全 文 ：人参研究 GINSENG RESEARCH 2014 年第 3 期
红参为五加科植物人参 Panax ginseng C.A.Mey.
的栽培品，即“园参”，经蒸制后的干燥根及根茎，主产
于东北，气微香而特异，味甘、微苦，可用于大补元气，
复脉固脱，益气摄血。人参皂苷为其主要成分之一，分
为三种类型，一种是原人参二醇型皂苷，一种为原人
参三醇型皂苷，还有一类是齐墩果酸型皂苷[1]。关于前
两种人参皂苷的化学成分含量研究， 目前已经很多。
齐墩果酸型人参皂苷目前发现有 1 种， 为人参皂苷
Ro[2]，人参皂苷 Ro 具有抗肿瘤、抗炎、抗补体活性 [3～5]
等药理作用。 姜状三七皂苷 R1 [6] 为人参皂苷 Ro 的
C28 位上的糖脱落后形成的新齐墩果酸型皂苷，它本
身也存在于很多植物中，比如三七[7]等。 为了研究 Ro
和 R1在人参中的含量关系， 本文将首次报道 HPLC
同时测定不同种类人参，人参不同不同部位，红参加
工过程中中 Ro和 R1的含量测定，为人参品质提供科
学依据。
1仪器与试剂
人参皂苷 Ro对照品 （天津马克生物科技有限公
司，纯度为 99%，批号：20130912 ）；姜状三七皂苷 R1
为实验室自制，纯度为 98%以上；甲醇、乙腈为色谱纯
人参中人参皂苷 Ro和姜状三七皂苷 R1的含量测定
朱 琼 1 李德坤 2 周大铮 2 叶正良 2* 鞠爱春 2
（1．中国药科大学药物分析教研室，南京 210009；
2．天津天士力之骄药业有限公司，天津 300402）
摘 要：目的 测定不同种类人参，人参不同部位中，红参加工过程中人参皂苷 Ro（简称 Ro）和姜状三七皂
苷 R1（简称 R1）的含量含量。 方法：采用 HPLC的方法，对样品预处理及色谱条件进行优化。 结果：
鲜参中 Ro 和 R1含量比红参中含量高；不同部位中 Ro 和 R1的含量差异为：芦头＞参须＞主根；红
参加工过程中的蒸制使 Ro含量升高，R1含量降低。 结论 本文所建立的人参中人参皂苷 Ro和姜
状三七皂苷 R1的含量测定方法准确、稳定可靠。
关键词：人参；人参皂苷 Ro；姜状三七皂苷 R1
Determination of ginsenosi de-Ro and zingibroside R1
in Ginseng Radix by HPLC
Zhu qiong1，Li Dekun2，Zhou Dazheng2，Ye Zhengliang2*，Ju Aichun2
(1.Department of Pharmaceutical Analysis，China Pharmaceutical University，Nanjing 210009；
2. Tianjin Tasly Pride Pharmaceutical Company Limited，Tianjin 300402)
Abstract:Objective To determine ginsenosides Ro and zingibroside R1 in the different types of ginseng,in
different parts of ginseng , in processing of the red ginseng. Method: optimizded the sample
preparation and chromatographic conditions by HPLC. Results: The difference of ginsenoside Ro
content was:fresh ginseng ＞red ginseng；Rhizoma ＞branch fibrous -root ＞main root；the content of
ginsenoside Ro was increased in steaming of the process of red ginseng,while the conternt of
zingibroside R1 was decreased.Conclusion the method was accurate, stable and reliable to
Determine ginsenoside-Ro and zingibroside R1 in Ginseng Radix.
Key words:Ginseng Radix；ginsenoside-Ro；zingibroside R1
作者简介：朱琼，女，中国药科大学药物分析在读硕士，研究方向：中药质量控制。
* 通讯作者：叶正良，研究员，硕士生导师。 E-mail：yezl@tasly.com.
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人参研究 GINSENG RESEARCH 2014 年第 3 期
时间（min） A：0.05%磷酸（%） B：乙腈（%）
0 75 25
6 75 25
8 70 30
12 68 32
35 68 32
40 50 50
50 50 50
51 0 100
60 0 100
61 75 25
70 75 25
朱 琼等：人参中人参皂苷 o 和姜状三七皂苷 R1的含量测定
（德国 Merck 公司），磷酸为色谱纯（天津市光复精细
化工研究所），超纯水为实验室自制；Waters e2695 高
效液相色谱仪，Waters 2489 紫外检测器，Thermo TSQ
quantum 液质联用仪 ，Milli -Q 超纯水系统 （美国
Millipore 公司），XS105 梅特勒精密电子分析天平（上
海梅特勒-托利多仪器上海有限公司）。鲜参、生晒参、
红参药材均为辽宁鑫泰提供，经中国药科大学余伯阳
教授鉴定为五加科植物人参 Panax ginseng C.A.Mey。
2方法与结果
2.1供试品制备
取红参药材 2g（过四号筛），用 12 倍量的 60%乙
醇回流提取，回流 3 次，每次 2h。 将提取液合并，过
滤，减压浓缩干燥，转移到 10mL 容量瓶，加水至刻度
线，定容。过 0.45um滤膜，取续滤液作为供试品溶液。
2.2 对照品制备
取人参皂苷 Ro、 姜状三七皂苷 R1对照品适量，
精密称定， 加甲醇制成每 1 mL 分别含人参皂苷 Ro
为 0.5946mg、姜状三七皂苷 R1为 0.0664mg 的混合溶
液，作为对照品混合溶液。
2.2 测定条件
分别精密吸取上述对照品和供试品溶液各 10
μL，注入液相色谱仪，记录色谱图，计算样品的含量，
即得。
2.2.1色谱条件
菲罗门 Gemini C18 色谱柱 （4.6 mm×250 mm，
5μm）以 0.05%磷酸-乙腈为流动相，按表 1 中的梯度
比例进行梯度洗脱；检测波长：203 nm；流速：1.0 mL·
min-1；柱温：30℃；进样量：10 μL。在此色谱条件下，所
测成分与其他成分色谱峰均达到基线分离。结果见图
1，图 2。
表 1 HPLC 梯度洗脱程序
图 1 人参皂苷 Ro 和姜状三七皂苷 R1对照品 HPLC 图
图 2 红参药材中人参皂苷 Ro 和姜状三七皂苷 R1 HPLC 图
2.2.2 质谱条件
雾化气压力：25.0 psi， 干燥气流量：9.0 L/min，干
燥气温度：350 ℃，毛细管电压：3500V，电离方式：负
离子，ESI，扫描范围：500-1300 m/z。
图 3 人参皂苷 Ro 和姜状三七皂苷 R1混合对照品 TIC 图
图 4 红参药材样品 TIC 图谱
图 5 人参皂苷 Ro 对照品质谱图
图 6 红参药材中人参皂苷 Ro 的质谱图
R
Ro
!
Ro
R
10
人参研究 GINSENG RESEARCH 2014 年第 3 期
图 7 姜状三七皂苷 R1 对照质谱图
图 8 红参药材中姜状三七皂苷 R1质谱图
2.3 方法学验证
2.3.1 线性
分别取人参皂苷 Ro、姜状三七皂苷 R1对照品适
量，精密称定，加甲醇分别稀释制成一定浓度的对照
品溶液，稀释成一系列对照品溶液，分别进样，记录色
谱图。 以对照品浓度（mg/mL）为横坐标，峰面积（AU）
为纵坐标，分别绘制标准曲线，计算回归方程，结果见
表 2，表 3，图 9，图 10。
表 2 人参皂苷 Ro 线性关系结果
图 9 人参皂苷 Ro 标准曲线图
表 3 姜状三七皂苷 R1线性关系结果
图 10 姜状三七皂苷 R1标准曲线图
2.3.2 精密度
精密吸取混合对照品溶液 （人参皂苷 Ro 浓度为
0.5170mg·ml-1、姜状三七皂苷 R1浓度为 16.10μg·ml-
1）10 μl，注入液相色谱仪，连续进样 5 次，记录色谱
图，计算进样精密度，结果见表 2～4。 结果表明，仪器
精密度良好。
表 2-4 精密度试验结果（n=5）
2.3.3 稳定性
按所拟订的“含量测定”项下方法，对同一供试品
溶液 （批号：20120301） 分别在室温下放置 0、2、4、8、
12、24 小时，精密吸取 10 μL 注入液相色谱仪，测定。
结果见表 5。 结果表明，供试品溶液在 24小时内稳定。
表 5 稳定性试验结果（n=6）
对照品浓度
（mg/mL） 0.0517 0.2585 0.4012 0.5946 0.8123 1.034
峰面积（AU） 174532 825342 1298104 1871342 2557821 3275863
线性回归方程 Y = 3E+06X + 15076 R2 = 0.9999
对照品浓度
（mg/mL） 41.6 32.2 24.3 16.1 8.05 2.01
峰面积（AU） 156432 121329 90731 57865 29957 9047
线性回归方程 Y= 3582X+ 2276. R2 = 0.9992
峰面积（AU） Ro R1
1 1681400 57863
2 1684100 58719
3 1701724 57332
4 1662788 56901
5 1679416 58776
均值 1679593 57918
RSD% 0.81 1.43
峰面积（AU） Ro R1
0 h 1635095 59819
2 h 1617702 52413
12 h 1572768 57698
24 h 1635095 59819
均值 1609946 64131
RSD% 1.51 1.71
4 h 1597190 60028
8 h 1601823 55010
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人参研究 GINSENG RESEARCH 2014 年第 3 期
2.3.4 重复性
按所拟订的“含量测定”项下方法，对同一批药材
（批号：20120301）平行制备 5 份供试品溶液，进样 10
μL，分别计算各测定成分的含量，结果见表 6。结果表
明，本法重复性良好。
表 6 重复性试验结果（AU，n=5）
2.3.5 加样回收率
精密称取 6份已知含量的红参药材样品（批号为
20120301） 各 1 g， 分别精密加入人参皂苷 Ro 1.55
mg、姜状三七皂苷 R1 96.6μg，按供试品溶液的制备方
法制备供试品溶液测定，结果见表 7、表 8。 加样回收
率试验结果表明，所拟订的方法符合定量的要求。
表 7 人参皂苷 Ro 加样回收试验结果
表 8 姜状三七皂苷 R1加样回收试验结果
2.3.6 检测限的测定
将人参皂苷 Ro和姜状三七皂苷 R1适量，配制成
合适浓度，进样检测，当信噪比为 3 时，人参皂苷 Ro
检测浓度为 3.73 ng，姜状三七皂苷 R1为 1.01ng。
图 11 最低检测线图
2.3.7 定量限的测定
取人参皂苷 Ro和姜状三七皂苷 R1适量，配制成
合适浓度，进样检测，当信噪比为 10 时，连续进样 6
针，RSD＜2%， 该人参皂苷 Ro 浓度为 14.92 ng， 姜状
三七皂苷 R1为 2.01ng。
1-对照；2-空白
图 12 最低定量线图
2.4 含量测定
2.4.1 不同种类人参中 Ro和 R1含量测定
表 9 不同种类人参中 Ro 和 R1的含量测定结果
从表 9 可以看出鲜参中 Ro 和 R1的含量高于红
参。
2.4.2 人参不同部位中 Ro和 R1含量测定
表 10 人参不同部位中 Ro 和 R1含量测定结果
峰面积（AU） Ro R1
样品 1 1690527 75095
样品 2 1662034 76030
样品 5 1715106 72398
均值 1691389 73963
RSD% 2.24 2.70
样品 3 1648106 74972
样品 4 1741174 71316
样品
编号
取样量
(g)
样品原
含量
(mg)
对照品
加入量
(mg)
测得量
(mg)
回收率
(%)
平均回
收率
(RSD)
1 1.0283 1.5864
1.55
3.0766 96.2 97.9%
2 1.0462 1.6140 3.1255 97.6 （1.35%）
3 1.0325 1.5928 3.1440 100.1
4 1.0441 1.6107 3.1353 98.4
5 1.0235 1.5790 3.0807 96.9
6 1.0127 1.5623 3.0814 98.0
样品
编号
取样量
(g)
样品原
含量
(mg)
对照品
加入量
(mg)
测得量
(mg)
回收率
(%)
平均回
收率
(RSD)
1 1.0283 105.81
96.6
198.97 96.44
97.7%
(1.45%)
2 1.0462 107.65 201.57 97.22
3 1.0325 106.24 202.87 100.03
4 1.0441 107.44 202.34 98.24
5 1.0235 105.32 198.21 96.16
6 1.0127 104.21 198.88
1
2
批号 Ro 含量（mg/g） R1含量（mg/g）
红参 20121101 3.52 0.10
红参 20120201 3.22 0.10
红参 20120301 3.45 0.08
鲜参 20121101 4.84 0.37
鲜参 20120201 4.44 0.33
鲜参 20120301 4.12 0.31
批号 Ro 含量（mg/g） R1含量（mg/g）
芦头 1 11.49 0.20
芦头 2 11.96 0.26
芦头 3 11.65 0.28
参须 1 4.51 0.19
参须 2 4.69 0.17
参须 3 4.51 0.18
主根 1 3.29 0.09
主根 2 3.13 0.08
主根 3 3.27 0.09
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人参研究 GINSENG RESEARCH 2014 年第 3 期
从表 10中可以得出红参芦头中 Ro 和 R1的含量
最高，其次是参须，主根中含量最低。
2.4.3 红参加工过程中 Ro和 R1含量测定
为了弄清红参中 Ro 和 R1的含量为何比鲜参中
低， 因此进行了红参加工过程中 Ro 和 R1的含量测
定，图 11是红参加工流程图，H1~H6为取样点。
图 11 红参加工流程图及取样点
表 11 红参加工过程中 Ro 和 R1含量测定结果
图 12 红参加工过程中人参皂苷 Ro 含量
图 13 红参加工过程中 R1含量
红参加工过程中 Ro的含量在蒸制时上升， 但在
干燥的过程中含量又有所下降； 姜状三七皂苷 R1的
含量在蒸制时下降，但在干燥的过程中含量又有所升
高。这说明人参在蒸制和干燥步骤是发生化学变化的
主要因素，人参皂苷 Ro 和姜状三七皂苷 R1可能存在
相互转化的关系。
3 讨论
a.本次对人参药材中人参皂苷 Ro、姜状三七皂苷
R1 进行了提取方法的优化，采用单因素实验，正交实
验，最后确定最佳提取方法为 60%乙醇回流，提取 3
次，每次 2小时。 该方法能完全提取人参药材中的人
参皂苷 Ro、姜状三七皂苷 R1。
b.建立了人参药材中的人参皂苷 Ro，姜状三七皂
苷 R1的含量测定方法，对 HPLC条件进行了优化，采
用不同比例的乙腈，不同种类的酸作为流动相，最后确
定 0.05%磷酸-乙腈能使药材中的人参皂苷 Ro， 姜状
三七皂苷 R1与杂质达到最好的分离。 在该色谱条件
下， 色谱系统性实验考察了不同牌子的 C18柱子，不
同型号的液相色谱仪， 最后得出菲罗门的吉米色谱柱
对其分离最好， 并且在不同的仪器上都能达到良好的
分离，其余牌子的色谱柱峰型和分离度有欠缺。
c.分别对 6 批红参，3 批鲜参，3 批生晒参，3 批芦
头，3批参须进行了人参皂苷 Ro，姜状三七皂苷 R1的
含量测定， 最后发现人参皂苷 Ro 的含量： 芦头＞参
须＞鲜参＞红参；姜状三七皂苷 R1在鲜参中就存在，在
生晒生到红参的过程中无明显含量变化。关于人参皂
苷 Ro 和姜状三七皂苷 R1是否存在转化关系还需进
一步研究。
参考文献
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药品评价，2005，2（1）：23~30.
样品 人参皂苷 Ro含量（mg/g） 姜状三七皂苷 R1含量（mg/g）
H1 3.60 0.24
H2 3.63 0.23
H3 3.57 0.22
H4 3.62 0.23
H5 6.05 0.06
H6 2.78 0.09
13