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HPLC法测定扭肚藤药材中东莨菪素的含量



全 文 :图 2 蜂胶样品(河南产)的 HPLC图
图 3 蜂胶样品(山东产)的 HPLC图
流动相:甲醇-0.4%的磷酸水 (65∶35)和 2005年版
药典所用的流动相:甲醇 - 0.15%的磷酸水 (64∶
36)进行比较 ,结果表明 ,药典法所用的流动相 ,对
个别样品中高良姜和白杨素未能达到基线分离 。
3.3  柱温对高良姜素和白杨素的分离及出峰时间
有一定的影响 ,因此 ,在实验过程中 ,应严格控制柱
温箱的温度在 25℃。
3.4  本实验结果表明 ,各产地蜂胶中高良姜素含
量均在 10mg /g左右 ,其中以山东产的蜂胶中高良
姜素的含量最高 ,达到 11.7 mg /g,其次为内蒙和河
南 ,甘肃产的蜂胶中高良姜素的含量最低 ,但也达到
9.8mg /g。提示高良姜素是蜂胶主要活性
图 4 蜂胶样品(甘肃产)的 HPLC图
图 5 蜂胶样品(内蒙产)的 HPLC图
成分之一 ,但产地会影响蜂胶中高良姜素含量。
参 考 文 献
[ 1] 王宗伟 , 黄兆胜 .蜂胶的药理作用 .国外医药 植物药
分册 , 1997, 12:151-153.
[ 2] 尉辉杰 , 田玉慧 ,李志春 , 等 .蜂胶黄酮类提取物对去卵
巢大鼠骨代谢的影响 .新乡医学院学报 , 2005, 22(3):
218-220.
[ 3] 杨明 , 朱妹 ,隋殿军 , 等 .蜂胶总黄酮对大鼠心肌缺血一
再灌注损伤诱导细胞凋亡的影响 .中国药理学通报 ,
2005, 21(5):551-554.
[ 4] 胡福良 , 玄红专 .蜂胶的生物学活性及毒性和过敏反
应 .科技通报 , 2003, 19(2):166-169.
(2006 - 10 -17收稿)
HPLC法测定扭肚藤药材中东莨菪素的含量
彭 维 ,王小锐 ,王永刚 ,李沛波 ,贾 强 ,苏薇薇
(中山大学生命科学学院 ,广东广州 510275)
  摘要 目的:建立扭肚藤药材中东莨菪素的含量测定方法。方法:采用 HPLC法。 色谱柱为 M erck L ichro spher
100RP-18e(250×4. 0 mm, 5 μm),流动相为乙腈-磷酸水溶液(14. 5∶85. 5, v /v, 用磷酸调节水溶液 pH为 3.0),检测
波长为 346 nm。结果:平均回收率 98.38%, RSD为 2. 21%。结论:方法简便 , 结果准确 , 重现性好 , 可用于扭肚藤
药材的质量控制。
关键词 扭肚藤;东莨菪素;高效液相色谱法
中图分类号:R284.1  文献标识码:A  文章编号:1001-4454(2007)05-0562-02
  扭肚藤为木犀科植物扭肚藤(Jasm inum amplex-
icaule Buch.-Ham.)的嫩茎叶 ,具有清热 、利湿的功
效 ,主治湿热腹痛 、肠炎 、痢疾 、四肢麻痹肿痛 、瘰疬 、
疥疮 [ 1] 。该药材收载于《广东省中药材标准》(粤
D W/ S-056-2003)[ 2] ,无含量测定项。我们在对扭肚
藤药材进行系统的化学成分研究时发现 ,扭肚藤主
562 中药材 Journa l o f Chine seM ed icina lM a teria ls  第 30卷第 5期 2007年 5月DOI牶牨牥牣牨牫牳牰牫牤j牣issn牨牥牥牨牠牬牬牭牬牣牪牥牥牱牣牥牭牣牥牪牫
要含东莨菪素等成分 。本文采用 HPLC法测定了不
同来源的扭肚藤药材中东莨菪素的含量 ,为评价扭
肚藤药材的质量提供了依据。
1  仪器与试药
Dionex P680型高效液相色谱仪 (美国戴安 ,四
元梯度 泵 、自动进样器 、 PDA— 100 检测器及
Chromeleon工作站)。扭肚藤药材来源见表 l,经中
山大学生命科学学院李沛波博士鉴定为木犀科植物
扭肚藤 Jasm inum amplexicau le Buch.-Ham.的嫩茎
叶 。东莨菪素对照品由中国药品生物制品检定所提
供 (批号:11538-200302),乙腈为色谱纯 ,水为超纯
水 ,甲醇 、磷酸均为分析纯 。
2  方法与结果
2.1  色谱条件  色谱柱:M erck Lichrospher 100
RP-18e(250×4.0 mm , 5 μm),流动相:乙腈-磷酸水
溶液 (14.5∶85.5 , v /v, 用磷酸调节水溶液 pH 为
3.0),柱温:30℃,流速:1.0 m l /m in,检测波长:346
nm。
图 1 东莨菪素对照品(A)和扭肚藤药材(B)HPLC图
2.2  对照品溶液的制备 精密称取减压干燥至恒
重的东莨菪素对照品 8.54mg,置 50 m l量瓶中加甲
醇至刻度 ,摇匀;精密量取 4 m l上述溶液 ,置 10 m l
量瓶中加甲醇稀释至刻度 ,摇匀 ,即得 。
2.3  供试品溶液的制备 取扭肚藤药材粗粉 2 g,
精密称定 ,置索氏提取器中 ,加入甲醇 150 m l,水浴
加热回流 6 h至提取液近无色 ,提取液回收溶剂 ,残
渣加甲醇定量转移至 l0 m l量瓶中 ,并加甲醇至刻
度 ,摇匀 , 0.45 μm微孔滤膜滤过 ,取续滤液作为供
试品溶液 。
2.4 线性及线性范围 取上述对照品溶液 ,分别
进样 2 μl、5 μl、10 μl、15μl、20μl、25 μl测定 ,以峰
面积积分值 A对对照品的进样量 C(μg)进行回归
分析 ,得回归方程:A =62.358C - 4.875×10-2 , r=
0.99999,表明东莨菪素含量在 0.137μg ~ 1.708 μg
范围内与峰面积呈良好的线性关系。
2.5 精密度试验 取对照品溶液 10 μl,连续进样
6次 ,测定峰面积 ,其 RSD为 0.38%,表明精密度良
好。
2.6 重复性试验 精密称取同一批号的样品粉末
6份 ,分别按供试品溶液制备方法平行操作 ,精密吸
取供试品溶液各 10 μl,分别注入液相色谱仪 ,测定
峰面积 ,其 RSD为 1.34%(n=6),表明方法重复性
好。
2.7 稳定性试验 取供试品溶液于室温下分别放
置 0、3、6、12、24、48 h后 ,分别进样 10 μl,测定峰面
积 ,其 RSD为 0.58%,表明稳定性好 。
2.8 加样回收试验 精密称取已测知东莨菪素含
量的样品适量 ,在线性范围的高 、中 、低三个水平 ,分
别准确精密加入一定量的对照品溶液 ,按供试品溶
液的制备及色谱条件项下操作 , 计算回收率及
RSD ,结果平均回收率为 98.38%, RSD为 2.21%。
2.9 样品测定 精密吸取供试品溶液 、对照品溶
液各 10μl,注入液相色谱仪 ,以外标一点法计算东
莨菪素含量。结果见表 1。
 表 1  扭肚藤药材中东莨菪素的含量
样品来源 东莨菪素含量(mg /g)
购于广州清平市场 0. 143
购于广州鸿泽药店 0. 057
购于广州清平市场 0. 138
购于广州采芝林药店 0. 188
购于广州二天堂药店 0. 163
购于广州金凤药店 0. 068
购于广州清平市场 0. 094
购于湛江工农市场 0. 302
购于广州康之选药店 0. 112
购于湛江东风市场 0. 290
参 考 文 献
[ 1] 江苏新医学院编 .中药大辞典(上册).上海:上海人民
出版社 , 1977:1110.
[ 2] 广东省食品药品监督管理局编 .广东省中药材标准
(第一册).广州:广东科技出版社 , 2004:109.
(2006 - 08 -28收稿)
563 中药材 Journa l o f Chine seM ed icina lM a teria ls  第 30卷第 5期 2007年 5月