全 文 ：P450代谢后，生成自由基(·CCl3 和·OOCCl3) ，后者可直接损伤
质膜，并启动膜脂质过氧化，使膜稳定性降低，造成肝细胞变性坏
死，其中线粒体膜受影响最大，这与线粒体生成自由基多，以及线
粒体膜含酶丰富有关。·CCl3 还可以与肝细胞微粒体脂质和蛋
白质发生结合，损伤肝细胞膜的结构与功能，使肝细胞内可溶酶
如 ALT、AST 等从细胞内游离出来，使血清 ALT、AST 升高，并最
终导致肝细胞的坏死［4］。因此，血清中的 ALT、AST 水平的高低
可以敏感地反映肝脏细胞膜的受损程度。而 MDA 是氧自由基
与细胞膜表面不饱和脂肪酸反应(脂质过氧化反应)的产物，当
过量的氧自由基产生于组织细胞并对其发生损伤时，会引起
MDA含量升高［5］。另外，肝指数可间接反映肝纤维化程度，也
是动物实验最为简单的检测指标之一。
实验结果表明，高、中剂量美味猕猴桃根提取物，均使血清中
ALT、AST活性明显降低，显著降低 MDA 含量，高、中、低剂量均
明显降低小鼠 HI，说明美味猕猴桃根提取物对 CCl4 致小鼠慢性
肝损伤具有一定的保护作用，其作用机理可能是降低肝内脂质过
氧化反应，清除自由基，通过保护肝细胞膜结构的完整及功能，而
拮抗 CCl4 对肝细胞膜的损害作用。
参考文献:
［1］ 江苏新医学院．中药大辞典(下册) ［M］．上海:上海科学技术出版
社，1997:2211．
［2］ 李 丽，钟振国，梁 洁，等．美味猕猴桃根提取物对小鼠急性肝损
伤的保护作用［J］．时珍国医国药，2007，18(3) :封 3．
［3］ 朱起贵，曾岳祥，李天望，等． 保肝康抗急慢性肝损伤的实验研究
［J］．中西医结合肝病杂志，2000，10(6) :31．
［4］ 王晓立．柳茶对 CCl4 肝损伤的保护作用及机理探讨［J］．中国中药
杂志，1995，20(20) :746．
［5］ 赵铁建，钟振国，方 卓，等．白花丹水煎液对四氯化碳慢性肝损伤
小鼠肝组织脂质过氧化的影响［J］． 广西医科大学学报，2006，23
(5) :725．
收稿日期:2010-06-26; 修订日期:2010-09-02
基金项目:广西高校人才小高地建设创新团队资助计划
作者简介:韦建华(1972-) ，女(壮族) ，广西都安人，现任广西中医学院讲
师，硕士学位，主要从事中药、民族药有效成分与质量标准研究工作．
草龙提取物及化学成分的抗菌活性研究
韦建华，卢汝梅，周媛媛
(广西中医学院，广西 南宁 530001 )
摘要:目的 研究草龙提取物及化学成分的抗菌活性。方法 采用琼脂稀释法测定草龙各个部位提取物及单体成分对金
黄色葡萄球菌，表皮葡萄球菌，大肠埃希菌及绿脓杆菌的抑菌效果。结果 醋酸乙酯提取物和正丁醇提取物有明显的抑
菌的活性，水提取部位在高质量浓度下仅有一定的生物活性，石油醚提取物没有抑菌活性;从醋酸乙酯部位分得的没食
子酸也有抑菌作用。结论 草龙醋酸乙酯部位和正丁醇部位有明显的体外抑菌作用，抑菌作用最强的是醋酸乙酯部位;
没食子酸单体具有体外抑菌作用。
关键词:草龙; 有效部位; 没食子酸; 抗菌作用
DOI标识:doi:10． 3969 / j． issn． 1008-0805． 2011． 06． 079
中图分类号:R285． 5 文献标识码:B 文章编号:1008-0805(2011)06-1449-02
草龙 Ludwigia hyssopifolia(G． Don)Exell 为柳叶菜科丁香蓼
属植物，分布于台湾、湖南、广东、海南、广西等中国西南各地［1］，
其干燥全草具有发表清热、解毒利尿、凉血止血等药理活性，用于
治疗感冒发热、咽喉肿痛、疮疖等［2］。以往文献及本课题前期工
作多侧重于化学成分的研究［3，4］，与药理作用相结合的研究较
少。本实验以金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、大肠埃希菌、绿脓
杆菌对广西草龙提取物及化合物没食子酸进行抗菌活性研究，以
期明确草龙中主要抑菌活性成分的所在部位，进一步确定草龙中
所含没食子酸是否为草龙抗菌活性的物质基础。
1 材料
1． 1 菌种 金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、大肠埃希菌、绿脓杆
菌等标准菌株均为广西中医学院基础医学院微生物与免疫教研
室提供。
1． 2 药材及试剂 草龙全草采于广西玉林，经广西中医学院中药
研究所刘寿养副教授鉴定为柳叶菜科植物线叶丁香蓼草龙 Lud-
wigia hyssopifolia(G． Don)Exell的全草。标本存放于广西中学院
药学院中药化学教研室。
氯化钠注射液(广西南宁百会药业集团有限公司)、医用蒸
馏水、营养琼脂(国药集团化学试剂有限公司)、DMSO(二甲亚基
砜) (天津汇英化学试剂有限公司)、0． 2% /100 ml 氧氟沙星注射
液(江苏扬州中宝制药有限公司)。
1． 3 没食子酸的分离纯化 草龙干燥全草粗粉 5kg，用 95%乙醇
渗漉提取，收集 10 倍量渗漉液，药渣再用 60%乙醇渗漉提取，收
集 10 倍量渗漉液，合并渗漉液，减压浓缩得浸膏 450 g;依次用石
油醚、醋酸乙酯、正丁醇溶剂萃取得石油醚提取物 100 g;醋酸乙
酯提取物 25 g;正丁醇提取物 85 g。醋乙酸乙酯提取物经硅胶柱
色谱、凝胶色谱法反复分离纯化，从醋酸乙酯提取物中分离纯化
得到没食子酸单体化合物。
1． 4 草龙提取物制备 草龙粗粉 95%乙醇回流提取 2 h后，提取
液浓缩成浸膏，浸膏加水稀释后依次用石油醚、醋酸乙酯和正丁
醇萃取，回收溶剂，得到石油醚、醋酸乙酯、正丁醇和水 4 个部位
的浸膏。临用前以二甲基亚砜助溶后生理盐水溶解，无菌过滤后
备用。
2 方法
2． 1 琼脂稀释法实验依据的原理［5］ 在肉汤或琼脂平板中将抗
菌药物进行一系列二倍稀释后再定量接种检测菌，35℃孵育 18
～ 24 h后观察。抑制肉眼可见生长的最低药物浓度为测定药物
对检测菌的最低抑菌浓度(MIC)。
2． 2 琼脂稀释法测定
2． 2． 1 培养基 36 g营养琼脂加 500 ml蒸馏水高压灭菌。
2． 2． 2 检测菌和标准菌的准备 各种菌液用生理盐水校正到
0． 5 麦氏标准。
2． 2． 3 药琼脂的制备 分别取草龙提取物石油醚部位，醋酸乙酯
部位，正丁醇部位，水部位浸膏各 1． 5 g，加 1． 5 ml DMSO助溶，随
后溶于 0． 9%氯化钠注射液 30 ml中。抗菌药物浓度为 50 mg /ml
为最大抗菌药物浓度，加 0． 9%氯化钠注射液二倍稀释法成 8 个
浓度梯度，分别是 50，25，12． 5，6． 3，3． 1，1． 6，0． 8 mg /ml，取 5 ml
加入一系列已做好标记的内径为 9 mm 的平板内。再取高压灭
·9441·
LISHIZHEN MEDICINE AND MATERIA MEDICA RESEARCH 2011 VOL ． 22 NO． 6 时珍国医国药 2011 年第 22 卷第 6 期
菌好温度保持在 50℃以上的营养琼脂 5 ml 加到平板内(药物∶
琼脂 = 1∶ 1) ，边加边摇晃平板，使药物和培养基充分混匀，平行
两组试验。含药琼脂的药物浓度分别是 25，12． 5，6． 3，3． 1，1． 6，
0． 8，0． 4，0． 2 mg /ml。
2． 2． 4 阳性对照组 用氧氟沙星配成最大浓度为 25 μg / ml 溶
液，琼脂二倍稀释后含药琼脂浓度为 12． 5，6． 3，3． 1，1． 6，0． 8，
0． 4，0． 2，0． 1 μg / ml。
2． 2． 5 细菌接种 用 1 μl 定量接种环进行接种，接种时先接种
含药浓度的平板，然后接种含药浓度高的平板，最后接种不含抗
菌药物的生长对照平板。35℃恒温培养箱 24 h后观察结果。
2． 3 结果判断［5］ 检查整个实验过程中检测菌的存活状态，菌
落生长被完全抑制的最低药物浓度为该药对检测菌的 MIC。单
一菌生长可忽略不计。
3 结果
3． 1 氧氟沙星(阳性对照组)对抗菌的影响 实验结果表明，氧
氟沙星对金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、大肠埃希菌、绿脓杆菌
均有抑制作用。结果见表 1。
表 1 阳性药物(氧氟沙星)抑菌作用
菌种
细菌生长程度
12．5
μg·ml －1
6．3
μg·ml －1
3．1
μg·ml －1
1．6
μg·ml －1
0．8
μg·ml －1
0．4
μg·ml －1
0．2
μg·ml －1
0．1
μg·ml －1
SA － － － － － － － +
SE － － － － － － － +
EC － + + + + + + + + + + + + + + + + + + +
PA － － － － － － + + + +
“ －”表示没有细菌生长;与空白对照“ +”表示约有 30%细菌生长，“ + +”表
示约有 60%细菌生长，“ + + +”表示约有 100%细菌生长
3． 2 广西草龙各提取部位对抗菌活性的影响 初步筛选显示，醋
酸乙酯提取物和正丁醇提取物有明显的抑菌的活性，水提取部位
在高质量浓度下仅有一定的生物活性，石油醚提取物没有抑菌活
性。结果见表 2 ～ 4。
表 2 草龙醋酸乙酯部位提取物的抑菌作用
菌种
细菌生长程度
25
mg·ml －1
12．5
mg·ml －1
6．3
mg·ml －1
3．1
mg·ml －1
1．6
mg·ml －1
0．8
mg·ml －1
0．4
mg·ml －1
0．2
mg·ml －1
SA － － － － － － + + +
SE － － － － － － + + +
EC － － － － + + + + + + + + +
PA － － － － － + + + + + +
“ －”表示没有细菌生长;与空白对照“ +”表示约有 30%细菌生长，“ + +”表
示约有 60%细菌生长，“ + + +”表示约有 100%细菌生长
表 3 草龙正丁醇部位提取物的抑菌作用
菌种
细菌生长程度
25
mg·ml －1
12．5
mg·ml －1
6．3
mg·ml －1
3．1
mg·ml －1
1．6
mg·ml －1
0．8
mg·ml －1
0．4
mg·ml －1
0．2
mg·ml －1
SA － － － － + + + + + + + + + +
SE － － － － － － + + + +
EC － － + + + + + + + + + + + + + +
PA － － － + + + + + + + + + + + +
“ －”表示没有细菌生长;与空白对照“ +”表示约有 30%细菌生长，“ + +”表
示约有 60%细菌生长，“ + + +”表示约有 100%细菌生长
表 4 草龙水部位提取物的抑制作用
菌种
细菌生长程度
25
mg·ml －1
12．5
mg·ml －1
6．3
mg·ml －1
3．1
mg·ml －1
1．6
mg·ml －1
0．8
mg·ml －1
0．4
mg·ml －1
0．2
mg·ml －1
SA － － + + + + + + + + + + + +
SE － － + + + + + + + + + +
EC + + + + + + + + + + + + + + + +
PA + + + + + + + + + + + + + + +
“ －”表示没有细菌生长;与空白对照“ +”表示约有 30%细菌生长，“ + +”表
示约有 60%细菌生长，“ + + +”表示约有 100%细菌生长
3． 3 单体化合物没食子酸的抑菌作用 研究表明没食子酸单体
对金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、大肠埃希菌、绿脓杆菌均有很
好的抑制作用。结果见表 5。
表 5 没食子酸的抑菌作用
菌种
细菌生长程度
12．5
mg·ml －1
6．3
mg·ml －1
3．1
mg·ml －1
1．6
mg·ml －1
0．8
mg·ml －1
0．4
mg·ml －1
0．2
mg·ml －1
0．1
mg·ml －1
SA － － + + + + + + + + + + + +
SE － － + + + + + + + + + +
EC + + + + + + + + + + + + + + + +
PA + + + + + + + + + + + + + + +
“ －”表示没有细菌生长;与空白对照“ +”表示约有 30%细菌生长，“ + +”表
示约有 60%细菌生长，“ + + +”表示约有 100%细菌生长
4 讨论
本研究以金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、大肠埃希菌、绿脓
杆菌 4 种菌为筛选模型，以抗菌活性为指标，较为系统地对广西
草龙不同提取部位和单体化合物没食子酸进行抗菌活性的初步
研究。结果表明，广西草龙中抗菌作用的物质存在于提取极性较
大的部位，即醋酸乙酯提取物和正丁醇提取物，而石油醚部位没
有抗菌活性。草龙中化学成分没食子酸的抗菌作用效果良好。
这为揭示草龙抑菌作用的药效物质基础提供了一定的科学依据。
但由于分离单体的量比较少，没有对所有的单体都进行抑菌活性
筛选，也并未对单体化合物的药理活性和构效关系进行研究，我
们有必要在今后对草龙进行更深入的研究。
参考文献:
［1］ 中国科学院中国植物志编辑委员会．中国植物志［M］． 北京:科学
出版社，1979．
［2］ 《中华本草》编委会．中华本草(第 3 册) ［M］．上海:上海科学技术
出版社，1999:11．
［3］ Das B，Kundu J，Bachar SC，et al． Antitumor and antibacterial activi-
ty of ethylacetate extract of Ludwigia hyssopifolia linn and its active
principle piperine［J］． Pakistan Journal of Pharmaceutical Sciences，
2007，Apr，20(2) :128．
［4］ 卢汝梅，周媛媛，韦建华．草龙华学成分的研究［J］．中草药，2009，
40(9) :1372．
［5］ 徐叔云，卞如濂，陈 修．药理实验方法学(第 2 版) ［M］．北京:人
民卫生出版社，2002:1659．
·0541·
时珍国医国药 2011 年第 22 卷第 6 期 LISHIZHEN MEDICINE AND MATERIA MEDICA RESEARCH 2011 VOL． 22 NO． 6