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走马胎槲皮素提取工艺研究及含量测定



全 文 :世界最新医学信息文摘 2016 年 第 16 卷 第 78 期 139
解除痉挛而改善脑部供血,使眩晕症状得以缓解,因此对老年椎
动脉型颈椎病有效,可常规使用。
参考文献
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·药物研究·
走马胎槲皮素提取工艺研究及含量测定
张传耀 1,莫佳佳 2,王翔 1
(1.安徽中医药大学,安徽 合肥 230000;2.合肥医工医药有限公司,安徽 合肥 230000)
摘 要:目的 优选走马胎槲皮素的提取工艺,建立走马胎槲皮素含量测定方法。方法 以走马胎槲皮素提取率为指标,
通过单因素考察,研究走马胎槲皮素的最佳提取工艺;采用紫外可见分光光度法,以槲皮素为对照品,Al(NO3)3显色
在波长 270 nm处对样品中的槲皮素进行含量测定。结果 走马胎中槲皮素最佳提取工艺为:料液比 1:10(g:mL),
60%乙醇提取 1 h。在此提取条件下,三份走马胎中槲皮素平均含量为 1.38%。结论 建立了超声提取走马胎槲皮素含
量测定方法,此方法简单、稳定、参数准确,有一定的实用价值。
关键词:走马胎;槲皮素;单因素;含量测定
中图分类号:R749.053    文献标识码:B    DOI:10.3969/j.issn.1671-3141.2016.78.113
0 引言
  走马胎又名走马藤、大叶紫金牛,为紫金牛科紫金牛属植
物走马胎(Ardisia gigantifolia Stapf.)的干燥根茎,主要分布在我
国西南地区,资源丰富,为民间常用的跌打伤科药 [1];临床报
道走马胎在治疗类风湿关节炎上疗效与雷公藤多苷片相似,起
效率达88%,并且无明显毒副反应[2]。走马胎槲皮素的研究还
未有报道。槲皮素(Quercetin) 是一种自然界天然存在的黄酮类
化合物,大量研究表明槲皮素具有抗炎、抗病毒、抗肿瘤、抗
氧化、保护心血管、免疫抑制和维持血糖等稳定强大的生物活性,
本实验对走马胎槲皮素进行薄层鉴定,并开展提取工艺研究及
含量测定,为进一步开发走马胎资源提供科学依据。
1 仪器与试剂、药材
1.1 仪器。UV-1800岛津紫外可见分光光度计;RE-52AA旋
转蒸发仪,上海亚荣生化仪器厂; 电子天平,AL104梅特勒-
托利多仪器(上海)有限公司; 循环水式真空泵,巩义市予华
责任有限公司; KH2200超声器,昆山禾创超声仪器厂。
1.2 试剂。槲皮素,中国食品药品检定研究所;硝酸铝,中国
上海振欣试剂厂2010-03-03;无水乙醇(分析纯),无锡市晶
科化工有限公司20110601;硅胶G薄层板。
1.3 药材。走马胎购于安徽毫州饮片厂,经浙江中医药大学中
药教研室陈锡林副教授鉴定为紫金牛科紫金牛属走马胎(Ardisia
gigantifolia Stapf.)。
2 方法和结果
2.1 对照品溶液的制备。精密称取槲皮素标准品7.5 mg,置于
50 mL容量瓶中,加入60%的乙醇溶解,定容至50 mL,即得
每1mL中含0.15mg的槲皮素对照品标准溶液 。
2.2 供试品溶液的制备。取走马胎粉碎过40目筛,精密称取3
g置于锥型瓶中,加入10倍量的60%乙醇浸泡1 h,超声提取1 h,
抽滤得到滤液,减压旋转蒸发干滤液,得浸膏用60%乙醇定容
至25 mL,作为供试品。
2.3 走马胎中槲皮素薄层鉴定。取硅胶G板在105℃下活化30
min,用0.3 mm毛细管吸取走马胎供试液和标准对照液分别点
在薄层板上,少量多次,然后吹风筒吹干,甲苯:乙酸乙酯:
甲酸=5:2:2为展开剂展开。得到如下所示的图谱1,供试品色
谱在与对照品色谱相应位置上县相同颜色的斑点表明走马胎中
含有槲皮素成分。
2.4 标准曲线的制作。吸取上述槲皮素对照品溶液0.8、1.0、
1.2、1.4、1.6 mL,分别置于25 mL容量瓶中,加入4 mL10%
Al(NO3)3,用60%乙醇定容至25 mL,显色10min后于270nm波
长处测定吸光度。以吸光度为纵坐标,浓度为横坐标,绘制标
准曲线,得到回归方程y=6.5152x-0.11137, r=0.9997。结果表明,
槲皮素对照品在0.0048 mg/L~0.0096 mg/L范围呈线性关系。
3 方法学考查
3.1 精密度试验。精密移取槲皮素对照品溶液0.1 mL,加入
4 mL10% Al(NO3)3定容至25 mL显色10 min后连续测定6次,
RSD为1.19%。表明仪器精密度良好。
3.2 稳定性试验。吸取供试品溶液0.1 mL,加入4 mL 10%
Al(NO3)3定容至25 mL,显色10 min后,每隔30 min检测其吸
光度,共测定180min,RSD=1.88%。表明该显色反应在3 h内稳定。
3.3 加样回收试验。精密称取3.5 g同一批次走马胎粉碎过40
目筛样品6份按2.2项下进行处理,吸取0.1 mL供试品和0.8
mL槲皮素对照品溶液,加入4 mL10% Al(NO3)3定容至25 mL,
显色10 min后测定加样前后的吸光度,得出槲皮素含量,计算
回收率,结果见下表1,平均回收率=97.38%,RSD=2.8%。
4 走马胎槲皮素的提取工艺优选
4.1 料液比考查。取3 g走马胎粉碎过40目筛样品六份,分别
加6、8、10、12、14、16倍量60%乙醇浸泡1 h后,超声1 h,
抽滤得到滤液,减压旋转蒸发浓缩,得浸膏用60%乙醇定容至
25 mL,吸取0.1 mL对照品,加入4 mL10% Al(NO3)3定容至25
mL,显色10 min后,测定各份的吸光度,考察不同料液比对槲
(下转第142页)
图 1 走马胎中的槲皮素(S: 槲皮素标准液 ;Y1、Y2 :走马胎供试液)
World Latest Medicne Information (Electronic Version) 2016 Vo1.16 No.78142
投稿邮箱:sjzxyx88@126.com
表 2 各科室的中药饮片与中药免煎颗粒使用情况
科室 中药饮片 免煎颗粒
中医内科 5423 2835
针灸理疗 2381 1046
皮肤门诊 623 2349
中医外科 377 1600
骨科门诊 35 0
保健门诊 24 2
耳鼻喉门诊 23 0
妇科门诊 14 2
普外门诊 3 1
口腔门诊 3 0
泌尿外科门诊 1 0
中药免煎颗粒的使用,避免了煎煮中药时所带来的麻烦、令人
不悦的气味、煎煮过程的繁琐等,但同时,有研究发现,中药
免煎颗粒也存在有疗效不稳定的不足,需要加以改进。从核心
概念上来分析,中药免煎颗粒是经现代制药技术提取、浓缩、
分离、干燥、制粒、包装精制而成的纯中药产品 [8],具有方便
携带的服用的优点,受到广大使用者的欢迎。中药饮片和中药
免煎颗粒的使用,在近年来很受的关注。但同样有一些质量问
题需要加强监管。比如在某些报道可以看到中药饮片出现染色
增重、铝盐和镁盐加重、药材掺假、走票过票、贴牌包装等问题。
中药免煎颗粒在使用前,也需要有专业人员进行检查,鉴别真伪。
中药饮片与中药免煎颗粒在临床中的应用越来越广泛,许多科
室中也开始重视相关的使用问题。在本次的讨论中,笔者对我
院2015年1月至2015年12月的中药饮片与中药免煎颗粒的销
售情况进行统计分析,了解中药饮片与中药免煎颗粒的临床应
用情况。根据最终观察的结果,中药饮片与中药免煎颗粒的销
售情况呈现出上升的趋势,但二者之间相比来看,中药饮片的
销售情况更佳。同时,在医院中,中医内科、针灸理疗等科室
更偏向于使用中药饮片,而在皮肤门诊、中医外科等科室则更
加偏向于使用中药免煎颗粒。
  综上所述,中药饮片与中药免煎颗粒的应用在现代医学中
十分广泛,二者的销售情况均呈上升趋势,在不同科室对于两
种中药药方的使用有所不同,临床应用中也要酌情使用。
参考文献
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(上接第139页)
皮素提取率的影响。见图2,结果表明,当料液比在1:10(g:mL)
时槲皮素吸光度最大,故选1:10(g:mL)作为槲皮素提取的料液比。
4.2 提取时间考查。取3 g走马胎粉碎过40目筛样品六份,加
10倍量60%乙醇浸泡1h后,分别超声0.5、1、1.5、2、2.5、3 h,
抽滤得到滤液,减压旋转蒸发浓缩,得浸膏用60%乙醇定容至
25 mL,吸取0.1 mL对照品,加入4 mL10% Al(NO3)3至25 mL,
显色10 min后,测定各份的吸光度,考察不同提取时间对槲皮
素提取率的影响。见图3,结果表明提取时间大于1 h后,槲皮
素吸光度变化不大,故选1 h作为提取时间。
5 讨论
  良好的提取工艺是中药更好发挥药效的前提,本文以走马
胎为原材料,以槲皮素含量为指标,通过薄层鉴定槲皮素,运
用单因素考察了料液比、提取时间、溶剂浓度等因素对走马胎
槲皮素提取率的影响,确定了最佳提取工艺,即料液比1:10,
60%乙醇超声提取1 h。在最佳提取工艺基础上,对三份走马胎
进行了槲皮素含量测定,平均含量在1.38%。本文鉴定了走马
胎中槲皮素的存在,并探究了走马胎中槲皮素的提取方法此,
方法精密度高,分离度良好,具有实用性,为走马胎中有效成
分槲皮素的提取奠定实验基础。
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图 2 乙醇体积对提取液中槲皮素含量的影响
表 1 加样回收试验
编号 原样品吸光度
(A)
加样后吸光
度(A)
回收率
(%)
平均回收
率(%)
RSD(%)
1 0.386 0.515 102.5
97.38 2.80
2 0.387 0.507 95.4
3 0.392 0.513 96.2
4 0.398 0.518 95.4
5 0.388 0.512 98.6
6 0.390 0.510 96.2
图3 提取时间对走马胎中槲皮素含量的影响