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翻白草对糖尿病大鼠血管内皮细胞形态结构的影响



全 文 :收稿日期: 2005 - 03- 17
基金项目:湖北省教育厅重点科研项目( 2004X080) ; 湖北中医学
院院级科研课题
作者简介:韩永明( 1970 - ) ,男,湖北武汉人,讲师,博士研究生。
文章编号: 1009 - 5276( 2005) 09 -1614 - 03
翻白草对糖尿病大鼠血管内皮细胞形态结构的影响
韩永明,袁 芳,段妍君,陈泽斌,张六通
(湖北中医学院, 湖北 武汉 430061)
摘 要: 目的:研究翻白草对糖尿病大鼠血管内皮细胞的作用。方法: 采用四氧嘧啶建立糖尿病大鼠模
型, 自造模成功后,灌胃给予翻白草水煎液,连续给药 4 周, 采用血管内皮细胞平铺技术制作血管内皮铺片,
镜下观察。结果: 翻白草组大鼠血管内皮细胞胞膜呈柔和锯齿状, 边界清晰、连续, 胞核椭圆形、居于细胞中
央。结论: 翻白草能有效保护血管内皮细胞。
关键词: 翻白草;糖尿病; 血管内皮细胞
中图分类号: R58711 文献标识码: B
翻白草( PDB) , 又名天青地白草, 属蔷薇科委陵菜
属, 为多年生草本,全草及根入药; 它有清热润燥、凉血解
毒、止血消肿、止痢之功效; 多用于治疗痢疾、疟疾、痈肿、
各种出血 [1 ]。然民间常作为偏方治疗糖尿病 ,多有良效。
笔者研究证实了该药具有明显的降低糖尿病大鼠血糖的
作用 [2 ]; 且近年有少量实验研究和临床报道进一步证实
了该药的降血糖作用 [3~ 5]。本文通过研究翻白草对糖尿
病大鼠血管内皮细胞 ( VEC)形态结构的作用, 旨在探讨
其防治糖尿病血管病变的可能机制。
1 材料和方法
11 1 实验动物 Wistar大鼠 40 只,体重 200~ 250g,雌雄
不限。于实验前 1 周一次性购进, 置于避强光、温暖、安
静的环境中饲养, 室温 18~ 25e , 自由摄食饮水。
11 2 造模方法 采用四氧嘧啶( alloxan, ALX)制作糖尿
病模型的方法进行造模 [6~ 8]。大鼠禁食 24h 后, 以 215%
ALX(美国 Sigma 公司 ) 生理盐水溶液 (现配现用) , 按
120mg /kg /d剂量对大鼠行腹腔注射, 每天 1 次, 连续 2
天。在造模 48h 内,以葡萄糖水供大鼠饮用。造模后第5
日测血糖(不禁食) , 以血糖在 16165mmol /L 以上者为造
模成功,造模成功率达 70% ; 若造模不成功者, 仍按上法
补注 1 次,成功率达 100%。
11 3 分组和给药方法 随机选取 40 只大鼠中的 10 只
为正常对照组。其余 30 只大鼠按上述方法进行造模, 成
功后随机分为 3 组:模型对照组、实验对照组、翻白草组,
每组 10只。A1 正常对照组: 为正常大鼠, 不造模、不给
药。B1 模型对照组: 造模成功后不治疗。C1 实验对照
组: 造模成功后,予以优降糖( 01 25mg /kg /d)灌胃, 连续治
疗 4 周,每天 1 次。D1 翻白草组: 造模成功后, 予以翻白
草水煎液( 15g /kg /d)灌胃, 连续治疗 4 周,每天 1 次。
11 4 取材和制片 采用血管内皮细胞平铺技术制作内
皮细胞铺片[9 ] , 具体步骤如下。 ( 1) 固定: 各组大鼠以
2%戊巴比妥钠腹腔注射麻醉, 打开胸腔, 剪开左、右心
房,经左心室插管至升主动脉,以血管夹固定插管, 先以
4 e 5%葡萄糖溶液 100mL快速冲洗, 继之灌注 4 e 0125%
AgNO3溶液 100mL, 再以 4e 5% 葡萄糖溶液 100mL 快速
冲洗,然后用 4e 4%多聚甲醛溶液 200mL灌注固定。灌
注完毕后,取出胸主动脉, 除去血管周围组织, 沿血管长
轴纵向剪开血管, 将其贴于滤纸上(内膜面朝下) , 置于
4 e 4%多聚甲醛溶液中后固定 2h。( 2)染色:将固定后的
胸主动脉用蒸馏水漂洗 3 次, 每次 5min; 然后置于 Harris
苏木素染液中染色 15min,流水分化 1min。( 3)脱水: 常规
梯度浓度酒精脱水。( 4)贴片: 将血管剪成 3 段, 按顺序
用 16%火棉胶溶液贴于火棉胶载玻片上(将洁净载玻片
浸入 16%火棉胶溶液中, 然后取出放入干燥器内干燥) ,
自然干燥(约 60min)。( 5)软化: 将切片浸入 30% 酒精中
软化 30~ 60min。( 6)剥离: 小心揭去血管外膜、中膜, 血
管内皮层即保留在玻片上。( 7)脱水:常规梯度浓度酒精
脱水。( 8)透明:以石炭酸、甲苯、二甲苯混合液 (石炭酸
21 5g、甲苯 25mL、二甲苯 50mL)透明。( 9)封片: 中性树胶
封片。
2 结 果
镜下观察( 400 @ ) : 正常对照组大鼠 VEC 呈多角形,
细胞边界清晰,细胞间嗜银线呈连续细密锯齿状、柔和。
模型对照组大鼠 VEC 细胞间嗜银线锯齿变大、稀疏、僵
硬变直,有明显断裂现象; 说明模型对照组大鼠血管内皮
细胞连接遭破坏、细胞膜损伤较严重。实验对照组大鼠
VEC 细胞间嗜银线锯齿变大、稀疏, 存在断裂现象, 但不
明显。翻白草组大鼠 VEC 接近于正常对照组,说明翻白
草对 VEC 形态结构具有较好的保护作用。
3 讨 论
糖尿病( DM)是世界范围内的、越来越常见的内分泌
代谢紊乱性疾病。根据WHO 资料, DM 已经成为继心血
管病和肿瘤之后的第三大非传染病, 严重威胁着人类的
生存和生活质量。高血糖是由于胰岛素分泌或作用的缺
陷、或者两者同时存在而引起的。WHO 于 1999 年公布
了糖尿病的最新诊断和分型标准: ¹ 由于各种原因引起
胰岛的变性坏死、技能低下, 导致胰岛素绝对不足而产生
的糖尿病为 1 型糖尿病; º因胰岛素分泌相对不足而
产生的糖尿病为2型糖尿病; »在妊娠期间发现有各种
第 23卷 第 9期
2 0 0 5 年 9月
中 医 药 学 刊
CHINESE ARCHIVES OF TRADITIONAL CHINESE MEDICINE
Vol. 23 No. 9
Sep . , 2 0 0 5
中医药
1614
学刊
DOI:10.13193/j.archtcm.2005.09.71.hanym.035
图 1 糖尿病大鼠血管内皮细胞形态结构
程度的葡萄糖耐量减低或明显的糖尿病为妊娠糖尿病;
¼ 其它的病因明确的糖尿病和所有的继发性糖尿病称为
其它特殊类型糖尿病。糖尿病的病因和发病机制较为复
杂, 至今仍未完全明了,目前普遍认为 1 型糖尿病是由于
胰岛 B 细胞发生细胞介导的自身免疫反应性损伤而引
起的; 2 型糖尿病的病因中先天因素占重要的地位,其发
病机制尚不清楚, 此外少数 2 型糖尿病患者为胰岛素受
体功能障碍所致。
随着医学的进展, 胰岛素和抗生素的广泛应用,糖尿
病慢性并发症日益突出。其慢性并发症是指随着糖尿病
的慢性经过而发展起来的大血管病变、微血管病变、神经
病变等。¹ 糖尿病大血管病变的主要病理变化是动脉粥
样硬化及周围动脉硬化, 主要侵犯主动脉、冠状动脉、肾
动脉等大、中动脉,其发病率和病死率均较非糖尿病者为
多; 其发病机制及其与糖尿病代谢紊乱之间的关系未完
全明了。º糖尿病微血管病变是糖尿病的特征性并发
症, 是糖尿病并发多种器官损伤的病理基础;其主要病变
是毛细血管基底膜增厚、微循环障碍、微血管瘤形成; 见
于全身各部位, 其中尤以糖尿病肾病、视网膜病变为突
出; 其发生、发展可能与山梨醇旁路代谢增强、生长激素
过多、血液流变学改变、血小板功能异常、红细胞糖化血
红蛋白含量增高有关。»糖尿病神经病变以周围神经为
最常见, 通常为对称性, 下肢较严重; 主要是由微血管病
变、山梨醇旁路代谢增强致山梨醇醉增多等所形成。上
述慢性病变已经成为糖尿病的主要并发症, 尤其是血管
病变已经成为最终导致病人死亡的头号原因。
糖尿病属于中医学/ 消渴0范畴。祖国医学认为其病
因主要是先天禀赋不足、饮食失节、情志失调、劳欲过度;
基本病机是阴津亏损, 燥热偏胜,以阴虚为本 ,燥热为标,
两者互为因果, 阴愈虚则燥热愈盛,燥热愈盛则阴愈虚。
消渴病变脏腑主要在肺、胃、肾三脏,尤以肾为关键。在
治疗上,以清热润燥、养阴生津为基本治则。
翻白草味甘、微苦, 性平, 无毒; 入肝、胃、大肠经; 有
清热润燥、凉血解毒、止血消肿、止痢之功效;多用于治疗
痢疾、疟疾、痈肿、各种出血 [1 ]。民间常作为偏方治疗糖
尿病,多有良效。笔者前期研究证实了该药具有明显的
降低糖尿病大鼠血糖的作用 [2 ]; 且近年有少量实验研究
和临床报道进一步证实了该药的降血糖作用 [3~ 5]。本品
有清热、润燥、凉血之功效,因而可清除/ 消渴0患者的燥
热,燥热既除, 则阴津自生,达到清热润燥、养阴生津之目
的,故能有效缓解/ 消渴0之症状。
本实验通过观察翻白草对糖尿病大鼠 VEC 形态结
构的影响, 发现翻白草可以有效地保护 VEC, 防止 VEC
的形态结构和功能的损伤, 从而可以起到防治糖尿病血
管病变的作用。本试验结果为翻白草应用于临床防治糖
尿病血管病变提供了实验依据。
但是, 翻白草是通过何种途径实现对 VEC 的保护,
有待今后进一步研究。
参考文献:
[1 ] 冉先德. 中华药海 (上册 ) [M ] . 哈尔滨: 哈尔滨出版社,
1996. 528
[2 ] 韩永明,张业辉,熊迎春,等. 中药翻白草对糖尿病大鼠血
糖的影响 [ J ] .湖北中医学院学报, 2002, 4( 1) : 23~ 24
[3 ] 孟令云,朱黎霞,杜惠.翻白草对家兔血糖影响的研究 [ J ] .
中医药学报, 2001, 29( 4) : 35
[4 ] 刘仲慧,阎树河,徐敏,等.翻白草治疗 2型糖尿病 [ J ] .新中
医, 2003, 35(1) : 30
[5 ] 马瑛,温少珍.翻白草治疗 2型糖尿病 50例疗效观察 [ J ] .
中草药, 2002, 33(7) : 664
[6 ] 施新猷.现代医学实验动物学[M ] .北京:人民军医出版社,
2000. 482
[7 ] 叶燕丽,王辉云,王莲桂,等. 四氧嘧啶制作大鼠糖尿病模
型 [ J ] .实验动物科学与管理, 2001, 18( 2) : 54~ 55
[8 ] 徐叔云,卞如濂,陈修,等.药理实验方法学 [M ] .第 3版.北
京:人民卫生出版社, 2002. 1066~ 1067
[9 ] 刘宝宜,陈铁镇.血管内皮细胞平铺技术的研究 [ J ] . 中国
医科大学学报, 1986, 15( 4) : 245~ 248
第 9 期 韩永明等: 翻白草对糖尿病大鼠血管内皮细胞形态结构的影响
中医药
1615
学刊
The Function of Potentilla Discolour Bunge( PDB) on the
Vascular Endothelial Cells( VEC) of the DM Big Rat
HAN Yong-ming, YUAN Fang, DUAN Yan-jun, CHEN Ze-bin, ZHANG Liu-tong
(Hubei college of Traditional Chinese Medicine,Wuhan 430061, Hubei, China)
Abstract: Objective: The research turns over the function of Potentilla Discolour Bunge( PDB) on the vascular endothelial cells
( VEC) of the DM big rat. Methods: The rats were done into diabetic by injected alloxan, and then the rats were intragastricly adminis-
tered with herb of PDB for 4 weeks continuously . The histological changes of VEC were assayed by using stretched preparation method.
Result: It shows that the VECmembrane of the PDB group is soft and denticulate, the boundary is clear and continuous, and the nucle-
us is located in the center of cells. Conclusion : The PDB can protect effectively the VEC.
Key words: Potentilla Discolour Bunge( PDB) ; diabetes mellitus( DM) ; vascular endothelial cells( VEC)
收稿日期: 2005 - 03- 04
基金项目:广东省中医管理局基金项目
作者简介:向东方( 1971 - ) ,女(土家族) ,湖北宜昌人,主治医师,硕士,研究方向:盆腔子宫内膜异位症、盆腔炎、盆腔包块的诊治。
文章编号: 1009 - 5276( 2005) 09 -1616 - 02
中医多途径疗法治疗子宫内膜异位症痛经 51例分析
向东方,梁雪芳,司徒仪
(广州中医药大学第二临床医学院妇科, 广东 广州 510120)
摘 要: 探讨中医药综合疗法在子宫内膜异位症痛经治疗中的应用。对于临床接受激素或手术治疗后
痛经再发者, 或不愿接受激素和手术治疗的患者, 中医综合疗法是一种安全、有效的治疗途径。本文选择符
合子宫内膜异位症诊断并伴有需要治疗痛经的患者 51例, 轻度痛经 15 例,中度痛经 23 例, 重度痛经 13 例。
所选病例均采用中医综合疗法 ,包括中药内服、中药莪棱灌肠液灌肠、耳穴贴压 3 种方法。临床观察提示: ¹
化瘀贯穿治疗之始终; º多途径治疗方法分别从不同途径化瘀止痛。总有效率 100% ; »痛经不离瘀滞, 但
瘀滞之根在肾。
关键词: 子宫内膜异位症;中医药疗法;痛经
中图分类号: R2711711171 文献标识码: B
据统计, 约 70%的子宫内膜异位症患者有继发性痛
经 [1]。痛经是子宫内膜异位症最主要的症状之一, 又称
/ 经前腹痛0 , / 月水来腹痛0 , / 经后腹痛0。此种痛经, 程
度多有渐进性, 症状重且易反复,西医激素治疗可迅速使
痛经症状减轻或消失,部分经过手术治疗的患者痛经症
状亦可能得到缓解, 但激素和手术治疗并非无限制的, 对
于临床接受激素或手术治疗后痛经再发者, 或不愿接受
激素和手术治疗的患者, 中医综合疗法无疑是一项安全、
有效的治疗途径。现将近 2 年中医综合疗法治疗子宫内
膜异位症痛经的资料总结如下。
1 资料与方法
11 1 选择对象 选择我院子宫内膜异位症专科符合子
宫内膜异位症诊断并伴有需要治疗痛经的患者 51 例, 年
龄最小 24 岁,最大 45 岁;有生育流产史者 32 例, 未孕者
19 例;腹腔镜 /剖腹手术确诊子宫内膜异位症 30例 ,据症
状妇检结合 B 超检查临床诊断 21例; 合并子宫腺肌症者
18例;妇检子宫活动差,子宫骶韧带触痛结节,或子宫后
壁不平滑者 37 例; B 超提示一侧或双侧卵巢巧克力囊
肿,或曾行卵巢巧克力囊肿剔除术者 16 例; 伴见月经失
调者 19例, 性交痛患者 30 例;平时或经期肛门坠胀者 26
例。51例中轻度痛经 15 例,中度痛经 23 例,重度痛经 13
例。
11 2 治疗方法 所选病例均采用中医综合疗法,包括中
药内服、中药莪棱灌肠液灌肠、耳穴贴压 3 种方法。中药
按月经周期遣方用药, 经前以化瘀通经为法,组方(简称
通经方) : 药用香附 12g, 丹参、赤芍、桃仁各 15g, 三棱、莪
术各 9g, 白芍 15g , 川断 12g , 云苓 20g, 淮山药 15g, 甘草
6g。经前 1周始服, 每日 1剂, 经来停药。经期以行气止
痛为法,组方(简称止痛方) : 药用益母草 20g, 田七末(冲
服) 115g, 郁金、川楝子各 10g, 延胡索 15g, 枳壳 12g, 白芍
第 23卷 第 9期
2 0 0 5 年 9月
中 医 药 学 刊
CHINESE ARCHIVES OF TRADITIONAL CHINESE MEDICINE
Vol. 23 No. 9
Sep . , 2 0 0 5
中医药
1616
学刊