全 文 ：2 8
湖北中医学院学报
J o u nar l
o f H u be i Co llge
e o f T CM
20 0 5年 9月第
Se P tner be
r
.
2 00 5
7卷第 3期
,
V o l
.
7
,
N o
.
翻白草对糖尿病大鼠胰岛形态结构的影响
韩永明 ,段妍君 ,衰 芳 , 陈泽斌 , 张六通
(湖北中医学院基础课部 ,湖北 武汉 4 30 0 61 )
摘要 : 目的 研 究翻 白草对糖尿病大 鼠胰岛 B 细胞的作用 。 方法 采用 四氧啥咤建立糖尿病大鼠模型 , 自造模成功
后 , 灌胃给 予翻 白草水煎液 , 连续给药 4 周 ,常规取材 、 固定 、 切片 ,采用醛 品红 法染色 , 镜下观察 。 结果 翻 白草组大 鼠胰
岛边界清楚 , B 细胞数量较正常对照组略有减少 , 但较模型对照组 密度高 , 细胞结构完整 , 无 肿胀坏死现象 。 结论 翻 白草
能有效保护胰岛 B 细胞 。
关键词 :翻 白草 ; 搪尿病 ;胰岛
中图分类号 : R 28 5 文献标识码 : A 文章编号 : 1 0 0 5一 g s 7X ( 20 0 5 ) 0 3一 0 0 28一 0 2
T h e F u n e t io n o f P o t e n t i ll a D is e o l o u r B u n g e ( P D B )
O n t h e P s n C r e s t iC ! S le t B C e l lS O f t h G D M R s t
H A N Y o n g m in g
,
D U A N Y a -n j
u n , Y U A N F a n g
, e t a l
( H u b e i oC ll
e g e o f T ar d i t i o na l C h ine
s e
M
e d ie in e
,
W
u h a n 4 3 0 0 6 1 )
bA
s t r ac t
:
O bj
e e t iv e : T h e r e s e a r e h t u m
s o v e r t h e fu n e t io n o f P o t e n t il la d i s co l o
u r b u飞 e ( P D B ) o n th e p a nc r ea t i e is le t B
e e l ls o f t h e l )M
r a t
.
M
e t ho d s
:
T h e r a t s w e r e do ne in t o d ia b
e t i
e
mo d
e l b y inj ec t
e d a l lo xa n
, a n d t he n the ar t
s w e r e p e汀u s e d a
s t o
ant
e h w i th P l ) B d e co
e t io n fo r 4 w e k
s
co n t i n
u o u s l犷 T h e 囚 n e r ca t ie i s le t B e e l ls w e r e s t a in de w i t h a ld e hy d e
f u e h s i n e
.
R e s u l t s
:
I t
s h o w s t h a t t h e bo
u n d a r y o f 囚 n e r ca t ie i s l e t o f t h e P D B g or u p ar t s 15 e l ae r , t h a t t h e e e ll s t r u e t u r e 15
e o m p le t e
, a
dn t h
a t t h e r e 15 n o t h e p u t r e s e e n e e Ph
eno
m eno 几 oC cn lu s i o n : P D B e a n p or t e e t e f f e e t iv e l y t h e aP cn r ae t ie i s le t B
e e l ls
.
K e y wo
r
ds
:
P o t
e n t il la d i s co lo
r b u n g e ;压 a b e t e s m e l li t u s ; I s l e t s o f pacn r e a s
基金基目 : 湖北省教育厅重点科研项目 (编号 : 2 004 X O8 0)
作者简介 : 韩永明 ( 19 7 0一 ) ,男 ,湖北中医学院博士研究生 。
与空白对照组比较 ’ p < 0 . 0 1 , # P > 0 . 0 5 。
与相应空白血清对照组比较乙 尸< 0 . 01 , ☆ 尸> 0 . 05 。
3 讨 论
M l l
、
L匕色法是一种较为成熟的检测细胞活力的方法 , NI H/
3佣成纤维细胞数量与 M l丁转化以 )值正相关 ,可用于观察 NI H /
3竹 细胞的毒性及增殖实验 53 。
实验结果显示 , 3 种浓度眼血散煎剂浓缩液与空白对照组比
较均有显著性差异 ( 尸< 0 . 0 1 ) 。 20 %及 10 %含药血清分别与空
白对照 组 、 相应空 白血清对照组 比较均有显著性差异 ( 尸 <
0
.
0 1 )
,
5 %含药血清无显著性差异 ( 尸> 0 . 0 5 ) 。 随着眼血散煎剂
浓缩液和含药血清浓度的增大 , 抑制细胞增殖的作用增强 。 空
白血清对细胞增殖无明显影响 (尸> 0 . 0 5 ) 。 实验结果表明眼血
散能抑制 N IH 3/ T 3 细胞的生长 。
增殖性玻璃体视网膜病变基本病理特征是细胞增生 , 在对
P V R 的视网膜前膜以及玻璃体膜的病理研究中发现大量成纤维
细胞 ,它们可能来自变异的胶质细胞 、 血管周皮细胞 、 巨噬细胞
或玻璃体细胞 , 而人视网膜色素上皮细胞 (RP )E 也能转化为成 `
纤维细胞 。 成纤维细胞在 P V R 中的作用是合成胶原物质 ,从而
使膜形成 ,导致收缩 ,引起牵引性视网膜脱离 。 故抑制成纤维细
胞增殖是防治增殖性玻璃体视网膜病变的关键环节 。 眼血散可
能是通过抑制成纤维细胞生长而起到防治增殖性玻璃体视网膜
病变的作用 。
参考文献 :
曾巍 , 陈金卯 ,袁敏立 , 等 . 眼血散治疗玻璃体积血的实验研究〔J」.
中国中医眼科杂志 , 2 002 , 12 (2 ) : 4一 .6
李仪奎 . 中药血清药理学实验方法的若干问题〔J」. 中药新药与临
床药理 , 1 9 9 9 , 1 0 ( 2 ) : 9 5一 9 8 .
包金凤 ,刘国卿 . 中药血清药理学的方法研究概述〔J〕. 药理进展 ,
2 0 0 0
,
2 4 ( 2 )
:
8 9
一
9 2
.
司徒镇强 ,吴军正 . 细胞培养 〔M 〕. 西安 : 世界图书出版社 , 19 96 ,
18 6
一
1 8 7
.
刘成海 , 熊磊 ,刘平 , 等 . M T T 法观察三七总贰对 NI H 3/ T 3 成纤维
细胞毒性作用与增殖的影响〔J〕. 中国中西医结合脾胃杂志 , 1 99 ,
7 ( 4 )
:
2 0 3
一
20 5
门J刁」1人n乙一IL厂L
刁lJ esJ飞」八jA孟工勺厂LriF
(收稿 日期 : 2 0 0 5一 04 一 10 编辑 : 郑晓屏 )
20 0 5 年第 7 卷第 3 期 韩永明等 .翻白草对糖尿病大鼠胰岛形态结构的影响
翻白草 (P o t e nt i l l a D i s e o l o r B u ng e , P D B ) , 又名天
青地白草 ,属蔷薇科委陵菜属 ,为多年生草本 ,全草及根
人药 ;有清热润燥 、凉血解毒 、止血消肿 、止痢之功效 : 多
用于治疗痢疾 、 疟疾 、痈肿 、各种出血川 。 然民间常作为
偏方治疗糖尿病 ,多有良效 。 笔者研究证实了该药具有
明显的降低糖尿病大鼠血糖的作用 z[] 。 且近年有少量
实验研究和临床报道进一步证实了该药的降血糖作
用〔3一 s1 。 然其降血糖的作用机制如何 ,并未见报道 。 笔
者通过研究翻白草对糖尿病大鼠胰岛形态结构的保护 ,
旨在探讨其降血糖作用的可能机制 。
1 材料和方法
1
.
1 实验动物
W i
s t a r 大鼠 4 0 只 ,体重 2 0 0一 2 50 9 , 雌雄不限 。 于
实验前一周一次性购进 ,置于避强光 、温暖 、安静的环境
中饲养 ,室温 18 一 25 ℃ , 自由摄食 。
1
.
2 造模
采用四氧嗜吮 ( al fo xa n , A L X )制作糖尿病模型的
方法进行造模 〔6一 s] 。 大鼠禁食 24 h后 , 以 2 . 5% A L x (美
国 S馆m a 公司 )生理盐水溶液 , 按 12 o m g / K g d/ 剂量对
大鼠行腹腔注射 , 1次 d/ ,连续 Zd 。 在造模 48 h 内 , 以葡
萄糖水供大鼠饮用 。 造模后第 5天测血糖 (不禁食 ) , 以
血糖在 16 . 65 ~ ol / L 以上者为造模成功
, 造模成功率
达 70 % ;若造模不成功者 ,仍按上法补注一次 , 成功率
达 1 0 0% 。
1
.
3 分组和给药
随机选取 40 只大鼠中的 10 只为正常对照组 。 其
余 30 只大鼠按上述方法进行造模 , 成功后随机分为 3
组 : 模型对照组 、 实验对照组 、 翻白草 组 , 每组 10 只 。
A
. 正常对照组 : 为正常大鼠 ,不造模 、不给药 。 B . 模型
对照组 : 造模成功后 ,不治疗 。 C . 实验对照组 : 造模成
功后 ,予以优降糖 (0 . 25 m g / k g / d) 灌胃 , 连续治疗 4 周 ,
1次 / d 。 D . 翻白草组 :造模成功后 , 予以翻白草水煎液
( 1 5 9 / k g / d )灌胃 ,连续治疗 4 周 , 1次 / d 。
1
.
4 取材和制片
于治疗结束后第 2天 ,各组大鼠以 2%戊巴比妥余闯馒腔注
身捅辨 ,打开腹腔犷央重取出胰腺 ,置于 4%多聚甲醛溶液中外
固定 跳 h 。
将固定后胰腺组织流水冲洗 2 4 h , 然后常规脱水 、
浸蜡 、 包埋 、 切片 、 脱蜡 、 复水 ;醛 品红染色 10 m in , 梯度
浓度酒精溶液脱水 ,透明 、封片 。
2 结果
镜下观察 ( 40 x ) :正常对照组大鼠胰岛呈圆形或椭
圆形 ,边界清晰 , B 细胞均匀分布在胰岛中心 ,胞核呈圆形 。
模型对照组大鼠胰岛边界模糊 , B 细胞数量较正常对照组
明显减少 ,并有明显的细胞肿胀 、 坏死现象 。 实验对照组
大鼠胰岛边界较清晰 , B 细胞数量较正常对照组略有减少 ,
但较模型对照组密度高 ,细胞形态较佳 ,无明显细胞肿胀 、
坏死 。 翻白草组大鼠胰岛边界清楚 , B 细胞数量较正常对
照组略有减少 ,但较模型对照组密度高 ,细胞结构完整 ,无
肿胀坏死现象 。 说明翻白草能有效保护胰岛 B 细胞 、且其
效果优于优降糖 。
3 讨论
糖尿病属于中医学 “ 消渴 ” 范畴 。 祖国医学认为其病
因主要是先天察赋不足 、饮食失节 、情志失调 、 劳欲过度 ;基
本病机是阴津亏损 ,燥热偏胜 ,以阴虚为本 ,燥热为标 ,两者
互为因果 ,阴愈虚则燥热愈盛 ,燥热愈盛则阴愈虚 。 消渴
病变脏腑主要在肺 、 胃 、 肾三脏 ,尤以肾为关键 。 肺为燥热
所伤 ,则不布津而口渴多饮 ;脾胃受燥热灼伤 ,脾阴不足 , 胃
火炽盛 ,则多食善饥而形体消瘦 ;肾阴亏虚 , 肾失濡养 ,开阖
固摄失权 ,故尿多味甜 。 在治疗上 , 以清热润燥 、养阴生津
为基本治则 。
本实验通过观察翻白草对糖尿病大鼠胰岛形态结
构的影响 ,发现翻白草可以有效地保护胰岛 B 细胞 , 阻
止胰岛 B 细胞的进一步损伤 ,使血胰岛素水平升高 ,进
而增加血糖利用 、促进血糖转化为糖原 ,从而降低血糖
水平 。 提示翻白草可 以通过保护胰岛 B 细胞 , 起到降
血糖的作用 。
但是 , 翻白草是通过何种途径实现对胰岛 B 细胞
的保护 , 有待今后进一步研究 。
参考文献 :
[ 1〕
〔2〕
冉先德 . 中华药海 (上册 ) [明 . 哈尔滨 : 哈尔滨出版社 , 19% , 52 &
韩永明 , 张业辉 , 熊迎春 ,等 . 中药翻白草对糖尿病大鼠血糖的影响
口〕. 湖北中医学院学报 , 2 0 0 2 , 4 ( l ) : 23一 2 4 .
孟令云 ,朱黎霞 , 杜惠 . 翻白草对家兔血糖影响的研究〔J〕. 中医药
学报 , 2 0 0 1 , 2 9 ( 4 ) : 3 5 .
刘仲慧 , 阎树河 , 徐敏 , 等 . 翻白草治疗 2 型糖尿病〔J] . 新中医 ,
2 00 3
,
3 5 ( l )
:
3 0
.
马瑛 , 温少珍 . 翻白草治疗 n 型糖尿病 50 例疗效观察〔J〕. 中草
药 , 20 0 2 , 3 3 ( 7 ) : 6 64 .
施新酞 ,现代医学实验动物学〔叨 . 北京 : 人民军医出版社 , 2(X℃: 4 82
叶燕丽 ,王辉云 , 王莲桂 , 等 . 四氧啥吮制作大鼠糖尿病模型〔J〕.
实验动物科学与管理 , 2 0 0 2 , 1 8` 2 ) : 54一 5 5 .
徐叔云 ,卞如镰 ,陈修 . 药理实验方法学 (第三版 )〔M〕. 北京 : 人民
卫生出版社 , 2 00 2 : 10 6 6一 10 6 7 .
ùJ Il .,J气es刁JIJnj洼`ù匕ōh叮刃OU厂LìLe`一I
(收稿日期 : 2 0 05 一 02 一 29 编辑 : 郑晓屏 )