全 文 ：作者单位:1.沈阳药科大学中药学院 ,沈阳 110016;2.国药控股沈阳
有限公司
作者简介:张进(1982-),女,辽宁庄河人 ,博士在读 ,研究方向:天然
产物成分的提取分离及活性研究。
通讯作者:孙启时
文章编号:1001-0580(2009)05-0587-03　　中图分类号:R996　　文献标志码:A 【实验研究】
花锚中 3种 酮苷对小鼠肝损伤保护作用
张进1 ,王迎 2 ,孙启时 1
　　摘　要:目的　研究花锚提取物中 3种 酮苷对肝脏保护作用。方法　用 CCl4灌胃小鼠 , 建立急性肝损伤动物
模型 , 观察其肝脏组织形态 , 测定肝脏系数 ,血清中谷丙转氨酶 、谷草转氨酶活性和肝糖元含量 , 研究 3种 酮苷对小
鼠肝损伤的保护作用。结果　模型组中小鼠的血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)活性 、肝脏系数 、肝糖元 A
值分别为(1045.61±47.82), (1323.52±230.22)U/L, (0.062 ±0.0041), (0.062 ±0.013);与模型组比较 , 花锚中 3
种 酮苷高剂量组(10 mg/ml)对小鼠实验性肝损伤均有明显的修复作用 , 能降低 CCl4所致肝损伤小鼠的肝脏系数 、
血清 ALT、AST活性 ,并提高肝糖元含量(P<0.01);化合物A、B、C中剂量组(5mg/ml)的肝糖元 A值分别为(0.072±
0.011), (0.077±0.015), (0.078±0.012), 与模型组相比均明显升高(P<0.05), 其余各项指标与模型组比较 , 差异
均有统计学意义(P<0.01);与模型组比较 ,化合物 B低剂量组(1 mg/ml)可有效降低小鼠的肝脏系数及血清 AST活
性(P<0.05), 化合物 C低剂量组可明显降低小鼠血清 AST活性(P<0.01), 对 ALT活性的升高也有较好的抑制作用
(P<0.05),而其他给药组与模型组比较 ,差异均无统计学意义。结论　花锚中 3种 酮同苷均有较好的保肝作用 ,
为花锚保护肝脏的有效成分 、且具有一定的量效关系。
关键词:花锚; 酮苷;谷丙转氨酶(ALT);谷草转氨酶(AST);肝糖元;保肝作用
StudyonprotectiveeffectofthreexanthoneglucosidesfromHaleniacorniculataonchemical-inducedhepaticinjuryin
mice　ZHANGJin, WANGYing, SUNQi-shi.ColegeofTraditionalChineseMedicine, ShenyangPharmaceuticalUniversity
(Shenyang110016, China)
Abstract:Objective　ToresearchtheprotectiveeffectofthreexanthoneglucosidesfromHaleniacorniculataon
chemicalhepaticinjuryinmice.Methods　ThechemicalhepaticinjurywasinducedbyCC14inmiceasthemodeltostudy
themorphologicchangesofliverandthelivercoefficient, serumALT, ASTactivityandliverglycogenlevel.Results　Com-
paredwiththemodelgroup, thehighdose(10 mg·ml-1)xanthoneglucosidesshowedeffectsofrestoringoflivertissue, re-
ducingthelivercoefficient, serumALTandASTactivity, increasingtheliverglycogenlevel(P<0.01).Themediumdose
(5 mg·ml)xanthoneglucosidesincreasedtheliverglycogenlevel(P<0.05)andinducedsignificantalterationsofotherin-
dexescomparedwithmodelgroup(P<0.01).Inlowdose(1 mg/ml), Btypexanthoneglucosidereducedthelivercoeffi-
cientandserumASTactivity(P<0.05).TheCtypexanthoneglucosidesignificantlyreducedtheserumASTactivity(P<
0.01)andinhibitedtheriseoftheserumALT(P<0.05).Conclusion　Theresultsindicatethatthreexanthoneglucosides
fromHeleniacorniculatacouldprotecttheliveragainstchemicalinjuryindose-effectmannerinmice.
Keywords:HaleniacorniculataL.Cornaz;xanthoneglucosides;ALT;AST;liverglycogen;anti-hepatitis
　　中药不仅有着来源广泛 、种类及数量众多 、毒副反应小的
特点 , 而且有多环节 、多层次 、多靶点综合作用的特点 , 在治疗
肝病方面有独特的优势 〔1〕。 从传统的中药中寻找有效部位
或有效成分治疗病毒性肝炎已经成为研究的热点 〔2〕。花锚
(HaleniacornfculataL.Cornaz)为龙胆科(Gentianaceae)花锚
属(Halenia)植物 , 该植物作蒙藏医常用的传统药物 , 广泛用
于治疗肝胆系统疾患和病毒性肝炎。据报道 , 花锚的水溶性
成分中的 酮苷为其保护肝脏作用的主要成分 〔3〕。因此 , 本
实验选取 3种 酮苷成分 , 用 CCl4灌胃小鼠 , 建立急性肝损
伤动物模型 , 对其肝脏组织形态进行观察 ,并测定肝脏系数 、
血清中谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)活性及肝糖元
含量 , 以验证 3种 酮苷对小鼠实验性肝损伤的修复作用及
有效成分 , 为应用花锚治疗肝病提供实验依据。
1　材料与方法
1.1　材料
1.1.1　主要仪器与试剂　721分光光度计(上海第三分析仪
器厂);JY6001电子天平(上海天平仪器总厂);电热恒温水
浴锅(江苏省金坛市宏华仪器厂);TGL-16G高速离心机(上
海安亭科学仪器厂)。 四氯化碳(CCl4)、 95%乙醇 、 5%三氯
乙酸 , 95%氢氧化钾均为分析纯(天津市康科德科技有限公
司);葸酮试剂(分析纯 , 青岛正业化学试剂有限公司);谷丙
转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)试剂盒(北京北化康泰试剂
有限公司)。
1.1.2　药品　2, 3, 5-三甲氧基-1-O-樱草糖氧基 酮(A), 2,
3, 4, 5-四甲氧基-1-O-樱草糖氧基 酮(B), 2, 3, 4, 7-四甲氧
基-1-O-樱草糖氧基 酮(C), 均由花锚正丁醇层中分离得
到 〔4〕。
1.1.3　实验动物　清洁级昆明种小白鼠 110只(沈阳药科大
学实验动物中心), 体重 18 ～ 22 g,雌雄各半。
1.2　实验方法
1.2.1　动物分组与处理　110只小鼠在实验室适应性饲养
3d后 ,按体重随机分为空白组 、模型组 、给药组(化合物 A高 、
中 、低剂量组 ,化合物 B高 、中 、低剂量组 , 化合物 C高 、中 、低
剂量组)共 11组 , 每组 10只 , 均自由摄取常规颗粒状饲料和
自来水。空白组与模型组均灌胃给予蒸馏水 10 ml/kg, 化合
物 A、B、C分别以蒸馏水配制成高 、中 、低 3个不同剂量组(浓
度分别为 10, 5, 1 mg/ml)的溶液 ,以 10ml/(kg·bw)的剂量灌
胃给药 , 均连续给药 7d,末次给药后 2 h,空白组灌胃给予蒸
馏水 10 ml/(kg·bw),其余各组按 10 ml/(kg·bw)剂量用 CCl
4
灌胃(以花生油配成 1%溶液), 禁食不禁水。 16 h后将所有
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动物精确称重后 , 摘眼球取血 , 完整摘取肝组织。
1.2.2　肝脏组织形态观察及肝脏系数测定　各组对照 , 仔细
观察新鲜肝组织形态 ,精确测量肝脏重量 , 计算肝脏系数。
1.2.3　ALT、AST活性测定　动物新鲜血样以 3 000 r/min离心
20min,取上层血清,采用赖氏法测定ALT, AST活性 〔5〕。
1.2.4　肝糖元的提取与测定　肝脏经生理盐水空白漂洗 , 滤
纸吸干 , 精确称取肝组织 200 mg, 以葸酮法测定肝糖元
含量 〔6〕。
1.3　统计分析　应用 SPSS15.0统计软件进行 LSD-t检验。
2　结　果
2.1　肝脏组织形态变化　小鼠肝脏组织形态学观察表明 , 与
空白组相比较以下不同 , 模型组肝脏色泽暗淡 , 无血色 ,边缘
轮廓模糊不清 , 肝脏肥大 ,部分肝脏局部出现囊肿。与模型组
比较 , 各给药组的低剂量组的肝脏轮廓大多清晰 , 肿大程度有
所改善 , 表面有细颗粒状突起 , 色泽仍较空白组暗淡;而各给
药组的高剂量组肝脏轮廓十分清晰 ,纤维化程度大大减轻 , 颗
粒状突起明显回缩 , 几乎无肥大表现 , 且色泽鲜艳 , 与空白组
的肝脏颜色非常接近。结果表明 , 各给药组的肝脏病变程度
均较模型组轻 , 说明花锚中的 3种 酮苷对 CCl4诱导的肝病
理损伤均有一定的保护与修复作用。
2.2　肝脏系数分析(表 1)　空白组小鼠肝脏系数明显低于
模型组(P<0.01), 说明 CCl4可造成小鼠肝脏肥大 , 使肝脏
重量明显增加。与模型组相比 ,除化合物 A低剂量组外 , 3种
化合物各剂量组小鼠的肝脏系数均小于模型组 ,其中高 、中剂
量组与模型组比较 , 差异均有统计学意义(P<0.01);除化合
物 B低剂量组明显低于模型组(P<0.05)外 , 化合物 A、C低
剂量组与模型组比较 ,差异均无统计学意义。说明这 3种化
合物对由 CCl4导致小鼠肝损伤而造成的肝脏系数增大现象
均有抑制作用 , 并存在一定的量效关系。
表 1　花锚中 3种 酮苷对 CCl4肝
损伤小鼠肝脏系数影响( x±s)
组别(mg/ml) 肝脏系数
空白组 0.049±0.004 9＊
模型组 0.062±0.004 1
化合物 A高剂量组 10 0.048±0.002 9＊＊
　　　　中剂量组 5 0.052±0.005 7＊＊
　　　　低剂量组 1 0.065±0.005 0
化合物 B高剂量组 10 0.050±0.004 6＊＊
　　　　中剂量组 5 0.054±0.003 2＊＊
　　　　低剂量组 1 0.059±0.004 0＊＊
化合物 C高剂量组 10 0.049±0.003 7＊＊
　　　　中剂量组 5 0.052±0.004 4＊＊
　　　　低剂量组 1 0.058±0.005 2
　　注:与模型组比较 , ＊ P<0.05, ＊＊ P<0.01;n=10。
2.3　ALT, AST活性分析(表 2)　模型组小鼠血清中 ALT和
AST活性均明显高于空白组(P<0.01),说明 CCl4急性肝损
伤动物模型造模成功 。与模型组比较 , 3种化合物高 、中剂量
组的 ALT、AST活性 、化合物 C低剂量组的 AST、ALT活性及
化合物 B低剂量组的 AST活性均明显低于模型组(P<0.01
或 P<0.05),化合物 B低剂量组的 ALT活性及化合物 A的
AST、ALT活性与模型组比 , 差异均无统计学意义。结果显
示 , 花锚中的 3种 酮苷对抑制急性肝损伤模型 ALT与 AST
活性的升高均有较好的效果 ,并具有一定的量效关系。
表 2　花锚中 3种 酮苷对 CCl
4
肝损伤小鼠
血清中 ALT、AST活性影响( x±s)
组别(mg/ml) ALT(U/L) AST(U/L)
空白组 711.75±29.92＊＊ 662.55±36.28＊＊
模型组 1 045.61±47.82 1 323.52±230.22
化合物 A高剂量组 898.05±130.56＊＊ 781.53±131.33＊＊
　　　　中剂量组 5 1 024.87±52.80＊＊ 961.15±81.85＊＊
　　　　低剂量组 1 1 038.11±66.80 1 227.62±205.94
化合物 B高剂量组 10 981.54±56.66＊＊ 750.45±1 52.39＊＊
　　　　中剂量组 5 985.13±50.34＊＊ 955.59±209.66＊＊
　　　　低剂量组 1 1 038.37±84.27 1 084.45±167.06＊
化合物 C高剂量组 10 964.66±36.29＊＊ 672.31±104.69＊＊
　　　　中剂量组 5 985.80±29.13＊＊ 831.87±t29.61＊＊
　　　　低剂量组 1 998.71±48.46＊ 1 070.23±183.59＊＊
　　注:与模型组比较 , ＊ P<0.05, ＊＊ P<0.01;n=10。
2.4　肝糖元含量分析(表 3)　肝糖元 A值愈大 , 说明肝糖元
含量愈高。结果显示 , 模型组小鼠肝糖元含量明显低于空白
组(P<0.01),说明 CCl4急性肝损伤动物模型造模成功 , 可
能使肝脏储存糖元能力下降 , 破坏肝功能。 与模型组比较 , 3
种化合物各剂量组的肝糖元含量均升高 ,其中所有化合物的
高 、中剂量组与模型组比较 , 差异均有统计学意义(P<0.01
或 P<0.05),所有化合物的低剂量组与模型组比较 , 差异均
无统计学意义。结果表明 , 3种 酮苷均能够提高 CCl4所致
肝损伤小鼠的肝糖元合成能力 , 对肝功能恢复有一定的作用 ,
并呈现一定的量效关系。
表 3　花锚中 3种 酮苷对 CCl4肝损伤小鼠
肝糖元 A值影响( x±s)
组别(mg/ml) A值
空白组 0.096±0.014
模型组 0.062±0.013
化合物 A高剂量组 10 0.082±0.011
　　　　中剂量组 5 0.072±0.011
　　　　低剂量组 1 0.069±0.011
化合物 B高剂量组 10 0.084±0.012
　　　　中剂量组 5 0.077±0.015
　　　　低剂量组 1 0.072±0.022
化合物 C高剂量组 10 0.085±0.014
　　　　中剂量组 5 0.078±0.012
　　　　低剂量组 1 0.070±0.015
　　注:与模型组比较 , ＊ P<0.05, ＊＊ P<0.01;n=10。
3　讨　论
据报道 , 四氯化碳(CCl4)作为一种致肝毒物质 , 经代谢
产生 CCl4自由基 , 使脂质过氧化 , 可引起肝细胞坏死 , 导致肝
脏的急性损伤 〔7〕。本实验表明 , CCl4对小鼠肝组织有损伤作
用 ,表现在模型组小鼠血清中 ALT, AST活性和空白组比较均
明显升高。当肝细胞受损时 , 细胞质内的 ALT和 AST释放入
血造成高血清 ALT和 AST, 故血清中的 ALT和 AST的含量是
反映肝受损的敏感指标 〔8 , 9〕。本实验中 3种 酮苷对肝细胞
的组织学病变均有较好的修复作用 , 能明显降低 CCl4引起的
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小鼠血清ALT和 AST增高 ,并且有一定的量效关系 , 表明这 3
种 酮苷可能在一定程度保护肝细胞膜结构 , 减少自由基的
攻击而减轻肝细胞的损伤 , 对实验性肝损伤具有较好的保护
和治疗作用。
肝脏是药物代谢的主要器官 ,肝对糖的存储 、分布和调节
起重要作用 〔10〕。本实验中 ,模型组肝糖元含量与空白组相比
下降 , 这可能与肝组织损伤而引起的糖代谢变化有关。当肝
细胞严重受损时 , 造成肝糖元合成障碍与贮存减少 , 以多种途
径影响糖代谢 , 导致模型组的肝糖元含量明显下降 〔11〕。结果
显示 , 各给药组小鼠的肝糖元含量均高于模型组 , 可能是由于
酮苷促进了糖元合成途径或提高了糖元储备能力 , 从而较
好地控制肝细胞坏死和促进损伤肝细胞的修复 , 有效地保护
肝细胞 , 避免有毒物质的侵害和自由基大量的产生 , 从而提高
肝细胞糖元的合成或储备能力。
参考文献
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挑战 [ J] .中国中药杂志, 2001, 6(10):662-666.
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研究进展 [ J] .时珍国医国药 , 2008, 19(1):25-27.
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Haleniacorniculata[ J].ArchPharmRes, 2008, 31(7):850-855.
〔5〕　叶应妩 ,王毓三.全国临床检验操作规程 [ M] .3版.南京:东南
大学出版社 , 2006.
收稿日期:2008-12-22 (王奕编辑　李贵福校对)
作者单位:辽宁省大连市一★三中学医务室 , 116105
作者简介:刘红娥(1971-),女 ,大连金州人 ,主治医师 ,本科 ,主要从
事学校学生常见病防治工作。
文章编号:1001-0580(2009)05-0589-01　　中图分类号:R183　　文献标志码:B 【基层公共卫生】
大连市某中学一起流行性腮腺炎暴发调查
刘红娥
　　关键词:流行性腮腺炎;中学生;流行病学调查
　　2007年 3 ～ 4月, 大连市某中学生发生一起流行性腮腺炎
暴发疫情 ,经大连市金州区疾病预防控制中心及学校医务室人
员的综合防治 ,使疫情得到有效控制。为了解此次流行性腮腺
炎暴发流行状况 ,进行了流行病学调查。结果报告如下。
疫情概况　大连市某中学是一所位于农村的高级中学。
全校学生 2 232人 , 其中男生 1 248人 , 女生 984人。全校宿
舍 124间 ,住宿生 1 604人 , 其中男生 872人 , 女生 732人 , 平
均每间宿舍住宿学生 12.9人。 2007年 3月 20日 ～ 25日 , 高
二(4)班连续出现 5例腮腺炎病例。接到报告 , 医务室立即
隔离了这 5名患病学生并报告区疾病预防控制中心。因为首
发病例学生与其他班级学生混寝 , 使其他班级学生也陆续出
现腮腺炎病例。 1个月之内 , 共计发生 68例腮腺炎病例。
临床表现　68例患者均有发热 38 ～ 40 ℃, 头痛 ,肌肉酸
痛 , 食欲不振 ,全身不适等症状;1 ～ 2 d内腮腺肿大 ,其中 2例
男性患病学生发烧达 40 ℃, 出现相应的并发症 , 1例伴有胰
腺炎 , 1例伴有睾丸炎 ,送市传染病医院进行治疗。经过 2周
多的治疗痊愈。
流行病学调查　此次流行性腮腺炎暴发疫情 , 从 3月 20
日出现首例患者至 4月 28日最后 2例患者 , 持续 38 d。 (1)
时间分布:3月 20 ～ 25日 5例 , 3月 28日 17例 , 4月 5日 19
例 , 4月 8日 19例 , 4月 12日 6例。 (2)年级分布:高一 17
例 ,高二 38例 ,高三 23例。 (3)年龄分布:均在 17 ～ 18岁;
(4)性别分布:68例腮腺炎中 ,男生 36例 ,女生 32例 , 男女生
之间差异无统计学意义。
防治措施　(1)对出现并发症的 2例患者及时送往医院
进行治疗;其余症状较轻的患病学生 ,在家隔离诊疗 , 由校医
每天随访 , 直到症状完全消失。有医院的痊愈诊断书 ,方可返
校上课。 (2)对教室及宿舍空气 、地面 、物品等进行全面的消
毒 ,加强通风 ,每天通风 2次 , 每次 30 min。 (3)每天由班主
任 、生活委员进行晨检 , 将晨检结果报告医务室 , 如有新病例
发生 ,立即报告区疾病预防控制中心。 (4)对出现流行性腮
腺炎的班级其他健康学生进行应急麻 -风 -腮疫苗接种。
(5)开展健康教育 , 提高学生的自我保健能力 , 对班主任进行
1次传染病知识讲座 , 确保早发现 、早诊断 、早治疗。 通过以
上各项措施 ,疫情得到控制 ,未对学校的正常教学秩序和学生
健康造成影响。
小　结　该起流行性腮腺炎的暴发 , 首发病例出现在高
二(4)班 , 班主任老师无传染病报告意识 , 以至引起 1周内该
班出现 5例病例。该校住校学生 、每个班级学生人数较多 , 数
十人同住一个宿舍 , 相互之间接触密切 , 很容易引起暴发流
行 ,并且大多数学生没有注射腮腺炎疫苗 ,也是出现暴发流行
的原因。
收稿日期:2008-11-11 (刘铁编辑　李贵福校对)
589中国公共卫生 2009年 5月第 25卷第 5期　　ChinJPublicHealthMay2009 Vol.25 No.5