全 文 ：第 34 卷第 5 期
2014 年 10 月
林 产 化 学 与 工 业
Chemistry and Industry of Forest Products
Vol． 34 No． 5
Oct． 2014
doi:10． 3969 / j． issn． 0253-2417． 2014． 05． 024
神秘果叶多酚的超声波提取工艺及其抗氧化能力
收稿日期:2013-03-12 修回日期:2014-06-18
基金项目:国家自然科学基金资助项目(2166009) ;海口市应用技术研究与开发项目(2014-90) ;海南省省级创新训练项目
(2013116580)
作者简介:卢圣楼(1987—) ，男，江苏南京人，硕士生，研究领域为精细有机合成与天然产物分离
* 通讯作者:刘 红(1967—) ，女，山东诸城人，教授，博士，硕士生导师，研究领域为天然产物分离新技术;E-mail:lhyd123@ sohu． com。
LU Sheng-lou
卢圣楼，符家珍，刘 红* ，符春敏，林友明，王晓贺
( 海南师范大学化学与化工学院，海口市热带特色药食同源植物研究
与开发重点实验室，海南 海口，571127)
摘 要: 利用响应面法找出超声波提取神秘果叶多酚的最佳提取工艺，并考察其抗氧化性。在单
因素试验的基础上，建立神秘果叶多酚的二次多项数学模型，1． 0 g 神秘果叶粉末，在液料比 30 ∶ 1
( mL ∶ g) 条件下，所得到最优提取工艺条件为:丙酮体积分数 58 %、超声波时间 72 min、提取温度
48 ℃，实测得率为 6． 84 %，与预测值( 6． 82 % ) 基本相符。神秘果叶多酚对 ABTS、DPPH 和·OH 自由基的清除作用均
呈现量效关系，半数抑制浓度( IC50 ) 值分别为 51． 81、13． 40 和 28． 91 mg /L，表明神秘果叶多酚具有较强的抗氧化能力。
关键词: 神秘果叶;多酚;超声波提取;抗氧化能力
中图分类号:TQ35 文献标识码:A 文章编号:0253-2417( 2014) 05-0145-07
Ultrasonic Extraction and Antioxidant Activity of Polyphenol
from Synsepalum dulcificum Leaf
LU Sheng-lou，FU Jia-zhen，LIU Hong，FU Chun-min，LIN You-ming，WANG Xiao-he
(College of Chemistry and Chemical Engineering，Hainan Normal University，Haikou Key Laboratory of Ｒesearch and
Development on Topical and Special Medicine and Edible Plant，Haikou 571127，China)
Abstract:The purpose of this paper was to determine the optimum technology and conditions to extract polyphenol from the leaves
of Synsepalum dulcificum． Based on the results of single factor experiments，by using the response surface method the
S． dulcificum leaves polyphenols mathematical model was established． Meanwhile，the antioxidant activity of the extracted
polyphenol was evaluated． The best technical conditions to extract polyphenol from S． dulcificum leaf were obtained as follows:the
concentration of acetone solution 58%，ultrasonic time 72 min and extraction temperature 48 ℃，when the S． dulciticum leaf were
1． 0 g and liquid-solid ratio was 30 ∶ 1(mL ∶ g)． The predicted polyphenol extraction yield was 6． 82% ． Under the optimized
condition，the experimental yield was 6． 84 % which agreed with its predicted yield． The in vitro antioxidant assay results showed
that S． dulcificum leaf polyphenol exhibited a dose-dependent scavenging activity against 2，2-azinobis (3-ethyl-benzothiazoline-
6-sulfonic acid ammonium salt(ABTS)radical，1，1-diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH)radical and ·OH radical． Its hemi-
inhibiting concentrations (IC50)were 51． 81，13． 40 and 28． 91 mg /L，respectively． Which suggested that S． dulcificum leaf had
high antioxidant activity．
Key words:Synsepalum dulcificum leaf;polyphenol;ultrasound extraction;antioxidant activity
神秘果(Synsepalum dulcificum)系山榄科神秘果属，常绿灌木植物，原产于西非热带地区，20 世纪 60
年代引入中国云南、海南、广东和福建等地区种植［1］，属于国宝级的珍稀植物。神秘果含有奇特的神秘
果素，是一种变味糖蛋白，能改变人的味觉，使原本酸度强烈的食物变成琼浆玉露般的甘甜［2］，因而又
被称为奇迹果、梦幻果。研究表明，神秘果除了具有改变味觉功能外，还具有改善胰岛素抵抗及抗氧化
能力［3］。神秘果叶可用于治疗糖尿病、高血压、尿酸和动脉硬化的天然药物，并且能够提高免疫力，增
146 林 产 化 学 与 工 业 第 34 卷
强肝胆功能［4－5］。神秘果茎的功能成分具有抑制黑色素瘤和降低蘑菇酪氨酸酶的功效［6］。神秘果种子
可以降低糖尿病小鼠空腹血糖值，促进胰岛素的正常分泌［7］。植物多酚是一类具有独特生理功能和药
物活性的植物次生代谢产物，大量研究表明，植物多酚在抗氧化、抗诱变，抗肿瘤、抗辐射、抗衰老、抗病
毒和预防中风等诸多方面具有显著功效，因而在医药、生化、食品及日用化工等领域具有广阔的开发前
景［8－9］。响应面法是利用合理的试验设计，采用多元二次回归方程拟合因素与响应值之间的函数关系，
通过对回归方程的分析寻求最佳工艺参数，解决多变量问题的一种统计方法，已在诸多领域中得到了广
泛应用［10－17］。本研究采用超声波辅助提取海南产神秘果叶多酚，利用响应面法优化神秘果叶多酚的提
取工艺条件，并评价其清除 ABTS、DPPH和·OH 自由基的能力，为进一步研究神秘果叶的药理活性和
保健功效提供理论依据。
1 实 验
1． 1 材料与仪器
神秘果叶采集于海南省保亭县，经海南师范大学生命科学学院钟琼芯教授鉴定其为神秘果
(S． dulcificum)的叶，标本现存于热带药用植物化学教育部重点实验室。试验前，先将神秘果叶洗净，
烘干，粉碎过 0． 25 mm筛，置于干燥器中备用。
没食子酸(色谱纯) ，中国药品生物制品检定所;无水碳酸钠、无水乙醇等，国药集团化学试剂有限
公司;福林酚试剂、1，1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)、2，2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐
(ABTS)、6-羟基-2，5，7，8-四甲基色烷-2-羧酸(Trolox) ，美国 Sigma公司;AB-8 大孔吸附树脂，天津南开
大学化工厂。
XO-5200DTS超声波清洗仪，南京先欧仪器制造有限公司;TU-1901 双光束紫外可见分光光度计，北
京普析通用仪器有限责任公司;LGJ-10 冷冻干燥机，北京四环科学仪器厂有限公司。
1． 2 多酚标准曲线的制作
采用 Folin-Ciocalteu法略加修改［11］。精确称取干燥至质量恒定的没食子酸对照品 0． 1 g，用蒸馏水
溶解并定容至 100 mL，得质量浓度为 1 g /L 的对照品溶液。精密吸取没食子酸对照品溶液 0． 0、2． 0、
4. 0、6． 0、8． 0、10． 0 和 12． 0 mL置于 50 mL 容量瓶中，定容。准确量取上述溶液 0． 25 mL，加入到 7 个
10 mL容量瓶中，分别加入 3． 75 mL蒸馏水，再加入 0． 25 mL福林酚试剂，摇匀，静置反应 8min左右，再
添加质量分数为 7． 5%的无水碳酸钠溶液 0． 75mL后用蒸馏水定容至刻度，摇匀。在温度为 30 ℃的水
浴锅中静置 1． 5 h，定容，最后测定其在 765 nm处的吸光度。以没食子酸的质量浓度(C)为横坐标，吸
光度(A)为纵坐标，绘制标准曲线，得到标准方程为:A = 77． 928 6C + 0． 012 7，Ｒ2 = 0． 999 6。
1． 3 神秘果叶多酚的提取及含量测定
精密称取神秘果叶粉末 1． 0 g，置于 100 mL锥形瓶中，以相应液料比加入一定体积分数的溶剂，搅
拌均匀，封口膜密封后，置于超声波洗涤器中，按一定的超声波处理时间及提取温度进行萃取(功率为
200 W)。提取液离心分离，上清液定容至 100 mL容量瓶中。取 25 mL 样品溶液定容至50 mL容量瓶，
按照 1． 2 节方法测定多酚质量浓度。多酚得率按如下公式计算:
多酚得率 =提取多酚的质量
神秘果叶的质量
× 100 %
1． 4 单因素试验
1． 4． 1 萃取溶剂 在液料比以 8 ∶ 1、7 ∶ 1、5 ∶ 1 依次进行 3 次萃取后合并萃取液，即合并液料比 20 ∶ 1
(mL ∶ g，下同) ，超声波处理时间 50 min，提取温度 50 ℃的条件下，分别考察 50 %甲醇、50 %乙醇、50 %
丙酮以及纯水对多酚得率的影响。
1． 4． 2 溶剂体积分数 采用 1． 4． 1 节选择的最佳萃取溶剂丙酮，按照合并液料比 20 ∶ 1;超声波温度为
50 ℃;超声时间为 40 min;分别考察 20 %、30 %、40 %、50 %、60 %和 70 %丙酮溶液对多酚得率的
第 5 期 卢圣楼，等:神秘果叶多酚的超声波提取工艺及其抗氧化能力 147
影响。
1． 4． 3 超声波处理时间 采用 1． 4． 1 及 1． 4． 2 节优化的萃取溶剂、溶剂体积分数，在合并液料比
20 ∶ 1，提取温度 50 ℃的条件下，分别考察超声波处理时间为 40、60、80、100、120 和 140 min 对多酚得
率的影响。
1． 4． 4 提取温度 采用 1． 4． 2 及 1． 4． 3 节优化的丙酮体积分数和超声波处理时间，合并液料比 20 ∶ 1，
分别考察 30、40、50、60 和 70 ℃对多酚得率的影响。
1． 4． 5 液料比 取 1． 4． 1 及 1． 4． 2 节选取的最佳萃取溶剂及其溶剂体积分数，固定超声波温度为
50 ℃;时间为 40 min;分别考察合并液料比(分 3 次萃取)为 20 ∶ 1(8 ∶ 1、7 ∶ 1、5 ∶ 1)、30 ∶ 1(11 ∶ 1、10 ∶ 1、
9 ∶ 1)、40 ∶ 1(14 ∶ 1、13 ∶ 1、13 ∶ 1)、50 ∶ 1(18 ∶ 1、17 ∶ 1、15 ∶ 1)、60 ∶ 1 (21 ∶ 1、20 ∶ 1、19 ∶ 1)和 70 ∶ 1
(24 ∶ 1、23 ∶ 1、23 ∶ 1)对多酚得率的影响。所有单因素实验均重复 3 次，每次平行测定 3 次，取平均值。
1． 5 响应面试验设计
综合单因素试验结果，根据 Box-Behnken中心组合设计原理，分别选取丙酮体积分数(X1)、超声波
处理时间(X2)和提取温度(X3)作为自变量，以神秘果叶多酚的得率作为响应值，采用统计分析软件
Design-Expert 8． 0 建立 3 因素 3 水平的响应面分析法，通过回归得出自变量与响应值之间的统计模型，
确定神秘果叶多酚超声波提取的最佳工艺参数。
1． 6 抗氧化活性
1． 6． 1 神秘果叶多酚的纯化 称取神秘果叶 2． 000 g，利用响应面法所得的最佳提取工艺提取多酚，再
将神秘果叶多酚粗提液过 HPD500 大孔吸附树脂，用水洗脱除去水溶性糖类、色素及杂质，再以 70 %的
丙酮溶液进行洗脱，收集此部分洗脱液，真空浓缩，冷冻干燥，得到纯化的神秘果叶多酚粉末，纯度约为
84． 62 %，备用。
1． 6． 2 ABTS自由基清除能力的测定 参考文献［12］中的方法，略加修改。Trolox 是一种水溶性生育
酚类似物，常用作抗氧化剂阳性对照［13］。5 mL 7 mmol /L ABTS水溶液和 88 μL 140 mmol /L K2S2O8 水
溶液避光反应 12～16 h后产生·ABTS +。使用前用乙醇溶液稀释到吸光值在 734 nm处为 0． 70 ± 0． 02。
取 250 μL不同浓度的样品或对照品 Trolox 溶液加到 3． 75 mL ·ABTS + 溶液中避光反应 6 min，于
734 nm处测定吸光度值(Ai)。以乙醇溶液代替样品溶液为空白对照记为 Ac，以样品或对照品 Trolox乙
醇溶液为参比对照记为 Aj。试验重复 3 次，每次平行测定 3 次，取平均值。·ABTS
+清除率(yABTS)计
算公式如下:
yABTS =(1 －(Ai － Aj)/Ac)× 100 %
以样品浓度为横坐标，清除率为纵坐标作图并计算 IC50(半数抑制率，即自由基清除率为 50 %时所
需要的抗氧化剂的浓度)作为最终结果。
1． 6． 3 DPPH自由基清除能力的测定 参照 Sabir的方法［14］略作修改。在 2 mL 0． 1 mmol /L 的 DPPH
乙醇溶液中加入 2 mL不同浓度的样品或者对照品 Trolox 溶液，用力摇匀后于室温下避光反应 30 min，
测定其在 517 nm下的吸光度值(As)。以无水乙醇代替样品为空白对照记为 A0，样品或对照品 Trolox
乙醇溶液为参比对照记为 Ax。试验重复 3 次，每次平行测定 3 次，取平均值。依据如下公式计算
DPPH·清除率(yDPPH) ，并以 IC50作为最终结果。
yDPPH =(1 －(As － Ax)/A0)× 100%
1． 6． 4 ·OH自由基清除能力的测定 在 1 mL 6 mmol /L的硫酸亚铁溶液中分别加入 1 mL配制的不同
浓度的样品溶液 Trolox 溶液，用力摇匀，再加入 1 mL 6 mmol /L 的过氧化氢溶液，置于室温下反应
10 min，再加入 1 mL 6 mmol /L水杨酸溶液，静置 30 min后测定其在 510 nm下的吸光度值记为 A2。以
无水乙醇代替样品为空白对照(A0) ，以无水乙醇代替过氧化氢溶液的吸光度(A1)。重复 3 次，每次平
行测定 3 次，取平均值。计算·OH清除率(y·OH)及 IC50。
y·OH =(1 －(A2 － A1)/A0)× 100%
148 林 产 化 学 与 工 业 第 34 卷
2 结果与讨论
2． 1 单因素试验
2． 1． 1 萃取溶剂 50 %甲醇、50 %乙醇、50 %丙酮溶液和纯水对神秘果叶多酚得率分别为 3． 33 %、
4． 80 %、5． 63 %和 2． 54 %。纯水萃取多酚效果不理想，50 %乙醇溶液萃取多酚得率优于 50 %甲醇溶
液，在 4 种溶剂中，50 %丙酮溶液萃取多酚得率最高，说明 50%丙酮溶液易溶解多酚，因此，50%丙酮溶
液是提取神秘果叶多酚较好的萃取溶剂。
2． 1． 2 丙酮体积分数 图 1(a)为不同丙酮体积分数对神秘果叶多酚得率的影响。由图 1(a)可以看
出，丙酮体积分数为 20 %～50 %范围内，多酚得率随体积分数增大而增加，趋势明显;但多酚在丙酮体
积分数 60 %和 70 %时萃取得率下降。这可能是由于丙酮体积分数较低时，水溶性物质大量溶出，而丙
酮体积分数过高，则脂溶性物质大量溶出，从而影响了神秘果叶多酚的溶出度。因此，选择丙酮体积分
数以 50 %为宜。
2． 1． 3 超声波处理时间 超声波处理时间对多酚得率的影响如图 1(b)所示。超声波在较短时间内能
够对神秘果叶多酚进行充分的提取，超声波处理 80 min 时，多酚得率达 6． 7 %。当超声提取时间大于
80 min，多酚得率有下降趋势，这可能是因为超声波具有较强的剪切作用，长时间的超声波提取使得多
酚分子结构被破坏，从而降低了多酚得率。因此超声波处理时间以 80 min为宜。
2． 1． 4 提取温度 提取温度对多酚得率的影响如图 1(c)所示。在 30～40 ℃范围内，多酚得率变化不
大，当提取温度达到 50 ℃左右时，多酚得率达到最大值，是由于温度升高会增加溶剂分子和溶质分子的
热运动，促进扩散作用，故而多酚得率增大。继续提高温度，多酚得率反而呈下降趋势，这是由于多酚是
热敏性物质，易受热而发生氧化，导致多酚得率下降，因此选取 50 ℃为最佳超声波提取温度。
2． 1． 5 液料比 实验讨论了合并液料比对多酚得率的影响，如图 1(d)随着合并液料比的增加，多酚得
率也越来越高，因为溶剂增加，固体与液体的接触面就越大，萃取速率就越大，再加上溶剂的增加，增大
浓度差，从而提高扩散速度。但在合并液料比大于 30 ∶ 1 时，溶剂溶解多酚接近饱和，继续增加溶剂用
量，也没有显著提高多酚的得率;且由于液料比值越大，丙酮消耗量也越大，在工业应用中会增加成本。
因此，选择合并料液比为 30 ∶ 1 作为研究响应面优化的基础。
图 1 不同提取条件对多酚得率的影响
Fig． 1 Effect of different factors on yield of polyphenol
2． 2 神秘果叶多酚提取工艺响应面优化
2． 2． 1 模型的建立与显著性分析 根据 Box-Benhnken 模型，以丙酮体积分数(X1)、超声波处理时间
(X2)和提取温度(X3)为自变量，神秘果叶多酚的得率为响应值(Y)。响应面试验的设计和结果见表 1。
利用 Design Expert 8． 0 软件对表 1 的试验数据进行回归分析，拟合后得到了二次多项回归模型方程:
Y = － 38． 237 75 + 0． 395 00X1 + 0． 114 71X2 + 1． 204 37X3 － 1． 625 × 10
－3 X1X2 + 8． 25 × 10
－4 X1X3 +
3． 25 × 10 －4X2X3 － 3． 96 × 10
－3X21 － 7． 7125 × 10
－4X22 － 0． 012 785X
2
3。
对该模型方程进行方差分析，结果见表 2。回归模型具有高度的显著性(p ＜ 0． 000 1) ，失拟项
p = 0． 062 5 ＞ 0． 05，表明二次响应曲面回归方程能够很好地拟合本试验所得的结果，该模型可以用于神
第 5 期 卢圣楼，等:神秘果叶多酚的超声波提取工艺及其抗氧化能力 149
秘果叶多酚得率试验的理论预测。回归模型系数 Ｒ2 = 0． 990 9，说明回归方程可以较好地描述各因素与
响应值之间的真实关系。模型的调整确定系数 Ｒ2Adj = 0． 979 2，变异率仅有 1． 86%，说明该模型可信
度高。
表 1 响应面实验设计和结果分析
Table 1 Design matrix and results of response surface experiment
编号
No．
X1
丙酮体积分数 /%
volume fraction
of actone
X2
超声波时间 /min
ultrasonic time
X3
提取温度 /℃
extraction
temperature
多酚得率 polyphenol yield /%
试验值
experimental yield
预测值
predicted yield
偏差 /%
residual
1 60 60 50 6． 53 6． 43 0． 10
2 50 80 50 6． 76 6． 82 － 0． 06
3 50 80 50 6． 89 6． 82 0． 07
4 50 60 60 4． 99 5． 11 － 0． 12
5 50 80 50 6． 79 6． 82 － 0． 03
6 60 100 50 6． 28 6． 35 － 0． 07
7 60 80 60 5． 46 5． 38 － 0． 04
8 40 60 50 5． 89 5． 82 0． 07
9 50 80 50 6． 89 6． 82 0． 07
10 50 80 50 6． 78 6． 82 － 0． 04
11 50 60 40 5． 34 5． 38 － 0． 04
12 50 100 40 5． 35 5． 23 0． 12
13 60 80 40 5． 35 5． 41 － 0． 06
14 40 100 50 5． 77 5． 87 0． 10
15 40 80 60 4． 78 4． 72 0． 06
16 40 80 40 5． 00 5． 03 － 0． 03
17 50 100 60 5． 26 5． 22 0． 04
表 2 回归模型方差分析
Table 2 Variance analysis of regression model
方差来源
source
平方和
sum of squares
自由度
df
均方
MS
F值
F value
p值
(prob ＞ F)
显著性
significant
模型 model 9． 15 9 1． 02 84． 64 ＜ 0． 0001 ＊＊
X1 0． 59 1 0． 59 49． 44 0． 0002 ＊＊
X2 1． 012 × 10 －3 1 1． 012 × 10 －3 0． 084 0． 78
X3 0． 038 1 0． 038 3． 15 0． 1193
X1X2 4． 225 × 10 －3 1 4． 225 × 10 －3 0． 35 0． 5718
X1X3 0． 027 1 0． 027 2． 27 0． 176
X2X3 0． 017 1 0． 017 1． 41 0． 2743
X21 0． 66 1 0． 66 54． 95 0． 0001 ＊＊
X22 0． 40 1 0． 40 33． 35 0． 0007 ＊＊
X23 6． 88 1 6． 88 572． 81 ＜ 0． 0001 ＊＊
残差 residual 0． 084 7 0． 012
失拟项 lack of fit 0． 068 3 0． 023 5． 73 0． 0625 不显著 not significant
纯误差 pure error 0． 016 4 3． 970 × 10 －3
总误差 sum 9． 24 16
二次模型中回归系数的显著性检验表明:因素 X1 都对提取效果的线性效应极显著，X
2
1、X
2
2 和 X
2
3 对
提取效果的曲面效应极显著，X1X2、X1X3、X2X3 对提取效果的交互影响不显著(p ＞ 0． 05)。依据参数估
计值可知影响因子的主次效应顺序依次为:丙酮体积分数 ＞提取温度 ＞超声波作用时间。
150 林 产 化 学 与 工 业 第 34 卷
2． 2． 2 各因素交互作用分析 根据二次回归方程，建立响应面图，见图 2。从图 2 中可以清晰看出
X1X2、X1X3 和 X2X3 交互作用不显著。2 个因子对多酚得率影响的主次顺序为:X1X3 ＞ X2X3 ＞ X1X2，结
果与表 2 的参数估计结果相同。
图 2 响应曲面图
Fig． 2 Ｒesponse surface plot
2． 2． 3 最佳条件的确定和模型的验证 利用优化后的模型通过响应面分析得到海南神秘果叶多酚提
取的最优工艺条件:丙酮体积分数为 58 %、超声波处理时间 72 min、提取温度 48 ℃。按此条件进行验
证实验，5 次实验的多酚平均得率为 6． 84 %，该结果与理论得率(6． 82 %)基本相符，说明该模型可靠。
2． 3 神秘果叶多酚抗氧化能力
2． 3． 1 ABTS自由基清除 神秘果叶多酚对·ABTS +清除效果如图 3(a)所示。研究发现，在神秘果叶
浓度为 30～150 mg /L的范围内，·ABTS自由基的清除率逐渐升高。说明在一定的浓度范围内，神秘果
叶多酚浓度与·ABTS +自由基清除能力呈现较好的效量关系，根据线性关系，可知神秘果叶多酚 IC50值
为 51． 81 mg /L，其清除 ABTS自由基能力较 Trolox略弱。
2． 3． 2 DPPH自由基清除 DPPH自由基非常稳定，抗氧化剂能使 DPPH自由基的单电子配对，使溶液
的吸光值减小，所以吸光值的变化能定量反应样品对自由基的清除能力［17］。如图 3(b)所示，神秘果叶
多酚对 DPPH·的清除率也随浓度升高而升高，Trolox 的 DPPH·清除率随浓度变化比较平稳，神秘果
叶多酚 IC50值为13． 40 mg /L，表明神秘果叶多酚清除 DPPH自由基能力低于 Trolox。
2． 3． 3 ·OH自由基清除 秘果叶多酚对·OH清除效果如图 3(c)所示。由图 3(c)可以看出，神秘果
叶多酚对·OH都有较好的清除能力，且随着浓度递增。神秘果叶多酚对·OH的 IC50为 28． 91 mg /L。
图 3 神秘果叶多酚对自由基的清除作用
Fig． 3 Ｒadical scavenging activity of polyphenol extracted from S． dulcificum leaf
第 5 期 卢圣楼，等:神秘果叶多酚的超声波提取工艺及其抗氧化能力 151
3 结 论
3． 1 在单因素试验的基础上，应用响应面法优化超声波提取神秘果叶多酚的工艺条件。回归分析结果
表明，丙酮体积分数对得率的影响显著。1． 0 g神秘果叶粉末，在液料比 30 ∶ 1(mL ∶ g)条件下，多酚超声
波提取的最佳条件为:丙酮体积分数为 58 %、超声波处理时间 72 min，提取温度 48 ℃，神秘果叶多酚的
预测得率为 6． 82 %，实测得率为6． 84 %(n = 5) ，与预测值基本相符。因此，优化的工艺参数准确可靠，
具有实际应用价值。
3． 2 体外抗氧化试验结果表明，神秘果叶多酚具有较好的抗氧化活性，能有效地清除·ABTS +、DPPH
和·OH自由基，其半数抑制浓度 IC50值分别为 51． 81、13． 40 和 28． 91 mg /L。因此，神秘果叶可以作为
抗氧化药物的潜在资源，在制药、食品工业以及保养品行业中具有良好的应用前景。
参考文献:
［1］卢圣楼，刘红，曹佳佳，等．神秘果中齐墩果酸和五环三萜含量的测定［J］．食品工业，2012，33(3) :130－133．
［2］卢圣楼，刘红，江虹，等．微波辅助提取———HPLC 法测定神秘果种子中齐墩果酸［J］．湖北农业科学，2012，51(4) :816－819，830．
［3］卢圣楼．神秘果叶营养价值和挥发油化学成分分析及其总黄酮提取纯化与药理化学评价［D］． 海口:海南师范大学硕士学位论
文，2013．
［4］齐赛男，贾桂云，雷鹏，等．神秘果种子挥发油化学成分的气相色谱-质谱分析［J］． 海南师范大学学报:自然科学版，2012，25(1) :
73－76．
［5］钟剑珊，欧阳伟，袁晓清．神秘果叶对小鼠高尿酸血症模型影响观察［J］．亚太传统医药，2013，9(8) :9－10．
［6］WANG H M，CHOU Y T，HONG Z L，et al． Bioconstituents from stems of Synsepalum dulcificum Daniell(Sapotaceae)inhibit human melanoma
proliferation，reduce mushroom tyrosinase activity and have antioxidant properties［J］． Journal of the Taiwan Institute of Chemical Engineers，
2011，42(2) :204－211．
［7］黄巨波，刘红，卢圣楼，等．神秘果种子蛋白质的提取与降糖效用研究［J］．天然产物研究与开发，2012，24(10) :1441－1443，1347．
［8］李金凤，段玉清，马海乐，等．板栗壳中多酚的提取及体外抗氧化性研究［J］．林产化学与工业，2010，30(1) :53－58．
［9］裘振宇，汤明礼，张旋，等．盐肤木叶多酚提取及抗氧化活性初探［J］．林产化学与工业，2013，33(1) :107－112．
［10］李田田，王飞．超声波辅助提取黑荆树皮原花青素工艺优化［J］．林产化学与工业，2012，32(6) :56－62．
［11］LI Y，JIANG J G，LI W F，et al． Optimum extraction process of polyphenol from the bark of Phyllanthus emblica L． based on the response
surface methodology［J］． Journal of Separation Science，2009，32(9) :1437－1444．
［12］ZHU K X，LIAN C X，GUO X N，et al． Antioxidant activities and total phenolic contents of various extracts from defatted wheat germ［J］． Food
Chemistry，2011，126(3) :1122－1126．
［13］DU G Ｒ，LI M J，MA F W，et al． Antioxidant capacity and the relationship with polyphenol and Vitamin C in Actinidia fruits［J］． Food
Chemistry，2009，131(2) :557－562．
［14］SABIＲ S M，AHMAD S D，HAMID A，et al． Antioxidant and hepatoprotective activity of enthanolic extract of leaves of Solidago microglossa
containing polyphenolic compounds［J］． Food Chemistry，2012，131(3) :741－747．
［15］柳嘉，赵竞，景浩．笃斯越桔多酚提取物成分分析及其抗氧化活性的研究［J］．食品科技，2009，34(9) :220－224．
［16］INGLETT G E，CHEN D J，BEＲHOW M，et al． Antioxidant activity of commercial buckwheat flours and their free and bound phenolic
compositions［J］． Food Chemistry，2011，125(3) :923－929．
［17］周晔，王伟，陶冉，等．超声波提取核桃内种皮多酚的响应面优化及其抗氧化研究［J］．林产化学与工业，2013，33(4) :73－78．