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翻白草中化学成分研究



全 文 :翻白草中化学成分研究*
张 颖 1 ,张立木 2 ,赵雪梅 1 ,郝吉福 1 ,李同德 1 , 王晓丹 1 ,
(1.泰山医学院药学院 ,山东 泰安 271000;2.泰安市第一人民医院 ,山东 泰安  271000)
摘要:目的 分离 、鉴定翻白草中各化学成分。方法 采用硅胶柱层析 , 以氯仿:丙酮 , 氯仿:甲醇为流动相进行
梯度洗脱。结果 从翻白草中分离出熊果酸(Ⅰ 、Ⅱ )、没食子酸 (Ⅲ )、原儿茶酸(Ⅳ )、儿茶素(Ⅴ)和槲皮素(Ⅵ )
等单体。结论 翻白草中化学成分丰富 ,该中药具有较大开发价值。
关键词:翻白草;熊果酸;没食子酸;原儿茶酸;儿茶素;槲皮素
中图分类号:R 965. 3 文献标识码:A 文章编号:1004-7115(2007)03-0168-02
Stud ies on the chem ical constituents of Potentilla D iscolor Bge.
ZHANG Ying1 , ZHANG Li -mu2 , Zhao X ue -m ei1 , HAO J i - fu1 , Li Tong -de1 , Wang X iao -dan1
(1. Dep.t of Pharmaceu tical S cience, TaishanM edica lCo llege, Taian Shandong 271000, C h ina;
2. The Firs tPeop lesH ospi tal of Taian, Taian S handong 271000, C hina)
Abstrac t:Ob jec tiv:To iso la te and check the chem ica l constituents of Po tentilla disco lor Bge. . M e thods:S tream line
sepa ration by co lumn ch rom a tog raphy w as used, and g radien t e lution w as done w ith chloro form :A ce tone and Ch lo rofo rm
w ith m e thano l asm obile phase. Results:The con tent of u rso lic acid, potoca techuric acid, ga llic acid, catech in and querce-
tin w e re iso la ted from Po ten tilla disco lo rBge. Conclu sion:The re a re abundan t chem ica l constituents in the Chine se tradi-
tiona lm edicine - Po tentilla disco lo r Bge. , w hich has great deve lopping va lue.
K ey words:Po tentilla D isco lo r Bge;Urso lic acid;Ga llic ac id;P ro to ca techu ric acid;Ca techin;querce tin
  翻白草 ,又名鸡腿儿 、反白蒿子 、鸡腿根 ,叶下
白 、白背叶 ,始载于《救荒本草》,为蔷薇科 (Rosace-
ae)植物翻白草 (Po tentilla d isco lo r Bunge)的带根全
草 。性平 、味甘 、微苦。清热解毒 、消肿止血 。主治
吐血 、咳血 、下血 、妇女血崩 、痢疾 、疟疾 、疔疮肿
毒 [ 1]等。现代医学研究证明 ,翻白草具有抗菌 、止
泻和免疫抑制作用 [ 2] 。近几年有研究发现 ,翻白草
具有降血糖和抗肿瘤作用[ 3] 。但国内外对其化学
成分及药效学的研究报道甚少 。已有文献报道其化
学成分主要有鞣质 、黄酮 、原儿茶酸 、没食子酸 、熊果
酸等[ 4] 。翻白草中没食子酸 、原儿茶酸 、熊果酸的分
离 、提取及其含量测定目前还没有报道 ,为了阐明其
药效理论基础 ,我们对翻白草进行了系列化学成分
研究。本研究在确定最佳提取工艺条件后 ,经过反
复硅胶柱层析 ,分离 、纯化得到没食子酸 、原儿茶酸 、
熊果酸 、槲皮素 、儿茶素等化学成分 ,并利用紫外透
射分析和薄层层析方法对物质进行鉴定。
1 实验材料
1. 1 实验仪器
美国W ate rs公司 HPLC -MS ZQ质谱仪 ,W a-
ters 2695型二极管阵列检测器 , SPD数据处理系统;
旋转蒸发仪 (RE - 52A ,上海亚荣生化仪器厂 );循
环水式多用真空泵 (SHB - B95A型 ,郑州长城科工
贸有限公司);x - 5显微熔点测定仪 (北京泰克仪
器有限公司);紫外透射反射分析仪 (上海康华生化
仪器制造厂);超声波清洗器 (KQ - 250D型昆山清
洗仪器有限公司);微型植物试样粉碎机(中国天津
泰斯特仪器有限公司 );电子天平 (FA - 1004,上海
精密科学仪器有限公司 )。
1. 2 实验试剂
无水乙醇 、甲醇 、氯仿 、石油醚 、乙酸乙酯 、正丁
醇 、香蓝素 -硫酸指示剂 、 FeC l3指示剂均为分析
纯;翻白草 ,采于泰山 ,野生 ,经泰山医学院药学院李
同德教授鉴定;硅胶板 (100 mm ×200 mm)、硅胶
(200 ~ 300目)均为青岛基亿达硅胶试剂厂生产。
2 实验方法
以 70%乙醇为溶剂 ,料液比为 1∶12,水浴回流
时间为 2. 5h,回流提取 4次。将滤液合并后 ,减压
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泰 山 医 学 院 学 报
JOURNAL OF TAISHAN MEDICAL COLLEGE Vol. 28 No.3 2007
* 基金项目:泰安市科技局资助项目(编号:20042 - 49)
作者简介:张颖(1972— ),女 ,山东莱芜人 ,高级实验师 ,硕士。主要从事药物分析与研究工作。
浓缩至无醇味 ,回收乙醇 ,得浸膏 。依次用石油醚 、
氯仿 、乙酸乙酯 、正丁醇萃取 ,将各个萃取层浓缩至
50 m l,备用 。氯仿层上硅胶柱 ,用氯仿:丙酮 (20∶
1, 15∶1, 10∶1, 5∶1)梯度洗脱 ,接收各流分 。把
32 - 58瓶二次上硅胶柱(氯仿:丙酮 =10∶1)洗脱 ,
分离得到化合物 Ⅰ , 64 - 72瓶合并 ,二次上硅胶柱
(氯仿:丙酮 =5∶1)洗脱 ,分离得到化合物Ⅴ。乙
酸乙酯层上硅胶柱 ,用氯仿:甲醇 (20∶1, 15∶1, 10
∶1, 5∶1)梯度洗脱 ,接收各流分 。 32 - 33瓶二次
上硅胶柱 (氯仿:甲醇 =20∶1),分离得到化合物
Ⅱ;34 - 38瓶合并 ,二次上硅胶柱 (氯仿:甲醇 =15
∶1,得到化合物Ⅲ , 44 -54瓶二次上硅胶柱 (氯仿:
甲醇 =10 ∶1 ,分离得到化合物Ⅳ, 79 - 95瓶二次
上柱 (氯仿:甲醇 =5∶1),分离得到化合物Ⅵ 和Ⅴ。
提取分离流程图如下:
图 1 翻白草提取分离流程图
3 物质鉴定
晶体Ⅰ和晶体Ⅱ (乙醇 ),白色针晶 , mp=286 ~
288℃, [ α] 20 , +66℃,均可溶于甲醇 、乙醇 、氯仿 、乙
醚 。香兰素 -硫酸指示剂显亮紫色斑点 ,荧光下无
色 。与标准品对照 TLC的 Rf=0. 85相一致 ,混合
熔点不下降 。确定晶体 Ⅰ (大量 )和晶体 Ⅱ (少量 )
为熊果酸。
化合物 Ⅲ(氯仿:甲醇 ),浅黄色针晶 , mp=236
~ 237℃,三氯化铁反应显蓝色 ,提示有酚羟基 ,溴甲
酚绿反应阳性 ,提示结构中有羧基。以氯仿:乙酸乙
酯:甲醇:甲酸(5∶5∶1∶1)为展开剂 ,在紫外灯下
检视 ,显示暗紫色斑点 。与没食子酸标准品共薄层 ,
Rf值为 0. 45,两者基本一致 ,混合熔点不下降 。确
定化合物为没食子酸 。
晶体Ⅳ为白色针晶 (甲醇 ), mp =198 ~ 200℃,
遇三氯化铁反应墨绿色 ,再加 Na2CO3显紫色。 TLC
结果与标准品原儿茶酸 R f=0. 76一致 ,故确定晶
体Ⅳ为原儿茶酸 。
化合物Ⅴ(氯仿:甲醇 ),白色粉末状晶体 ,荧光
下无色 ,香蓝素显色为红色 ,与 (+) -儿茶素对照
品显色相同 。 TLC的 Rf值 =0. 22与 (+) -儿茶素
对照品完全一致。确定化合物Ⅴ为儿茶素。
化合物Ⅵ (甲醇 )黄色针晶 , mp=310 ~ 312℃,
盐酸 -镁粉反应呈紫红色 ,在紫外 (254nm)下该化
合物在荧光下呈亮黄色 , A lC l3反应呈黄绿色 ,推测
该化合物为黄酮类化合物。 Rf=0. 37,与对照品一
致 ,确定化合物Ⅳ为槲皮素。
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JOURNAL OF TA ISHAN MEDICAL COLLEGE Vo l. 28 No. 3  2007