全 文 :第 17卷 第 4 期 云南农业大学学报 Vol.17 No.4
2002年 12 月 Journal of Yunnan Agricultural University Dec.2002
不同激素浓度对香荚兰组织培养的影响
Effect of Different Auximone Concentrations on
Tissue Culture of Vanilla planifolia Andr
王云月 , 丁正岗 , 廖 斌 , 杨 静 , 孔 琼
(云南农业大学 ,云南省植物病理重点实验室 , 云南 昆明 650201)
中图分类号:Q 943.1 文章编号:1004-390X(2002)04-0414-02
香荚兰(Vanilla planifolia Andr.)又名香子兰 、
香果兰 、香草兰 ,分布在南 、北纬 15°~ 20°之间 ,海
拔 700 m 以下地带。香荚兰原产于墨西哥东南部
和中美洲的热带雨林中 ,主要分布在马达加斯加 、
印尼 、科摩罗。中国主要分布在海南 、云南和福建 。
香荚兰是名贵的天然食品香料 ,经发酵生香的香荚
兰制成的浸剂[主要成分香兰素(3-甲氧基-4羟
基苯甲醛)] ,是食品工业的重要香料 ,也用于烟 、
酒 、茶 、化妆品 、医药等的加香上。我国从 20世纪
60年代初到 70年代末开始引种试种研究 ,到 1994
年以后规模种植 ,但由于香荚兰生长地域有限 、生
长发育迟缓 、自花授粉不结实 、人工授粉工序繁杂 、
产量低等原因 ,造成天然香荚兰产品严重匮乏 。因
此 ,利用香荚兰组织培养快速繁殖提供种植材料满
足市场需求很有必要 。本文探讨香荚兰的组织培
养在什么样的激素浓度组合下更有利于其生长 ,以
达到快速繁殖的目的 。
1 材料和方法
1.1 材料
试管苗为中国科学院昆明植物研究所提供。
1.2 培养基
以MS 培养基(配方为:配制每升培养基用琼
脂6.5 g ,蔗糖 30 g ,大量元素 100mL ,Fe2+盐 5 mL ,
微量元素 1mL ,维生素 1 mL)作为继代培养的基本
培养基 ,加入不同配比的激素 ,分装于三角瓶中 ,
121 ℃(1.1 kg/cm2压力)灭菌 15min备用 。
1.3 方法
4种培养基的配方为:(1)MS+0.25 mg/L 6-BA
+0.1 mg/L IAA , (2)MS +0.125 mg/L 6-BA +0.1
mg/L IAA , (3)MS +0.25 mg/L 6-BA +0.05 mg/L
IAA ,(4)MS +0.5 mg/L 6-BA+0.05mg/L IAA 等 4
个处理浓度 ,用来测验不同激素浓度组合对香荚兰
的芽生长 、根生长及发根条数的影响。在超净工作
台上将香荚兰试管苗取出 ,切取长度约为 2 cm 的
幼芽或幼茎(至少带一个腋芽),分别插入配有不同
激素浓度的培养基上进行培养。
1.4 培养条件
在人工气候箱中培养 ,以日光灯为光源 ,光照
强度 2 000 lx ,光周期以 12 h/d ,温度(28±1)℃,相
对湿度为 90%.
1.5 统计分析方法
单因素随机区组试验结果的方差分析法 ,首先
用 F测验来测验 4个处理浓度对香荚兰芽生长 、根
生长及发根条数是否有显著差异 ,如果有显著差
异 ,再用 LSR测验法测验各处理浓度彼此对香荚
兰芽生长 、根生长及发根条数是否也有显著差异 。
收稿日期:2002-05-08
基金项目:云南省应用基础研究重点基金资助项目(97C005Z)
作者简介:王云月(1962-), 女 ,云南昆明人 ,硕士 , 教授 ,主要从事生物多样性与病害控制 、植物真菌病害及分子监
测和生物防治。
DOI :10.16211/j.issn.1004-390x(n).2002.04.035
2 结果与分析
2.1 不同激素浓度组合对香荚兰继代培养生长
的影响
试验以 MS培养基为基本培养基进行 4个浓
度组合处理时 ,每个处理接种 30 瓶 ,每 10瓶为 1
重复 ,每瓶接种 1个外植体 。接种 6周后进行统计
各外植体在不同激素浓度组合下的生长情况 。
4个不同激素浓度组合的处理间彼此达到了
极显著水平 。由此可以得出这 4个激素浓度组合
分别对香荚兰继代培养促芽生长的作用是不同的 。
激素浓度组合MS+0.25mg/L 6-BA+0.1mg/L IAA
促进芽生长的平均长度为 4.0 cm ,激素浓度组合
MS+0.125mg/L 6-BA+0.1 mg/L IAA 促进芽生长
的平均长度为 3.2 cm ,激素浓度组合MS+0.25mg/
L 6-BA+0.05 mg/L IAA促进芽生长的平均长度为
4.6 cm ,激素浓度组合 MS+0.5 mg/L 6-BA+0.05
mg/L IAA 促进芽生长的平均长度为 6.2 cm.从结
果分析得出:比较有利于促进香荚兰继代培养芽生
长的激素浓度组合是 0.5 mg/L 6-BA+0.05 mg/L
IAA.
2.1.2 不同激素浓度组合对香荚兰继代培养根
生长的影响情况
4个激素浓度组合分别对香荚兰继代培养促
进根生长的作用是不同的。激素浓度组合 MS+
0.25mg/L 6-BA+0.1mg/L IAA促进根生长的平均
长度为 3.0 cm , 激素浓度组合 MS +0.125 mg/L
6-BA+0.1 mg/L IAA 促进根生长的平均长度为
3.6 cm ,激素浓度组合 MS +0.25mg/L 6-BA+0.05
mg/L IAA 促进根生长的平均长度为 2.6 cm ,激素
浓度组合 MS+0.5mg/L 6-BA+0.05 mg/L IAA促
进根生长的平均长度为 1.0 cm.从结果分析得出:
比较有利于促进香荚兰继代培养根生长的激素浓
度组合是:0.125mg/L 6-BA+0.1 mg/L IAA.
2.1.3 不同激素浓度组合对香荚兰继代培养发
根的影响情况
4个激素浓度组合分别对香荚兰发根条数的
作用是不同的。激素浓度组合 MS +0.25 mg/L
6-BA+0.1 mg/L IAA 促进发根的平均条数为 3.4
条 ,激素浓度组合 MS+0.125mg/L 6-BA+0.1 mg/
L IAA促进发根的平均条数为 4.0 ,激素浓度组合
MS+0.25mg/L 6-BA+0.05 mg/L IAA促进发根的
平均条数为 2.6条 ,激素浓度组合 MS +0.5 mg/L
6-BA+0.05mg/L IAA促进发根的平均条数为 2.4
条。从结果分析得出:比较有利于促进香荚兰继代
培养发根的激素浓度组合是:0.125 mg/L 6-BA +
0.1 mg/L IAA.
3 讨论
植物体内同时存在数种植物激素 ,它们之间可
相互促进增效 ,也可以相互颉抗抵消。在植物生长
发育过程中 ,任何一种生理过程往往不是某一激素
的单独作用 ,而是多种激素相互作用的结果 。例
如:IAA 促进细胞核的分裂 ,而 CTK 促进细胞质的
分裂 ,二者共同作用 ,从而完成细胞核与细胞质的
分裂;生长素抑制侧芽萌发 ,维持植株的顶端优势 ,
而细胞分裂素却可消除顶端优势 ,促进侧芽生长 ,
这就是一个很好的激素间的增效作用与颉抗作用
的例子。在组织培养中 IAA 常用于器官与组织分
化 ,但它的作用还决定于植物中细胞分裂素浓度的
高低 。因为 ,当CTK/ IAA的比例高时 ,有利于愈伤
组织分化出芽 ,比例低时 ,有利于分化出根 ,比例中
间水平时愈伤组织只生长而不分化 ,只有比例适宜
时愈伤组织才既分化出根又分化出芽。本试验所
用的两种激素是生长素 IAA 与细胞分裂素中的
6-BA(6-苄基腺嘌呤)。试验得出激素浓度组合
0.5mg/L 6-BA+0.05mg/L IAA表现为有利于促进
芽生长 ,激素浓度组合 0.125mg/L 6-BA+0.1mg/L
IAA表现为有利于促进发根和根的生长 ,与上述激
素对植物的生长调节理论相符合 。综合以上的研
究结果 ,并不是激素浓度越高越好 ,而是只有当激
素CTK与 IAA 的比例适中时 ,才能达到促进香荚
兰芽生长 、促根生长及发根的最佳效果 。
415第 4期 王云月 ,等:不同激素浓度对香荚兰组织培养的影响