全 文 :评价. 山西医科大学学报,2006;37(7)∶ 716 ~ 719
5 刘艾林,李铭源,王一涛,等. 丹参药理学活性物质基础研究现状. 中
国药学杂志,2007;42(9)∶ 641 ~ 646
6 邓文龙. 创建中药质量的药理学评价体系. 中药药理与临床,2001;
17(1)∶ 1 ~ 2
7 林治荣,陈程,田登科,等. 丹酚酸 A与丹酚酸 B 抗大鼠心肌缺血再
灌注损伤的比较研究. 时珍国医国药,2011;22(2)∶ 412 ~ 414
四倍体黄芩新品系 D20 与甘肃地产二倍体黄芩的抗炎作用比较*
杜 弢1,2,李少海3,颜建胜3,王瑞新3,千维娜3,王 艳3,王学习1,3
(1 甘肃省中药药理与毒理学重点实验室,兰州 730000;2 甘肃中医学院药用植物遗传育种研究所,兰州 730000;
3兰州大学基础医学院,兰州 730000)
摘 要 目的:四倍体黄芩新品系 D20 水提物与甘肃地产二倍体黄芩水提物的抗炎作用比较。方法:采用二甲苯致小鼠耳廓
肿胀、小鼠棉球肉芽肿、小鼠腹腔毛细血管通透性、LPS刺激的巨噬细胞急性炎症及大鼠角叉菜胶致足肿胀实验,观察四倍体黄芩新
品系 D20 水提物与甘肃地产二倍体黄芩水提物的抗炎作用。实验设空白组、地塞米松组( 30mg /kg) 、双黄连粉针剂组( 45mg /kg) 、
二倍体黄芩低剂量( 5g /kg) 、二倍体黄芩高剂量组( 10g /kg) 、四倍体黄芩低剂量组( 5g /kg) 、四倍体黄芩高剂量组( 10g /kg) 。黄芩水
提物等体积经口灌胃给药,地塞米松和双黄连粉针剂腹腔注射给药。结果:四倍体黄芩新品系 D20 水提物与甘肃地产二倍体黄芩
水提物均可不同程度减轻二甲苯致小鼠耳廓肿胀度和小鼠棉球肉芽肿,降低小鼠腹腔毛细血管通透性和 LPS刺激的巨噬细胞急性
炎症,抑制大鼠角叉菜胶所致的足肿胀,二者的作用强度基本无差异。结论:四倍体黄芩新品系 D20 抗炎作用与甘肃地产二倍体黄
芩水提物无差异。
关键词 黄芩;四倍体;二倍体;抗炎作用
甘肃中医学院药用植物遗传育种研究所[1]与甘肃神农文
峰药业有限公司引进中国药科大学高山林教授等培育的高产
优质四倍体黄芩新品系 D20[2],在甘肃省渭源县进行大田种植。
四倍体黄芩新品系 D20,多倍体植物由于染色体加倍,生长势
强,茎粗、叶厚,叶片长度、宽度增加,叶面积增大,生活力增强,
分枝数和叶片数减少,生长期延长,抗逆性增强,因此多倍体对
药用植物具有特殊的应用价值和较高的增产潜力[3 ~ 5]。本实验
主要观察是四倍体黄芩新品系 D20 与甘肃地产二倍体黄芩的
抗炎作用的药效学差异,为四倍体黄芩的进一步大田种植推广
提供药效学依据。
1 材料与方法
1. 1 试验药物 四倍体黄芩新品系 D20 和甘肃地产二倍体黄
芩均由甘肃中医院药用植物遗传育种研究所提供。黄芩水提
物制备,分别取四倍体和二倍体黄芩干品,粉碎,加入 10 倍量
水,80℃加热 60 min,过滤,药渣再加 8 倍量水,80℃加热 45min,
合并滤液,3000rpm离心 10min,取上清液分别减压浓缩至 0. 25g
生药 /ml和 0. 50g生药 /ml,4℃冷藏备用;按药典 2010 版一部黄
芩项下方法,以黄芩苷为对照 HPLC 法测定黄芩苷含量。按干
燥品计算,四倍体和二倍体黄芩水提物黄芩苷含量分别为 24.
8%和 21. 4%。双黄连粉针剂(国药准字 Z10940044),哈药集团
中药二厂,临用时用 N. S 配成 40mg /ml 药液,4℃冷藏备用;地
塞米松磷酸钠注射液(国药准字 H37020289),山东新华制药股
份有限公司,临用时用 NS 配成 3mg /ml 药液,4℃冷藏备用;黄
芩含药血清制备,取小鼠,黄芩水提物经口灌胃给药,地塞米松
和双黄连粉针剂腹腔注射给药,空白对照组(NS)、地塞米松组
(30mg /kg)、双黄连粉针剂组(45mg /kg)、二倍体黄芩低剂量组
(5g /kg)、二倍体黄芩高剂量组(10g /kg)、四倍体黄芩低剂量组
(5g /kg)、四倍体黄芩高剂量组(10g /kg),1 次 /d,共 3d,于末次
给药后 2h采血,分离血清,0. 22μm 微孔滤膜无菌过滤后,置 -
20℃冰箱保存备用。
1. 2 动物 昆明种小鼠,体重 18 ~ 22g,雄性;SD 大鼠,体重
180 ~ 220g,雄性;上述动物均由甘肃省中医学院 SPF 实验中心
提供,动物合格证号:SCXK(甘)2011-0001。
1. 3 试剂 角叉菜胶,Sigma,规格 5g /瓶,临用时 NS 配成 1%
溶液备用;二甲苯,AR 级,天津化学试剂总厂;伊文思蓝,Fluka
进口分装,临用时 NS配成 0. 5%溶液备用。
1. 4 仪器 YLS-7C 型动物足趾容积测定仪;ELX-800 型全自
动酶标仪。BUCKI R200 型旋转蒸发仪。
1. 5 方法 动物按体重分层随机分为 7 组,分别为空白对照组
(NS)、地塞米松组(地塞米松,30mg /kg)、双黄连粉针剂组(双
黄连粉针剂,40mg /kg)、二倍体黄芩低剂量组(二倍体黄芩水提
物,5g /kg)、二倍体黄芩高剂量组(二倍体黄芩水提物,10g /kg)、
四倍体黄芩低剂量组(四倍体黄芩水提物,5g /kg)、四倍体黄芩
高剂量组(四倍体黄芩水提物,10g /kg),10 只 /组。黄芩水提物
2ml /kg等体积经口灌胃给药,地塞米松和双黄连粉针剂腹腔注
射给药。
701中药药理与临床 2014;30(2)
* 基金项目: 甘肃省中药药理与毒理学重点实验室开放基金项目( No. ZDSYS - KJ - 2012 - 005) ,甘肃省中药材产业科技攻关项目( No. GYC12
- 05)
DOI:10.13412/j.cnki.zyyl.2014.02.034
1. 5. 1 二甲苯致小鼠耳廓肿胀 黄芩水提物等体积经口灌胃
给药,地塞米松和双黄连粉针剂腹腔注射给药,1 次 /d,连续 7d。
末次给药 lh 后,在小鼠右耳的前后两面涂抹 0. 02ml 的二甲苯
致炎,lh后颈椎脱臼处死动物,立即沿耳廓基线剪下双耳,用打
孔器分别在两耳片同一部位打孔取耳组织,在电子天平上精密
称重,两耳重量差为肿胀度。
肿胀度 =右侧致炎耳重 -左侧非致炎耳重
肿胀度抑制率 = (对照组肿胀度均值-给药组肿胀度均
值)/对照组肿胀度均值 × 100%
1. 5. 2 小鼠棉球肉芽肿 小鼠麻醉,两侧腋下皮下各切 1cm
切口,并将 20mg的灭菌脱脂棉球植入皮下,缝合切口。黄芩水
提物等体积经口灌胃给药,地塞米松和双黄连粉针剂腹腔注射
给药,1 次 /d,连续 7d。末次给药次日处死动物,剥离肉芽肿组
织置 60℃恒温烘箱中烘烤 12h,称干重,减去原棉球重量为肉芽
肿重量,计算肉芽肿抑制率。
肉芽肿胀度 =肉芽肿干重-棉球重量(20mg)
肉芽肿抑制率 = (对照组肉芽肿胀度-给药组肉芽肿胀
度)/对照组肉芽肿胀度 × 100%
1. 5. 3 小鼠腹腔毛细血管通透性 黄芩水提物等体积经口灌
胃给药,地塞米松和双黄连粉针剂腹腔注射给药,1 次 /d,连续
7d。末次给药 0. 5h 后,所有小鼠尾静脉注射 0. 5%伊文思兰 N.
S溶液 0. 1ml /10g,继而于腹腔内注入 HAC 0. 2ml /只(正常对照
组腹腔内注入 NS 0. 2ml /只),20min后将小鼠脱椎处死,用 4ml
NS冲洗腹腔 2 次,合并洗液,再加入 NS 使总量为 10ml,
3000rpm离心 10min,取上清液测定 A590nm。A590nm值的大小
与伊文思兰腹腔内渗出量成正比,故可以用 A590nm 值代表小
鼠腹腔毛细血管通透性。
1. 5. 4 LPS刺激的巨噬细胞急性炎症 小鼠腹腔注射 1640
培养液,10min后处死小鼠,轻轻按摩腹部,解剖取腹腔液,种入
孔中,2 ~ 3h后,用预热的 1640 培养液洗 3 次,然后培养过夜。
次日,用含 10%小牛血清的 1640 培养液洗 1 次后,加入 LPS(含
10%小牛血清的 1640 培养液稀释 LPS 510μg /ml),4h后加入后
含药血清,24h后,试剂盒检测上清中 NO、NOS含量。
1. 5. 5 大鼠角叉菜胶致足肿胀实验 黄芩水提物等体积经口
灌胃给药,地塞米松和双黄连粉针剂腹腔注射给药,1 次 /d,连
续 7d。末次给药 lh后,于大鼠足掌皮下注射 1%角叉菜胶溶液
0. 1ml /只,采用动物足趾容积测定仪测定致炎前和致炎后 1h、
2h、4h、6h大鼠足容积,计算足肿胀度。
足肿胀度 =致炎后足容积 -致炎前足容积
2 结果
2. 1 不同黄芩水提物对二甲苯致小鼠耳廓肿胀的影响 如表
1所示,二倍体黄芩水提物高低剂量、四倍体黄芩水提物高低剂
量、地塞米松、双黄连粉针剂均可减轻二甲苯致炎所致的小鼠
耳廓肿胀,与对照组比较有统计学意义;双黄连粉针剂、二倍体
黄芩水提物高低剂量、四倍体黄芩水提物高低剂量降低小鼠耳
廓肿胀度作用均较对照药物地塞米松为弱,与地塞米松组比较
有统计学意义;黄芩二倍体和四倍体水提物高剂量高对小鼠耳
廓肿胀度作用与双黄连粉针剂相当,但黄芩二倍体和四倍体水
提物低剂量对小鼠耳廓肿胀度作用弱于双黄连粉针剂;四倍体
黄芩水提物高剂量减轻小鼠耳廓肿胀度作用强于二倍体黄芩
水提物高剂量,但黄芩四倍体和二倍体水提物低剂量对小鼠耳
廓肿胀度减轻作用无差异。
表 1 不同黄芩水提物对二甲苯致小鼠耳廓肿胀的影响(珋x ± s,n =
10)
组 别
剂 量
(g /kg)
肿胀程度
(mg)
肿胀抑制率
(%)
空白对照 2. 238 ± 0. 201
地塞米松 0. 03 1. 183 ± 0. 361** 47. 14
双黄连粉针剂 0. 04 1. 564 ± 0. 148** 30. 12
二倍体黄芩 5. 00 1. 926 ± 0. 214** 13. 94
二倍体黄芩 10. 00 1. 741 ± 0. 199** 22. 21
四倍体黄芩 5. 00 1. 862 ± 0. 201** 16. 80
四倍体黄芩 10. 00 1. 553 ± 0. 182** 30. 61
与对照组组比较 * P < 0. 05,** P < 0. 01(下同)
2. 2 不同黄芩水提物对小鼠棉球肉芽肿的影响 如表 2 所
示,二倍体黄芩水提物高低剂量、四倍体黄芩水提物高低剂量、
地塞米松、双黄连粉针剂均可抑制小鼠棉球肉芽肿生成,与对照
组比较有统计学意义;二倍体黄芩水提物高低剂量、四倍体黄芩
水提物高低剂量抑制小鼠棉球肉芽肿生成均较对照药物地塞
米松和双黄连粉针为弱,与地塞米松组和双黄连粉针剂组比较
有统计学意义;四倍体黄芩水提物高低剂量对小鼠棉球肉芽肿
抑制作用与二倍体黄芩水提物高低剂量比较相当,无统计学意
义。
表 2 不同黄芩水提物对小鼠棉球肉芽肿的影响(珋x ± s,n = 10)
组 别
剂 量
(g /kg)
肉芽肿质量
(mg)
肉芽肿抑制率
(%)
空白对照 21. 18 ± 3. 64
地塞米松 0. 03 6. 89 ± 0. 82** 67. 46
双黄连粉针剂 0. 04 13. 45 ± 2. 90** 36. 50
二倍体黄芩 5. 00 19. 29 ± 3. 08** 8. 96
二倍体黄芩 10. 00 16. 49 ± 2. 78** 22. 17
四倍体黄芩 5. 00 18. 90 ± 2. 88** 10. 80
四倍体黄芩 10. 00 15. 84 ± 2. 48** 25. 21
2. 3 不同黄芩水提物对小鼠腹腔毛细血管通透性的影响 如
表 3 所示,二倍体黄芩水提物高低剂量、四倍体黄芩水提物高低
剂量、地塞米松、双黄连粉针剂均可降低小鼠腹腔毛细血管通透
性,与对照组比较有统计学意义;二倍体黄芩水提物高低剂量、
四倍体黄芩水提物高低剂量降低小鼠腹腔毛细血管通透性作
用均较对照药物地塞米松和双黄连粉针剂为弱,与地塞米松组
和双黄连粉针剂组比较有统计学意义;四倍体黄芩水提物高剂
量降低小鼠腹腔毛细血管通透性作用强于二倍体黄芩水提物
高剂量,但黄芩四倍体和二倍体水提物低剂量对小鼠腹腔毛细
血管通透性抑制作用无差异,见表 3。
表 3 不同黄芩水提物对小鼠毛细血管通透性和 LPS 刺激的巨噬
细胞急性炎症的影响(珋x ± s,n = 10)
组 别
剂 量
(g /kg)
毛细血管通透性
(A590nm)
NO
(μmol /gprot)
NOS
(U/gprot)
空白对照 1. 184 ± 0. 284 3. 24 ± 0. 28 8. 62 ± 0. 92
地塞米松 0. 03 0. 399 ± 0. 102** 2. 67 ± 0. 34** 4. 98 ± 0. 67**
双黄连粉针剂 0. 04 0. 511 ± 0. 115** 2. 52 ± 0. 43** 4. 29 ± 0. 55**
二倍体黄芩 5. 00 0. 822 ± 0. 112** 2. 56 ± 0. 32** 4. 82 ± 0. 74**
二倍体黄芩 10. 00 0. 798 ± 0. 124** 2. 57 ± 0. 25** 4. 32 ± 0. 52**
四倍体黄芩 5. 00 0. 807 ± 0. 128** 2. 66 ± 0. 53** 4. 96 ± 0. 84**
四倍体黄芩 10. 00 0. 674 ± 0. 119** 2. 53 ± 0. 34** 4. 35 ± 0. 61**
2. 4 不同黄芩水提物对 LPS刺激的巨噬细胞急性炎症的影响
801 中药药理与临床 2014;30(2)
如表 3 所示,二倍体黄芩水提物高低剂量、四倍体黄芩水提物
高低剂量、地塞米松、双黄连粉针剂均可抑制 LPS 刺激的巨噬
细胞急性炎症(NO、NOS),与对照组比较有统计学意义;二倍体
黄芩水提物高低剂量、四倍体黄芩水提物高低剂量抑制 LPS 刺
激的巨噬细胞所致急性炎性因子 NO的影响与对照药物地塞米
松和双黄连粉针剂相当,黄芩四倍体、二倍体水提物高剂量和
双黄连粉针剂对 NOS的影响强于地塞米松;四倍体黄芩水提物
高低剂量对 LPS刺激的巨噬细胞急性炎症抑制作用与二倍体
黄芩水提物高低剂量比较相当(NO、NOS),无统计学意义。
2. 6 不同黄芩水提物对大鼠角叉菜胶所致足肿胀度的影响
如表 4 所示,不同黄芩水提物对大鼠角叉菜胶所致足肿胀度在
致炎后不同时间点的影响不同。角叉菜胶致炎后 1h,仅地塞米
松、双黄连粉针剂和四倍体黄芩水提物高剂量可减轻足肿胀
度,与对照组比较有统计学意义;角叉菜胶致炎后 2h,所有药物
均可减轻足肿胀度,与对照组比较有统计学意义;角叉菜胶致
炎后 4h,除黄芩二倍体和四倍体水提物低剂量外所有药物均可
减轻足肿胀度,与对照组比较有统计学意义,且地塞米松作用
最强;角叉菜胶致炎后 6h,仅地塞米松可减轻足肿胀度。黄芩
二倍体和四倍体水提物对大鼠角叉菜胶所致足肿胀度减轻作
用在不同时间点无差异。
表 4 不同黄芩水提物对大鼠角叉菜胶性足肿胀度的影响(珋x ± s,n = 10)
组 别
剂 量
(g /kg)
致炎前足容积
(ml)
致炎后不同时间点足肿度 (ml)
1h 2h 4h 6h
空白对照 1. 52 ± 0. 11 0. 19 ± 0. 09 0. 20 ± 0. 05 0. 37 ± 0. 08 0. 32 ± 0. 09
地塞米松 0. 03 1. 59 ± 0. 12 0. 10 ± 0. 07* 0. 13 ± 0. 08* 0. 12 ± 0. 08** 0. 13 ± 0. 09**
双黄连粉针 0. 04 1. 51 ± 0. 09 0. 11 ± 0. 08* 0. 13 ± 0. 07* 0. 27 ± 0. 08* 0. 30 ± 0. 08
二倍体黄芩 5. 00 1. 49 ± 0. 10 0. 13 ± 0. 10 0. 14 ± 0. 06* 0. 30 ± 0. 10 0. 32 ± 0. 11
二倍体黄芩 10. 00 1. 52 ± 0. 09 0. 12 ± 0. 08 0. 14 ± 0. 05* 0. 28 ± 0. 07* 0. 31 ± 0. 10
四倍体黄芩 5. 00 1. 53 ± 0. 11 0. 12 ± 0. 09 0. 03 ± 0. 08* 0. 29 ± 0. 11 0. 32 ± 0. 08
四倍体黄芩 10. 00 1. 51 ± 0. 11 0. 11 ± 0. 07* 0. 12 ± 0. 09* 0. 27 ± 0. 09* 0. 29 ± 0. 08
3 讨论
黄芩现代研究证明,黄芩主要含黄芩甙、黄芩素、汉黄芩素,
汉黄芩甙、黄芩新素、β-谷甾醇等成分。对多种细菌、皮肤真菌、
钩端螺旋体、病毒等都有抑制作用。黄芩还有降血压、镇静、利
尿、保肝、利胆、抗过敏、解除平滑肌痉挛、抗肿瘤等作用[6 ~ 9]。
临床上用黄芩治疗小儿急性呼吸道感染、传染性肝炎、慢性气
管炎、糖尿病等,均可获良效[10]。
黄芩药材主要靠人工种植,长期以来由于农户自繁自种,
只种不选,导致群体内混杂严重,品种种性退化,药材产量下降,
质量不稳,严重影响了临床疗效和农民收入增加。多倍体植物
由于染色体加倍,其外部形态特征和二倍体有明显的差别,主
要表现在根、茎、叶的形态和大小上。一般而言,同源多倍体植
株高大,生长势强,茎粗、叶厚,叶片长度、宽度增加,叶面积增
大,生活力增强,分枝数和叶片数减少,生长期延长,抗逆性增
强,因此多倍体对药用植物具有特殊的应用价值和较高的增产
潜力。鉴于此,中国药科大学高山林教授等利用组织培养技术
进行了黄芩多倍体诱导技术的研究[11],培育出高产优质四倍体
黄芩新品系 D20,并对其有效成分含量、组织培养技术进行了相
应研究[12],建立起了黄芩组织培养的技术体系[13]。甘肃中医
学院与甘肃神农文峰药业有限公司于 2006 年将四倍体黄芩
D20引入甘肃省,以我省地产黄芩为对照,在渭源县进行了品系
比较试验,田间调查植物学特征、生物学特性,采收期田间测产,
国家中医药管理局西部重点学科中药生药学实验室测定黄芩
苷含量。经田间试验和实验室测定,综合产量、化学成分含量、
抗病性、适应性、商品性等农艺性状,四倍体黄芩 D20 均优于当
地主栽品系,综合性状优良[1]。
黄芩具有明显的抗炎作用。本次实验通过二甲苯致小鼠
耳廓肿胀、小鼠棉球肉芽肿、醋酸所致小鼠腹腔毛细血管通透
性、LPS刺激的巨噬细胞急性炎症及大鼠角叉菜胶所致足肿胀
等实验方法,观察了二倍体黄芩和四倍体黄芩在抗炎方面的药
效学差异,结果显示与甘肃地产二倍体黄芩比较,四倍体黄芩新
品系 D20 抗炎作用与甘肃地产二倍体黄芩相当,而且在抑制二
甲苯致小鼠耳廓肿胀和降低小鼠腹腔毛细血管通透性方面优
于甘肃地产二倍体黄芩。结合四倍体黄芩新品系 D20 产量、抗
病性、适应性、商品性等农艺性状均优于甘肃地产二倍体黄芩主
栽品系等优势,为四倍体黄芩新品系 D20 在甘肃省的大田栽培
提供实验室的理论依据。
四倍体黄芩新品系 D20 和二倍体黄芩的其他药效学作用
是否存存在差异,还需要进一步的实验。
参考文献
1 杜弢,林丽,雍思龙,等. 四倍体黄芩 D20 引种实验报告. 中药材,
2008;31(4)∶ 479 ~ 481
2 邓文,于翠,彭波,等. 人工四倍体桑树品种鄂桑 2 号的光合特性研
究. 蚕业科学,2012;38(3)∶ 381 ~ 388
3 匡全. 草石蚕四倍体与二倍体的品质分析. 安徽农业科学,2012;40
(22)∶ 11240 ~ 11242
4 朱丹妮,高山林,陈柏君. 黄岑同源四倍体株系中黄岑昔含量的比
较. 药物生物技术,2001;8(6)∶ 313 ~ 316
5 陈红刚,张延红,王惠珍,等. 四倍体黄芩 D20 组织培养与快速扩
繁. 山西农业科学,2012;40(1)∶ 11 ~ 12,33
6 Lin CC,Shieh DE. The anti-inflammatory activity of Scutellaria rivularis
extracts and its active components,Baicalin,Baicalein and wogonin. Am J
Chin Med,1996;24∶ 31 ~ 36
7 Ma SC,Du J ,But PP,et al. Antiviral Chinese medicinal herbs against
respiratory syncytial virus. J Ethnopharmacol,2002;79∶ 205 ~ 211
8 Ikemoto S,Sugimura K,Yoshida N,et al. Antitumor effects of Scutel-
lariae radix and its components baicalein,baicalin,and wogonin on bladder
cancer cell lines. Urology,2000;55∶ 951 ~ 955
9 Shieh DE,Liu LT,Lin CC. Antioxidant and free radical scavenging
901中药药理与临床 2014;30(2)
effects of baicalein,baicalin and wogonin. Anticancer Res,2000;20∶ 2861
~ 2865
10 王洛临,施之琪,李智勇,等. 黄芩解毒颗粒提取工艺研究. 中成药,
2012;34(10)∶ 2028 ~ 2031
11 陈柏君,高山林. 黄芩组织培养同源四倍体的诱导. 植物资源与环
境学报,2000;9(1)∶ 9 ~ 11
12 高山林,刘峻,谢小群. 高效毛细管电泳法测定黄芩多倍体株系中
黄芩苷的含量. 药物生物技术,2002;9(6)∶ 349 ~ 352
13 高山林,陈柏君. 黄芩组织培养快速繁殖技术的优化. 中草药,
2004;35(3)∶ 312 ~ 315
不同产地川芎对家兔血小板聚集、小鼠凝血功能及
血瘀大鼠血液流变性的品质评价研究
*
梅超南1,2,曾 瑾1,张了云1,廖 利1,2,赵军宁1**
(1 四川省中医药科学院药理毒理研究所,国家中医药管理局中药质量生物评价重点研究室,
四川省道地药材系统开发工程技术研究中心,中药品质评价与创新中药研究四川省重点实验室,成都 610041;
2成都中医药大学药学院,成都 610075)
摘 要 目的:研究不同产地川芎对动物血小板聚集、凝血功能和血液流变性的影响。方法:按《中国药典》2010 版一部川芎
项下含量测定方法检测阿魏酸、水分、微量元素含量,并计算挥发油的含量;制备不同产地彭州、都江堰、彭山川芎水提物 5g /kg,分
别测定不同产地川芎水提物对 ADP诱导的兔体内血小板聚集的抑制作用( 比浊法) ,并计算聚集抑制率; 测定不同产地川芎水提物
对小鼠凝血时间的影响( 毛细血管法) 以及活化部分凝血酶原时间( APTT) 、凝血酶原时间( PT) 的影响; 测定不同产地川芎水提物对
血瘀大鼠血液流变性的影响。结果:各产地川芎阿魏酸和水分含量差异不大,微量元素、挥发油含量差异较大;彭州、都江堰、彭山
川芎水提物 5g /kg对 ADP诱导兔血小板聚集的聚集率抑制作用与空白组相比均具有显著差异( P < 0. 05) ;都江堰、彭山川芎水提物
5g /kg对小鼠凝血时间延长作用、PT延长作用与空白组相比具有显著差异( P < 0. 05) ,都江堰、彭州、彭山川芎水提物 5g /kg对 APTT
延长作用与与空白组相比具有显著差异( P < 0. 05) ;彭州、都江堰、彭山川芎均能降低血浆粘度和红细胞聚集指数,与模型组相比均
具有显著差异( P < 0. 05) ,对全血表观黏度没有影响,无统计学差异,且各产地间未见统计学差异。结论:彭州、都江堰、彭山均为川
芎道地产区,这三个不同产地川芎均能抑制血小板的聚集,延长凝血时间及 APTT、PT时间,降低血浆黏度和红细胞聚集指数,从而
达到改善微循环、血液流变性,防止血栓形成的作用,结合化学成分、水分、微量元素、挥发油多因素分析结果提示该药效指标可作
为川芎活血化瘀作用的生物学质量评价方法之一。
关键词 川芎;产地;ADP;血小板聚集;凝血功能;品质评价
川芎为伞形科植物川芎 L igusticum chuanxiong Hortl 的干
燥根茎,能活血行气,祛风止痛。祛风止痛,效用甚佳,可治头风
头痛、风湿痹痛等症。昔人谓川芎为血中之气药,殆言其寓辛
散、解郁、通达、止痛等功能。现代研究其主要药理作用为抑制
血小板聚集、抗血栓、抗脑缺血和心肌缺血[1,2]。
川芎为著名的川产道地药材,主产地为四川彭山、彭州、都
江堰、崇州、什邡等。先前的研究,药材品质评价以外观性状、化
学成分为主[1,3],在外观性状方面,三个产地的川芎有显著的不
同,化学成分差异的研究表明不同产地川芎所含阿魏酸含量差
异性不大[4]。目前尚无以主要功效指标对川芎品质差异进行
评价的研究,而药材的药效作用是在一定程度上能比较直观反
映其临床疗效及质量的指标。课题组赵军宁研究员提出建立
以功效为核心的新型中药质量评价模式 [5],本研究以彭州、都
江堰、彭山川芎为研究对象,基于产地-化学-生物活性(功效)综
合研究,选择与川芎功效主治相关的药理作用--活血化瘀作用
(川芎抗血小板聚集、小鼠凝血功能和血液流变学)这三个经典
的临床应用。结合化学成分,从产地、化学、微量元素及生物活
性等多指标综合评价不同产地川芎的品质优劣,探讨能否以川
芎功效作为品质的评价标准,为试图建立以功效为核心的新型
中药质量评价模式提供科学依据。
1 材料与仪器
1. 1 试验药物 彭州川芎、都江堰川芎、彭山川芎均由四川省
中医药科学院中药资源所方清茂研究员于当地当季采集,并鉴
定为伞形科植物川芎 L igusticum chuanxiong Hortl 的干燥根茎。
川芎水提物:称取川芎药材 4kg,粉碎成粗粉,用水浸润后,通入
水蒸气蒸馏 5h 提取挥发油,收集挥发油。药渣加水煎煮两次,
每次加水 10 倍,煎煮 1. 5h,合并煎液,滤过,滤液浓缩至稠膏,
于 70℃减压干燥,粉碎成细粉,加入上述挥发油,混匀即得。最
终浓度为都江堰川芎 1. 47g生药 /g浸膏、彭州川芎 1. 46g生药 /
g浸膏、彭山川芎 1. 43g生药 /g浸膏,各川芎水提物样品由四川
省中医药科学院分析测试中心秦秀蓉老师提供,用前用蒸馏水
稀释成所需的浓度。
011 中药药理与临床 2014;30(2)
* 基金项目:“重大新药创制”项目课题( 2011ZX09401-304 ( 4-2) ) ;四川省科技厅基本科研业务专项( A-2012N-25) ; 国家科技支撑计划项目
( 2012BAI29B10) ;四川省科技支撑计划项目( 2013SZ0115) **通讯作者
DOI:10.13412/j.cnki.zyyl.2014.02.035