进行筛选。方法:运用小鼠氨水引咳法、小鼠呼吸道酚红排
泌法、豚鼠组胺致喘法3个药理实验对螃蟹甲不同提取部位的主要药理学指标进行了考察。结果:螃蟹甲的乙酸乙酯部位和
正丁醇部位均有较好的镇咳祛痰平喘作用,其中镇咳、祛痰作用以正丁醇部位为佳,平喘作用以乙酸乙酯部位作用明显。结
论:乙酸乙酯部位和正丁醇部位为螃蟹甲镇咳、祛痰、平喘的主要有效部位。
[关键词] 螃蟹甲;有效部位
[中图分类号] R285.5 [文献标识码] A [文章编号] 1672-951X(2011)02-0066-02
Studies on the effective parts to relieve cough, reduce phlegm and appease asthma
from Radix Phlomii
LIU Jing1, ZHAO Bin2, WANG Qiong2
(1.school of chinese pharmachy, chengdu university of tcm, chengdu 610075, china;
2.department of biomedicine, zhongshan torch polytechnic, zhongshan 528436, china)
[Abstract] Objective: To search on the effective parts to relieve cough, reduce phlegm and appease asthma from Radis
Phlomii. Methods: The major indexes of Radis Phlomii different extraction sites were studied pharmacology through three phar-
macodynamic experiments. Results: The acetic acid ethyl ester part and the n-butyl alcohol part of Radis Phlomii had promi-
nent biological activities of relieving cough, reducing phlegm and appeasing asthma. Conclusion: These results showed that the
acetic acid ethyl ester part and the n-butyl alcohol part of Radis Phlomii are the effective parts.
[Key words] Radis Phlomii; the effective parts
螃蟹甲为唇形科糙苏属植物植物螃蟹甲(Phlomis
younghusbandii Mukerjee)的干燥块根,藏药名为“露木尔”,
为常用藏药,已被中华人民共和国卫生部颁发的《药品标准》
(藏药第一册)所收载。螃蟹甲作为常用藏药,至今已有千余
年沿用历史,临床上广泛用于治疗感冒、咳嗽、疮疥肿毒以及
肺炎、支气管炎等呼吸道疾病。但其发挥作用的有效成分尚
不清楚,目前应用现代科学技术对其研究的文献报道甚少,
结合螃蟹甲的主要临床应用情况,本实验设计小鼠氨水引咳
法等3个药理实验对螃蟹甲镇咳祛痰平喘作用的有效部位进
行了筛选,以期初步探讨其活性物质,为进一步指导螃蟹甲
的研究开发提供实验依据。
1 材 料
1.1 实验药物 螃蟹甲药材采自西藏昌都地区,经成都中医
药大学中药鉴定教研室严铸云副教授鉴定为唇形科植物螃
蟹甲(Phlomis younghusbandii Mukerjee)的干燥块根。
1.2 阳性药物 咳必清片(批号:060815,25 mg/片,苏州医
药集团有限公司);氯化铵片(批号:061003,0.3 g/片,上海医
药有限公司信谊制药总厂);氨茶碱片(批号:060111,0.1 g/片,
吉林敖东延边药业股份有限公司)。
1.3 试剂及仪器 磷酸组织胺,氨水,碳酸氢钠。WH-96型超
声波雾化器(汕头市粤华医疗器械厂),TU-1810型紫外-可见
分光光度计(北京普析通用仪器)。
1.4 动物 昆明小白鼠,雌雄各半,体重18-22 g,清洁级,成
都中医药大学试验动物中心提供,动物许可证号:川实动管
(97)质第6号。豚鼠,雌雄各半,体重150-220 g,由成都中医药
大学试验动物中心提供,动物许可证号:川实动管质第
99-12号。
1.5 螃蟹甲不同提取部位的制备 取螃蟹甲粗粉加乙醇加
热回流提取3次,每次1 h,滤过,滤渣备用,滤液减压回收乙醇
后加适量水使呈混悬液,依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃
取,萃取液减压回收溶剂,干燥,加蒸馏水,以吐温-80为增溶
剂,制成相同生药剂量的混悬液(1 g生药/mL),作为石油醚、
乙酸乙酯、正丁醇部位,备用;试验所得滤渣用水煎煮2次,滤
过,滤液浓缩至1 g生药/mL,作为水提取部位,备用。
2 实验方法与结果[1-2]
2.1 对小鼠氨水引咳的影响 昆明小白鼠140只,体重18-22 g,
雌雄各半,随机分为14组,每组10只,分别为空白对照组
(0.9%NS),螃蟹甲石油醚部位高、中、低剂量组,螃蟹甲乙酸
乙酯部位高、中、低剂量组,螃蟹甲正丁醇部位高、中、低剂量
组,螃蟹甲水部位高、中、低剂量组,咳必清片对照组。各组给
药剂量如表1所示,每日灌胃给药1次,连续3 d,末次给药1 h
后,单个置于容积为1 L的密闭玻璃罩内,用超声雾化装置从
顶部持续喷人25%氨水15 s,取出记录咳嗽潜伏期及4 min内
咳嗽次数。(见表1)
!!!!!!
!!!!!!

方药研究
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DOI:10.13862/j.cnki.cn43-1446/r.2011.02.029
Guiding Journal of Traditional Chinese Medicine and Pharmacy
第17卷 第2期
Vol.17 No. 2
2011年 2月
February.2010
2.2 对酚红致小鼠呼吸道分泌量的影响 昆明小白鼠140
只,体重18-22 g,雌雄各半,随机分为14组,每组10只。分别为
空白对照组(0.9%NS),螃蟹甲石油醚部位高、中、低剂量组,
螃蟹甲乙酸乙酯部位高、中、低剂量组,螃蟹甲正丁醇部位
高、中、低剂量组,螃蟹甲水部位高、中、低剂量组,氯化铵对
照组。各组给药剂量如表2所示,每日灌胃给药,每日1次,连
续3 d,末次给药1 h后,腹腔注射酚红溶液(0.1 mL/kg),30 min
后,处死动物,剥去气管周围组织,分离气管,在气管下穿一
丝线,用8号针头从甲状软骨处插入气管内约0.3 cm,以丝线
固定,用5%碳酸氢钠溶液1.0 mL洗呼吸道,连续3次,收集洗
涤液,离心10 min(3000 r/min),取上清液于545 nm处测吸光
度。数据进行统计学分析,结果见表2。
表2 螃蟹甲不同提取部位对酚红致小鼠呼吸道分泌量
的影响 (x±s)
剂量 动物
(g生药/kg) (只)
空白对照组 - 10 0.129±0.029
氯化铵对照组 0.15 10 0.238±0.041b
石油醚部位 低剂量 3.0 10 0.124±0.038
中剂量 6.0 10 0.135±0.034
高剂量 12.0 10 0.150±0.039
乙酸乙酯部位 低剂量 3.0 10 0.132±0.036
中剂量 6.0 10 0.148±0.037
高剂量 12.0 10 0.202±0.044a
正丁醇部位 低剂量 3.0 10 0.193±0.037a
中剂量 6.0 10 0.218±0.045b
高剂量 12.0 10 0.207±0.048b
水部位 低剂量 3.0 10 0.131±0.031
中剂量 6.0 10 0.138±0.033
高剂量 12.0 10 0.159±0.036
注:与空白对照组比较,aP<0.05,bP<0.01。
2.3 对豚鼠组胺致喘的影响 取豚鼠140只,雌雄各半,分别
放入连有超声波喷雾器的玻璃罩中,喷入0.1%组胺,喷雾l min,
观察哮喘潜伏期,选择敏感豚鼠112只,随机分成14组,每组8
只,分别为空白对照组(0.9%NS),螃蟹甲石油醚部位高、中、
低剂量组,螃蟹甲乙酸乙酯部位高、中、低剂量组,螃蟹甲正
丁醇部位高、中、低剂量组,螃蟹甲水部位高、中、低剂量组,
氨茶碱片对照组。各组给药剂量如表3所示,每日灌胃给药,
每日1次,连续3 d,末次给药1 h后,分别放入连有超声波喷雾
器的玻璃罩中,喷入0.1%组胺,喷雾l min,观察哮喘潜伏期。
数据进行统计学处理,结果见表3。
表3 螃蟹甲不同提取部位对豚鼠组胺致喘的影响 (x±s)
剂量 动物
(g生药/kg) (只)
空白对照组 - 8 82.5±17.1
氨茶碱片对照组 0.03 8 194.3±24.2b
石油醚部位 低剂量 2.0 8 80.3±21.2
中剂量 4.0 8 87.0±21.8
高剂量 8.0 8 90.4±16.3
乙酸乙酯部位 低剂量 2.0 8 89.3±22.4
中剂量 4.0 8 124.7±24.3a
高剂量 8.0 8 153.3±22.3b
正丁醇部位 低剂量 2.0 8 80.6±19.5
中剂量 4.0 8 96.6±19.3
高剂量 8.0 8 126.0±21.7a
水部位 低剂量 2.0 8 77.9±15.2
中剂量 4.0 8 79.8±12.2
高剂量 8.0 8 111.2±15.7
注:与空白对照组比较,aP<0.05,bP<0.01。
3 讨 论
本研究通过小鼠氨水引咳法、小鼠呼吸道酚红排泌法、
豚鼠组胺致喘法3个药理实验,对螃蟹甲镇咳、祛痰、平喘有
组别 吸光度(A)
表1 螃蟹甲不同提取部位对氨水引咳小鼠的影响 (x±s)
组别 剂量(g生药/kg) 动物(只) 潜伏期(s) 4 min咳嗽数(次)
空白对照组 - 10 18.1±7.7 42.0±13.1
咳必清片对照组 0.02 10 55.4±13.5b 23.4±7.5b
石油醚部位 低剂量 3.0 10 18.9±6.1 34.1±8.7
中剂量 6.0 10 20.6±6.6 33.9±10.2
高剂量 12.0 10 19.9±7.3 38.4±8.9
乙酸乙酯部位 低剂量 3.0 10 22.1±8.4 34.4±9.9
中剂量 6.0 10 35.9±10.2a 26.8±6.3a
高剂量 12.0 10 44.7±12.6b 25.2±6.9a
正丁醇部位 低剂量 3.0 10 32.9±8.4a 27.4±8.1a
中剂量 6.0 10 48.4±11.4b 25.4±7.7a
高剂量 12.0 10 55.9±10.9b 23.5±6.1b
水部位 低剂量 3.0 10 19.6±6.7 39.0±8.8
中剂量 6.0 10 21.1±5.8 36.3±10.9
高剂量 12.0 10 23.0±6.9 40.3±11.9
注:与空白对照组比较,aP<0.05,bP<0.01。
组别 潜伏期(S)
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第17卷 第2期
Vol.17 No.2
2011年 2月
February.2010Guiding Journal of Traditional Chinese Medicine and Pharmacy
效部位进行了较为全面的筛选。试验结果表明,螃蟹甲的乙
酸乙酯部位和正丁醇部位均有较好的镇咳祛痰平喘作用,其
中镇咳、祛痰作用以正丁醇部位为佳,平喘作用以乙酸乙酯
部位作用明显;而石油醚部位和水部位均未见明显生物活
性。提示乙酸乙酯部位和正丁醇部位为螃蟹甲镇咳、祛痰、平
喘的主要有效部位。
参考文献
[1] 陈奇.中药药理实验方法学[M].北京:人民卫生出版社,
1993
[2] 徐叔云,卡如廉,陈修,等.药理实验方法学[M].2版.北京:
人民卫生出版社,1991
(收稿日期:2010-11-02 编辑:李海洋)
复方苦参子洗液提取工艺优选的实验研究
史 明,于 琳,时晓亚
(湖北医药学院附属东风医院,湖北 十堰 442008)
[摘要] 目的:优选复方苦参子洗液的最佳提取工艺。方法:采用正交实验设计,考察不同提取工艺制备的复方苦参子洗
液中苦参碱的含量,依据试验数据设计最佳提取工艺。结果:加水量、煎煮时间对提取效果有显著影响,最佳提取工艺为加水
10倍量、药材浸泡1 h、煎煮2次、每次煎煮2 h。结论:该提取工艺合理,有效成分提取效率高。
[关键词] 复方苦参子洗液;苦参碱;正交设计;提取工艺;HPLC法
[中图分类号] R284.2 [文献标识码] A [文章编号] 1672-951X(2011)02-0068-02
Study of Optimization of Extraction Process for Compound Kushenzi Lotion
SHI Ming,YU Lin,SHI Xiao-Ya
(Department of Pharmacy, Dongfeng Hospital Affiliated with Hubei Medical University, Shiyan Hubei, 442008, China)
[Abstract] Objeetive:To screen the best extraction process for Compound Kushenzi Lotion.Methods: The orthogonal experi-
ment was used to investigate the content of matrine contained in Compound Kushenzi Lotion prepared by different extraction
processes.The best extraction proces was designed according to the result of these studies.Results: The quantity of water and
the time of decoction were the most important factors in the extraction process.The best extraction process was adding 10
times of water,marinating for 1 h in advance,and the material should be decocted twice with 2 h each time.Condusion: The op-
timized extraction technology was rational and the extraction rate of the active principles was high.
[Key words] Compound Kushenzi Lotion; Matrine; Orthogonal design; Extraction technology
复方苦参子洗液是由苦参、蛇床子、地肤子、黄柏、土茯
苓、川椒、薄荷、白花蛇舌草等中药组成的中药复方制剂,具
有清热燥湿,杀虫止痒的作用,临床用于治疗霉菌性、滴虫性
阴道炎以及湿疹、接触性皮炎、皮肤瘙痒和体股癣。为了便于
临床应用,最大限度地保留有效成分,确保临床治疗效果,本
研究以苦参碱的含量为考察指标,对影响复方苦参子洗液的
提取工艺的主要因素进行了考察。
1 仪器与试药
UltiMate 3000高效液相色谱仪(德国戴安),含二极管阵
列检测器,Chromeleon色谱工作站;HS-2060型超声波清洗器
(HENGAO);AEU-200电子天平(日本岛津);苦参碱对照品
(中国药品生物制品检定所,批号:110805-200507);实验中
药材均购于十堰市中药材公司[经鉴定为《中国药典》(2005年
版)收载的正品];甲醇为色谱纯,蒸馏水为微孔滤膜过滤纯化
水;其他试剂均为分析纯。
2 方法与结果
2.1 正交实验设计 根据预试验,确定加水量(因素A)、煎
煮时间(因素B)和煎煮次数(因素C)为考察因素,以苦参碱含
量为评价指标,选用L9(34)正交表进行实验。(见表1)
表1 影响因素水平表
因 素
加水量(A)/倍 煎煮时间(B)/h 提取次数(C)/次
1 8 1.0 1
2 10 1.5 2
3 12 2.0 3
2.2 苦参碱的含量测定
水平
68