全 文 ：复方扭肚藤胶囊镇痛 、抗炎作用的实验研究
李沛波 ,王永刚 ,彭 维 ,苏薇薇＊
(中山大学生命科学学院 ,广东广州 510275)
摘要 目的:研究复方扭肚藤胶囊的镇痛 、抗炎作用。方法:采用小鼠扭体法观察复方扭肚藤胶囊的镇痛作
用;采用二甲苯致小鼠耳廓肿胀法 、角叉菜胶致大鼠足跖肿胀法和醋酸致小鼠毛细血管通透性增高法观察复方扭
肚藤胶囊的抗炎作用。结果:复方扭肚藤胶囊能显著抑制醋酸所致的小鼠扭体反应;能明显抑制二甲苯所致的小
鼠耳廓肿胀和角叉菜胶所致的大鼠足跖肿胀及炎性组织中 PGE2的生成 , 同时对醋酸所致小鼠毛细血管通透性增
高具有显著抑制作用。结论:复方扭肚藤胶囊具有明显镇痛 、抗炎作用。
关键词 复方扭肚藤胶囊;镇痛;抗炎
中图分类号:R285.5 文献标识码:A 文章编号:1001-4454(2008)01-0118-03
基金项目:广东省科技计划项目(2005A30101013)作者简介:李沛波(1973-),男,博士 ,讲师 ,研究方向:心血管药理学和中药新药研究与开发。＊通讯作者:苏薇薇 ,教授;Tel:020-84110808, E-mail:lsssww@126.com。
复方扭肚藤胶囊是中山大学研制的中药新药 ,
该药由扭肚藤 、火炭母 、救必应等中药组成的复方制
剂 ,笔者对其镇痛 、抗炎作用进行了研究 ,现报道如
下 。
1 材料和方法
1.1 药物及试剂 复方扭肚藤胶囊:由中山大学
华南创新中药研究开发与技术服务中心提供;阿司
匹林片:河北石家庄制药集团生产 ,批号:041114;乌
拉坦:国药集团化学试剂有限公司生产 , 批号:
E60521;二甲苯:广东光华化学有限公司生产 ,批
号:20050218;角叉菜胶:购自美国 Sigma公司 ,批
号:59C-0328。
1.2 动物 昆明种小鼠 ,体重 20 ～ 24 g,清洁级 ,
由第一军医大学实验动物中心提供 ,动物合格证号:
2004A063号;SD大鼠 ,雄性 ,体重 150 ～ 180 g,清洁
级 ,由中山大学实验动物中心提供 ,动物合格证号:
粤检证字 2003A070。
1.3 方法
1.3.1 对醋酸所致小鼠扭体反应的影响 〔1〕:取昆
明种小鼠 60只 ,雌雄各半 ,随机分为空白对照组 、复
方扭肚藤胶囊低 、中 、高剂量组 、阳性对照药物(阿
司匹林)组 ,共 5组 ,每组 12只 ,实验前小鼠禁食不
禁水 12 h,然后各组小鼠按 0.1ml/10g体重灌胃给
药 , 1次 /d,共 7 d,其中空白对照组给予等体积蒸馏
水 。末次给药 30 min后 ,每只小鼠腹腔注射 0.6%
醋酸溶液 0.2 ml,记录小鼠 30 min内扭体反应次数
(以小鼠出现腹部内凹 、躯干与后肢伸张 ,臀部高起
为扭体反应),计算镇痛率 。
1.3.2 对二甲苯致小鼠耳廓肿胀的影响 〔1〕:取昆
明种小鼠 60只 ,随机分为空白对照组 、模型对照组 、
复方扭肚藤胶囊低 、中 、高剂量组 、阳性对照药物
(阿司匹林)组 ,共 6组 ,每组 10只 ,实验前小鼠禁
食不禁水 12h,然后各组小鼠按 0.1 ml/10g体重灌
胃给药 , 1次 /d,共 7d,其中空白对照组和模型对照
组给予等体积蒸馏水。末次给药 30 min后 ,除空白
对照组外 ,其余各组小鼠于右耳正反两面涂上二甲
苯 50 μl致炎 , 1 h后脱颈椎处死动物 ,用直径 9mm
打孔器冲下左耳和右耳同一部位的圆片 ,于分析天
平上称重 ,以两耳片重差值为炎症肿胀度。
1.3.3 对角叉菜胶致大鼠足跖肿胀及炎症组织中
PGE2的影响〔1、2〕:取雄性 SD大鼠 50只 ,随机分为
空白对照组 、复方扭肚藤胶囊低 、中 、高剂量组 、阳性
对照药物(阿司匹林)组 ,共 5组 ,每组 10只 ,实验
前大鼠禁食不禁水 12 h,然后各组大鼠按 1ml/100g
体重灌胃给药 , 1次 /d,共 7 d,其中空白对照组给予
等体积蒸馏水 。末次给药 1 h后 ,先按容积测定方
法测量各鼠右踝关节以下容积 ,然后于各鼠右后足
跖皮下注射 1%角叉菜胶 0.1 ml致炎 ,分别于致炎
后 1、2、3、4 h时 , 按原法测量右踝关节以下容积。
测完后 ,颈椎脱臼处死大鼠 ,于踝关节上 0.5 cm处
剪下炎性肿胀足称重 ,并将以上剪下的致炎足剥皮 ,
剪碎放入 5ml生理盐水中浸泡 1h后 ,离心 ,取上清
液 0.1 ml, 加 0.5 mol/LKOH-甲醇溶液 2 ml, 在
50℃下异构化 20 min,用甲醇稀释至 5 ml,于 278
nm处测定吸光度 (OD)值 , OD值的大小即反映
PGE2的含量 。
1.3.4 对醋酸致小鼠毛细血管通透性增高的影
响〔3〕:取昆明种小鼠 50只 ,随机分为空白对照组 、复
方扭肚藤胶囊低 、中 、高剂量组 、阳性对照药物(阿
司匹林)组 ,共 5组 ,每组 10只 ,实验前小鼠禁食不
·118· 中药材 JournalofChineseMedicinalMaterials 第 31卷第 1期 2008年 1月
DOI :10.13863/j.issn1001-4454.2008.01.045
禁水 12 h,然后各组小鼠按 0.1ml/10g体重灌胃给
药 , 1次 /d,共 7 d,其中空白对照组给予等体积蒸馏
水 。末次给药后 1 h,各组小鼠尾静脉注射 0.5%伊
文思蓝生理盐水溶液 0.1 ml/10g, 随即腹腔注射
0.6%醋酸 0.1 ml/10g, 20 min后断头放血处死小
鼠 ,腹腔注射 6ml生理盐水 ,轻揉腹部 ,收集腹腔洗
出液 , 1000 r/min离心 5 min,取上清液于 590 nm处
测吸光度值(OD值)。
1.4 统计学处理 实验数据以 X±S表示 ,采用
SPSS统计软件进行统计学处理 。
2 结果
2.1 复方扭肚藤胶囊对醋酸所致小鼠扭体反应的
影响 由表 1可见 ,复方扭肚藤胶囊低 、中 、高剂量
组小鼠的扭体次数与空白对照组比较 ,差异具有统
计学意义(P<0.01或 P<0.05),说明复方扭肚藤
胶囊能减少醋酸所致的小鼠扭体反应 ,提示复方扭
肚藤胶囊具有明显镇痛作用。
2.2 复方扭肚藤胶囊对二甲苯致小鼠耳廓肿胀的
表 1 复方扭肚藤胶囊对醋酸所致小鼠
扭体反应影响( X±S, n=12)
组别 给药剂量 扭体次数(次) 抑制率(%)
空白对照组 - 29.1±5.7 -
复方扭肚藤胶囊低剂量组 0.36g生药 /kg 18.1±8.3＊ 37.8
复方扭肚藤胶囊中剂量组 0.72g生药 /kg 13.8±3.4＊＊ 52.6
复方扭肚藤胶囊高剂量组 1.44g生药 /kg 10.6±3.8＊＊ 63.6
阿司匹林组 0.2g/kg 8.8±2.3＊＊ 69.8
与空白对照组比较:＊P<0.05, ＊＊P<0.01
影响 由表 2可见 ,复方扭肚藤胶囊中 、高剂量组的
耳重差与模型对照组比较 ,差异具有统计学意义(P
<0.01),说明复方扭肚藤胶囊能抑制二甲苯所致
的小鼠耳廓肿胀 ,提示复方扭肚藤胶囊对急性炎性
肿胀具有抑制作用 。
2.3 复方扭肚藤胶囊对角叉菜胶致大鼠足跖肿胀
及炎症组织中 PGE2含量的影响 由表 3可见 ,中 、
高剂量复方扭肚藤胶囊对角叉菜胶致炎后 1、2、3、4
h时大鼠的足跖肿胀及炎症组织中 PGE2含量增加
表 2 复方扭肚藤胶囊对二甲苯致小鼠耳廓肿胀的影响( X±S, n=10)
组别 给药剂量 左耳重(mg) 右耳重(mg) 重量差
空白对照组 - 20.24±2.67 20.98±5.01 0.71±0.31
模型对照组 - 21.32±4.12 38.01±7.34 16.86±5.33##
复方扭肚藤胶囊低剂量组 0.36g生药 /kg 21.35±3.76 34.79±4.67 13.12±5.27
复方扭肚藤胶囊中剂量组 0.72g生药 /kg 19.89±3.26 28.65±3.65 8.58±2.34＊＊
复方扭肚藤胶囊高剂量组 1.44g生药 /kg 19.37±3.87 27.29±6.43 7.55±2.72＊＊
阿司匹林组 0.2g/kg 20.57±2.89 25.68±4.69 5.23±1.67＊＊
与模型对照组比较:＊P<0.05, ＊＊P<0.01;与空白对照组比较:#P<0.05, ##P<0.01
表 3 复方扭肚藤胶囊对角叉菜胶致大鼠足跖肿胀及炎症组织中 PGE2含量的影响( X±S, n=10)
组别 给药剂量 OD值 肿胀率(%)
1 h 2 h 3h 4h
空白对照组 - 2.35±0.52 37.87±5.36 50.35±10.11 58.93±9.02 71.97±13.68
复方扭肚藤胶囊低剂量组 0.25g生药 /kg2.24±0.46 31.46±6.99 43.87±10.25 50.24±9.03 59.37±19.35
复方扭肚藤胶囊中剂量组 0.50g生药 /kg1.76±0.23＊ 27.43±5.31＊ 33.26±4.57＊ 34.65±8.74＊＊ 37.69±7.34＊＊
复方扭肚藤胶囊高剂量组 1.00g生药 /kg1.51±0.28＊＊ 24.30±3.89＊＊ 29.21±7.01＊＊ 29.80±6.59＊＊ 33.75±7.65＊＊
阿司匹林组 0.2g/kg 1.41±0.31＊＊ 22.87±4.43＊＊ 24.37±6.01＊＊ 30.77±7.01＊＊ 30.46±9.03＊＊
与空白对照组比较:＊P<0.05, ＊＊P<0.01。表 4同
表 4 复方扭肚藤胶囊对醋酸致小鼠毛细血管
通透性增高的影响( X±S, n=10)
组别 给药剂量 OD值
空白对照组 - 0.346±0.043
复方扭肚藤胶囊低剂量组 0.36g生药 /kg 0.207±0.051＊
复方扭肚藤胶囊中剂量组 0.72g生药 /kg 0.158±0.029＊＊
复方扭肚藤胶囊高剂量组 1.44g生药 /kg 0.129±0.023＊＊
阿司匹组 0.2g/kg 0.116±0.021＊＊
均具有明显的抑制作用(P<0.05或 P<0.01),提
示复方扭肚藤胶囊对急性炎性肿胀具有显著抑制作
用。
2.4 复方扭肚藤胶囊对醋酸致小鼠毛细血管通透
性增高的影响 由表 4可见 ,复方扭肚藤胶囊低 、
中 、高剂量腹腔洗出液的吸光度值与空白对照组比
较 ,差异具有统计学意义(P<0.05或 0.01),说明
复方扭肚藤胶囊组能明显抑制醋酸致小鼠毛细血管
·119·中药材 JournalofChineseMedicinalMaterials 第 31卷第 1期 2008年 1月
通透性增高 ,提示复方扭肚藤胶囊对炎性过程中毛
细血管通透性增高具有一定的抑制作用。
3 讨论
实验结果表明 ,复方扭肚藤胶囊能显著抑制醋
酸所致的小鼠扭体反应 ,可显著抑制炎症的水肿和
渗出 ,且能降低局部炎症组织中 PGE2含量。提示
复方扭肚藤胶囊具有显著的镇痛和抗炎作用 ,且其
抗炎机制之一可能与减少炎症组织中 PGE2合成有
关 。本研究为其临床应用提供了实验依据 。
参 考 文 献
[ 1] 徐叔云 , 卞如濂 ,陈修 .药理实验方法学 .北京:人民卫
生出版社 , 2003:882, 911-914.
[ 2] 邢建峰 , 孙建宁 ,侯家玉 , 等.异亚丙基莽草酸抗炎作用
的研究 .中国药学杂志 , 2006, 41(24):1861-1863.
[ 3] 陈奇 .中药药理实验方法学 .北京:人民卫生出版社 ,
1994:71-72.
(2007-05-18收稿)
·制剂与质量·
均匀设计法优选菝葜超临界萃取工艺的研究
陈东生 ,华小黎 ,于丽秀
(华中科技大学同济医学院附属协和医院 ,湖北武汉 430022)
摘要 目的:优选超临界 CO2流体萃取菝葜中有效成份———薯蓣皂苷元的最佳工艺条件。方法:采用均匀设
计的方法安排实验 , 探讨压力 、温度 、夹带剂等工艺条件对有效成分收率的影响 , 利用 HPLC对菝葜萃取产物中的
薯蓣皂苷元进行含量测定 ,计算收率 , 数据经 SPSS统计分析软件处理。结果:优化后的最佳萃取条件为:萃取釜压
力 25MPa, 萃取温度 67℃, 解析釜Ⅰ压力 10MPa,夹带剂乙醇浓度 95%。结论:超临界 CO
2
流体萃取较药典中采用
的有机溶剂提取方法可获得更高的收率 ,为改进菝葜中薯蓣皂苷元的提取方法提供科学依据。
关键词 均匀设计;超临界 CO2萃取;薯蓣皂苷元;菝葜
中图分类号:R284.2 文献标识码:A 文章编号:1001-4454(2008)01-0120-03
ResearchontheApplicationofSupercriticalFluidExtractionofDiosgeninofSmilaxchina
CHENDong-sheng, HUAXiao-li, YULi-xiu
(TheAfiliatedUnionHospitalofTongjiMedicalCollege, HuazhongUniversityofScienceandTechnology, Wuhan430022, China)
Abstract Objective:ToStudytheoptimumextractionconditionsofdiosgeninbyCO2 SupercriticalFluidExtraction(SFE).
Methods:UniformdesignwasusedtoselectthetechnologyofCO2 SFE.Thepressure, temperatureandmodiferconcentrationweredis-
cussedtotrytofindoutthebestcondition.SampleswereanalyzedwithareversephaseHPLCsystemtocalculatetheyield.Datawas
processedbySPSSstatisticalanalysissoftware.Results:ThebestextractionconditioninSFEasfolows:extractionpressure25MPa,
temperature67℃, seperationpressure10MPa, modiferconcentration95%.Conclusion:CO2 SFEmethodacquiresmoreyieldthan
thatoftraditionalorganicsolventextractionmethodinpharmacopoeia, providingscientificsupportonimprovingtheextractionmethodof
diosgenin.
Keywords Uniformdesign;CO2 SupercriticalFluidExtration;Diosgenin;SmilaxchinaL.
基金项目:湖北省科委重点攻关计划项目资助(编号:2002P1105)作者简介:陈东生 ,男 ,主任药师 ,硕士生导师;Tel:027-85726077。
超临界流体萃取是利用超临界条件下的气体作
萃取剂 ,从液体或固体中萃取出某些成分并进行分
离的技术〔1〕 ,是最近 20年来国际上迅速发展的新一
代化工分离技术 ,已广泛应用于食品 、香料 、医药工
业等领域〔2〕。超临界 CO2流体萃取方法具有惰性 、
无毒 、纯净 、价格低廉等优点 ,且萃取后 CO2易分离
可重复使用 ,与传统的溶剂法相比 ,具有巨大的优越
性。
菝葜 SmilaxchinaL.系百合科植物 ,其根茎具
有抗菌消炎 、抗肿瘤等功效。文献报道用于祛风湿 、
利小便 、消肿毒 ,治疗关节痛 、水肿 、疔疮等 ,其制剂
用于妇科附件炎有较好疗效 。现已发现菝葜中含有
皂苷类 、生物碱类 、有机酸类 、菝葜素类 、黄酮类 、氨
基酸类等成分 〔3〕 , 2005年中国药典中以薯蓣皂苷元
·120· 中药材 JournalofChineseMedicinalMaterials 第 31卷第 1期 2008年 1月