全 文 ：檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶
3 结论
本文采用 DPPH，ABTS，FRAP 3 种方法对疏花
假地豆不同溶剂提取物进行了体外抗氧化活性研
究，结果表明疏花假地豆不同溶剂提取物均有一定
的抗氧化活性。但是因为溶剂极性不同，其中提取
物极性也不同，这可能导致了不同溶剂提取物其抗
氧化活性有很大差别的根本原因。3 种抗氧化体系
结果表明其乙酸乙酯抗氧化活性高于总醇提物的抗
氧化活性，这可能是因为醇提物中含有的其他杂质
较多，在相同浓度时其抗氧化有效成分少于乙酸乙
酯提取物。综合上述结果可得出疏花假地豆乙酸乙
酯提取部位的抗氧化活性最好。
［参考文献］
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［责任编辑 顾雪竹］
［收稿日期］ 20120110(120)
［基金项目］ 中国中医科学院医学实验中心自主课题项目(zz2007002)
［第一作者］ 闫寒，从事中药质量控制研究，Tel:010-64014411-3324，E-mail:yanhanarrow@ 163. com
［通讯作者］ * 彭娟，助理研究员，硕士，从事药物分析及药代动力学研究，Tel:010-64014411-3324，Email:lillejuan@ 163. com
LC-MS-MS法测定参体和参须中
人参皂苷 Rb1，Rb2 和 Rc含量
闫寒1，赵松岩2，刘运嘉3，吴睿凡4，范斌1，郭娜1，彭娟1*
( 1. 中国中医科学院医学实验中心，北京 100700; 2. 沈阳药科大学，沈阳 110016;
3. 沈阳市药品不良反应和医疗器械不良事件监测中心，沈阳 110013;
4. 新疆医科大学，乌鲁木齐 830011)
［摘要］ 目的:建立检测参体和参须中人参皂苷 Rb1，Rb2 和 Rc 的 LC-MS-MS 方法。方法:应用液质联用，C18色谱柱系
统，采用梯度洗脱方法，A-水(0. 05% FA) ，B-乙腈，A-B = 65∶ 35，梯度洗脱(0 ～ 3 min，65% B;3 ～ 4 min，100% B) ，流速 0. 35
mL·min －1，柱温 40 ℃，建立了参体和参须中人参皂苷 Rb1，Rb2 和 Rc含量测定方法并进行了方法学考察。结果:建立了同时
检测参体和参须中人参皂苷 Rb1，Rb2 和 Rc含量测定方法。结论:该方法准确、简便、快速，可用于参体和参须的质量控制。
［关键词］ 参体和参须;含量测定;人参皂苷 Rb1;人参皂苷 Rc;人参皂苷 Rb2
［中图分类号］ R284. 1 ［文献标识码］ A ［文章编号］ 1005-9903(2013)06-0105-03
Simultaneous Quantitation of Rb1，Rb2 and Rc in Ginseng Tail
and the Main Root of Ginseng by LC-MS-MS
YAN Han1，ZHAO Song-yan2，LIU Yun-jia3，WU Rui-fan4，FAN Bin1，GUO Na1，PENG Juan1*
(1. Experimental Research Center，China Academy of Chinese Medical Sciences，Beijing 100700，China;
2. Shenyang Parmaceutical University，Shenyang 110016，China;3. Shenyang Monitoring Center for
Adeverse Drug Reaction and Medical Device Adeverse Event，Shenyang 110013，China;
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第 19 卷第 6 期
2013 年 3 月
中国实验方剂学杂志
Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae
Vol． 19，No． 6
Mar．，2013
4. Xinjiang Medical University，Xinjiang 830011，China)
［Abstract］ Objective:To develop a method to determine the content-of ginsengnoside Rb1，Rb2 and Rc
in ginseng tail and the main root of ginseng by using HPLC-MS-MS． Method:C18 HPLC column was used in the
system including HPLC-MS-MS with a gradient elution program． The mobile phase was consisted of:A for water
(0. 05% FA) ，B for acetonitrile，A∶ B = 65∶ 35;gradient elution program was as follows:0-3 min，65% (B) ;3-
4 min，100% (B)． The flow rate was 0. 35 mL·min －1;column temperature was kept at 40 ℃ ． Result:
Simultaneous quantitation of ginsengnoside Rb1，Rb2 and Rc in ginseng tail and the main root of ginseng by HPLC-
MS-MS was developed． Conclusion:The method is accurate，convenient and rapid，which can be applied for the
quality control of ginseng tail and the main root of ginseng．
［Key words］ ginseng tail and ginseng main root;content determination;ginsenoside Rb1;ginsenoside
Rc;ginsenoside Rb2
人参具有大补元气、复脉固脱、补脾益肺、生津养
血、安神益智之功效［1-3］。人参中的皂苷为重要的活
性成分，对人参皂苷的测定方法，主要采用高效液相
色谱法，高效液相色谱-蒸发光散射检测发等［4-6］。本
文建立了检测参体和参须中人参皂苷［7-9］Rb1，Rb2 和
Rc含量的 LC-MS-MS 快速灵敏的方法，并对参体和
参须中这 3种成分进行了定量比较。
1 材料
1. 1 药物及试剂 Rb1，Rb2 和 Rc均购于中国药品
生物制品检定所，人参产地吉林，批号 0090410，由
中国中医科学院中药研究所何希荣主管药师鉴定为
五加科植物人参 Panax ginseng C． A． Mey． 的干燥
根。参体取人参除去芦头及参须的部分;参须取人
参的须状根。正丁醇(分析纯) ，乙腈(色谱纯) ，甲
酸(色谱纯)均购于北京迪科马科技有限公司。
1. 2 仪器 Agilent 6410 型 QQQ LC-MS 分析系统
(美国 Agilent RRLC 液相色谱仪;Agilent 6410 QQQ
三重四级杆质谱检测器;Masshunter 工作站) ，赛多
利斯 arium  61316 /611VF 型超纯水处理器，赛多
利斯 BT25S型分析天平，多功能提取罐。
2 方法
2. 1 色谱条件 Agilent ZORBAX C18 SB 色谱柱
(2. 1 mm ×50 mm，1. 8 μm) ，流动相 A. 水(0. 05%
FA)A，乙腈 B，(65∶ 35) ，梯度洗脱:0 ～ 3 min，65%
B;3 ～ 4 min，100% B，流速 0. 35 mL·min －1，柱温
40 ℃。
质谱条件:正离子模式，MRM，Rb1 m/z 1 131. 6→
365，Rb2 m/z 1 101. 7→ 335 和 Rc m/z 1 101. 6→
334. 8。利用以上色谱条件分析得到 Rb1，Rb2，Rc 的
混合对照品的总离子流图见图 1 和各自的提取离子
流图(EIC)及各成分在参体和参须中的见图 2 ～3。
图 1 人参 Rb1，Rb2 和 Rc对照品的 TIC
图 2 参体样品中 Rb1，Rb2 和 Rc的 TIC图
图 3 参须样品中 Rb1，Rb2 和 Rc的 TIC图
2. 2 供试品溶液的制备 参体，参须干燥后，粉碎，
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中国实验方剂学杂志
Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae
Vol． 19，No． 6
Mar．，2013
过 40 目筛。取参体粉末 0. 1 g(参须同操作) ，精密
称定，精密加人水饱和的正丁醇 5 mL，密塞，放置
过夜，超声(功率 250 W，频率 50 kHz)处理 30 min，
两次，合并滤液，精密量取滤液 0. 5 mL，氮气吹干，
残渣加甲醇 1 mL 超声溶解，0. 22 μm 微孔滤膜过
滤，即得。
2. 3 线性关系考察 精密称取 Rb1，Rb2，Rc 对照
品，Rb1 的质量浓度依次为 3. 0，6. 0，12，24，48，96，
192 μg·L －1;Rb2 的质量浓度分别为 1. 75，3. 5，7. 0，
14，28，56，112 μg·L －1，Rc 的质量浓度 1. 75，3. 5，
7. 0，14，28，56，112 μg·L －1。按 2. 1 的色谱条件进
样分析。以峰面积(Y)对浓度(X)进行回归处理得
到 Rb1、Rb2 和 Rc 的回归方程分别为 Y = 48. 382 8
X － 191. 549 0 (r = 0. 998 0) ，Y = 79. 655 3X －
259. 117 6(r =0. 998 8)和 Y = 78. 168 5X － 146. 992 9
(r = 0. 999 2) ，说明 Rb1，Rb2 和 Rc 分别在 3 ～ 192，
1. 75 ～ 112，1. 75 ～ 112 μg·L －1线性关系良好。
2. 4 精密度试验 按 2. 3 制得的对照品溶液连续
进样 6 次，记录各组分的峰面积，计算 6 次的标准偏
差(RSD) ，得到人参皂苷 Rb1，Rb2，Rc 峰面积的
RSD分别为 2. 6%，4. 4%，3. 0%。
2. 5 重复性试验 按 2. 2 平行制备 6 份样品，按
2. 1 的色谱条件进样分析，记录人参皂苷 Rb1，Rb2
和 Rc的峰面积，计算 6 份平行样品间的 RSD 分别
为 5. 9%，4. 7%和 5. 2%，表明方法重复性良好。
2. 6 方法回收率的考察 向甲醇中加入已知量的
Rb1，Rb2，Rc对照品，制成已知质量浓度的质控样品
(标示浓度) ，进行液相质谱分析。进样峰面积代入
标准曲线，由实测浓度与质控样品标示浓度之比为
方法回收率，以该值评价方法的准确性。
表 1 人参皂苷 Rb1、Rb2 和 Rc的方法回收率考察(n = 6)
对照品
标示浓度
/μg·L －1
方法回收率 /%
回收率
平均值
RSD /%
人参皂苷 Rb1 24 92. 6 91. 1 94. 9 90. 7 106. 1 89. 9 94. 2 6. 5
人参皂苷 Rb2 14 93. 4 101. 3 97. 1 98. 1 95. 1 90. 5 95. 9 3. 9
人参皂苷 Rc 14 101. 5 95. 3 102. 7 95. 4 101. 3 90. 2 97. 7 5. 0
2. 7 样品稳定性 将制备好的供试品溶液于 0，2，
4，6，8，10，12，24 h 进样分析，考察供试品溶液的稳
定性，考察表明供试品溶液在 24 h内稳定。
2. 8 按 2. 2 项下制备样品，测得参体和参须中人参
皂苷 Rb1，Rb2 和 Rc含量分别见表 2。
表 2 参体和参须中人参皂苷 Rb1、Rb2 和 Rc含量测定
/mg·g － 1
样品 Rb1 Rb2 Rc
参体 0. 11 0. 04 0. 02
参须 1. 12 0. 98 0. 59
3 讨论
考察了供试品制备的溶剂种类正丁醇和乙醇，
结果表明正丁醇提取效率较好;考察了超声时间
15，30 min，结果表明 30 min 提取较完全，最终确定
了供试品制备方法［7］。
本方法利用 LC-MS /MS方法对参体和参须中人
参皂苷 Rb1，Rb2 和 Rc进行了含量测定，在 4 min内
完成检测，色谱峰峰形对称，分离较好，比传统方法
快速、准确且灵敏，另外，从结果可以看出，参须中的
Rb1，Rb2，Rc都明显高于参体。
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［责任编辑 顾雪竹］
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闫寒，等:LC-MS-MS法测定参体和参须中人参皂苷 Rb1，Rb2 和 Rc含量