全 文 ：华西药学杂志
W C J·P S 2014，29(3)∶262 ～ 265
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262．
收稿日期:2013 － 06 － 06
基金项目:四川省食品药品监督管理局《四川省藏药材标准》(2013 版)标准研究课题
作者简介:吴恋(1989 —) ，女，正攻读药物分析专业的硕士学位。Email:wulian0726@ sina． com
* 通信作者(correspondent author) ，Email:wanli8801@ 163． com
大车前草与车前草的有效成分比较
吴 恋，吕 维，王春艳，江道峰，范成杰，万 丽*
(成都中医药大学药学院 教育部中药材标准化重点实验室 中药资源系统研究与开发利用省部共建国家重点实验室培育基
地，四川 成都 611137)
摘要:目的 比较大车前草及车前草中大车前苷、总黄酮的含量差异。方法 采用 HPLC 法测定大车前苷，色谱柱为 Dikma
Diamonsil C18(250 mm × 4． 6 mm，5 μm) ，流动相为乙腈 － 0． 1%磷酸(18∶82) ，流速 1 mL·min
－1，检测波长 330 nm，柱温
30 ℃。以 70%乙醇为提取溶剂，以木犀草素为对照品;采用紫外 －可见分光光度法测定总黄酮。结果 大车前苷 0． 09 ～
11. 22 μg与峰面积呈线性(r = 0． 999) ，加样回收率为 100． 64%(ＲSD = 0. 95%) ，测得 4 批大车前草中大车前苷的含量为
0. 09% ～ 1． 36%，6 批车前草中大车前苷的含量为 0． 14% ～ 2． 40%。总黄酮 4． 248 ～ 50． 976 μg·mL －1与吸光度呈线性(r =
0. 999) ，加样回收率为 100． 13%(ＲSD = 1． 55%) ，测得 4 批大车前草中总黄酮含量为 1． 03% ～ 4． 86%，6 批车前草中总黄酮的
含量为 1． 31% ～ 4. 98%。结论 两种车前草中大车前苷的含量有一定差异，总黄酮含量较高且差异不大，这可能是导致其药
效差异的物质基础。
关键词:大车前草;车前草;大车前苷;总黄酮;含量测定
中图分类号:Ｒ28，Ｒ917 文献标志码:A 文章编号:1006 － 0103(2014)03 － 0262 － 04
DOI:10． 13375 / j． cnki． wcjps． 2014． 03． 011
Comparison of effective constituents between Plantago major and Plantago asiatica
WU Lian，L Wei，WANG Chun － yan，JIANG Dao － feng，FAN Cheng － jie，WAN Li*
(School of Pharmacy，Chengdu University of TCM，Ministry of Education Key Laboratory of Standardization of Chinese Herbal Medicine，
State Key Laboratory Breeding Base of Systematic Ｒesearch，Development and Utilization of Chinese Medicine Ｒesources，Chengdu，
Sichuan，611137 P． Ｒ． China)
Abstract:OBJECTIVE To compare the content of plantamajoside and total flavanone in Plantago major L． and Plantago asiatica
L．METHODS An HPLC method was established to determine the content of plantamajoside． Plantamajoside was separated at 30 ℃
on a Dikma Diamonsil C18(250 mm × 4． 6 mm，5 μm)column with acetonitrile － 0． 1% phosphoric acid(18∶82)as the mobile
phase． The detection wavelength was set at 330 nm and the flow rate was 1 mL·min －1 ． With 70% ethanol as the extraction solvent and
luteolin as the reference substance，the total flavanone was determined by the ultraviolet spectrophotometry． ＲESULTS In the HPLC
determination，good linearity of the calibration curve between the peak area and the concentration of plantamajoside was obtained in the
range of 0． 09 － 11． 22 μg(r = 0． 999) ，and the average recovery of plantamajoside was 100． 64% with ＲSD of 0． 95% ． The contents of
plantamajoside were in the range of 0． 09% － 1． 36% in 4 batches of Plantago major L． while 0． 14% － 2． 40% in 6 batches of Planta-
go asiatica L． In the ultraviolet spectrophotometry determination，good linearity of the calibration curve between the absorbency and the
concentration of total flavanone was obtained in the range of 4． 248 － 50． 976μg·mL －1(r = 0． 999) ，and the average recovery of total
flavanone was 100． 13% with a ＲSD of 1． 55% ． The contents of total flavanone were in the range of 1． 03% － 4． 86% in the Plantago
major L． while 1． 31% － 4． 98% in Plantago asiatica L． CONCLUSION The content of plantamajoside in the two samples are differ-
ent while the content of total flavanone are similar，it may be the reason of the different pharmacodynamics activities and can be further
developed and used．
Key words:Plantago major L．;Plantago asiatica L．;Plantamajoside;Total flavanone;Content assay
CLC number:Ｒ28，Ｒ917 Document code:A Article ID:1006 － 0103(2014)03 － 0262 － 04
大车前草 Plantago major L．为传统藏药，味苦、
涩，功效止热泄［1］。车前草 Plantago asiatica L．为传
统中药，味甘，具清热利尿通淋、祛痰、凉血、解毒的
功效。两者虽分别入药，但在中国的市场和临床应
用中存在混用、共用现象［2］。在药理作用方面，两
者都具有祛痰、镇咳、利尿、缓泻等功效［3］。大车前
草更多用于止热泄，车前草更多用于治疗淋症涩痛，
水肿尿少。在化学成分方面，两者都具有黄酮类、苯
乙醇苷类、环烯醚萜类及三萜与甾醇类等成分［4］。
大车前草与车前草中的苯乙醇苷类化合物大车前苷
具有抑制糖基终产物形成、抗氧化、抗炎、解痉等作
用［5］，且为车前草质量控制的指标成分［6］;黄酮及
其苷类化合物对呼吸系统有着明显的作用，为两种
车前草镇咳的主要成分，总黄酮类物质是其镇咳抗
炎活性的主要物质基础［7］。现以大车前苷、总黄酮
含量为评价指标，对大车前草及车前草进行比较，为
指导临床用药提供合理的实验依据。
1 实验部分
1． 1 仪器与试药
Aglient 1200 型高效液相色谱仪(安捷伦公
司) ;UV1100 紫外分光光度计(上海天美科学仪器
有限公司)。4 批次大车前草药材及 6 批次车前草
药材采集于不同产地，经成都中医药大学标本中心
卢先明教授鉴定为车前科植物大车前 Plantago
major L．(Dcq)及车前科植物车前 Plantago asiatica
L．(Cq) ;大车前苷(plantamajoside，批号:111914 －
201102)、木 犀 草 素 (luteolin，批 号:111520 －
200504)对照品(中国食品药品检定研究院) ;乙腈
为色谱纯;水为超纯水;其余试剂为分析纯。
1． 2 大车前苷的含量测定
1． 2． 1 色谱条件 采用 Dikma Diamonsil C18色谱柱
(250 mm ×4． 6 mm，5 μm) ，流动相为乙腈 － 0． 1%
磷酸(18∶82) ，流速 1 mL·min －1，检测波长 330 nm，
柱温 30 ℃，进样量 10 μL。理论板数以大车前苷峰
计≥3 × 103，大车前苷与相邻组分色谱峰的分离
度 ＞ 1． 5，达到完全分离。该色谱条件下的对照品与
供试品色谱图见图 1。
1. 2. 2 溶液的制备 称取大车前苷对照品适量，
加 60%甲醇制成 1． 12 mg·mL －1的对照品贮备液。
取大车前草或车前草药材粉末(过 2 号筛)约0． 5 g，
精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入 60% 甲醇
25 mL，密塞，称定重量，超声处理(150 W、40 kHz)
30 min，取出，放冷，再称定重量，用 60%甲醇补足
减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得供试品
溶液。
0 5 10 15 20 0 5 10 15 20 0 5 10 15 20
pl
an
ta
m
aj
os
id
e
pl
an
ta
m
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pl
an
ta
m
aj
os
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A B C
t/min
图 1 大车前苷对照品(A)、大车前草药材(B)和车前草药材(C)溶液的 HPLC图
Figure 1 HPLC chromatograms of plantamajoside reference solution(A)，Plantago major solution(B)and Plantago asiatica solution(C)
362第 3 期 吴 恋，等。大车前草与车前草的有效成分比较
1． 2． 3 线性关系的考察 分别量取适量对照品贮
备液，加入 60%甲醇稀释为 0． 009、0． 018、0． 056、
0. 113、0． 281、0． 561、1． 122 mg·mL －1的对照品溶
液，按“1. 2. 1”项色谱条件分别测定，以峰面积(Y)
对质量(X)进行回归分析，得回归方程为:Y =
1. 636 × 103X + 130. 0(r = 0． 999) ，大车前苷 0． 09 ～
11． 22 μg与峰面积有良好的线性关系。
1． 2． 4 精密度试验 取 0． 113 mg·mL －1大车前苷
对照品溶液，按“1. 2. 1”项色谱条件连续进样 6 次，
测定峰面积。计算得平均峰面积的ＲSD = 0． 65%，
表明精密度良好。
1． 2． 5 重复性试验 取同一批大车前草粉末(过 2
号筛) ，平行制备 6 份供试品溶液，进样，测定峰面
积，计算大车前苷的平均含量为 0． 19%，ＲSD =
1. 74%，表明该方法的重复性良好。
1． 2． 6 稳定性试验 取大车前草粉末(过 2 号
筛) ，制备供试品溶液，分别在 0、2、4、8、12、24 h 时
进样测定，计算其峰面积的 ＲSD = 1． 29%，表明该样
品溶液在 24 h内稳定。
1． 2． 7 加样回收率试验 精密称取已知含量的大
车前草药材粗粉约 0． 25 g，共 6 份，按含量的 1∶1
加入对照品，按“1. 2. 2”项下方法制备溶液并测定、
计算回收率(表 1)。
表 1 大车前苷的加样回收率试验结果(mg，n =6)
Table 1 Ｒesults of plantamajoside recovery test(mg，n =6)
Original Added Detected Ｒecovery /% 珔X /% ＲSD /%
0． 464 0． 452 0． 923 101． 63 100． 64 0． 95
0． 465 0． 452 0． 917 100． 10
0． 463 0． 452 0． 921 101． 40
0． 466 0． 452 0． 915 99． 33
0． 465 0． 452 0． 917 99． 98
0． 464 0． 452 0． 922 101． 37
1． 2． 8 样品的测定 取各产地大车前草及车前草
药材粉末 0． 5 g，精密称定，制备供试品溶液，分别精
密吸取对照品溶液与供试品溶液各 10 μL ，按
“1. 2. 1”项色谱条件测定，采用外标一点法计算样
品中大车前苷的含量。4 批大车前草和 6 批车前草
中大车前苷的含量分别为 0． 09%、0． 19%、1． 36%、
0. 65%、0． 40%、0． 14%、0． 32%、1． 75%、2． 40%、
1. 25%。
1． 3 总黄酮的含量测定
1． 3． 1 溶液的制备 称取木犀草素对照品 5． 31
mg于 25 mL棕色量瓶中，加 70%乙醇适量，超声使
溶解，放冷，加 70%乙醇定容，得 0． 2124 mg·mL －1的
对照品溶液。称取大车前草或车前草药材粉末(过
2 号筛)1 g，精密称定，加 70%乙醇 50 mL，回流提取
1 h，放冷，滤过，滤液置 100 mL棕色量瓶中，用 70%
乙醇冲洗药渣至净，加 70%乙醇定容，混匀，即得供
试品溶液。
1． 3． 2 测定波长的选择 分别吸取对照品、供试品
溶液适量，置 25 mL棕色量瓶中，加 70%乙醇定容。
以 70%乙醇为空白，在 300 ～ 600 nm 扫描，510 nm
处均无吸收峰。
分别取对照品溶液、供试品溶液适量置 25 mL
棕色量瓶中，加 70%乙醇至 6 mL，加 5%亚硝酸钠
溶液 1 mL，混匀，放置 6 min，加 10%硝酸铝溶液
1 mL，摇匀，放置 6 min，加 1 mol·L －1氢氧化钠试液
10 mL，再加 70%乙醇至刻度，摇匀，放置 15 min，以
相应试剂为空白，在 400 ～ 600 nm 扫描，约 510 nm
处对照品、供试品溶液出现最大吸收峰，故确定本次
实验的测定波长为 510 nm。
1． 3． 3 标准曲线的制备 精密量取 0． 5、1、2、3、4、
5、6 mL对照品溶液，分别置 25 mL 棕色量瓶中，加
70%乙醇至 6 mL，加 5%亚硝酸钠溶液 1 mL，混匀，
放置 6 min，加 10%硝酸铝溶液 1 mL，混匀，放置
6 min，加 1 mol·L －1氢氧化钠试液 10 mL，再加 70%
乙醇至刻度，放置 15 min;以相应的试剂为空白，在
510 nm处测定吸光度。以吸光度为纵坐标、对照品
浓度为横坐标，绘制标准曲线，得回归方程为:Y =
0． 0222X + 6． 6 × 10 －3 (r = 0． 999) ，木犀草素
4． 248 ～ 50． 976 μg·mL －1与吸光度线性关系良好。
1． 3． 4 精密度试验 取对照品溶液 3 mL，置 25 mL
棕色量瓶中，照“1． 3． 3”项下方法，自“加 70%乙醇
至 6 mL”起，依法测定吸光度，同份显色样品连续测
定 6 次，计算 ＲSD = 0． 16%，显示精密度良好。
1． 3． 5 重复性试验 取同一批大车前草粉末(过 2
号筛) ，精密称取 1 g，共 6 份，照“1． 3． 1”项下方法
制备供试品溶液，取供试品溶液适量，置 25 mL棕色
容量瓶中，照“1． 3． 3”项下方法，自“加 70%乙醇至
6 mL”起，测定吸光度，通过标准曲线求得总黄酮含
量分别为 20． 31、19． 35、20． 05、20． 13、19． 19、19. 68
mg·g －1，平均 19． 79 mg·g －1，ＲSD = 2． 28%，表明重
复性良好。
1． 3． 6 稳定性试验 取大车前草供试品溶液适量，
置 25 mL棕色量瓶中，照“1． 3． 3”项下方法，自“加
70%乙醇至 6 mL”起，测定吸光度。在室温下分别
放置 0、15、30、60 min 后连续测定，计算得测定的
ＲSD = 2． 60%，表明样品在 60 min内基本稳定。
1． 3． 7 加样回收率试验 精密称取已知含量的大
车前草粉末 0． 5 g，共 6 份，按 1∶1 加入对照品，照
“1． 3． 3”项下方法制备供试品溶液，取供试品溶液
适量，置 25 mL 棕色量瓶中，照“1． 3． 3”项下方法，
自“加 70%乙醇至 6 mL”起，测定吸光度，计算回收
462 华 西 药 学 杂 志 第 29 卷
率(表 2)。
表 2 木犀草素加样回收率的试验结果(mg，n =6)
Table 2 Ｒesults of luteolin recovery test(mg，n =6)
Original Added Detected Ｒecovery /% 珔X /% ＲSD /%
0． 300 0． 319 0． 616 99． 18 100． 13 1． 55
0． 298 0． 319 0． 621 101． 38
0． 297 0． 319 0． 619 101． 07
0． 298 0． 319 0． 623 102． 01
0． 298 0． 319 0． 613 98． 87
0． 298 0． 319 0． 611 98． 24
1． 3． 8 样品的测定 取大车前草或车前草粉末约
1 g，精密称定，照“1． 3． 1”项下方法制备供试品溶
液，取供试品溶液适量，置 25 mL 棕色量瓶中，照
“1． 3． 3“项下方法，自“加 70%乙醇至 6 mL”起，测
定吸光度。计算得大车前草中总黄酮的含量分别为
1. 62%、1． 03%、4． 86%、2． 00%(n = 3) ，车前草中
总黄酮的含量为 1． 99%、1． 31%、2． 01%、4． 98%、
3． 52%、3． 57%(n = 3)。
2 讨论
通过定量分析，不同产地的大车前草和车前草
中大车前苷的含量分别为 0． 09% ～ 1． 36%、
0． 14% ～ 2． 40%。在同种药材中比较，大车前苷的
含量差异较大，与文献相符［8］。在不同种药材间比
较，车前草中大车前苷的平均含量高于大车前草，可
能是由于不同种植物化学成分的差异所导致。以大
车前苷含量为评价指标，车前草的质量较优。大车
前草及车前草中的总黄酮测定大多采用芦丁作为对
照品［9 － 11］。但大车前草、车前草中所含的黄酮类物
质大部分为木犀草素、6 －羟基木犀草素、木犀草苷、
车前黄酮苷［4］，不含芦丁。文中首次采用木犀草素
作为对照品，利用亚硝酸钠 －硝酸铝 －氢氧化钠体
系的分光光度法测定，能更准确地反应大车前草及
车前草中总黄酮的含量。大车前草、车前草中总黄
酮的含量分别为 1. 03% ～ 4． 86%、1． 31% ～
4. 98%，表明大车前草与车前草在总黄酮含量上差
异不大。
大车前草和车前草药材均全年可采，并以全草
入药。在历来的文献报道中，并未见对其生长期及
用药部位的研究。可进一步对不同生长时期、药材
不同部位进行研究，以确定两者的最佳采收时期及
药用部位，以便更加合理地开发利用。
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