全 文 ：蛋白酶活性影响的研究.生物磁学 , 2004;4(3):3-5
6　马晓松 ,樊雪萍等.白术对动物胃肠运动的作用及其机
制探讨.中华消化杂志 , 1996;16(5):261-264
7　高丽松 ,曾凡潘 , 黄舒微等.磁处理白术药液对消化功能
影响的药效研究.生物磁学 , 2004;4(2):4-6
8　王红梅 ,马玲等.小鼠廓清实验方法的比较.中国食品卫
生杂志 , 2000;12(3):3-5
9　薛彬.免疫毒理学实验技术.北京:北京医科大学 、中国
协和医科大学联合出版社 , 1996:49-50
10　上海医学化验所主编.临床免疫学检验.上海:上海科
技出版社 , 1983:124-126
11　刘振英 ,戴祖玉 ,周娥月等.磁水对小鼠固定巨噬细胞
碳粒廓清功能的影响.兰州医学院学报 , 1987;2:16-18
12　郑天珍 ,李伟 ,张英福等.党参对动物小肠推进运动的
实验研究.甘肃中医学院学报 , 2001;18(1):19-20
13　李绍芝 ,谭晓红.党参对小肠血流量和耗氧量的影响.
中国中药杂志 , 1999;24(5):299-302
(收稿日期 2004-10-14)
不同生长调节剂对狗肝菜愈伤组织
诱导和离体快繁的影响
广东教育学院生物系　(510303)　龚玉莲　李瑜丹　柯少娥　吴凤如
摘要　目的:研究不同生长调节剂对狗肝菜愈伤组织诱导和离体快繁的影响。方法:狗肝菜不同外植
体在附加不同生长调节剂的培养基上诱导愈伤组织 ,比较愈伤组织的诱导率;用 3因子 5水平的正交实
验 ,比较不同生长调节剂对丛生芽诱导的影响;在附加不同生长调节剂的培养基上比较芽增殖倍数;附加
不同浓度NAA的培养基上比较生根效果 。结果:愈伤组织诱导率相对以叶片最高 ,茎段次之 ,最后为叶
柄;愈伤组织诱导的最佳培养基为MS+6-BA0.5+NAA1.5;不同激素对茎段芽诱导的影响次序为 6-BA
>KT>NAA ,芽诱导的最佳培养基为 MS +6-BA2mg/L+KT1mg/L+NAA0.5mg/L;芽继代增殖的最佳激
素组合是MS +6-BA2mg/L +NAA2mg/L , 增殖倍数达 3.00 , 影响芽继代增殖的因素次序为 6-BA >
NAANAA0.5 mg/L 的生根效果较好。结论:附加一定的生长调节剂能提高狗肝菜愈伤组织的诱导率和离
体快繁的效率。
关键词:狗肝菜;生长调节剂;愈伤组织;离体快繁
Effect of different growth regulators on callus induction and in vitro
rapid propagation of Dicliptera chinensis(L.)Nees
GONGYu-lian , LI Yu-dan , KE Shao-e , et al
Department of Biology , Guangdong Education Institute , Guangzhou 510303
ABSTRACT Objetive:The effects of different growth regulators on callus induction and in vitro rapid propaga-
tion of Dicliptera chinensis(L.)Nees were studied.Methods:Different explants were tested for callus induction;
and callus induction , bud induction , bud multiplication and rooting were studied on the medium supplemented by dif-
ferent growth regulators.Results:The frequencies of callus formation of explants were in the order of leaf > stem >
petiole , the best medium for callus induction was MS+6-BA0.5+NAA1.5.The effects of different growth regula-
tors on bud induction of stem were in the order of 6-BA>KT>NAA , the best medium for bud induction was MS+
6-BA2mg/L +KT1mg/L +NAA0.5mg/L.The best medium for bud multiplication was MS +6-BA2mg/L +
NAA2mg/L , the propagation coefficient of the bud could reach 3.00 , the effects of different growth regulators on bud
multiplication were in the order of 6-BA>NAA.The best medium for rooting was MS+NAA0.5 mg/L.Conclu-
sion:Growth regulators could improve callus induction and in vitro rapid propagation of Dicliptera chinensis (L.)
Nees.
Key words:Dicliptera chinensis(L.)Nees;growth regulators;callus;in vitro rapid propagation
狗肝菜(Dicliptera chinensis(L.)Nees)又名猪肝菜 、 羊肝菜 、路边青 ,爵床科狗肝菜属一年或两年生草
4
生物磁学　2004年　第 4卷　第 4期　　BIOMAGNETISM　2004 Vol.4No.4　
DOI :10.13241/j.cnki.pmb.2004.04.003
本植物。分布于江西 、福建 、台湾 、广东 、广西 、云南
等地 ,多长于平野 、圳畔 、田埂四周较为潮湿 、肥沃
的地方。狗肝菜既是野生中草药 ,也是味道鲜美的
蔬菜 。狗肝菜味苦 、性寒 ,能清热解毒 、凉血 、生津 、
利尿 ,临床常用于治疗热病斑疹 、小便不利 、便血 、
溺血 、肿毒 、疔疮等症[ 1] 。狗肝菜的组织培养未见
报道。本文研究了不同生长调节剂对狗肝菜愈伤
组织诱导和离体快繁的影响 ,为狗肝菜的种质资源
保存和研发利用提供参考 。
材料和方法
实验材料 狗肝菜(Dicliptera chinensis (L.)
Nees)采自广东教育学院校园 。
无菌材料的获得 取狗肝菜叶片 、叶柄和茎段 ,
用洗衣粉溶液浸泡 1 ～ 2min ,自来水冲洗 1 ～ 2h ,转
入超净工作台用 75%酒精浸泡 30s ,再用 0.1%升
汞消毒10 ～ 12 min ,无菌水洗 6次 。
愈伤组织的诱导 将无菌叶片 、叶柄和茎段(不
带腋芽)分别接种于含不同生长调节剂的培养基上
诱导愈伤组织 , 40天后统计结果。愈伤组织诱导
率=形成愈伤组织的外植体数/接种的外植体数×
100%。
丛生芽的诱导 将无菌带腋芽茎段接种于附加
不同生长调节剂的培养基上 。采用 3因子(6 -
BA ,KT ,NAA)5水平的正交设计 。19天后统计结
果。芽诱导率=(外植体产生的芽总数/接种的外
植体数×100%。
丛生芽的继代增殖 将茎段上诱导的丛生芽切
下 ,转入附加不同生长调节剂的增殖培养基中 。24
天后统计结果 。芽增殖倍数=(外植体产生的芽总
数/接种的外植体数×100%。
生根和移栽:将继代增殖形成的芽切下 ,转入
附加NAA的培养基中 ,24天后统计结果。将根系
发达的试管苗取出 ,洗去琼脂 ,移栽到沙质土中 ,保
持湿度 ,2周后统计成活率。
以上培养基均为 MS 基本培养基 、添加 3%蔗
糖 、0.8%琼脂 , Ph5.8 ～ 6.0。培养温度为 25℃左
右 ,光照强度 1200Lx ,12h/d。
结果与分析
1　不同外植体 、不同生长调节剂对愈伤组织诱导
的影响
表 1　不同生长调节剂对狗肝菜不同外植体愈伤组织诱导的影响
生长调节剂(mg/ L) 外植体 诱导率(%) 愈伤组织的生长状况
6-BA0.5+NAA0.5 叶片 leaf 0 —
叶柄 petiole 0 —
茎段 stem 15.4 白色疏松絮状 ,分化出 1个芽 、9条根
6-BA0.5+NAA1 叶片 leaf 58.3 白色疏松絮状 ,出根 81条
叶柄 petiole 0 出根 4条
茎段 stem 30 黄色疏松透明团状 ,分化出 7个芽 、丛根
6-BA0.5+NAA1.5 叶片 leaf 100 白色疏松絮状无光泽 ,绿色致密有光泽粒状 ,出大量丛根
叶柄 petiole 87.5 白色致密透明有光泽 ,出丛根
茎段 stem 100 白色疏松透明絮状 ,出粗壮丛根
6-BA1+NAA0.5 叶片 leaf 91.7 绿色致密有光泽透明团状 ,白色疏松絮状 ,出 1个芽 、根 6条
叶柄 petiole 8.3 褐色疏松絮状
茎段 stem 55.6 无色致密透明团状 ,白色疏松絮状 ,出 3个芽丛
6-BA1+NAA1 叶片 leaf 93.3 白色疏松团絮状 ,绿色致密粒状
叶柄 petiole 42.9 白色团状或黄绿色粒状 ,致密透明
茎段 stem 75 白色致密透明有光泽湿润团状 ,绿色致密有光泽粒状 ,分化出 2个芽丛
6-BA1+NAA1.5 叶片 leaf 84.6 褐色疏松团絮状
叶柄 petiole 80 白色 、绿色或黄褐色 ,致密团状透明
茎段 stem 87.5 黄褐色或黑褐色 ,疏松湿润 ,团状 ,分化出 9个芽丛
6-BA1.5+NAA0.5 叶片 leaf 100 白色或黑褐色 ,疏松团絮状
叶柄 petiole 0 —
茎段 stem 30 白色或黑褐色 ,疏松团絮状 ,出 1个芽丛
6-BA1.5+NAA1 叶片 leafP 100 白色 、黄色或黑褐色疏松团絮状 ,无色致密透明团状
叶柄 petiole 27.3 白色褐色疏松团絮状 ,绿色致密粒状
茎段 stem 0 —
6-BA1.5+NAA1.5 叶片 leaf 83.3 白褐色 、黑褐色疏松 ,绿色致密透明,团状或团絮状
叶柄 petiole 18.2 绿色致密半透明有光泽团状 ,褐色疏松湿润团状
茎段 stem 50 无色或绿色致密透明团状 ,白色或黑褐色疏松团絮状 ,出 3个芽丛
5
生物磁学　2004年　第 4卷　第 4期　　BIOMAGNETISM　2004 Vol.4No.4　
　　愈伤组织出现最快的是茎段 ,约7天在茎段两
端切口处出现愈伤组织;叶片约2周后出现愈伤组
织;叶柄最慢 ,第 3周后在叶脉切口处陆续出现愈
伤组织 。从表 1可见外植体的愈伤组织诱导率相
对以叶片最高 ,茎段次之 ,最后为叶柄。
6-BA为低浓度(0.5mg/L)时 ,随着 NAA 浓度
增加愈伤组织诱导率增加;随着 6-BA浓度增加
愈伤组织诱导率呈下降趋势 。从表 1可见愈伤组
织诱导的最佳培养基为MS+6-BA0.5+NAA1.5。
愈伤组织不转瓶即观察到芽和根的分化 。茎
段诱导的愈伤组织分化较多 ,叶片次之 ,叶柄最后 。
6-BA1mg/L时丛芽分化较多;6-BA低浓度时 ,随
着NAA浓度升高生根能力也增加;6-BA浓度大
于0.5mg/L 时生根能力下降 。
2　不同生长调节剂对芽诱导的影响
表 2　狗肝菜芽诱导的正交实验结果
编号
No.
生长调节剂(mg/ L)
6-BA KT NAA 芽诱导率(%)
1 0 0 0 100
2 0 0.5 0.5 120.8
3 0 1 1 129.2
4 0 1.5 1.5 130.8
5 0 2 2 129.2
6 0.5 0 0.5 125
7 0.5 0.5 1 130.8
8 0.5 1 1.5 129.2
9 0.5 1.5 2 117.9
10 0.5 2 0 133.3
11 1 0 1 132.1
12 1 0.5 1.5 133.3
13 1 1 2 150
14 1 1.5 0 142.3
15 1 2 0.5 157.7
16 1.5 0 1.5 142.3
17 1.5 0.5 2 154.2
18 1.5 1 0 161.5
19 1.5 1.5 0.5 138.5
20 1.5 2 1 135.7
21 2 0 2 133.3
22 2 0.5 0 153.6
23 2 1 0.5 165.4
24 2 1.5 1 161.5
25 2 2 1.5 134.6
K 1 610 632.7 690.7
K 2 636.2 692.7 707.4
K 3 715.4 735.3 689.3
K 4 732.2 691 670.2
K 5 748.4 690.5 684.6
R 138.4/5 102.6/5 37.2/5
正交实验安排及结果见表 2。接种 3天后腋
芽开始萌动 ,5天后切口处长出愈伤组织 ,1周后腋
芽伸长 、叶展开 ,除对照外均有芽丛形成。极差分
析表明不同激素对狗肝菜茎段芽诱导的影响次序
为6-BA>KT>NAA。芽诱导的最佳培养基为 6
-BA2mg/L+KT1mg/L+NAA0.5 mg/L。
3　不同生长调节剂对芽继代增殖的影响
实验安排及结果见表 3 ,可见狗肝菜芽继代增
殖的最佳激素组合是 6-BA2mg/L +NAA2mg/L ,
增殖倍数达 3.00。影响芽继代增殖的因素次序为
6-BA>NAA 。
表 3　不同生长调节剂对狗肝菜芽继代增殖的影响
编号
No.
生长调节剂(mg/L)
6-BA NAA 芽增殖倍数
1 0 0 1.25
2 0 0.5 1.13
3 0 1 1.19
4 0 1.5 1.19
5 0 2 0.25
6 0.5 0 1.94
7 0.5 0.5 1.13
8 0.5 1 0.44
9 0.5 1.5 2.69
10 0.5 2 1.00
11 1 0 1.31
12 1 0.5 1.69
13 1 1 1.69
14 1 1.5 0.44
15 1 2 2.06
16 1.5 0 0.56
17 1.5 0.5 0.81
18 1.5 1 2.00
19 1.5 1.5 0.88
20 1.5 2 1.94
21 2 0 0.75
22 2 0.5 2.06
23 2 1 1.38
24 2 1.5 0.44
25 2 2 3.00
K1 5.01 5.81
K2 7.20 6.82
K3 7.19 6.70
K4 6.19 5.64
K5 7.63 8.25
R 2.62/ 5 2.61/ 5
4　不同浓度NAA对生根的影响
结果见表 4。可见 NAA0.5 mg/L 的生根效果
最好 。移栽成活率达 100%。
表 4　不同浓度NAA对生根的影响
NAA(mg/L) 平均根数 根的生长情况
0 5.25 主根粗 ,侧根少
0.25 5.5 主根粗 、短 ,侧根多
0.5 8.25 主根清晰 ,侧根密 、多
0.75 6 主根粗 、短 ,侧根少
1 3.75 主根不明 ,侧根少
1.25 3.5 主根短 、细 ,根从少
6
生物磁学　2004年　第 4卷　第 4期　　BIOMAGNETISM　2004 Vol.4No.4　
讨论
狗肝菜含有蛋白质 、糖类 、维生素 、矿物质 、氨
基酸及有机酸等对人体健康有益的物质 。冯小映
等[ 2]测定狗肝菜的多糖含量为 5.23%;康笑枫
等[ 3]鉴定了狗肝菜中挥发油的化学成分 ,其中的石
竹烯 、紫苏醛 、薄荷等成分具消炎抗菌 、镇咳怯痰 、
抗过敏等功效。作为一种中草药和蔬菜 ,狗肝菜是
值得开发的野生植物 。
狗肝菜愈伤组织的诱导和茎段的离体快繁体
系已建立 ,叶片和茎段的愈伤组织诱导率可达
100%,1个茎段通过离体繁殖 1年可产生 10多万
株苗 ,这为狗肝菜的研究和利用打下了基础 。但愈
伤组织的分化还有待研究;若进一步优化快繁的理
化条件 ,其繁殖效率可望得到提高 。
参 考 文 献
1　江苏中医学院.中药大辞典.上海:上海人民出版社 ,
1977:14
2　冯小映 , 周诚 ,黄恩等.狗肝菜多糖含量的测定.中药材 ,
2003;26(9):643-644
3　康笑枫 ,徐淑元 , 秦晓霜.狗肝菜中挥发油的化学成分分
析.热带农业科学 , 2003;23(4):14-16 , 21
(收稿日期 2004-10-15)
乙型肝炎病毒前 S1抗原与 HBV 血清
标志物同时检测及临床意义
广东省深圳市南山区人民医院检验科　(518052)　徐　丹　张然蓉　杨妙琳　程　琼
摘要　目的:了解前S1抗原与 HBV血清标志物的关系。方法:采用 ELSIA方法同时检测 2101例乙型
肝炎病毒感染者的前 S1抗原和 HBV血清标志物。结果:29例 HBsAg(+)、HBeAg(+)标本中 ,有 28例前
S1抗原阳性 ,阳性率96.55%;784例HBsAg(+)、HBeAg(+)、抗HBc(+)标本中 ,有679例前S1抗原阳性 ,
阳性率86.61%;276例 HBsAg(+)、抗HBc(+)标本中 ,有 197例前 S1抗原阳性 ,阳性率 71.38%;1012例
HBsAg(+)、抗 Hbe(+)、抗HBc(+)标本中 ,有 468例前S1抗原阳性 ,阳性率 46.25%。结论:前S1抗原作
为病毒复制的指标与 HBeAg具有很好的一致性 ,又具有其独立的检测价值 ,可弥补 HBV血清标志物检测
的不足。
关键词:乙型肝炎病毒;检测;前S1抗原;HBV血清标志物
Hepatitis B virus anterior S1 antigen with HBV blood serum and Serologic
makers meanwhile test of Clinical significance
XU Dan , ZHANGRan-rong , YANGMiao-lin , et al
Shenzhen city Nanshandistrict people hospital of Guangdong province (518052)
ABSTRACT Objective:to investigate anterior S1 antigen with HBV Serologic makers of relational.Methods:
use to ELSIA methods meanwhile test 2101 cases HBV infection patient that anterior S1 antigen and HBV serologic
makers.Results:in the 29 cases HBsAg(+)、HBeAg(+)specimen , have 679 cases that Anterior S1 antigen male ,
male rate 86.61%;In the 276 cases HBsAg(+)、Anti-HBe(+)Specimen , have 197 cases that anterior S1antigen
male , male rate 71.38%;1012 cases HBsAg(+)、Anti-Hbe(+)、Anti-Hbc(+)specimen , have 468 cases an-
terior S1 antigen male , male rate 46.25%.Conclusion:anterior S1 antigne conduct and have that independent of test
value , can to make up HBV serologic makers test itself for deficiency.
Key words:Hepatietns B viras;test;anterior S1 antigen;HBV Serologic makers
　　乙型肝炎病毒(HBV)乙型肝炎的直接致病因
子 ,也是原发性肝癌的诱发因子[ 1] 。乙型肝炎病毒
前S1抗是外膜蛋白的重要组成部分 ,是完整病毒
颗粒 ,是 Dane 颗粒的表面成分 ,在病毒侵入肝细胞
过程中起重要作用[ 2] 。一般认为与 HBV 复制有密
切关系[ 3] ,为了进一步探讨前 S1抗原与乙型肝炎
病毒血清标志物之间的关系 ,本文采用 ELISA法检
测 2101例 HBsAg阳性血清标本的前S1抗原 ,观察
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