全 文 ：北方园艺２０１６（０５）：１１９～１２３ ·生物技术·
第一作者简介：杨艳（１９８０－），女，博士，助理研究员，研究方向为林
木选育与栽培。Ｅ－ｍａｉｌ：ｙａｎｇｙａｎｚｕｐｅｉ＠１２６．ｃｏｍ．
责任作者：蒋丽娟（１９６５－），女，博士，教授，现主要从事能源植物培
育与利用等研究工作。Ｅ－ｍａｉｌ：ｌｉｌｊｉａｎｇ１９６５＠ｓｉｎａ．ｃｏｍ．
基金项目：长沙市科技计划资助项目（ｋｌ３０７０１２－２１）。
收稿日期：２０１５－１０－０８
ＤＯＩ：１０．１１９３７／ｂｆｙｙ．２０１６０５０３２
Ｏｒｇａｎｏｇｅｎｅｓｉｓ ａｎｄ Ｒｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ ｏｆ ＳｙｍｐｌｏｃｏｓｐａｎｉｃｕｌａｔａＦｒｏｍ
Ｉｍｍａｔｕｒｅ Ｚｙｇｏｔｉｃ Ｅｍｂｒｙｏｓ ｉｎ ｖｉｔｒｏ
ＹＡＮＧ Ｙａｎ１，ＪＩＡＮＧ Ｌｉｊｕａｎ２，ＴＡＮＧ Ｙｕｘｉ １，ＬＩ Ｃｈａｎｇｚｈｕ１，ＴＡＮＧ Ｊｉｅ１，ＬＩ Ｙｏｎｇｊｉｎ１
（１．Ｈｕｎａｎ Ｆｏｒｅｓｔｒｙ Ａｃａｄｅｍｙ，Ｃｈａｎｇｓｈａ，Ｈｕｎａｎ ４１０００４；２．Ｃｏｌｅｇｅ ｏｆ Ｌｉｆｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｃｅｎｔｒａｌ Ｓｏｕｔｈ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ Ｆｏｒｅｓｔｒｙ ａｎｄ
Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｃｈａｎｇｓｈａ，Ｈｕｎａｎ ４１０００４）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｔａｋｉｎｇ ｉｍｍａｔｕｒｅ ｚｙｇｏｔｉｃ ｅｍｂｒｙｏｓ ｏｆ Ｓｙｍｐｌｏｃｏｓ ｐａｎｉｃｕｌａｔａ ａｓ ｍａｔｅｒｉａｌｓ，ｕｓｉｎｇ ｍｏｄｉｆｉｅｄ ＭＳ ｍｅｄｉｕｍ，ｔｈｅ
ｏｒｇａｎｏｇｅｎｅｓｉｓ ａｎｄ ｒｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ ｗｅｒｅ ｒｅｓｅａｒｃｈｅｄ．Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ ｔｈｅ ｍＭＳ ｍｅｄｉｕｍ ｃｏｕｌｄ ｉｎｄｕｃｅ ｃａｌｕｓ ｇｒｅａｔｌｙ，
ｔｈｅ ｈｉｇｈｅｓｔ ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ ｒａｔｅ ９２．５％ ｗａｓ ｏｂｔａｉｎｅｄ ｏｎ ｔｈｅ ｍｅｄｉｕｍ ｗｉｔｈ ０．２ｍｇ／Ｌ ６－ＢＡ＋０．１ｍｇ／Ｌ ＮＡＡ．７２．４％ｏｆ
ｃａｌｕｓｅｓ ｉｎｉｔｉａｔｅｄ ｇｒｅｅｎ ｂｕｄ－ｌｉｋｅ ｓｔｒｕｃｔｕｒｅｓ ｗｈｅｎ ｔｈｅｙ ｗｅｒｅ ｃｕｌｔｕｒｅｄ ｏｎ ｍＭＳ ｐｌｕｓ ０．２５ｍｇ／Ｌ ６－ＢＡ＋０．１５ｍｇ／Ｌ ＮＡＡ．
Ｔｈｅ ｃａｌｕｓｅｓ ｗｉｔｈ ｇｒｅｅｎ ｂｕｄ－ｌｉｋｅ ｓｔｒｕｃｔｕｒｅｓ ｗｅｒｅ ｓｕｂｃｕｌｔｕｒｅｄ ｏｎｔｏ ｍＭＳ ｍｅｄｉｕｍ ｗｉｔｈｏｕｔ ｐｌａｎｔ ｇｒｏｗｔｈ ｒｅｇｕｌａｔｏｒｓ ｆｏｒ １５
ｄａｙｓ，７６．６％ｏｆ ｔｈｅｍ ｄｅｖｅｌｏｐｅｄ ｉｎｔｏ ｓｈｏｏｔｓ．Ｓｈｏｏｔｓ ｅｌｏｎｇａｔｅｄ ｔｏ １．５ｃｍ ｌｏｎｇ ｏｎ １／２ｍＭＳ ｍｅｄｉｕｍ ｐｌｕｓ １．５％ｓｕｃｒｏｓｅ ２０
ｄａｙｓ ａｆｔｅｒ ｃｕｌｔｕｒｅ．
Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：Ｓｙｍｐｌｏｃｏｓ ｐａｎｉｃｕｌａｔａ；ｉｍｍａｔｕｒｅ ｚｙｇｏｔｉｃ ｅｍｂｒｙｏｓ；ｏｒｇａｎｏｇｅｎｅｓｉｓ；ｒｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ
中图分类号：Ｓ ７９２．２９ 文献标识码：Ａ 文章编号：１００１－０００９（２０１６）０５－０１１９－０５
Ｓｙｍｐｌｏｃｏｓ ｐａｎｉｃｕｌａｔａ （Ｔｈｕｎｂ．）Ｍｉｑ．ｂｅｌｏｎｇｓ ｔｏ
Ｓｙｍｐｌｏｃａｃｅａｅ．Ｉｔ ｉｓ ｎａｔｉｖｅ ｉｎ ｍｉｘｅｄ ｆｏｒｅｓｔｓ ａｔ ａｎ ｅｌｅｖａｔｉｏｎ
ｏｆ ８００－２ ５００ｍｉｎ ｔｈｅ Ｈｉｍａｌａｙａｓ，ａｎｄ ｅａｓｔｅｒｎ Ａｓｉａ，
ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ Ｃｈｉｎａ，Ｊａｐａｎ，ａｎｄ Ｋｏｒｅａ［１］．Ｓａｐｐｈｉｒｅ ｂｅｒｒｙ ｉｓ ａ
ｄｅｃｉｄｕｏｕｓ ｓｈｒｕｂ ｏｒ ｓｍａｌ ｔｒｅｅ ｗｉｔｈ ｒｏｕｇｈ ｙｅｌｏｗｉｓｈ－ｂｒｏｗｎ
ｂａｒｋ，ｃｒｅａｍｙ ｗｈｉｔｅ ｆｒａｇｒａｎｔ ｆｌｏｗｅｒｓ，ａｎｄ ｂｌｕｅｂｅｒｒｙ－ｌｉｋｅ
ｆｒｕｉｔｓ．Ｔｈｉｓ ｐｌａｎｔ ｉｓ ｋｎｏｗｎ ｆｏｒ ｅｄｉｂｌｅ ａｎｄ ｍｅｄｉｃｉｎａｌ ｕｓａｇｅｓ．
Ｔｈｅ ｂａｒｋ ｉｓ ｕｓｅｄ ｆｏｒ ｐｒｏｄｕｃｉｎｇ ａ ｋｉｎｄ ｏｆ ｙｅｌｏｗ ｄｙｅ［２］，
ａｎｄ ｔｈｅ ｊｕｉｃｅ ｏｆ ｔｈｅ ｂａｒｋ ｉｓ ａｐｐｌｉｅｄ ｅｘｔｅｒｎａｌｙ ｔｏ ｓｐｒａｉｎｓ
ａｎｄ ｍｕｓｃｕｌａｒ ｓｗｅｌｉｎｇｓ［３］．Ｔｈｅ ｐｌａｎｔ ｈａｓ ｂｅｅｎ ｕｓｅｄ ｉｎ
ｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌ ｍｅｄｉｃｉｎｅｓ ｆｏｒ ｔｈｅ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｏｆ ｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ［４］，
ｍｅｎｏｒｒｈａｇｉａ，ｂｏｗｅｌ ｃｏｍｐｌａｉｎｔｓ，ｅｙｅ ｄｉｓｅａｓｅｓ，ｕｌｃｅｒｓ［５］，ａｎｄ
ｔｙｐｅⅡｄｉａｂｅｔｅｓ［６］．Ｉｔ ｉｓ ａｌｓｏ ｕｓｅｄ ａｓ ａ ｇａｒｇｌｅ ｆｏｒ ｇｉｖｉｎｇ ｆｉｒｍｎｅｓｓ
ｔｏ ｓｐｏｎｇｙ ａｎｄ ｂｌｅｅｄｉｎｇ ｇｕｍｓ［５］．Ｔｈｅ ｆｒｕｉｔ ｉｓ ｅｄｉｂｌｅ ａｎｄ
ｃａｎ ｂｅ ｕｓｅｄ ｉｎ ｊａｍｓ，ｊｅｌｉｅｓ，ａｎｄ ｓａｕｃｅ［７］．Ｉｎ ａｄｄｉｔｉｏｎ，ｔｈｅ
ｓｅｅｄ ｈａｓ ｏｉｌ ｕｐ ｔｏ ３６．６％ ｗｉｔｈ ｕｎｓａｔｕｒａｔｅｄ ｆａｔｔｙ ａｃｉｄｓ，
ｓｕｃｈ ａｓ ｏｌｅｉｃ ａｃｉｄ ａｎｄ ｌｉｎｏｌｅｉｃ ａｃｉｄ［８］．Ｔｈｉｓ ｐｌａｎｔ ｈａｓ
ｒｅｃｅｎｔｌｙ ｂｅｅｎ ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｄ ａｓ ａｎ ｉｄｅａｌ ｒａｗ ｍａｔｅｒｉａｌ ｆｏｒ
ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ ｏｆ ｂｉｏｄｉｅｓｅｌ［８－１０］．Ｔｈｅ ｄｏｍｅｓｔｉｃａｔｉｏｎ ａｎｄ ｃｕｌｔｉｖａｔｉｏｎ
ｏｆ ｔｈｉｓ ｗｉｌｄ ｐｌａｎｔ ｉｓ ｎｅｃｅｓｓａｒｙ ｆｏｒ ｐｒｏｔｅｃｔｉｎｇ ｔｈｅ ｎａｔｕｒａｌ
ｇｅｎｅｔｉｃ ｒｅｓｏｕｒｃｅｓ ｆｒｏｍ ｏｖｅｒ－ｅｘｐｌｏｉｔａｔｉｏｎ．
Ｐｒｏｐａｇａｔｉｏｎ ｆｒｏｍ ｓｅｅｄ ｇｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｒｅｑｕｉｒｅｓ
ｓｔｒａｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ［１１］．Ｉｔ ｉｓ ｂｅｔｔｅｒ ｔｏ ｓｏｗ ｓｅｅｄｓ ｉｎ ａ ｃｏｌｄ ｆｒａｍｅ
ｉｎ ｌａｔｅ ｗｉｎｔｅｒ，ａｎｄ ｔｈｅｙ ｎｅｅｄ １２ｍｏｎｔｈｓ ｔｏ ｇｅｒｍｉｎａｔｅ［１１］．
Ｓｅｅｄ ｐｒｏｐａｇａｔｉｏｎ ｏｆ ｓａｐｐｈｉｒｅ ｂｅｒｒｙ ｉｓ ｌｉｍｉｔｅｄ ｄｕｅ ｔｏ ｌｏｎｇ
ｐｅｒｉｏｄ ｏｆ ｓｔｒａｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ，ａｎｄ ｐｒｏｐａｇａｔｉｏｎ ｏｆ ａ ｓｐｅｃｉｆｉｃ ｃｕｌｔｉｖａｒ
ｉｓ ｉｍｐｏｓｓｉｂｌｅ ｂｅｃａｕｓｅ ｏｆ ｓｅｅｄｌｉｎｇ ｖａｒｉａｂｉｌｉｔｙ．Ｓｅｍｉ－ｈａｒｄ
ｗｏｏｄ ｃｕｔｔｉｎｇｓ，７－１０ｃｍ ｌｏｎｇ ｗｉｔｈ ａ ｈｅｅｌ，ｃａｎ ｆｏｒｍ ｒｏｏｔｓ
ｉｎ ａｂｏｕｔ ４ｗｅｅｋｓ ａｎｄ ｈａｖｅ ａ ｇｏｏｄ ｐｅｒｃｅｎｔａｇｅ ｉｎ Ｊｕｌｙ ｏｒ
Ａｕｇｕｓｔ［１２－１３］．Ｈｏｗｅｖｅｒ，ｖｅｇｅｔａｔｉｖｅ ｐｒｏｐａｇａｔｉｏｎ ｏｆ ｓａｐｐｈｉｒｅ
ｂｅｒｒｙ ｂｙ ｃｕｔｔｉｎｇｓ ｍａｙ ｂｅ ｓｕｂｊｅｃｔ ｔｏ ｓｅａｓｏｎａｌ ｖａｒｉａｔｉｏｎｓ．
Ｔｈｅｒｅ ｉｓ ａｎ ｕｒｇｅｎｔ ｎｅｅｄ ｔｏ ｄｅｖｅｌｏｐ ａ ｓｔａｂｌｅ ａｎｄ ｅｆｉｃｉｅｎｔ
ｐｒｏｔｏｃｏｌ ｆｏｒ ｔｈｅ ｌａｒｇｅ－ｓｃａｌｅ ｐｒｏｐａｇａｔｉｏｎ ｏｆ ｓａｐｐｈｉｒｅ ｂｅｒｒｙ
ｉｎ ｏｒｄｅｒ ｔｏ ｍｅｅｔ ｉｔｓ ｅｖｅｒ－ｉｎｃｒｅａｓｉｎｇ ｄｅｍａｎｄ ａｎｄ ｃｏｎｓｅｒｖｅ
ｉｔｓ ｇｅｒｍｐｌａｓｍ ａｎｄ ｇｅｎｅｔｉｃ ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ．
Ｔｉｓｓｕｅ ｃｕｌｔｕｒｅ ｐｒｏｖｉｄｅｓ ａ ｆａｓｔ ｃｌｏｎａｌ ｒｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ ｆｏｒ
ｒｅｆｏｒｅｓｔａｔｉｏｎ ｐｒｏｊｅｃｔｓ，ｎｕｒｓｅｒｙ ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ ａｎｄ ｐｒｅｓｅｒｖａｔｉｏｎ
ｏｆ ｎａｔｕｒａｌ ｇｅｎｅｔｉｃ ｒｅｓｏｕｒｃｅｓ［１４］．Ｔｉｓｓｕｅ ｃｕｌｔｕｒｅ ｏｆ Ｓｙｍｐｌｏｃｏｓ
ｔｅｔａｇｏｎａ ｈａｄ ｂｅｅｎ ｃｏｎｄｕｃｔｅｄ［１５］．Ｔｈｅｙ ｆｏｕｎｄ ｔｈａｔ ｔｈｅ ｃａｌｕ－
ｓｅｓ ｆｏｒｍｅｄ ｏｎ １／２ＭＳ ｍｅｄｉｕｍ ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔｅｄ ｗｉｔｈ ２，４－Ｄ
（２，４－Ｄｉｎｉｔｒｏｐｈｅｎｙｌｈｙｄｒａｚｉｎｅ）２ｍｇ／Ｌ ｗｈｅｎ ｍａｔｕｒｅ ｚｙ－
ｇｏｔｉｃ ｅｍｂｒｙｏｓ ｗｅｒｅ ｃｕｌｔｕｒｅｄ ｆｏｒ ２５ｄａｙｓ，ａｎｄ ａｘｉｌａｒｙ
ｓｈｏｏｔｓ ｄｅｖｅｌｏｐｅｄ ｏｎ ＷＰＭ ｍｅｄｉｕｍ ｐｌｕｓ ６－ＢＡ ｏｒ ｋｉｎｅｔｉｎ
（Ｎ６ －ｆｕｒｆｕｒｙｌａｄｅｎｉｎｅ）ａｔ ｔｈｅ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ ｏｆ ０．２－
１．５ｍｇ／Ｌ．Ｈｏｗｅｖｅｒ，ｌｉｔｌｅ ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ ｉｓ ａｖａｉｌａｂｌｅ ｆｏｒ ｐｌａｎｔ
ｒｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ ｏｆ Ｓｙｍｐｌｏｃｏｓｐａｎｉｃｕｌａｔａ．Ｔｈｅ ａｉｍ ｏｆ ｔｈｉｓ
ｓｔｕｄｙ ｉｓ ｔｏ ｄｅｖｅｌｏｐ ｉｎ ｖｉｔｒｏ ｒｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ ｐｒｏｔｏｃｏｌ ｆｏｒ
Ｓｙｍｐｌｏｃｏｓ ｐａｎｉｃｕｌａｔａｆｒｏｍ ｉｍｍａｔｕｒｅ ｅｍｂｒｙｏｓ．
９１１
·生物技术· 北方园艺２０１６（０５）：１１９～１２３
１ ＭＡＴＥＲＩＡＬＳ ＡＮＤ ＭＥＴＨＯＤＳ
１．１ Ｔｅｓｔ ｍａｔｅｒｉａｌｓ
Ｇｒｅｅｎ ｉｍｍａｔｕｒｅ ｆｒｕｉｔｓ（４－５ｍｍ ｉｎ ｄｉａｍｅｔｅｒ）ｏｆ
ｓａｐｐｈｉｒｅ ｂｅｒｒｙ ｗｅｒｅ ｃｏｌｅｃｔｅｄ ｉｎ ｍｉｄ－ｔｏ－ｌａｔｅ Ａｕｇｕｓｔ
（ａｂｏｕｔ １２ｗｅｅｋｓ ａｆｔｅｒ ｐｏｌｉｎａｔｉｏｎ）ｆｒｏｍ ａｎ ａｐｐｒｏｘｉｍａｔｅｌｙ
２０－ｙｅａｒ－ｏｌｄ ｓｕｐｅｒｉｏｒ ｔｒｅｅ ｇｒｏｗｎ ｉｎ Ｄａｗｅｉ Ｍｏｕｎｔａｉｎ（Ｌｉｕｙａｎｇ，
Ｈｕｎａｎ）．
Ｔｈｅ ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ ｍｅｄｉｕｍ ｃｏｎｓｉｓｔｅｄ ｏｆ Ｍｕｒａｓｈｉｇｅ ａｎｄ
Ｓｋｏｏｇ［１６］ｂａｓａｌ ｍｅｄｉｕｍ，ｍｏｄｉｆｉｅｄ ＭＳ（ｍＭＳ）ｏｒ ｗｏｏｄｙ ｐｌａｎｔ
ｍｅｄｉｕｍ［１７］ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔｅｄ ｗｉｔｈ ３０ｇ／Ｌ ｓｕｃｒｏｓｅ，０．６５％ （ｗ／ｖ）
ａｇａｒ，ａｎｄ ｐｌａｎｔ ｇｒｏｗｔｈ ｒｅｇｕｌａｔｏｒｓ．Ｍｏｄｉｆｉｅｄ ＭＳ（ｍＭＳ）ｗａｓ
ｐｒｅｐａｒｅｄ ｂｙ ａｄｄｉｎｇ ５０ｍｇ／Ｌ Ｎａ２ＳＯ４ｉｎ ｉｎｏｒｇａｎｉｃ ｓａｌｔ ａｎｄ
ｒｅｄｕｃｉｎｇ Ｚｎ２ＳＯ４·７Ｈ２Ｏ ｔｏ ８ｍｇ／Ｌ ｉｎ ｔｒａｃｅ ｅｌｅｍｅｎｔｓ．
１．２ Ｔｅｓｔ ｍｅｔｈｏｄｓ
１．２．１ Ｔｅｓｔ ｍａｔｅｒｉａｌｓ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ Ｆｒｕｉｔｓ ｗｅｒｅ ｔｈｏｒｏｕｇｈｌｙ
ｗａｓｈｅｄ ｆｏｒ ４ｈｏｕｒｓ ｉｎ ｒｕｎｎｉｎｇ ｔａｐ ｗａｔｅｒ．Ｔｈｅｙ ｗｅｒｅ ｓｕｒ－
ｆａｃｅ ｄｉｓｉｎｆｅｃｔｅｄ ｆｏｒ ５ｍｉｎｕｔｅｓ ｗｉｔｈ １０％（ｖ／ｖ）ｃｏｍｍｅｒｃｉａｌ
ｂｌｅａｃｈ（５．２５％ｓｏｄｉｕｍ ｈｙｐｏｃｈｌｏｒｉｔｅ）ａｎｄ ｔｈｅｎ ｒｉｎｓｅｄ ｉｎ
ｄｉｓｔｉｌｅｄ ｗａｔｅｒ ５－６ｔｉｍｅｓ．Ｓｅｅｄｓ ｅｘｃｉｓｅｄ ｆｒｏｍ ｆｒｕｉｔｓ ｗｅｒｅ
ｓｏａｋｅｄ ｉｎ ７５％（ｖ／ｖ）ｅｔｈａｎｏｌ ｆｏｒ ５ｍｉｎｕｔｅｓ，ａｎｄ ｓｕｂｓｅ－
ｑｕｅｎｔｌｙ ｉｎ ５０％ （ｖ／ｖ）ｃｏｍｍｅｒｃｉａｌ ｂｌｅａｃｈ ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ ０．１％
Ｔｗｅｅｎ－２０ｆｏｒ １５ｍｉｎｕｔｅｓ，ａｎｄ ｒｉｎｓｅｄ ５－６ｔｉｍｅｓ ｗｉｔｈ
ｓｔｅｒｉｌｅ ｄｉｓｔｉｌｅｄ ｗａｔｅｒ．Ｔｈｅ ｐｅｒｉｃａｒｐ ａｎｄ ｔｅｓｔａ ｏｆ ａｌ ｓｅｅｄｓ
ｗｅｒｅ ｒｅｍｏｖｅｄ．
１．２．２ Ｅｘｐｌａｎｔｓ ｉｎｏｃｕｌａｔｉｏｎ Ｔｈｅ ｗｈｉｔｅ ｉｍｍａｔｕｒｅ ｚｙ－
ｇｏｔｉｃ ｅｍｂｒｙｏｓ（１．５－２．０ｍｍ ｉｎ ｌｅｎｇｔｈ）ｗｅｒｅ ｔｒａｎｓｆｅｒｒｅｄ
ｔｏ Ｐｙｒｅｘ ｇｌａｓｓ ｆｌａｓｋｓ ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ ２５ｍＬ ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ ｍｅｄｉ－
ｕｍ．６－ＢＡ （６ －ｂｅｎｚｙｌａｍｉｎｏｐｕｒｉｎｅ）ａｔ ０．１５ ｍｇ／Ｌ，
０．２０ｍｇ／Ｌ，０．２５ｍｇ／Ｌ ｏｒ ０．３０ｍｇ／Ｌ ｐｌｕｓ ０．１０ｍｇ／Ｌ
ＮＡＡ（α?ｎａｐｈｔｈａｌｅｎｅａｃｅｔｉｃ ａｃｉｄ）ｗａｓ ｔｅｓｔｅｄ．Ａｌ ｍｅｄｉａ
ｗｅｒｅ ａｕｔｏｃｌａｖｅｄ ａｔ １２１℃ｆｏｒ ２０ｍｉｎｕｔｅｓ ａｆｔｅｒ ａｄｊｕｓｔｉｎｇ ｐＨ
５．８ｕｓｉｎｇ ＮａＯＨ ｏｒ ＨＣｌ．Ａｌ ｃｕｌｔｕｒｅｓ ｗｅｒｅ ｍａｉｎｔａｉｎｅｄ
ｕｎｄｅｒ ｄａｒｋ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ ｉｎ ａ ｃｕｌｔｕｒｅ ｒｏｏｍ ａｔ（２５±２）℃．Ａ
ｔｏｔａｌ ｏｆ ２０ｅｘｐｌａｎｔｓ（ｉｍｍａｔｕｒｅ ｚｙｇｏｔｉｃ ｅｍｂｒｙｏｓ）ｗｅｒｅ ｕｓｅｄ
ｆｏｒ ｅａｃｈ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ，ａｎｄ ｅａｃｈ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｗａｓ ｒｅｐｅａｔｅｄ ３
ｔｉｍｅｓ．２０ｄａｙｓ ａｆｔｅｒ ｃｕｌｔｕｒｅｄ，ｔｈｅ ｑｕａｌｉｔｙ ａｎｄ ｔｈｅ ｐｒｅｓｅｎｃｅ
ｏｒ ａｂｓｅｎｃｅ ｏｆ ｃａｌｕｓｅｓ ｗｅｒｅ ｒｅｃｏｒｄｅｄ．
１．２．３ Ｏｒｇａｎｏｇｅｎｅｓｉｓ ａｎｄ ｐｌａｎｔ ｒｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎｍ ＭＳ
ｂａｓｉｃ ｍｅｄｉａ ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔｅｄ ｗｉｔｈ ６ －ＢＡ ａｔ ０．２０ ｏｒ
０．２５ｍｇ／Ｌ ａｎｄ ＮＡＡ ａｔ ０．１０ ｍｇ／Ｌ，０．１５ ｍｇ／Ｌ ｏｒ
０．２０ｍｇ／Ｌ ｗｅｒｅ ｕｓｅｄ ｆｏｒ ｃａｌｕｓ ｄｉｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ ａｎｄ ｐｌａｎｔ
ｒｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ．ｍＭＳ ｗｉｔｈｏｕｔ ａｎｙ ｐｌａｎｔ ｇｒｏｗｔｈ ｒｅｇｕｌａｔｏｒｓ
ｗａｓ ｐｒｅｐａｒｅｄ ａｓ ｔｈｅ ｃｏｎｔｒｏｌ．Ａｌ ｍｅｄｉａｓ ｗｅｒｅ ａｄｄｅｄ ｗｉｔｈ
３０ｇ／Ｌ ｓｕｃｒｏｓｅ ａｎｄ ０．６５％ （ｗ／ｖ）ａｇａｒ，ａｎｄ ｐＨ ｗａｓ ａｄ－
ｊｕｓｔｅｄ ｔｏ ５．８．Ａ ｔｏｔａｌ ｏｆ ２０ｆｌａｓｋｓ ｗｉｔｈ ５ｃａｌｕｓｅｓ（５ｍｍ
ｉｎ ｄｉａｍｅｔｅｒ）ｐｅｒ ｆｌａｓｋ ｗｅｒｅ ｕｓｅｄ ｆｏｒ ｅａｃｈ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ，ａｎｄ
ｅａｃｈ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｗａｓ ｒｅｐｅａｔｅｄ ３ｔｉｍｅｓ．３０ｄａｙｓ ａｆｔｅｒ ｃｕｌ－
ｔｕｒｅｄ ｕｎｄｅｒ ｄａｒｋ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ，ｔｈｅ ｄａｙｓ ｆｏｒ ｃａｌｕｓｅｓ ｔｏ ｄｉｆｅｒ－
ｅｎｔｉａｔｅ，ａｎｄ ｔｈｅ ｐｒｅｓｅｎｃｅ ｏｒ ａｂｓｅｎｃｅ ｏｆ ｃａｌｕｓｅｓ ｗｉｔｈ ｇｒｅｅｎ
ｂｕｄ－ｌｉｋｅ ｓｔｒｕｃｔｕｒｅｓ ｗｅｒｅ ｒｅｃｏｒｄｅｄ．Ｄｉｆｅｒｅｎｔｉａｔｅｄ ｃａｌｕｓｅｓ
ｗｅｒｅ ｃｕｌｔｕｒｅｄ ｏｎ ｍＭＳ ｂａｓｉｃ ｍｅｄｉｕｍ ｗｉｔｈｏｕｔ ｐｈｙｔｏｈｏｒ－
ｍｏｎｅｓ ｕｎｄｅｒ ｔｈｅ ｃｕｌｔｕｒｅ ｒｏｏｍ ｆｏｒ １５ｄａｙｓ ｔｏ ｅｌｏｎｇａｔｅ ｔｈｅ
ｓｈｏｏｔｓ．Ｒｅｇｅｎｅｒａｔｅｄ ｓｈｏｏｔｓ ｗｅｒｅ ｔｒａｎｓｆｅｒｒｅｄ ｔｏ ｔｈｅ ｍＭＳ
ｂａｓｉｃ ｍｅｄｉｕｍ ａｔ １／２ｍＭＳ ｐｌｕｓ １５ｇ／Ｌ ｓｕｃｒｏｓｅ ａｎｄ ｋｅｐｔ ｉｎ
ｃｕｌｔｕｒｅ ｕｎｄｅｒ ｌｉｇｈｔ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ ｗｉｔｈ ａ １２ｈｏｕｒｓ ｐｈｏｔｏｐｅｒｉｏｄ
ａｎｄ ５０μｍｏｌ·ｍ
－２·ｓ－１ ｆｒｏｍ ｃｏｏｌ ｗｈｉｔｅ ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｔ
ｔｕｂｅｓ．
１．３ Ｉｔｅｍ ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ
Ｔｈｅ ｐｅｒｃｅｎｔａｇｅ ｏｆ ｅｘｐｌａｎｔｓ ｗｉｔｈ ｃａｌｕｓｅｓ ａｎｄ ｃａｌｕｓｅｓ
ｗｉｔｈ ｂｕｄ－ｌｉｋｅ ｓｔｒｕｃｔｕｒｅｓ ｗｅｒｅ ｃａｌｃｕｌａｔｅｄ．Ｔｈｅ ｃａｌｕｓ ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ
ｒａｔｅ ｗａｓ ｃａｌｃｕｌａｔｅｄ ｕｓｉｎｇ ｔｈｅ ｅｑｕａｔｉｏｎ，ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ ｒａｔｅ（％）＝
（ｅｘｐｌａｎｔｓ ｗｉｔｈ ｃａｌｕｓｅｓ／ｔｏｔａｌ ｅｘｐｌａｎｔｓ ｃｕｌｔｕｒｅｄ）×１００；ｔｈｅ
ｃａｌｕｓ ｄｉｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ ｒａｔｅ ｗａｓ ｃａｌｃｕｌａｔｅｄ ｕｓｉｎｇ ｔｈｅ ｅｑｕａｔｉｏｎ，
ｄｉｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ ｒａｔｅ（％）＝ （ｄｉｆｅｒｅｎｔｉａｔｅｄ ｃａｌｕｓｅｓ／ｔｏｔａｌ
ｃａｌｕｓｅｓ ｃｕｌｔｕｒｅｄ）×１００．
１．４ Ｄａｔａ ａｎａｌｙｓｉｓ
Ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ ｖａｒｉａｎｃｅ（ＡＮＯＶＡ）ｗａｓ ｐｅｒｆｏｒｍｅｄ ｕｓｉｎｇ
ＪＭＰ?９．０（ＳＡＳ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ，Ｉｎｃ．，Ｃａｒｙ，ＮＣ）．Ｔｕｋｅｙ’ｓ Ｈｏｎｅｓｔｌｙ
Ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ Ｄｉｆｅｒｅｎｔ（ＨＳＤ）ｔｅｓｔ ａｔ Ｐ＜０．０５ｗａｓ ａｐｐｌｉｅｄ ｆｏｒ
ｍｅａｎｓ ｓｅｐａｒａｔｉｏｎｓ．
２ ＲＥＳＵＬＴＳ ＡＤＮ ＡＮＡＬＹＳＩＳ
２．１ Ｃａｌｕｓ ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ
Ｔｈｅ ｉｍｍａｔｕｒｅ ｚｙｇｏｔｉｃ ｅｍｂｒｙｏｓ ｂｅｇａｎ ｔｏ ｅｘｐａｎｄ
５ｄａｙｓ ａｆｔｅｒ ｃｕｌｔｕｒｅ（Ｆｉｇ．１Ａ）．Ｃａｌｕｓｅｓ ｗｉｔｈ ｇｌｏｂｕｌａｒ ｓｔｒｕｃ－
ｔｕｒｅｓ ｆｏｒｍｅｄ ｏｎ ｔｈｅ ｈｙｐｏｃｏｔｙｌ ａｎｄ ｒａｄｉｃｌｅ ｏｆ ｚｙｇｏｔｉｃ ｅｍｂｒｙ－
ｏｓ １０ｄａｙｓ ａｆｔｅｒ ｃｕｌｔｕｒｅ（Ｆｉｇ．１Ｂ，Ｃ），ａｎｄ ｔｈｅ ｅｎｔｉｒｅ ｅｍｂｒｙｏ
ｄｉｆｅｒｅｎｔｉａｔｅｄ ｔｏ ｃａｌｕｓｅｓ ｗｉｔｈ ｈｏｒｎ－ｓｈａｐｅｄ ｏｒｇａｎｏｇｅｎｅｓｉｓ
ｔｉｓｓｕｅ １５ｄａｙｓ ａｆｔｅｒ ｃｕｌｔｕｒｅ（Ｆｉｇ．１Ｄ，Ｅ，Ｆ）．２０ｄａｙｓ ａｆｔｅｒ
ｃｕｌｔｕｒｅ，ｔｈｅ ｎｕｍｂｅｒ ｏｆ ｉｍｍａｔｕｒｅ ｅｍｂｒｙｏｓ ｗｉｔｈ ｃａｌｕｓｅｓ
ｗａｓ ｃｏｕｎｔｅｄ ｗｈｉｌｅ ｔｈｅ ｃｏｌｏｒ ａｎｄ ｔｅｘｔｕｒｅ ｏｆ ｔｈｅ ｃａｌｕｓｅｓ
ｗｅｒｅ ａｌｓｏ ｒｅｃｏｒｄｅｄ（Ｔａｂｌｅ １）．
Ｂｏｔｈ ｂａｓｉｃ ｍｅｄｉｕｍ ａｎｄ ｐｌａｎｔ ｇｒｏｗｔｈ ｒｅｇｕｌａｔｏｒ
ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ ａｆｅｃｔｅｄ ｃａｌｕｓ ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ；ｈｏｗｅｖｅｒ，ｎｏ ｉｎｔｅｒａｃｔｉｖｅ
ｅｆｅｃｔｓ ｏｃｃｕｒｒｅｄ（Ｔａｂｌｅ １）．Ｔｈｅ ｍａｊｏｒｉｔｙ ｏｆ ｉｍｍａｔｕｒｅ
ｅｍｂｒｙｏｓ ｃｕｌｔｕｒｅｄ ｏｎ ＭＳ （ａｖｅｒａｇｅ ６４．６％）ａｎｄ ｍＭＳ
（ａｖｅｒａｇｅ ８５．１％）ｍｅｄｉａ ｆｏｒｍｅｄ ｃａｌｕｓｅｓ，ｗｈｉｌｅ ３２．４％
（ａｖｅｒａｇｅ）ｏｆ ｉｍｍａｔｕｒｅ ｅｍｂｒｙｏｓ ｃｕｌｔｕｒｅｄ ｏｎ ＷＰＭ ｍｅｄｉａ
ｈａｄ ｃａｌｕｓｅｓ．Ｍｏｓｔ ｏｆ ｔｈｅ ｃａｌｕｓｅｓ ｆｏｒｍｅｄ ｏｎ ｉｍｍａｔｕｒｅ
ｅｍｂｒｙｏｓ ｔｈａｔ ｃｕｌｔｕｒｅｄ ｏｎ ＭＳ ａｎｄ ＷＰＭ ｍｅｄｉａ ｗｅｒｅ ｗａｔｅｒｙ
ｏｒ ｓｏｆｔ ｉｎ ｔｅｘｔｕｒｅ．Ｔｈｉｓ ｋｉｎｄ ｏｆ ｃａｌｕｓ ｗａｓ ｄｉｆｉｃｕｌｔ ｔｏ ｆｕｒｔｈｅｒ
ｄｉｆｅｒｅｎｔｉａｔｅ ａｎｄ ｅｖｅｎｔｕａｌｙ ｄｉｅｄ ｄｕｒｉｎｇ ｓｕｂｃｕｌｔｕｒｅ．
Ｈｏｗｅｖｅｒ，ｔｈｅ ｃａｌｕｓｅｓ ｆｏｒｍｅｄ ｏｎ ｉｍｍａｔｕｒｅ ｅｍｂｒｙｏｓ ｔｈａｔ
０２１
北方园艺２０１６（０５）：１１９～１２３ ·生物技术·
ｃｕｌｔｕｒｅｄ ｏｎ ｍＭＳ ｍｅｄｉｕｍ ｗｅｒｅ ｕｓｕａｌｙ ｌｏｏｓｅ，ｍｉｌｋｙ ｗｈｉｔｅ
ｗｉｔｈ ｓｔｒｏｎｇ ｄｉｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ ｃａｐａｃｉｔｙ．Ａｓ ｔｈｅ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ
ｏｆ ６－ＢＡ ｉｎｃｒｅａｓｅｄ，ｔｈｅｒｅ ｗａｓ ａ ｑｕａｄｒａｔｉｃ ｔｒｅｎｄ ｆｏｒ ｔｈｅ
ｐｅｒｃｅｎｔａｇｅ ｏｆ ｃａｌｕｓｅｓ ｆｏｒｍｅｄ ｏｎ ｉｍｍａｔｕｒｅ ｅｍｂｒｙｏｓ．
Ｗｈｅｎ ｉｍｍａｔｕｒｅ ｅｍｂｒｙｏｓ ｃｕｌｔｕｒｅｄ ｏｎ ｍＭＳ ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔｅｄ
ｗｉｔｈ ０．２０ｍｇ／Ｌ ６－ＢＡ ａｎｄ ０．１０ｍｇ／Ｌ ＮＡＡ，ｔｈｅ ｐｅｒｃｅｎｔ
ｏｆ ｅｍｂｒｙｏｓ ｗｉｔｈ ｃａｌｕｓｅｓ ｗａｓ ｔｈｅ ｍａｘｉｍｕｍ，９２．５％．
Ｎｏｔｅ：Ａ，Ｃａｌｕｓｅｓ ｉｎｄｕｃｅｄ ｆｒｏｍ ｉｍｍａｔｕｒｅ ｚｙｇｏｔｉｃ ｅｍｂｒｙｏ ５ｄａｙｓ ａｆｔｅｒ ｃｕｌｔｕｒｅ；Ｂ ａｎｄ Ｃ，Ｇｌｏｂｕｌａｒ ｃａｌｕｓｅｓ ｆｏｒｍｅｄ ａｎｄ ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｅｄ １０ｄａｙｓ ａｆｔｅｒ ｃｕｌｔｕｒｅ；Ｄ，Ｅ
ａｎｄ Ｆ，Ｌｅａｆ ｐｒｉｍｏｒｄｉａ ｉｎｉｔｉａｔｅｄ １５ｄａｙｓ ａｆｔｅｒ ｃｕｌｔｕｒｅ；Ｇ，Ｌｉｇｈｔ ｇｒｅｅｎ ｌｅａｆ ｐｒｉｍｏｒｄｉａ ｄｅｖｅｌｏｐｅｄ ｏｎ ｔｈｅ ｍＭＳ ｂａｓａｌ ｍｅｄｉｕｍ ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ ０．２５ｍｇ／Ｌ ６－ＢＡ ａｎｄ ０．１５
ｍｇ／Ｌ ＮＡＡ；Ｈ，Ｇｒｅｅｎ ｓｈｏｏｔｓ ｒｅｇｅｎｅｒａｔｅｄ ｏｎ ｍＭＳ ｍｅｄｉｕｍｓ ｗｉｔｈｏｕｔ ｐｌａｎｔ ｇｒｏｗｔｈ ｒｅｇｕｌａｔｏｒｓ ｆｏｒ １５ｄ；Ｉ，Ｓｈｏｏｔｓ ｅｌｏｎｇａｔｅｄ ｏｎ １／２ｍＭＳ ｍｅｄｉｕｍ ｐｌｕｓ １．５％ｓｕ－
ｃｒｏｓｅ ２０ｄａｙｓ ａｆｔｅｒ ｃｕｌｔｕｒｅ．
Ｆｉｇ．１ Ｒｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ ｏｆ Ｓｙｍｐｌｏｃｓ ｐａｎｉｃｕｌａｔａｆｒｏｍ ｉｍｍａｔｕｒｅ ｚｙｇｏｔｉｃ ｅｍｂｒｙｏ ｖｉａ ｏｒｇａｎｏｇｅｎｅｓｉｓ
Ｔａｂｌｅ １ Ｃａｌｕｓ ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ ｏｆ Ｓｙｍｐｌｏｃｏｓ ｐａｎｉｃｕｌａｔａ ｏｎ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｍｅｄｉａ ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔｅｄ ｗｉｔｈ ６?ＢＡ ａｎｄ ＮＡＡ
Ｂａｓａｌ ｍｅｄｉｕｍ Ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ ｏｆ ６－ＢＡ／（ｍｇ·Ｌ－１）Ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ ｏｆ ＮＡＡ／（ｍｇ·Ｌ－１）Ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ ｒａｔｅ ｏｆ ｅｘｐｌａｎｔｓ／％ Ｃａｌｕｓ ｍｏｒｐｈｏｌｏｇｙ
０．１５ ０．１０ ５０．１±０．３ｇｄ Ｙｅｌｏｗｉｓｈ ｗｈｉｔｅ，ｗａｔｅｒｙ ｔｅｘｔｕｒｅ
ＭＳ ０．２０ ０．１０ ７３．２±１．３ｃ Ｇｒｅｅｎ，ｆｉｒｍ ｔｅｘｔｕｒｅ
０．２５ ０．１０ ６９．８±２．４ｃ Ｇｒｅｅｎ ｗｉｔｈ ｗｈｉｔｅ ｔｉｓｓｕｅ ｓｃａｔｔｅｒｅｄ ｏｎ ｔｈｅ ｓｕｒｆａｃｅ，ｓｏｆｔ ｔｅｘｔｕｒｅ
０．３０ ０．１０ ６５．３±０．９ｃ Ｗｈｉｔｅ，ｗａｔｅｒｙ ｔｅｘｔｕｒｅ
０．１５ ０．１０ ８１．２±１．０ｂｃ Ｌｉｇｈｔ ｙｅｌｏｗ，ｆｉｒｍ ｔｅｘｔｕｒｅ
ｍＭＳ
０．２０ ０．１０ ９２．５±０．９ａ Ｍｉｌｋｙ ｗｈｉｔｅ，ｌｏｏｓｅ ｔｅｘｔｕｒｅ ｗｉｔｈ ｇｒａｎｕｌａｒ ｔｉｓｓｕｅ
０．２５ ０．１０ ８６．３±０．８ａｂ Ｍｉｌｋｙ ｗｈｉｔｅ，ｓｏｆｔ ｔｅｘｔｕｒｅ
０．３０ ０．１０ ８０．３±０．４ｂｃ Ｙｅｌｏｗｉｓｈ ｇｒｅｅｎ，ｓｏｆｔ ｔｅｘｔｕｒｅ
０．１５ ０．１０ ２１．２±０．６ｆ Ｍｉｌｋｙ ｗｈｉｔｅ，ｗａｔｅｒｙ ｔｅｘｔｕｒｅ
ＷＰＭ
０．２０ ０．１０ ３７．９±０．５ｅ Ｗｈｉｔｅ ｗｉｔｈ ｓｌｉｇｈｔｌｙ ｇｒｅｅｎ，ｓｏｆｔ ｔｅｘｔｕｒｅ
０．２５ ０．１０ ３７．０±０．３ｅ Ｗｈｉｔｅ，ｓｏｆｔ ｔｅｘｔｕｒｅ
０．３０ ０．１０ ３３．５±０．９ｅ Ｂｒｏｗｎ，ｗａｔｅｒｙ ｔｅｘｔｕｒｅ
Ｎｏｔｅ：Ｄｉｆｅｒｅｎｔ ｌｏｗｅｒｃａｓｅ ｌｅｔｔｅｒｓ ｉｎ ｔｈｅ ｓａｍｅ ｃｏｌｕｍｎ ｓｈｏｗ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ ｄｉｆｅｒｅｎｃｅ ａｔ ０．０５ｌｅｖｅｌ．Ｔｈｅ ｓａｍｅ ｂｅｌｏｗ．
１２１
·生物技术· 北方园艺２０１６（０５）：１１９～１２３
２．２ Ｏｒｇａｎｏｇｅｎｅｓｉｓ ａｎｄ ｐｌａｎｔ ｒｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ
Ｍｉｌｋｙ ｗｈｉｔｅ ｃａｌｕｓｅｓ ｉｎ ｌｏｏｓｅ ｔｅｘｔｕｒｅ ｗｅｒｅ ｓｕｂｃｕｌｔｕｒｅｄ
（Ｔａｂｌｅ ２）．Ｉｔ ｔｏｏｋ １８ｄａｙｓ ｆｏｒ ｔｈｅ ｃａｌｕｓｅｓ ｔｈａｔ ｃｕｌｔｕｒｅｄ ｏｎ
ｔｈｅ ｍｅｄｉｕｍ ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ ０．２５ｍｇ／Ｌ ６－ＢＡ ａｎｄ ０．１５ｏｒ
０．２０ｍｇ／Ｌ ＮＡＡ ｔｏ ｄｉｆｅｒｅｎｔｉａｔｅ ｉｎｔｏ ｇｒｅｅｎ ｂｕｄ－ｌｉｋｅ
ｓｔｒｕｃｔｕｒｅｓ（Ｆｉｇ．１Ｇ），ｗｈｅｒｅａｓ ２２ｄａｙｓ ｆｏｒ ｔｈｏｓｅ ｏｎ ｔｈｅ ｍｅ－
ｄｉｕｍ ｐｌｕｓ ０．２０ｍｇ／Ｌ ６－ＢＡ ａｎｄ ０．１０ｍｇ／Ｌ，０．１５ｍｇ／Ｌ
ｏｒ ０．２０ｍｇ／Ｌ ＮＡＡ．Ｈｏｗｅｖｅｒ，ｔｈｅｒｅ ｗａｓ ｎｏ ｓｉｇｎ ｏｆ ｄｉｆ－
ｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ ｏｆ ｃａｌｕｓｅｓ ｏｂｓｅｒｖｅｄ ｏｎ ｔｈｅ ｍｅｄｉｕｍ ｗｉｔｈｏｕｔ
ａｎｙ ｈｏｒｍｏｎｅｓ．Ｔｈｉｓ ｄａｔａ ｗａｓ ｅｘｃｌｕｄｅｄ ｆｏｒ ａｎａｌｙｓｉｓ．Ｔｈｅ
ｐｅｒｃｅｎｔ ｏｆ ｃａｌｕｓｅｓ ｔｈａｔ ｄｉｆｅｒｅｎｔｉａｔｅｄ ｉｎｔｏ ｂｕｄ－ｌｉｋｅ ｓｔｒｕｃ－
ｔｕｒｅｓｗａｓ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ ａｍｏｎｇ ６－ＢＡ ｌｅｖｅｌｓ，ＮＡＡ ｌｅｖｅｌｓ，ａｎｄ
ｔｈｅ ｉｎｔｅｒａｃｔｉｖｅ ｅｆｅｃｔｓ ｗｅｒｅ ａｌｓｏ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ（Ｔａｂｌｅ ２）．Ｔｈｅ
ｐｅｒｃｅｎｔ ｏｆ ｃａｌｕｓｅｓ ｗｉｔｈ ｂｕｄ－ｌｉｋｅ ｓｔｒｕｃｔｕｒｅｓ ｒｅｓｐｏｎｄｅｄ
ｑｕａｄｒａｔｉｃａｌｙ ｔｏ ｔｈｅ ｉｎｃｒｅａｓｅｄ ６－ＢＡ．Ｒｅｇａｒｄｌｅｓｓ ｏｆ ｔｈｅ
ＮＡＡ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ，ｔｈｅ ｐｅｒｃｅｎｔ ｏｆ ｃａｌｕｓｅｓ ｗｉｔｈ ｂｕｄ－ｌｉｋｅ
ｓｔｒｕｃｔｕｒｅｓ ｗａｓ ２－３ｔｉｍｅｓ ｈｉｇｈｅｒ，ｃｏｍｐａｒｅｄ ｔｏ ｔｈｏｓｅ ｃｕｌ－
ｔｕｒｅｄ ｏｎ ｔｈｅ ｍｅｄｉｕｍ ｗｉｔｈ ０．２ｍｇ／Ｌ ６－ＢＡ．Ｔｈｅ ｍａｘｉｍｕｍ
ｖａｌｕｅ ｏｆ ｄｉｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ ｒａｔｅ ｗａｓ ７２．４％ ｗｈｅｎ ｔｈｅ ｃａｌｕ－
ｓｅｓ ｗｅｒｅ ｃｕｌｔｕｒｅｄ ｏｎ ０．２５ｍｇ／Ｌ ６－ＢＡ ａｎｄ ０．１５ｍｇ／Ｌ
ＮＡＡ．
Ｔｈｅ ｃａｌｕｓｅｓ ｗｉｔｈ ｇｒｅｅｎ ｂｕｄ－ｌｉｋｅ ｓｔｒｕｃｔｕｒｅｓ ｗｅｒｅ
ｓｕｂｃｕｌｔｕｒｅｄ ｏｎ ｔｏ ｍＭＳ ｍｅｄｉｕｍ ｗｉｔｈｏｕｔ ｐｌａｎｔ ｇｒｏｗｔｈ
ｒｅｇｕｌａｔｏｒｓ ｆｏｒ １５ｄａｙｓ．Ａ ｔｏｔａｌ ｏｆ ７６．６％ｏｆ ｃａｌｕｓｅｓ ｗｉｔｈ
ｂｕｄ－ｌｉｋｅ ｓｔｒｕｃｔｕｒｅｓ ｄｅｖｅｌｏｐｅｄ ｉｎｔｏ ｓｈｏｏｔｓ（Ｆｉｇ．１Ｈ）．Ｔｈｅｙ
ｗｅｒｅ ｔｈｅｎ ｔｒａｎｓｆｅｒｒｅｄ ｏｎ ｔｏ １／２ｍＭＳ ｍｅｄｉｕｍ ｐｌｕｓ １．５％
ｓｕｃｒｏｓｅ．Ｓｈｏｏｔｓ ｅｌｏｎｇａｔｅｄ，ａｎｄ ｔｈｅ ｈｅｉｇｈｔ ｏｆ ｓｈｏｏｔｓ ｗａｓ
１．５ｃｍ ａｆｔｅｒ ２０ｄａｙｓ ｏｆ ｃｕｌｔｕｒｅ（Ｆｉｇ．１Ｉ）．
Ｔａｂｌｅ ２ Ｓｙｍｐｌｏｃｏｓ ｐａｎｉｃｕｌａｔａｃａｌｕｓｅｓ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｅｄ ｏｎ ｍｏｄｉｆｉｅｄ
ＭＳ ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔｅｄ ｗｉｔｈ ６?ＢＡ ａｎｄ ＮＡＡ
Ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ ｏｆ ６－ＢＡ
／（ｍｇ·Ｌ－１）
Ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ ｏｆ ＮＡＡ
／（ｍｇ·Ｌ－１）
Ｔｉｍｅ ｏｆ ｄｉｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ
／ｄ
Ｒａｔｅ ｏｆ ｃａｌｕｓｅｓ
ｗｉｔｈ ｓｈｏｏｔ／％
０．２０ ０．１０ ２２ ２３．３±１．５ｅ
０．２０ ０．１５ ２２ ２５．７±１．８ｄ
０．２０ ０．２０ ２２ ２５．６±０．８ｄｅ
０．２５ ０．１０ ２２ ６６．０±１．５ｂ
０．２５ ０．１５ １８ ７２．４±１．０ａ
０．２５ ０．２０ １８ ５７．９±０．６ｃ
３ ＣＯＮＣＬＵＳＩＯＮ
Ｉｎ ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ，ｃａｌｕｓｅｓ ｗｅｒｅ ｉｎｄｕｃｅｄ ｆｒｏｍ ｉｍｍａｔｕｒｅ
ｅｍｂｒｙｏｓ ｃｕｌｔｕｒｅｄ ｏｎ ｍＭＳ ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔｅｄ ｗｉｔｈ ０．２ｍｇ／Ｌ
６－ＢＡ ａｎｄ ０．１ｍｇ／Ｌ ＮＡＡ ｗｉｔｈ ｃａｌｕｓ ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ ｐｅｒｃｅｎｔ－
ａｇｅ ｏｆ ９２．５％．Ｔｈｅ ｉｎｄｕｃｅｄ ｃａｌｕｓｅｓ ｗｅｒｅ ｃｕｌｔｕｒｅｄ ｏｎ
ｍＭＳ ｐｌｕｓ ０．２５ｍｇ／Ｌ ６－ＢＡ ａｎｄ ０．１５ｍｇ／Ｌ ＮＡＡ，ａｎｄ
７２．４％ ｏｆ ｔｈｅ ｃａｌｕｓｅｓ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｅｄ ｉｎｔｏ ｇｒｅｅｎ
ｂｕｄ－ｌｉｋｅ ｓｔｒｕｃｔｕｒｅｓ．Ｔｈｅｓｅ ｔｉｓｓｕｅｓ ｗｅｒｅ ｓｕｂｃｕｌｔｕｒｅｄ ｏｎ
ｔｏ ｍＭＳ ｍｅｄｉｕｍ ｗｉｔｈｏｕｔ ｐｌａｎｔ ｇｒｏｗｔｈ ｒｅｇｕｌａｔｏｒｓ ｆｏｒ
１５ｄａｙｓ，７６．６％ ｏｆ ｗｈｉｃｈ ｄｅｖｅｌｏｐｅｄ ｉｎｔｏ ｓｈｏｏｔｓ．Ｓｈｏｏｔｓ
ｅｌｏｎｇａｔｅｄ ｔｏ １．５ｃｍ ｌｏｎｇ ｏｎ １／２ｍＭＳ ｍｅｄｉｕｍ ｐｌｕｓ
１．５％ｓｕｃｒｏｓｅ ２０ｄａｙｓ ａｆｔｅｒ ｃｕｌｔｕｒｅ．Ｓｈｏｏｔｓ ｗｅｒｅ ｓｔｉｌ ｕｎ－
ｄｅｒ ｔｅｓｔ ｔｏ ｄｅｖｅｌｏｐ ｒｏｏｔｓ．Ｔｈｉｓ ｐｒｏｔｏｃｏｌ ｍｉｇｈｔ ｐｒｏｖｉｄｅ ａ
ｎｅｗ ａｐｐｒｏａｃｈ ｆｏｒ ｔｈｅ ｒａｐｉｄ ｐｒｏｐａｇａｔｉｏｎ ｏｆ ｓｙｍｐｌｏｃｏｓ
ｐａｎｉｃｕｌａｔａ．
ＲＥＦＥＲＥＮＣＥＳ
［１］ ＷＵ Ｚ Ｙ，ＲＡＶＥＮ Ｐ Ｈ．Ｆｌｏｒａ ｏｆ Ｃｈｉｎａ［Ｍ］．Ｓｔ Ｌｏｕｉｓ：Ｍｉｓｓｏｕｒｉ Ｂｏｔａｎｉｃａｌ
Ｇａｒｄｅｎ Ｓｃｉｅｎｃｅ，１９９６．
［２］ ＧＡＵＲ Ｒ Ｄ．Ｆｌｏｒａ ｏｆ ｄｉｓｔｒｉｃｔ ｇａｒｈｗａｌ，ｎｏｒｔｈ ｗｅｓｔ ｈｉｍａｌａｙａ［Ｍ］．Ｓｒｉ－
ｎａｇａｒ：Ｔｒａｎｓ Ｍｅｄｉａ，１９９９．
［３］ ＭＡＮＡＮＤＨＡＲ Ｎ Ｐ．Ｐｌａｎｔｓ ａｎｄ ｐｅｏｐｌｅ ｏｆ ｎｅｐａｌ［Ｍ］．Ｏｒｅｇｏｎ：Ｔｉｍｂｅｒ
Ｐｒｅｓｓ，２００２．
［４］ ＳＥＭＷＡＬ Ｒ Ｂ，ＳＥＭＷＡＬ Ｄ Ｋ，ＳＥＭＷＡＬ Ｒ Ｓ，ｅｔ ａｌ．Ｃｈｅｍｉｃａｌ ｃｏｎｓｔｉｔｕｅｎｔｓ
ｆｒｏｍ ｔｈｅ ｓｔｅｍ ｂａｒｋ ｏｆ Ｓｙｍｐｌｏｃｏｓ ｐａｎｉｃｕｌａｔａ Ｔｈｕｎｂ．ｗｉｔｈ ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ，ａｎａｌｇｅｓｉｃ
ａｎｄ ａｎｔｉ－ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ［Ｊ］．Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｅｔｈｎｏｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ，２０１１，１３５：
７８－８７．
［５］ ＣＨＯＰＲＡ Ｒ Ｎ，ＮＡＹＡＲ Ｓ Ｌ，ＣＨＯＰＲＡ Ｉ Ｃ，ｅｔ ａｌ．Ｇｌｏｓｓａｒｙ ｏｆ ｉｎｄｉａｎ
ｍｅｄｉｃｉｎａｌ ｐｌａｎｔｓ［Ｍ］．Ｎｅｗ Ｄｅｌｈｉ：Ｃｏｕｎｃｉｌ ｏｆ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ ａｎｄ Ｉｎｄｕｓｔｒｉａｌ Ｒｅｓｅａｒｃｈ
Ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎｓ ａｎｄ Ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ Ｄｉｒｅｃｔｏｒａｔｅ，１９９２．
［６］ ＮＡ Ｍ Ｋ，ＹＡＮＧ Ｓ，ＨＥ Ｌ，ｅｔ ａｌ．Ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ ｏｆ ｐｒｏｔｅｉｎ ｔｙｒｏｓｉｎｅ ｐｈｏｓｐｈａｔａｓｅ
１Ｂｂｙ ｕｒｓａｎｅ－ｔｙｐｅ ｔｒｉｔｅｒｐｅｎｅｓ ｉｓｏｌａｔｅｄ ｆｒｏｍＳｙｍｐｌｏｃｏｓ ｐａｎｉｃｕｌａｔａ［Ｊ］．Ｐｌａｎｔａ
Ｍｅｄ，２００６（７２）：２６１－２６３．
［７］ ＦＡＣＣＩＯＬＡ Ｓ．Ｃｏｒｎｕｃｏｐｉａ ＩＩ：ａ ｓｏｕｒｃｅ ｂｏｏｋ ｏｆ ｅｄｉｂｌｅ ｐｌａｎｔｓ［Ｍ］．Ｖｉｓｔａ：
Ｋａｍｐｏｎｇ Ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎｓ，１９９８．
［８］ ＬＩＵ Ｑ，ＹＡＮＧ Ｙ，ＹＩＮ Ｘ，ｅｔ ａｌ．Ｆｒｕｉｔ ｍｏｒｐｈｏｌｏｇｉｃａｌ ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ｏｆ ｏｉｌ
ｐｌａｎｔ Ｓｙｍｐｌｏｃｏｓ ｐａｎｉｃｕｌａｔａ［Ｊ］．Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｗｉｌｄ Ｐｌａｎｔ Ｒｅｓｏｕｒｃｅｓ，２０１２，３１（６）：
５３－５５，６１．
［９］ Ｃｈｉｎａ Ｏｉｌ Ｐｌａｎｔ Ｅｄｉｔｏｒｉａｌ Ｃｏｍｍｉｔｅｅ．Ｃｈｉｎｅｓｅ ｏｉｌ ｐｌａｎｔ［Ｍ］．Ｂｅｉｊｉｎｇ：Ｓｃｉｅｎｃｅ
Ｐｒｅｓｓ，１９８７．
［１０］ＬＩＵ Ｇ Ｂ，ＬＩＵ Ｙ Ｑ，ＨＵＡＮＧ Ｃ Ｇ，ｅｔ ａｌ．Ｐｈｙｓｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ ａｎｄ
ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ ｏｆ ｂｉｏｄｉｅｓｅｌ ｗｉｔｈ ｆｉｃｅ ｃａｔｅｇｏｒｉｅｓ ｏｆ ｗｏｏｄｙ ｐｌａｎｔ ｓｅｅｄ ｏｉｌ［Ｊ］．Ａｃｔａ
Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｅ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔａｔｉｓ Ｊｉａｎｇｘｉｅｎｓｉｓ，２０１０，３２（２）：３３９－３４４．
［１１］ＢＥＡＮ Ｗ Ｊ．Ｔｒｅｅｓ ａｎｄ ｓｈｒｕｂｓ ｈａｒｄｙ ｉｎ ｇｒｅａｔ ｂｒｉｔａｉｎ［Ｍ］．Ｌｏｎｄｏｎ：Ｃａｍ－
ｂｒｉｄｇｅ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｐｒｅｓｓ，１９１９．
［１２］ＨＵＸＬＥＹ Ａ，ＧＲＩＦＦＩＴＨＳ Ｍ，ＬＥＶＹ Ｍ．Ｔｈｅ ｎｅｗ ｒｏｙａｌ ｈｏｒｔｉｃｕｌｔｕｒａｌ
ｓｏｃｉｅｔｙ ｄｉｃｔｉｏｎａｒｙ ｏｆ ｇａｒｄｅｎｉｎｇ［Ｍ］．Ｌｏｎｄｏｎ：Ｍａｃｍｉｌａｎ Ｐｒｅｓｓ，１９９２．
［１３］ＳＨＥＡＴ Ｗ Ｇ．Ｐｒｏｐａｇａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｒｅｅｓ，ｓｈｒｕｂｓ ａｎｄ ｃｏｎｉｆｅｒｓ［Ｍ］．Ｌｏｎｄｏｎ：
Ｍａｃｍｉｌａｎ Ｐｒｅｓｓ，１９６３：４７９．
［１４］ＦＥＮＮＩＮＧ Ｔ Ｍ，ＧＥＲＳＨＥＮＺＯＮ Ｊ．Ｗｈｅｒｅ ｗｉｌ ｔｈｅ ｗｏｏｄ ｃｏｍｅ ｆｒｏｍ？
Ｐｌａｎｔａｔｉｏｎ ｆｏｒｅｓｔｓ ａｎｄ ｔｈｅ ｒｏｌｅ ｏｆ ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ［Ｊ］．Ｔｒｅｎｄｓ ｉｎ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，
２００２（２０）：２９１－２９６．
［１５］ＤＥＮＧ Ｘ Ｍ，ＨＵＡＮＧ Ｂ Ｘ，ＦＵ Ｓ Ｇ，ｅｔ ａｌ．Ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ ｆｏｒ ｐｒｏｐａｇａｔｉｏｎ
ｏｆ Ｓｙｍｐｌｏｃｏｓｔｅｔａｇｏｎａ［Ｊ］．Ｃｈｉｎａ Ｆｏｒｅｓｔｒｙ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，２００６，２０
（５）：５９－６１．
［１６］ＭＵＲＡＳＨＩＧＥ Ｔ，ＳＫＯＯＧ Ｆ．Ａ ｒｅｖｉｓｅｄ ｍｅｄｉｕｍ ｆｏｒ ｒａｐｉｄ ｇｒｏｗｔｈ ａｎｄ
ｂｉｏ－ａｓｓａｙｓ ｗｉｔｈ ｔｏｂａｃｃｏ ｔｉｓｓｕｅ ｃｕｌｔｕｒｅｓ［Ｊ］．Ｐｈｙｓｉｏｌ Ｐｌａｎｔ，１９６２，１５（３）：４７３－４９７．
［１７］ＬＬＯＹＤ Ｇ．Ｃｏｍｍｅｒｃｉａｌｙ－ｆｅａｓｉｂｌｅ ｍｉｃｒｏ－ｐｒｏｐａｇａｔｉｏｎ ｏｆ ｍｏｕｎｔａｉｎ ｌａｕｒｅｌ，
Ｋａｌｍｉａ ｌａｔｉｆｏｌｉａ，ｂｙ ｕｓｅ ｏｆ ｓｈｏｏｔ－ｔｉｐ ｃｕｌｔｕｒｅ［Ｊ］．Ｂ Ｉｎｔ Ｐｌａｎｔ Ｐｒｏｐ，１９８０（３０）：
４２１．
２２１
北方园艺２０１６（０５）：１２３～１２７ ·生物技术·
作者简介：鲁京慧（１９６７－），女，河北承德人，本科，实验师，现主要从事
园林工程及园林史的教学与科研工作。Ｅ－ｍａｉｌ：ｌｓｚ５２０９９９＠１２６．ｃｏｍ．
收稿日期：２０１５－０６－０１
ＤＯＩ：１０．１１９３７／ｂｆｙｙ．２０１６０５０３３
云南栽培金盏花遗传多样性ＲＡＰＤ分析
鲁 京 慧
（河北旅游职业学院 园艺系，河北 承德０６７０００）
摘 要：用采自云南昆明、曲靖和玉溪等地的８份金盏花种质资源为试材，利用改良ＣＴＡＢ
法提取ＤＮＡ，筛选引物，优化ＰＣＲ反应体系，对其进行遗传多样性ＲＡＰＤ（ｒａｎｄｏｍ ａｍｐｌｉｆｉｅｄ
ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｃ ＤＮＡ）和ＮＴＳＹＳ２聚类分析，以建立金盏花亲缘关系分析方法，明确分布在云南省各
地的金盏花种质资源之间的亲缘关系和遗传多样性。结果表明：优化的ＰＣＲ反应体系能达到良
好的扩增效果，３０条ＲＡＰＤ引物在８份金盏花种质资源中共产生１６５个位点，其中４５个位点具
有遗传多态性，约占２７．２８％。ＣＫ与７号的相似性最小，用ＣＫ和７号作为亲本的后代会有较大
的分离。试验表明金盏花种植资源遗传多样性丰富，遗传关系与其地理关系密切相关，但并非严
格的限聚在一起，需结合表型更深入地分析。
关键词：金盏花；ＲＡＰＤ；遗传多样性
中图分类号：Ｓ ６８１．７０３．６ 文献标识码：Ａ 文章编号：１００１－０００９（２０１６）０５－０１２３－０５
金盏花（Ｃａｌｅｎｄｕｌａ ｏｆｆｉｃｉｎａｌｉｓ Ｌ．）属菊科金盏菊属
一年生草本植物，又名金盏菊、山金菊等，适合于我国大
多数地区栽培，具有较高的经济价值。首先作为园林植
物中最为重要的观赏花卉之一，其在城市园林造景，局
部区域美化中具有独特作用，其次以金盏花的植株和花
为原料可提取叶黄素和精油，不但是化妆品中一种天然
的、具有良好抗氧化功能的原料，还可用于治疗多种皮
肤疾病，如外伤、皮疹、皮肤破裂等，具有抗感染和杀菌
消炎等功效［１］。近些年来，国内外学者主要开展金盏花
授粉结实和环境条件的关系［２］、水肥措施对经济性状的
影响［３］、盐胁迫对金盏花生长和逆境的生理响应机制［４］、
雄性不育两用系选育及植物学特性研究［５］，而关于金盏
花种质资源的研究尚鲜见报道。
分子标记技术是分析种质亲缘关系的有力工具，其
中ＲＡＰＤ分子标记是建立在ＰＣＲ基础之上。用筛选的
有１０个碱基的单链随机引物，对基因组ＤＮＡ进行ＰＣＲ
扩增以检测其多态性位点，具有操作简单、无需专门设
计引物、对模板ＤＮＡ质量要求不高、不受材料生长情况
限制，能反应材料的遗传信息差异等优点；虽然ＲＡＰＤ
分子标记有重复性不佳的缺点，但可以通过改良ＰＣＲ反
应体系加以改善［６］。已有学者为了在金盏花雄性不育
的育种过程中使用ＲＡＰＤ分子标记技术，通过条件优化
白檀未成熟胚的器官发生和植株再生
杨 艳１，蒋 丽 娟２，汤 玉 喜１，李 昌 珠１，唐 洁１，李 永 进１
（１．湖南省林业科学院，湖南 长沙４１０００４；２．中南林业科技大学 生命科学院，湖南 长沙４１０００４）
摘 要：以白檀未成熟胚为试材，以改良 ＭＳ为培养基，研究了白檀未成熟胚的器官发生和植株再生。结果表
明：改良 ＭＳ（ｍＭＳ）能够很好的诱导愈伤组织，在添加了０．２ｍｇ／Ｌ ６－ＢＡ＋０．１ｍｇ／Ｌ ＮＡＡ的培养基中，诱导率
高达９２．５％；胚性愈伤组织分化最佳培养基为ｍＭＳ＋０．２５ｍｇ／Ｌ ６－ＢＡ＋０．１５ｍｇ／Ｌ ＮＡＡ，分化率为７２．４％；分化
出的胚性愈伤组织在空白ｍＭＳ培养基上继代培养１５ｄ，７６．６％的组织分化出芽，再转入１／２ｍＭＳ＋１．５％蔗糖培养基
上培养２０ｄ，芽长至１．５ｃｍ。
关键词：白檀；未成熟胚；器官发生；植株再生
３２１