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香荚兰根腐病原茄类镰刀菌的生物学特性



全 文 :山 地农 业生 物学 报 25(6):506 ~ 509, 2006
Journal o f M oun ta in Agricu lture and B iology
香荚兰根腐病原茄类镰刀菌的生物学特性**
孔 琼 1 ,袁盛勇2 ,王云月 3 ,朱有勇3
(1. 红河学院 生物系 , 云南 蒙自 661100;
2. 红河学院 农学系 , 云南 蒙自 661100;3.云南农业大学 植保学院 , 云南昆明 650201)
摘 要:茄类镰刀菌 F usarium solani是香荚兰根腐病的主要病原菌之一 , 为对该病害进行有效的防治提供试验
数据 , 主要从温度 、pH值 、光照等条件对其菌落生长及孢子萌发的影响进行了研究。 结果表明 , 茄类镰刀菌在
8 ~ 36℃内菌丝能生长 ,分生孢子能萌发 , 且菌落生长和孢子萌发的最适温度均为 28℃, 菌落直径达 7. 39cm , 孢
子萌发率为 5. 51%;分生孢子致死温度为 58℃ 10m in;该菌可生长在 pH值为 2 ~ 12的酸碱范围内 , 菌落生长最
适 pH值为 6. 5, 菌落直径可达 6. 92cm ,孢子萌发最适 pH值为 4, 萌发率为 2. 98%;全光照对菌落生长有抑制作
用 , 光暗交替有利于菌落生长。
关键词:香荚兰;茄类镰刀菌;生物学特性
中图分类号:S682. 310. 1  文献标识码:A  文章编号:1008 -0457(2006)06 - 0506 -04
Study on b iolog ical properties ofFusarium solani on Vanilla root
KONG Q iong1 , YUAN Sheng-yong2 ,WANG Yun-yue3 , ZHU You-yong3(1. D epartm ent of B iology, HongheUniversity,
YunnanM engzi 661100, China;2. D epa rtm ent of Agronom y, HongheUn iversity, YunnanM engzi 661100, Ch ina;
3. College of P lan t P rotection , Yunnan Ag ricu ltura lU niversity, Yunnan Kunm ing 650201, Ch ina)
Abstract:The roo t-ro t w as an im po rtan t d isea se on Vanilla p lants, F usarium solan iw as one o f m a in pa thogens. In
o rde r to prov ide ba sic da ta of con tro lling th is disease, e ffec t o f tem pera ture, pH and ligh t on m yce lia grow th and
con id ia l g erm ination o fF usarium solani had prim arily been stud ied. The exper im ent show ed that be tw een 8 - 36℃,
the hyphae could g row and the conidia could ge rm ina te, the op tim um tem pe ra tu re w as 28℃, co lony diam e ter w a s
7. 39 cm average ly, ra te of conidia l ge rm ina tion w as 5. 51%;the le tha l tem pe ra tu re of spo res w as 58℃ for
10m inutes. Unde r the d ifferent pH va lue 2 - 12, the hyphae cou ld grow and the conidia could ge rm ina te, the opti-
m um pH va lue fo r hyphae g row th w as 6. 5 , co lony ave rage diam e te rw as 6. 92 cm , the op tim um pH fo r con id ia ge rm i-
na tion w as 4, ra te o f conidia l germ ina tion w as 2. 98%. The trea tm ent o fw ho le illum ina tion cou ld restra in the g row th
o f m yce lia, the a lte rnation o f darkness and light cou ld prom ote m yce lia grow th.
K ey words:Van illa;Fusa rium solan i;b io log ica l p roper ties
香荚兰 Vani lla plan ifolia又名香草兰 ,是兰科多年生热带香料植物 ,用途极广 [ 1] 。随着该香料植
物种植年限的延长和面积的扩大 ,由尖孢镰刀菌 Fusarium oxy sporum S ch l .f sp. van illae(Tucke r)G or-
don和茄类镰刀菌 Fusarium so lani(M ar.t )A pp. etW r混合侵染引起的根腐病严重阻碍香荚兰的大规
模生产 ,造成巨大的经济损失 [ 2] 。关于尖孢镰刀菌生物学特性研究已有报道 ,但对茄类镰刀菌研究
较少 ,因此为了进一步阐明根腐病的发病规律 ,笔者对温度 、 pH值 、光照对茄类镰刀菌的影响进行了
研究 ,为其病害的防治提供试验依据 。
* 收稿日期:2006 - 05 - 08;修回日期:2006 - 06 - 01
基金项目:云南省重点基金资助项目(97C 005Z)
作者简介:孔 琼(1976 -),女 ,云南宣威人 ,红河学院生物系讲师 ,硕士 ,主要从事植物组织培养及病虫害防治研究。
1 材料与方法
1. 1 材料
1. 1. 1 供试菌种 选取经单孢分离和致病性测定后的香荚兰根腐病原茄类镰刀菌 HN -6 -8为参试菌种[ 3] 。
1. 1. 2 培养基 试验中采用的培养基均为 PSA。
1. 2 方法
1. 2. 1 菌种制备 采用在 PSA培养基上生长 5d的菌种进行试验 ,每个培养皿内培养基量基本一致 (每
300mL倒 12个平皿)。
1. 2. 2 温度影响
1. 2. 2. 1 菌丝生长温度范围 在 PSA平板中间移入直径为 4mm的小菌块 ,在 4 ~ 40℃、梯度为 4℃的温
度下暗培养 ,每次处理 3皿 ,重复 3次 。 5d后测量菌落 2个相互垂直直径 ,取其平均值 。以同样方法测定
菌丝生长的最高温度和最低温度[ 4] 。
1. 2. 2. 2 孢子萌发温度 将菌种用灭菌蒸馏水制成孢子悬浮液 ,滴置于洁净凹面玻片上 ,在 4 ~ 40℃、梯
度为 4℃的温度下保湿暗培养 ,隔 15h随机取样镜检观察 [ 5] ,每个处理检查 10个视野 ,观察其孢子数 ,并
记录孢子萌发率 ,测定孢子萌发最高温度和最低温度 ,在处理 72h后进行镜检观察。
1. 2. 2. 3 孢子致死温度 将盛有孢子悬浮液的毛细管分别置于 45℃、50℃、55℃、60℃、65℃和 70℃的恒
温水浴中加热 10m in,取出管内菌液注入凹面玻片上 ,于 27℃下保湿暗培养 7d,每天观察孢子萌发情况 。
根据得出的结果 ,再采用相同方法 ,将孢子悬浮液分别置于更小温度间隔下进行测定。上述处理各设置
3个重复 。
1. 2. 3 pH值的影响
1. 2. 3. 1 菌丝生长 pH值 将培养基 pH值分别调至 2 ~ 12,灭菌后接入菌种 , 27℃恒温暗培养 5d,测量
菌落 2个相互垂直直径 ,取其平均值 。 pH值采用精密试纸进行测定 ,且灭菌后的培养基 pH值下降 0.5。
1. 2. 3. 2 孢子萌发 pH值范围 将灭菌蒸馏水 pH值调至 2 ~ 12 ,然后将孢子移入不同 pH值蒸馏水水滴
中 ,在 27℃下保湿暗培养 ,隔 15h随机取样镜检观察 ,每个处理 (同上 )检查 10个视野 ,观察其孢子数 ,并
记录孢子萌发率 。
1. 2. 4 光照对茄类镰刀菌生长的影响 在 PSA平板中间移入直径为 4mm的小菌块 ,于 27℃培养 5d后 ,
测量菌落 2个相互垂直直径 ,取其平均值 。采用 3种处理:全程暗处理;光暗交替 , 12h光照 , 12h黑暗;全
程光照 。
2 结果与分析
2. 1 温度对菌丝生长和孢子萌发的影响
从图 1中看出 ,在 8 ~ 36℃范围内 ,茄类镰刀菌菌丝和分生孢子均能生长和萌发 ,温度对二者的影
响基本是一致的 。经保湿培养后 ,分生孢子萌发最高温度和最低温度分别是 36℃和 5℃,且在 20 ~
28℃,萌发率随着温度的增加而增高 ,最适温度为 28℃,萌发率为 5. 51%;其次是 24℃, 萌发率为
4. 51%。在 20 ~ 32℃菌丝生长最快 ,温度对菌丝生长有明显的促进作用 ,最适生长温度是 28℃, 5d时
菌落平均直径为 7.39cm;其次是 20℃和 24℃, 5d时菌落平均直径分别为 5. 19cm和 5. 45 cm ,但温度过
高或过低对菌丝生长有抑制作用。在 4℃低温和 39℃高温下菌丝仍有生长迹象 ,但菌落没有扩展 ,因
此茄类镰刀菌生长的最高温度和最低温度分别是 39℃和 4℃。本结果与寄主生长条件和病害发病盛
期的环境气温相一致 。
507第 6期  孔 琼 ,等:香荚兰根腐病原茄类镰刀菌的生物学特性
图 1 温度对菌丝生长和孢子萌发的影响
F ig. 1 E ffect o f temperatu re on the mycelium and conid ia l germ ination ofFusarium solani
2. 2 分生孢子致死温度
分生孢子分别经 45℃、50℃、55℃、60℃、65℃和 70℃的恒温水浴处理后 ,结果表明 ,在 45℃、50℃和
55℃处理下的分生孢子都能萌发 ,其它温度处理的均不能萌发 。然后将分生孢子分别置于 56 ~ 59℃的恒
温水浴处理 (温度梯度为 1℃),则 58℃是分生孢子的致死温度 。
2. 3 pH值对菌丝生长和分生孢子萌发的影响
从图 2看出 ,在 PSA培养基上 ,茄类镰刀菌在 pH值为 2 ~ 12菌落能生长 ,分生孢子也能萌发 。菌丝
适宜生长的 pH值为 6 ~ 11,最适生长 pH值是 7(实际上是 6. 5,因灭菌后 PSA培养基的 pH值下降 0. 5),
菌落平均直径为 6. 92 cm;其次是 pH值 8和 pH值 9, 菌落平均直径分别为 6. 58cm和 6. 37cm ,并且基物
颜色随着 pH值变化而变化 , pH值升高 ,颜色由深至浅 ,反之 ,则由浅至深。分生孢子在 pH值 4时萌发率
最高 ,达 2. 98%;其次是 pH值 3、pH值 5、pH值 6 ,萌发率分别为 2. 19%、2. 16%、2. 02%,这是因此 pH值
为 3 ~ 6是分生孢子萌发的适宜酸度范围 ,且酸性环境有利于分生孢子的萌发 。
图 2 pH值对菌丝生长和孢子萌发的影响
F ig. 2 Effect o f d iffe rent pH value on them yce lium and conidial germ ina tion
508 山 地 农 业 生 物 学 报  2006年
2. 4 不同光照处理对菌落生长的影响
通过全光照 、光暗交替及暗培养处理后 ,培养 5d后的菌落平均直径分别为 6. 4cm、7. 0cm、6. 6cm ,表
明有无光照对菌落的生长速度影响不明显 ,但从总体看 ,全光照对菌丝生长有抑制作用 ,光暗交替有利于
菌丝的生长 。
3 讨 论
试验结果表明 ,茄类镰刀菌生长的温度为 8 ~ 36℃,最适生长温度为 28℃;孢子萌发的最高温度和最
低温度分别是 4℃和 39℃ ,最适温度是 28℃,并且在 12 ~ 28℃茄类镰刀菌菌丝和孢子萌发随温度递增而
菌丝生长加快 ,孢子萌发率也随之增加;孢子致死温度为 58℃、10m in;在 pH值为 2 ~ 12的条件下 ,菌丝能
够生长 ,孢子能萌发 ,菌丝最适生长 pH值为 6. 5,分生孢子最适萌发 pH值为 4。该研究结果与黄伙平 [ 6]
关于香荚兰根腐病田间发病流行规律报道相一致 ,即该病害多发生于高温多雨的夏季。从香荚兰尖孢镰
刀菌和茄类镰刀菌的生物学特性有关数据比较可看出 [ 7 - 8] ,茄类镰刀菌与香荚兰尖孢镰刀菌一样适应性
强 ,生长和存活的温度及酸碱范围较大 ,且高温和酸性环境有利于菌丝生长和分生孢子的萌发 ,但 pH值
高于 5或温度高于 32℃时对茄类镰刀菌菌丝生长有抑制作用。由于该病害是一种累积性土传病害 ,结合
香荚兰喜高温 、高湿 、酸性土壤的生长习性和多年生植物的特性 ,香荚兰根腐病的防治主要是以预防为主 ,
因此夏季来临之前应加强种植园地的管理 ,及时修剪病枝 、残株;增施有机肥 、磷素 、钙素使植株生长健壮;
或增施石灰 [ 9] ,石灰不仅能调节土壤 pH值 ,还可加强香荚兰对氮 、磷 、钾 、钙 、镁的吸收而利于生长 ,增强
植株抗病的能力 ,减少病菌积累和侵染机会。虽然选育抗病品种是防治香荚兰根腐病的行之有效的方法 ,
但我国抗病育种工作进展较缓 ,所以化学防治仍是防治该病的主要措施之一 ,因此 ,笔者下一步将为香荚
兰根腐病的田间化学防治进行室内药剂筛选试验。
参 考 文 献:
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[ 2] ALCONERO R, SANTIAGO A G. Fusa ria pa thogenic to Vanilla[ J] . P lant D is Rep, 1969, 53(11):854 - 857.
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[ 4] 方中达. 植病研究方法 [M ] .北京:中国农业出版社 , 1996:141 -143.
[ 5] 赖传雅 ,赖传碧 ,曾凡凯, 等. 茶扦插苗根腐性苗枯病菌腐皮镰孢生物学特性研究 [ J] .植物病理学报 , 2002, 32(1):79 -83.
[ 6] 黄伙平. 香荚兰根腐病的研究Ⅱ ———病害发生规律 [ J] .亚热带植物通讯 , 1987, 16(1):21 -25.
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