全 文 :*基金项目:云南省教育厅科学研究基金(5Y0280C)
作者单位:1.昆明医学院营养与食品研究所 ,昆明 650031;2.中国科学院昆明植物研究所
作者简介:王琦(1976-),女 ,云南建水人 ,讲师 ,硕士 ,主要从事营养与健康的研究。
文章编号:1001-0580(2007)02-0225-01 中图分类号:R 151.2 文献标志码:A 【实验研究】
翻白草不同方法提取物对小鼠降血糖作用*
王琦1 ,周玲仙1 ,罗晓东2 ,殷建忠1
翻白草(Po tentilla discolor Bunge)为蔷薇科委陵菜属多年
生草本植物 ,根部或干燥全草均可入药。全国各地均有分布 ,
为我国传统中药〔1〕。近年来 ,民间流行用翻白草治疗糖尿病
并取得一定的疗效。为了解翻白草降血糖作用机制 ,开发糖
尿病新药或保健品 ,本研究对翻白草进行提取 , 按极性不同的
3 个部分 , 利用四氧嘧啶诱导的糖尿病小鼠模型进行活性筛
选 ,以确定具有较强降血糖活性的部分。
1 材料与方法
1.1 实验动物 昆明种小鼠(雄性)100 只(昆明动物所)(合
格证编号:滇实验动物证第 2002106 号)。
1.2 主要试剂及仪器 四氧嘧啶(美国 Sigma公司);葡萄糖
测定试剂盒(上海荣盛生物技术有限公司 , 批号 20030101):
消渴丸(广州中一药业有限公司 ,批号:E01895);722 型光栅
分光光度计(上海分析仪器总厂)。
1.3 方法
1.3.1 样品提取并初步分离 利用乙醇浸提 , 乙酸乙酯萃
取 , D101 大孔树脂柱层析 , 将翻白草分为 I ~ Ⅲ部分 , 分别对
应 D101大孔树脂水洗脱部分 、D101 大孔树脂甲醇洗脱部分 、
乙酸乙酯萃取物。
1.3.2 实验动物糖尿病模型的建立〔2 , 3〕 实验动物体重(26
±2)g ,禁食 16 h , 准备给予四氧嘧啶造模。四氧嘧啶溶液临
用前配制 ,浓度为 12 mg/ml。给药方式为腹腔注射 ,剂量 120
mg/(kg·bw), 一周后 ,于第 8 d 断食 3 h 后 ,眼眶内眦采血 ,离
心取上层血清在 24 h 内用葡萄糖氧化酶法测定血糖。 取血
糖值>12 mmol/ L的糖尿病模型小鼠分组进行翻白草降血糖
实验。
1.3.3 实验动物分组及处理 取血糖值>12 mmol/ L 的糖
尿病模型小鼠 54 只 , 正常小鼠 10 只作为对照组 , 共计 64 只 ,
分为 6 组 ,分为糖尿病模型组(11 只)、阳性对照组(10 只)和
3 个实验组(各 11 只)。正常对照组 、糖尿病模型组给予蒸馏
水 ,剂量为每天 450 mg/(kg·bw);阳性对照组给予降血糖药
物消渴丸 ,剂量为 3.75 g(kg·bw);3 个实验组 I ~ Ⅲ分别给予
D101 大孔树脂水洗脱物 、D101大孔树脂甲醇洗脱物 、乙酸乙
酯萃取物 , 剂量均为每天 450 mg/(kg·bw)。给药方式为灌
胃 ,每天 1 次 , 时间 30 d。 30 d 后 , 测血糖值 , 条件和方法同
前。30 d内每周称各组小鼠空腹体重 ,观察体重变化。
1.3.4 统计分析 采用 SPSS 11.0 统计软件 , 进行方差分析
及 t 检验。
2 结 果
实验组Ⅰ 、Ⅱ与糖尿病模型组比较 , 血糖值降低差异无统
计学意义(P>0.05), 表明对糖尿病小鼠降血糖作用不明显。
而消渴丸组与实验组Ⅲ与糖尿病模型组比较 , 血糖降低差异
有统计学意义(P <0.05), 表明实验组 Ⅲ即乙酸乙酯部分对
糖尿病小鼠有降血糖作用 , 其降血糖效果与降糖药物消渴丸
类似。因此 , 可认为翻白草降血糖活性成分主要存在于乙酸
乙酯部分 , 将该部分进一步研究 , 见表 1。
实验期间 , 通过对动物体重的观察可知 , 糖尿病模型组动
物体重增长缓慢 , 其余各组动物体重均稳定增长 , 但各组之间
比较差异无统计学意义(P>0.05), 可认为翻白草各部分对
糖尿病小鼠的体重没有影响。
表 1 翻白草对糖尿病小鼠血糖水
平的影响(mmol/L , x±s)
组 别 动物数 实验前 实验后
正常对照组 10 7.6±1.2d 8.4±2.0b
糖尿病模型组 11 16.8±3.5 14.3±2.9
消渴丸组 10 17.5±4.1 10.1±4.5d , c
实验组 I 11 16.1±3.3 13.6±3.8
实验组Ⅱ 11 16.7±4.3 13.2±4.7
实验组Ⅲ 11 17.0±3.2 9.8±3.4ac
注:与糖尿病模型组比较 , a P<0.05:与实验前比较 , c P<0.05;
与糖尿病模型组比较 , b P<0.01;与其余各组比较 , d P<0.01
正常小鼠的血糖 、体重与正常对照组比较差异无统计学
意义(P >0.05), 可认为翻白草的乙酸乙酯部分对正常小鼠
的体重 、血糖均无影响。
3 讨 论
翻白草的根主要含鞣质及黄酮类化合物〔1〕。黄酮类化合
物具有多种生理活性 , 也具有降血糖的活性 , 其降血糖机制是
多方面的〔4 , 5〕。提示其降血糖活性成分可能是其中的黄酮类
物质。
本实验结果表明 , 翻白草乙酸乙酯萃取物具有较强的降
血糖作用 , 并且对正常小鼠的体重 、血糖均无影响。其降血糖
活性成分可能是其中的黄酮类物质 , 其降血糖作用机制有待
进一步研究。而其余 2 个部分未显示降血糖作用 , 原因可能
是提取分离过程中一些成分发生损失 ,或在该剂量下未能显
示降血糖活性。
参考文献
〔1〕 江苏新医学院.中药大词典[ M ] .下册.上海:科学技术出版社 ,
1986:2705.
〔2〕 张均田.现代药理实验方法[ M ] .上册.北京医科大学中国协和
医科大学联合出版社 , 1998:981-986.
〔3〕 郑建仙.功能性食品[ M] .3卷.北京:中国轻工业出版社 , 1999:
484-489.
〔4〕 陈勇 ,张晴.五羟基黄酮的药理学研究近况[ J] .中草药 , 1998 , 29
(8):569-570.
〔5〕 王玮 ,王琳.黄酮类化合物的研究进展[ J] .沈阳医学院学报 ,
2002 , 4(2):115-119.
收稿日期:2006-05-22 (文涛编辑 蔡天德校对)
225中国公共卫生 2007年 2月第 23卷第 2期 Chin J Publ ic Health Feb 2007 Vol.23 No.2