全 文 :陕西林业科技 N o . 4 , 一9 5 5 p p . 10一 1 2
S h a a u x i F o r e s七 S e i e n e e a n d T e e h n o l o g y
不同产地河北杨的过氧化物酶
同 工 酶 气酶 谱 分 析
翁俊华 王妹清 李新荣*
(西北林学院 )
同工酶技术在林木遗传育种中的应用 ,
近年来 已得到迅速发展 , 利用同工酶研究林
木遗传资源 、 林木群体的遗传变异 , 在国内
外已有不少报道 (` 一 , ) ` “ ) 。 为此 , 我们收集
了 1 个产地的河北杨 , 进行了过氧化物酶同
工酶的研究 , 从而 了解不同产地之间的河北
杨在造传上的差异 , 探索它们之间的亲缘关
系 , 为该树种的遗传资源研究 、 利用和改 良
提供依据 。
材料与方法
1
. 供试材料 : 为西北地区 1 个产地的河
北杨 , 即陕西的靖边 、 神木 、 佳县 、 横山 、
清涧和吴旗 ; 宁夏的西吉 ; 甘肃的皋兰和临
夏 , 青海的西宁和民和 。 材料采 自西北林学
院试验苗圃内一年生平茬苗的成 熟 新 鲜 叶
片 。 苗木按常规抚育管理 , 措施一致 。
2
. 样品的采葬和制备 : 从 弓月初至 6 月
下旬 , 每次重复取样的时间 、 株数及部位相
同 。 取样量为 0 . 5克于研钵中 , 加 2 . 5毫升无
离子水 , 并加少许 8 0 目的石英砂在水 浴 中
磨成匀浆 , 离心 , 取上清液置于 冰 箱 内保
存 , 作点样用 。
3
. 电泳 : 采取聚丙烯酞胺盘状电泳 , 分
离胶 p H为 8 . 9 、 隔离胶 p H为 6 . 7 、 凝胶浓度
为 7 , 5 坏 , 胶柱长 70 厘 米 , 胶 柱 采 用 光 聚
合 。 每次点样量为 10 微升 , 电泳在 口一 4 ℃
下进行 。 电泳始 , 使每管 电 流 为 1 m A , 15
分钟后 , 调至 2 m A , 电泳 3 小时 , 加澳粉
兰为前沿指示剂 , 染色液为醋酸 + 联苯胺 十
过氧化氢 , 染色 15 分钟可见清晰的的酶带 ,
用 7 % 的醋酸固定 , 测定R f值 , 拍照 。
结杀与分析
1
. 同一产地的河北杨 , 经 10 次 重 复 测
定 , 其成熟叶片的过氧化物酶同工酶酶谱相
对稳定 , 特别是活性高的酶带 基 本 相 同 。
此特性与程家胜报道 ( 3 ) 的 “ 同一果树品种 ,
在不 同年份 、 发育阶段相当的同各器官同工
酶谱也是相对稳定不变的 。 ” 是相一致的。
2
.
1 个产地的河北杨所显示出的过氧化
物酶同工酶酶谱总共分离出巧条酶带 (见 1
页图 ) 。但这 15 条酶带并非同时出现在 1 个产
地的河北杨中 , 各产地河北杨酶带数的变动
范围为 4 一 6 条 , 除横山和皋兰产地的河北
杨外 , 其余各产地的河北杨都显示 出 3 条一
级带 。 一级带活性强 、 着色深 、 带宽 、 重见
性高 ; 除横山产地的河北杨外 , 其余各产地
的河北杨都显示出 1 条相同的三级带 。 可将
上述的一级带和三级带 , 视为河北杨的主要
特征带 。
3
. 比较 1 个产地河北杨的过氧化物酶同
工酶酶谱的基本特征 , 表现为四种类型的酶
谱 (见下 表 ) 。
书李新荣原为我院林学系八三级学生 , 现 在兰
州沙漠所工作。
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— 一级带 一二级带 — 三级带 - -一四级带图 不同产地河北杨过氧化物酶酶带图谱
表 河北杨过氧化物酶酶谱类型及所
包括的产地
酶谱类型 各酶谱所包括的产地
靖边 、佳县 、 西吉 、 神木 、 民和 、 皋兰
清涧 、 临夏
吴旗 、 西宁
横山
百且
1丁
类型 I: 6个产地河北杨的过氧化物酶
同工酶酶谱都显示 出 l条相 同的三级带 , 而
靖边、 佳县 、 西吉 、 神木和民和产地的河北
杨 , 均具有 3 条一级带 , 但皋兰产地的河北
祷仅具有 、 条与其它产地河北杨相同的一级
带 , 一迩有盛条二级带 , 其迁移率与民和产地
河遮场的诬级带的迁移率是相同的 。 这 6 个
产地河能踢.的趁氧化物酶酶谱 , 除佳县产地
的河北杨缪乡”均显示出 ` 条四级带 。
, 类型互 , 减个产地河北杨的过氧化物酶
同工酶酶谱是基本相一致的 , 它们都显示 出
3 条相同的一级带和 1条相同的三级带 , 仅
四级带的迁移率有差异 。 同时 , 临夏产地河
北杨的过氧化物酶酶谱中的四级带比清涧产
地河北杨要多 1条 , 且带宽 。
类型 l : 两个产地河北杨的过氧化物酶
同工酶酶谱 , 均显示 出相同的 3 条一级带和
1条三级带 , 另 1条一级带的迁移率有差异 。
类型 W : 仅有横山产地的河 北杨 过 氧
化物酶同工酶酶谱 , 与前 3 种类型的酶谱有
差异 , 表现在 : 它仅有 1条一级带 , 4 条二
级带和 1条三级带 。
4
. 酶带活性的强弱与河北杨苗期生长状
况成正相关 。 在试验中 , 我们根据不同产地
河北杨苗期生长状况的调查资料和醉谱的表
现 , 发现凡是酶带活性强的产地的河韭杨 ,
其苗期生长状况也好 , 反之 , 活性弱的苗期
生长状况较差 。 从图中可见到吴旗和西宁产
地的河北杨 的过氧化物酶同工酶 酶 带 活 性
强 , 而一级带又较其它产地 的河北杨的越纸
备 .1 气`
化物酶同工酶酶带多 1条 。 它们苗期生长状
况明显优于其它产地的河北杨 。 关于树木同
工酶活性的强弱与苗木生长成正相关的研究
已有较多报道 工` ’ 。声, 我们的试验结果 与这
些报道是相一致的 。
小 结
1
.
1 个产地河北杨的过氧化物酶同工酶
酶谱的基本特征是相对稳定的 , 可重复的 。
2
.
n 个产地河北杨的过氧化物酶同工酶
共显示出 15 条酶带 , 但不同产地河北杨的酶
带存在着差异 , 这种差异表现在酶带数目的
多少及酶活性的强弱方面 。
3
. 不 同产地河北杨的过氧化物酶同工酶
酶带数的多少及酶活性的强弱与苗期生长成
正相关 。 这样可进一步进行树木幼年期 、 成
年期的过氧化物酶同工酶测定 , 探索它们之
间的相关性 , 为早期预测提供理论依据 。
4
,在树木遗传改 良中 , 确切了解它们之
间的亲缘关系 , 探索它们遗传变异的模式有
着重要的意义 。 为此 , 应进行多种酶系统的
研究 , 综合分析比较 , 找 出该树种的基本酶
谱及其酶带的遗传规律 。 从而使同工酶技术
在树木遗传育种中成为一个极有价值的研究
手段 。
参 考 文 献
〔 1 〕 黄敏仁: 同工酶技术在遗传育种中的应
用 , 咤南京林学院学报》 , 198 5年 (第 1期 ) , 第
4 1一 4 4页
〔 2 〕 杨慧生 : 植物同工酶研究的某些进展 ,
嵘植物生理通讯》 1 9 8 1年 (第 3 期 ) , 第 1一 7 页
( 3 ) 程家胜 : 同工酶分析在果树资源分类遗
传研究中的应用 , 嵘中国果 树 》 , 1 98 6 年 (第 4孙
期 ) , 第 z 。一 2 2页
( 4 〕 潘本立 : 落叶松立木杂种及杂种优势的
研究 , 《林业科学 》 , 第 17 卷 , 第 3 期 , 1 9 81 年 , 第
3 2 5一 3 3 0 页
〔 5 〕 段安安 : 黑杨派无性系过氧化物酶活性
的研究 , 嘴西林科技》 , 19 85 年 (第 1 期 ) , 第 49
一 52 页
( 6 〕 杜宗岳 : 毛白杨不同类型的同 工 酶 分
析 , 亏北京林学院学报》 , 1 9 5 3年 (第 2期 ) , 第
16一 2 0页
· 来稿摘编 ’ 油松种子发芽率计算公式的建立
李 卓 军
(商洛地区林科所 )
以库存不超过 2 年的本地区部分产地的 以本地部分县当年入库的种批和 由 外 省 调
种批及从辽宁省调入的种批为供试材料 , 随 入的种批作试验材料 , 随机抽取 1 06 个 样 本
机地在不同部位抽取 52 个样品进 行 发 芽 试 进行试验 , 然后将试验结果与 按y = 。 . s x 士
验 。 试验时每次每个样品取 ` 0 粒种子 放 入 7 . 5计算的理论值进行比较 ,结果 是 y = 0 . 8“
比重为。 . 9 24 的酒精溶液中 , 让其 沉 浮 , 扮 十 7 . 5所计算的理论值与实验所得平均 发 芽
出上浮粒 , 统计其数 , 用下沉粒作常规发芽 率基本吻合 , 总体平均数间的误差为 0 . 5% 。
试验 。 每个样品重复 4 次。 然后 统 计 发 芽 由此得出结论 : y 一 0 , 8戈 + 7 . 5可作为计算油
数 , 计算发芽率 , 以下沉粒和发芽率两项指标 松种子发芽率的理论公式并应用于生产 。
建立 回归直线方程 , 并对此方程进行回归分 此公式不仅在理论上成立 , 而且也与实
析 , 最后 得到油松种子发芽率计算模式为 : 验结果相 吻合 。 这给外出调种人员及无实验
y ~ .0 78 4 4 x 一 0
.
0 63 士 7
.
5( :y 发芽率 , x : 设备条件的地方提供了方便 。 但须注意 , 此
下沉粒 / 10 0粒 ) 经 化 简 为 : y ~ 。 . s x 士 7 . 5 公式只能适用于油松种子 , 且种子的库存期
为了验证此公式是否能应用于生产 , 又 不能超过 2 年 , 含水量不能高于 1 %②
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