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翻白草乙酸乙脂提取液抗糖尿病功能性研究



全 文 :翻白草乙酸乙脂提取液抗糖尿病功能性研究
张 俭 , 伍贤进* ,李胜华 ,代威 (怀化学院生命科学系 ,湖南怀化 418008)
摘要 [目的 ] 研究翻白草乙酸乙脂提取液对糖尿病小鼠的降血糖功效。 [方法 ]分 5个试验组 , 即空白对照组 ,阴性对照组 , 阳性对照
组灌胃盐酸二甲双胍 100mg/kg,高剂量组灌胃翻白草乙酸乙脂提取液 50g/kg,低剂量组灌胃翻白草乙酸乙脂提取液 25g/kg。连续灌
胃 7d,于第 8天禁食 12h后断尾测血糖。 [结果 ]翻白草高剂量(50g/kg)和低剂量(25g/kg)对四氧嘧啶所致糖尿病小鼠具有明显的
治疗效果 ,但两者差异不大;但对正常小鼠血糖无显著影响。 [结论]翻白草 2个剂量组对糖尿病小鼠有明显的降血糖作用。
关键词 翻白草;动物模型;四氧嘧啶;降血糖
中图分类号 S567  文献标识码 A  文章编号 0517-6611(2010)24-13103-02
StudyonAnti-diabeticFunctionofEthylAcetateExtractedSolutionfromPotentiladiscolorBange
ZHANGJianetal (DepartmentofLifeSciences, HuaihuaUniversity, Huaihua, Hunan418008)
Abstract [ Objective] Theresearchaimedtostudytheanti-diabeticfunctionofethylacetateextractedsolutionfromPotentiladiscolorBange.
[Method] Theexperimentgroupsweredividedinto5 controlgroupsasfollows:blankcontrolgroup, negativecontrolgroup, thepositivecontrol
groupgivenmetforminhydrochloridebygastricadministrationof100mgperkilogrammice, thehighdosegroupadministratedethylacetateex-
tractedsolutionfromPotentiladiscolorBangebygastricadministrationof50gperkilomiceandthelowdosegroupgiven25gperkilomiceby
gastricadministration.Thegastricadministrationlastedforcontinuous7days, theirbloodglucosewasmeasuredbytailcuttingmethodafter12
hoursfasting.[ Result] ThehighdoseandlowdoseofPotentilladiscolorBangehadobvioustherapeuticefectonaloxan-induceddiabeticmice,
withlitlediference.Butithadnosignificantefectonbloodglucoseofnormalmice.[ Conclusion] ThetwodosagegroupsofPotentilladiscolor
Bangehadanapparenthypoglycemicefectondiabeticmice.
Keywords PotentiladiscolorBange;Animalmodel;Alloxan;Hypoglyceic
基金项目 湖南省科技创新平台项目(09K105)。
作者简介 张俭(1967-),男 ,湖南洞口人 ,硕士 , 副教授 ,从事细胞生
物学和药物学研究。 *通讯作者。
收稿日期  2010-05-05
  翻白草(PoterntiladiscolorBange)又名天青地白 、白头
翁 ,为蔷薇科多年生草本植物 ,全国各地均有分布。翻白草
性平 ,味甘 ,微苦 ,无毒 ,具有止血止痢 、清热解毒 、消肿之功
效 [ 1] 。现代医学研究表明 ,翻白草具有抗菌 、止泻 、抗肿瘤 、
免疫抑制和降血糖的作用 ,在民间和临床上有抗糖尿病的应
用 [ 2-4] ,但对翻白草具体的降血糖作用物质基础和降糖机制
的研究尚未见报道。笔者采用 3%、200mg/kg四氧嘧啶生理
盐水溶液腹腔注射 KM小鼠 ,建立糖尿病小鼠模型 ,将翻白
草乙酸乙酯提取液配成高低 2个剂量组给糖尿病小鼠和正
常小鼠灌胃 ,以盐酸二甲双胍灌胃糖尿病小鼠组作为阳性对
照组 ,以生理盐水灌胃正常小鼠组和糖尿病小鼠组为空白对
照和阴性对照组 ,观察翻白草乙酸乙酯提取液对高血糖模型
小鼠的降血糖作用 ,为研究翻白草降血糖药理机制提供理论
依据。
1 材料与方法
1.1 动物与材料 试验动物为体重 20 ~ 35 g的清洁级 KM
小鼠 ,雌雄不限 ,购置于中山大学实验动物研究中心(合格证
号:粤检证字 2008A064)。翻白草样品:2008年 5月采自湖
南省溆浦县西南山坡地。
1.2 试剂 乙酸乙酯 (广东汕头市西陇化工厂 ,批号:
0610222),四氧嘧啶(美国 sigma公司 ,批号:A7413),盐酸二
甲双胍(湖南湘雅制药有限公司 ,批号 0806112),其他试剂均
为分析纯(AR)。
1.3 方法
1.3.1 翻白草乙酸乙脂提取液的制备。称取翻白草全草适
量 , 60 ℃干燥 24h,粉碎 ,称取 1 000g翻白草粉末按 1∶10置入
70%乙醇中浸泡过夜 , 24 h后放入超声波环流提取机提取 40
min,超声 2s,间隙 1s,工作频率 40kHz,转速 1 300r/min,收集
超声波环流提取机中乙醇提取液 ,静置 24 h。将乙醇提取液
用旋转蒸发仪 65℃减压浓缩 ,将回收后浓缩液放入 65 ℃恒
温干燥箱中干燥成粘稠状的浸膏。用适量 80 ℃蒸馏水回收
浸膏 ,将溶液转移至 250 ml分液漏斗 ,用乙酸乙酯萃取 ,将翻
白草乙酸乙酯萃取液装入旋转蒸发仪上减压浓缩 ,将浓缩物
配制成 2g/ml,放入冰箱中保存备用。
1.3.2 四氧嘧啶糖尿病小鼠模型的建立。取体重为 20 ~35 g
KM鼠 50只 ,禁食 12 h后一次性腹腔注射 ALX200mg/kg
(ALX在临用前用 0.9%生理盐水配制成 3%四氧嘧啶生理盐
水溶液)。3 d后禁食 12h用 FreeStyle血糖测试仪断尾取血测
血糖 ,血糖浓度高于 11.1mmol/L即为糖尿病小鼠。考虑到小
鼠的模型稳定性 ,采用血糖浓度在 15 ~25 mmol/L的 KM鼠为
试验对象 ,此范围的小鼠是筛选降糖药物的最适合血糖值 [5] 。
1.3.3 正常小鼠给药 。选取 30只正常 KM鼠 ,体重约 20 ~
35 g,随机分为 4组 ,分别给药等量生理盐水 、盐酸二甲双胍 、
翻白草乙酸乙酯提取液高剂量 、翻白草乙酸乙酯提取液低剂
量 ,于每天下午 3点灌胃 ,连续 7d(表 1)。
1.3.4 糖尿病小鼠给药 。选取 30只成模稳定的 KM糖尿病
鼠 ,随机分为 4组 ,分别给药等量生理盐水 、盐酸二甲双胍 、
翻白草乙酸乙酯提取液高剂量 、翻白草乙酸乙酯提取液低剂
量 ,于每天下午 3点灌胃 ,连续 7d(表 1)。
1.3.5 试验动物观察和血糖的测定 。观察和记录每天灌胃
后各组小鼠的形态特征 ,如毛色变化;饮食 ,分泌排泄;生长
状况;体重变化等。血糖的测定分别于末次给药 3 d后禁食
12 h,用雅培利舒坦血塘测试仪断尾取血测血糖。记录正常
组和模型组小鼠的血糖和体重变化。
1.4 数据处理  各组试验数据用 Excel处理 ,用(x±s)
描述 [ 6] 。
2 结果与分析
2.1 不同试剂对正常小鼠血糖的影响 30只正常 KM试验
安徽农业科学 , JournalofAnhuiAgri.Sci.2010, 38(24):13103-13104 责任编辑 李占东 责任校对 李岩DOI :10.13989/j.cnki.0517-6611.2010.24.174
鼠连续给药 7 d,于末次给药后禁食 12h,采用断尾法取血测
血糖 ,不同试剂对正常小鼠血糖的影响见表 2。由表 2中可
知 ,盐酸二甲双胍片 、翻白草乙酸乙酯提取液高剂量组(50
g/kg)、翻白草乙酸乙酯提取液低剂量组(25 g/kg)与灌胃等
量生理盐水组相比 ,翻白草乙酸乙酯提取液高 、低 2个剂量
对正常小鼠血糖浓度影响较小。
表 1 KM试验鼠的给药分组情况
Table1 GroupingandadministrationofKMexperimentalmice
组别
Group
给药名称
Nameof
drugs
剂量
Dose
试验鼠数量∥只
Numberof
experimentalmice
正常试 生理盐水 0.4ml∥只 6
验鼠组 盐酸二甲双胍 100mg∥kg 8
翻白草提取液高剂量 50g∥kg 8
翻白草提取液低高剂量 25g∥kg 8
糖尿病 生理盐水 0.4ml∥只 6
试验鼠组 盐酸二甲双胍 100mg∥kg 8
翻白草提取液高剂量 50g∥kg 8
翻白草提取液低剂量 25g∥kg 8
表 2 不同试剂对正常小鼠血糖水平的影响
Table2 Effectofdifferentagentsonbloodglucoseofnormalmice
组别Group
给药前血糖浓度∥mmol/LConcentrationofbloodglucosebeforeadministration
给药后血糖浓度∥mmol/LConcentrationofbloodglucoseafteradministration
生理盐水 5.03±0.65 5.95±0.52
盐酸二甲双胍 5.71±0.58 6.39±0.62
高剂量 5.13±0.81 5.75±1.17
低剂量 5.89±0.59 6.10±0.68
2.2 不同试剂对四氧嘧啶糖尿病小鼠血糖的影响 30只成
模稳定的四氧嘧啶诱导型糖尿病 KM鼠连续给药 7 d,于末
次给药后禁食 12 h,采用断尾法取血测血糖 ,不同试剂对糖
尿病模型小鼠血糖的影响见表 3。由表 3可知 ,盐酸二甲双
胍片 、翻白草乙酸乙酯提取液高剂量 、翻白草乙酸乙酯提取
液低剂量对糖尿病模型鼠的血糖均有降低作用 ,其血糖下降
率分别为 39.28%、28.27%和 25.01%,其中翻白草高低剂量
的降血糖效果相当。
表 3 不同试剂对糖尿病模型小鼠血糖的影响
Table3 Efectofdifferentagentsonbloodglucoseofaloxan-induced
diabeticmice
组别Group
给药前血糖浓度∥mmol/LConcentrationofbloodglucosebeforeadministration
给药后血糖浓度∥mmol/LConcentrationofbloodglucoseafteradministration
降糖率∥%Hypoglycemicrate
生理盐水 21.12±2.60 19.88±3.36 5.9
盐酸二甲双胍 23.16±5.69 14.06±6.21 39.28
高剂量 25.08±5.49 17.99±5.10 28.27
低剂量 24.59±5.88 18.44±4.66 25.01
3 结论与讨论
该研究表明 ,翻白草乙酸乙脂提取液高剂量组和翻白草
乙酸乙脂提取液低剂量组对四氧嘧啶诱导的稳定糖尿病小
鼠有明显的降血糖功效 ,其血糖下降率分别为 28.27%、
25.01%,翻白草高低剂量的降血糖效果相当。其原因可能
是大剂量在小鼠胃内形成高渗透压使吸收率降低 [ 7] 。因此
在以后试验过程中可考虑用低剂量代替高剂量使用 ,减少用
药量 ,这也为临床用药量提供了一定的试验依据。尽管与阳
性对照组相比 ,翻白草乙酸乙脂提取液降糖效果低于阳性对
照组 ,但中药自身具有的毒副性较小又可以防治一些并发症
的优点 ,使翻白草成为一种具有很好开发前景的抗糖尿病中
草药。
参考文献
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[ 5] 刘智华 ,李清旺 ,冯涛,等.四氧嘧啶致糖尿病模型中体重与剂量关系
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[ 7] 孟令云,朱黎霞 ,郑海洪, 等.翻白草对高血糖动物模型的作用研究
[ J].中国药理学通报 , 2004, 20(5):588-590.
科技论文写作规范———缩略语
采用国际上惯用的缩略语 。如名词术语 DNA(脱氧核糖核酸)、RNA(核糖核酸)、ATP(三磷酸腺苷)、ABA(脱落酸 )、
ADP(二磷酸腺苷)、CK(对照)、CV(变异系数)、CMS(细胞质雄性不育性 )、IAA(吲哚乙酸)、LD(致死剂量)、NAR(净同化
率)、PMC(花粉母细胞)、LAI(叶面积指数)、LSD(最小显著差 )、RGR(相对生长率),单位名缩略语 IRRI(国际水稻研究
所)、FAO(联合国粮农组织)等 。对于文中有些需要临时写成缩写的词(如表及图中由于篇幅关系以及文中经常出现的词而
写起来又很长时),则可取各主要词首字母写成缩写 ,但需在第一次出现处写出全称 ,表及图中则用注解形式在下方注明 ,以
便读者理解 。
13104           安徽农业科学                         2010年