全 文 ：FOOD SCIENCE AND TECHNOLOGY
食 品 科 技
2011年 第 36卷 第 4期
速溶、稳定的抗氧化剂产品来推广使用。
参考文献：
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Anti-bacterial activity of Mentha spicata Linn essential oil
ZHANG Xiao-wei1, LI Qing-yu2, WANG De-guo1, SHI Qian-qian1, WANG Gui-hua1*
(1.College of Chemistry, XuchangUniversity, Xuchang 461000;
2.College of Environment, XuchangUniversity, Xuchang 461000)
Abstract: The antimicrobial activity of essential oil of Mentha spicata Linn were qualitatively evaluated using
diffusion method. The minimal inhibitory concentration(MIC) of essential oil was measured by UV-visible spect-
rophotometry. The results show that the antimicrobial activity of essential oil to the three test strains is: Bacillus
subtilis>Staphylococcus aureus>Escherichia coli. The minimal inhibitory concentration(MIC) to the three strains
are: Bacillus subtilis 0.5 μL/mL, Staphylococcus aureus 1.0 μL/mL, Escherichia coli 3.5 μL/mL.
Key words: Mentha spicata Linn; essential oil; antibacterial activity; MIC
张晓伟1， 李青雨 2， 王德国 1， 石倩倩 1， 王桂华 1*
(1.许昌学院化学化工学院，许昌 461000；2.许昌学院城环学院，许昌 461000)
摘要： 采用扩散法对留兰香精油的抗菌活性进行定性测定，用紫外可见分光光度法确定精油的
最小抑菌浓度(MIC值)。结果表明留兰香精油对 3种试验菌株的抑菌性是枯草芽孢杆菌>金黄色
葡萄球菌>大肠杆菌。对枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球、菌大肠杆菌 3 种菌的最小抑菌浓度
(MIC)分别为 0.5、1.0 μL/mL和 3.5 μL/mL。
关键词： 留兰香；精油；抗菌活性；最小抑菌浓度(MIC)
中图分类号： TQ 654.+2 文献标志码： A 文章编号： 1005-9989(2011)04-0227-03
留兰香精油的抗菌活性研究
收稿日期： 2010-09-08 *通讯作者
基金项目： 许昌学院校内项目(2011B023)。
作者简介： 张晓伟（1982—），男，河南许昌人，硕士，讲师，研究方向为食品生物技术及天然产物研究。
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河南特产之一十香菜是留兰香(Mentha spicata
Linn )的一种，多年生草本植物，植物学上，属被
子植物门，双子叶纲，唇形科，薄荷属中的绿薄
荷[1]。因其香气浓郁宜人，味道鲜美可口，因此在
民间被广泛用做净化空气的观赏植物，也被作为
一种可口蔬菜直接食用。留兰香全草含有 0.6%~
0.7%的留兰香精油，其主要成分为香芹酮
(Carvone)，其他成分还有柠檬烯、蒎烯、3- 辛醇、
薄荷酮等[2]。其精油主要用于日化、食品以及医药
等领域[3]。在日化、食品方面主要作为一种良好的
天然植物香料，被广泛用于牙膏、口香糖、口腔
清洁用品、洗涤剂等的生产；在医药方面则具有
疏风散热、和中理气、辟秽解毒、消炎、止血、
收敛之功效，常用于伤风感冒、头痛、胃气痛、
目赤、口疮、牙痛等症；此外由于其精油中含有
香辣气味可以驱蚊虫，所以在环境美化及生物防
治中也有着广泛的应用。
随着十香菜及其精油的广泛应用，对十香菜
精油的研究不断深入，但大多研究主要集中在对
其精油的提取方法及其成分组成上，有关其精油
对一些食品中常见致病菌的抗菌作用的研究却很
少，本文对十香菜精油对食品中常见的致病菌的
抑菌活性进行了初步探究，为综合开发利用十香
菜奠定一定的理论基础和科学依据。
1 试验材料与方法
1.1 试验材料
十香菜：市售。
菌种：大肠杆菌(Escherichia coli)、金黄色葡
萄球菌 (Staphylococcus aureus)、枯草芽孢杆菌
(Bacillus subtilis)：许昌学院化学化工学院食品微
生物实验室。
试剂：营养肉汤培养基(BR)、牛肉膏(BR)、蛋
白胨(BR)、氯化钠(AR)、琼脂(BR)。
1.2 试验器材
YP2002N电子分析天平：上海箐海仪器有限
公司；721型紫外分光光度计：北京莱伯泰科科技
有限公司；HX- 100型高速中药粉碎机：浙江省永
康市溪案五金药具厂；SW- CJ- 2FD净化工作台：
苏州净化设备工程有限公司；spx- 250- BS生化培
养箱、SPX- 250- Z振荡培养箱：上海博泰实验设
备有限公司；YXQ- LS- 50 立式压力蒸汽灭菌锅：
上海博讯实业有限公司医疗设备厂。
1.3 试验方法
1.3.1 精油的制备 参照《中国药典》2000版附录
XD挥发油测定法[4]，取干燥十香菜叶 40.01 g用常
压水蒸气蒸馏法提取[5]。得到淡黄色特殊香味的油
状物为 0.52 g，得率为 1.30%。密封存于 - 20℃冰
箱里。
1.3.2 抗菌活性的定性测定
1.3.2.1 供试菌悬液的制备 取大肠杆菌、金黄色
葡萄球菌、枯草芽孢杆菌的菌种 37℃斜面活化培
养 24 h 后，在无菌条件下用无菌生理盐水制成
107~108 cfu/mL的菌悬液。
1.3.2.2 滤纸片法 将培养基灭菌后，冷却到 45
℃，先在无菌培养皿底层铺一层 10 mL的琼脂培
养基待冷却，用无菌操作的方法将 0.5 mL供试菌
悬液加入到 250 mL牛肉膏蛋白胨培养基中，混合
均匀后用移液管移取 15 mL含菌培养基到已冷却
的琼脂培养基上，待平板凝固后用无菌镊子夹取
16 mm滤纸片(已灭菌)，沾取一定量的样液使滤纸
片恰好均匀润湿而又不溢出纸片圆周，贴于平板
表面中心处 [6]，每种样液作 3 组平行。37 ℃培养
18~24 h后，观察此滤纸片周围有无抑菌圈，并测
量直径。
1.3.2.3 抗菌活性的定量测定 取 24支装有 4.5 mL
营养肉汤培养基的试管灭菌后，分为 3组分别编
号 1~8，各加入 0.5 mL菌悬液，用 25μL微量进
样器分别吸取 25、 12.5、 6.5、 3.5、 1.5、 0.5、
0μL的十香菜精油加入到 1~7号试管中，8号试
管放入冰箱冷藏作空白对照，其余 7支试管在振
荡培养箱中 37℃下振荡培养 24 h 后，在 600 nm
波长处用紫外可见分光光度计测吸光度值[7]。
2 试验结果与分析
枯草芽孢杆菌 金黄色葡萄球菌
大肠杆菌
图 1 十香菜精油对试验菌株的抑制效果
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表 1 十香菜精油对试验菌株的抑菌圈直径测定结果表
供试菌株 抑菌圈直径/mm
大肠杆菌 18.5 20.0
金黄色葡萄球菌 30.0 31.0
枯草芽孢杆菌 33.0 32.0
平均值/mm
19.0 19.2
30.5 30.5
32.5 32.5
十香菜精油对食品中常见 3种致病菌的抑制
效果如图 1 所示，测其抑菌圈直径，结果如表 1
所示。
由图 1可知十香菜精油对 3种供试菌株大肠
杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌均有抑制
效果，且对不同的菌抑制效果强弱不同，从表 1
中对各种菌的抑菌圈直径可知：十香菜精油对 3
株供试菌的抑菌性强弱顺序是：枯草芽孢杆菌
(32.5 mm)> 金黄色葡萄球菌(30.5 mm)> 大肠杆菌
(19.2 mm)。
对十香菜精油对 3株供试菌的抑菌效果做进
一步的定量试验，测定其最小抑菌浓度(MIC)。将
加入十香菜精油的试验菌液培养一段时间后，
用紫外可见分光光度计测吸光度值，结果如表 2
所示。
表 2 金黄色葡萄球菌和大肠杆菌吸光度值的测定结果表
试管编号 1 2 3 4 5 6 7 8
精油浓度/(μL /mL) 5 2.5 1.25 0.7 0.3 0.1 0 0
枯草芽孢杆菌 OD 0.009 0.012 0.030 0.058 0.107 0.176 0.740 0
金黄色葡萄球菌 OD 0.046 0.053 0.086 0.206 0.488 0.695 0.754 0
大肠杆菌 OD 0.083 0.144 0.133 0.169 0.395 0.573 0.692 0
试验过程中可明显观察到液体培养基的浑浊
度随着加入精油量的降低而增强，而液体吸光度
与溶液中的菌体浓度呈一定的比例关系，通过对
不同吸光度值溶液中的菌体数量进行平板计数可
知，当溶液吸光度为 0.1时菌体生长基本被完全抑
制，所以我们以溶液吸光度为 0.1时作为该供试菌
的 MIC值。由表 2可知在一定的范围内，加入精
油量越多，抑制细菌生长现象越明显，吸光度值
越低。经过数次验证试验，可得出：枯草芽孢杆
菌的 MIC是 0.5 μL/mL，金黄色葡萄球菌的 MIC
是 1.0μL/mL，大肠杆菌的MIC是 3.5μL/mL。此
结果与前面的纸片扩散法得到的结果相同，十香
菜精油对 3种供试菌的抑制效果为：枯草芽孢杆
菌 >金黄色葡萄球菌 >大肠杆菌。
3 结论
本试验就十香菜精油的抗菌活性进行了研究，
通过纸片扩散法发现十香菜精油对大肠杆菌、金
黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌均有抑制作用，其
中对革兰阳性菌枯草芽孢杆菌和金黄色葡萄球菌
的抑制效果(抑菌圈直径分别为 32.5、30.5 mm)明
显强于对革兰阴性菌枯草芽孢杆菌(19.2 mm)抑制
效果，通过对其抑菌效果的定量试验可知十香菜
精油对 3株供试菌的最低抑菌浓度(MIC)分别为枯
草芽孢杆菌 0.5 μL/mL，金黄色葡萄球菌 1.0
μL/mL，大肠杆菌 3.5μL/mL.
参考文献：
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