全 文 :第 9 卷 第 1 期
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翻白草对实验性糖尿病大鼠治疗作用的研究
洪 花 , 李善花 , 朴丽花 , 李相伍 , 金 政
(延边大学医学部组织学与胚胎学教研室 , 吉林 延吉 13 3口以)
摘 要 : 目的 : 观察翻 白草对实验性糖尿病大 鼠治疗作用 。 方法 : 给动物灌胃给药 , 用四氧喀吮制备实验性糖
尿病大鼠模型 。 应用免疫组织化学方法观察胰岛B 细胞形态学改 变 , 比色分析法检测血糖 、胆固醉及甘油三 醋的含
量 、 结果 : 翻 白草对四氧喷咤性糖尿病大鼠的胰岛B 细胞有明显的修复作用并可 以降低血糖 、胆固醉及甘油三醋的
含量 。 结论 : 翻 白草对实验性糖尿病大鼠具有治疗作用 。
关键词 : 翻白草 ; 实验性糖尿病 ; 大鼠 ; 治疗
中图分类号 : R 2 85 . 5 文献标识码 : B 文章编号 : 167 3一84 2X (2 0() 7)0 1一0 15 5一 03
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随着社健泊勺进步与发展 ,糖尿病的发病率 日趋增高 , 中 国在近 2o 年内糖尿病患病率增加了 3倍多 ! ’}。
虽然糖尿病的病因 尚未被阐 明 、但 目前认为胰岛素绝对或相对不足或胰岛素抵抗是糖尿病的主要病理生理基础 。 胰岛素的主要作用是促进细胞吸收血液
内 的葡萄糖作为细胞代谢的主要能量来源 , 同时也促进肝细胞将葡萄糖合成糖原或转化为脂肪 。 胰岛素的这种作用受阻 、胰岛素分泌不足或两者同时存
在缺陷 , 可导致血糖增高 。 目前 , 尚缺乏针对病因 的有效治疗手段 , 因此 , 糖尿病的治疗中最关键的环节还是降血糖 。 目前 , 用于糖尿病治疗的药物大部分为
西药 。 西药的降糖作用是肯定的 ,但其不 良反应也是有目共睹 。 而中药在这方面有相对的优势 ,它不 良反
应少 ,能有效防治并发症且疗效肯定 。 在民间用翻白草泡水降糖的偏方 , 具有良好的临床效果 [z] 。
1 实验材料
1
.
1 翻 白草 由延边大学医学部药学院天然药物
教研室分离提取 。
1
.
2 美咄达 海南金晓制药公司有限公司 。
1
.
3 试 剂 四 氧 啼 呢 为 H O N G K O N G FA R CO
e h e m se a l su p p一ie s 公司产品 : 小鼠抗大鼠胰岛素血
清为武汉博士德生物工程有限公司产品 ; 血糖试剂
盒为北京北化康临床试剂有限公司提供 ; 甘油三醋试剂盒为浙江东欧生物工程有 限公司提供 ; 总胆 固
醇试剂盒为上海荣盛生物技术有限公司提供 ; 其他
试剂均为国产分析纯 。
1
.
4 动物 实验动物采用实验用W ist ar 雄性大鼠 ,体
重为 190 一23 飞 . 由延边大学医学部实验动物科提供。
2 实验方法
2. 1 四氧喀咤性糖尿病 大 鼠模型的 制备 采取 2 次给药法 侧 , 将四氧啼 咤用生理盐水配成 2 % 注射液
(四氧嗜咤现配现用 )。 第 1 次禁食不禁水 12h 后腹腔注射四氧嗜咙 1 2o m 叭g , 巧m in 后腹腔注射胰岛素 0 . lm L , 并分别于给 四氧嘀吮后 2. 5h 和 5h 灌 胃给
25 % 葡萄糖 lm IJ lo g 。 第 2次禁食不禁水 12 h后腹腔注射四氧啥吮 10 o m 妙g 。 巧 m in 后腹腔注射胰岛素 0 . lm L , 并分别 于给四氧啥吮后 2. 5h 和 5h 灌 胃给
25 % 葡萄糖 l m u lo g 。 实验采用葡萄糖氧化酶法取眼眶后静脉丛血测末次给药后 72 h 的空腹血糖值 ,以空腹血糖 >1 1 . lm m o l几作为糖尿病大鼠 。
2. 2 实验动物 分组及给药方法 正常大鼠 6O 只按随机数字表法分为正常对照组 、糖尿病对照组 、药物
对照组 、实验(大 、 中 、小 3个剂量 )组 。 实验期间各
组大鼠均给予普通饲料喂养 自由饮水 , 实验组每 日分别灌胃翻白草 9妙 g 、6叭g 、3妙g ; 药物对照组每日灌 胃美毗达 sm沙 g; 糖尿病对照组和正常对照组每 日灌胃相应体积的蒸馏水 , 实验周期为 4 周 。
2. 3 生化检测 实验前后实验动物禁食 12 h , 分别
取眼眶后静脉丛血 , 分离血清 , 分别测空腹血糖 、总
胆固醇 、甘油三醋 。 血糖测定采用葡萄糖氧化酶法 ,
总胆固醇与甘油二醋测定各采用 C H O D 一PA P法和
酶偶联比色法 。
2. 4 免疫 组 织化 学观察 实验 4 周后大鼠脱颈处
死 , 迅速剖取胰尾 , 应用免疫组织化学 SA B C 法显示
胰岛 B 细胞 。
2. 5 统计学处理 用 SPS sl o. O统计软件处理 , 进行
配对 , 检验及方差分析 。
3 结 果
3
.
1 免疫组 织化学观察结果 正常对照组胰岛多为
圆形 、椭圆形 、多边形或不规则形 、大小不一 。 S AB c
法染色后胰岛 B 细胞为棕褐色的免疫反应阳性 , 多
位于胰岛 中央 , 占据胰岛的绝大部分 , 排列紧密 , 细
收稿日期 : 2 0 6 一0 7 一巧
作者简介 : 洪花( 19 7 9 一 ),女 (朝鲜族 ), 吉林延吉人 , 讲师 , 博士研究生 , 研究方向 : 组织化学 。
1肠
DOI:10.13194/j.jlunivtcm.2007.01.157.hongh.113
辽 宁 中 医 药 大 学 学 报 , 卷
胞界限较清楚 , 多数呈圆形或椭圆形 , 免疫反应阳性
物质分布于细胞质内 ,胰岛素分泌颗粒呈颗粒状 , 细胞质内分泌颗粒丰富 , 界限较清楚 , 着色深 , 未经染色的核呈空泡状 , 呈圆形或椭圆形 , 居中 。 B 细胞群
中存在的少量空 白区为胰岛其他细胞所在位置 , 见
图 1 。 胰腺外分泌部的腺泡细胞间偶见单个免疫反
应阳性细胞 。 糖尿病对照组胰岛形状多不规则 , 边缘不整齐 。 胰岛 内免疫反应阳性细胞数量明显减
少 ,每个胰岛内仅见数个散在的免疫反应 阳性细胞 ,
细胞之间出现较大的不规则空白区域 , 细胞质内分
泌颗粒明显减少甚至缺失 , 颗粒着色浅 , 界限模糊 ,分布不均匀 , 空泡状的核界限不清甚至固缩 , 见图 2 。外分泌部腺泡细胞间很难见到单个免疫反应阳性细
胞 。 实验大剂量组胰岛 B 细胞免疫组织化学改变与正常对照组相 比 , 胰岛形状不规则 ,胰岛内免疫反应
阳性细胞数量亦明显减少 , 境界不清 ,但部分细胞胞
质 内分泌颗粒与糖尿病对照组相比数量较多 , 着色深 ,界线较清楚 . 分布较均匀 。 少数细胞核界限清楚 ,见图 3 。 实验中剂量组 ,见图 4 与药物对照组 , 见图 5和糖尿病对照组相比胰岛内免疫反应阳性细胞数量相对较多 ,但细胞间仍有较大的空白区域 ,细胞轮廓较清楚 ,胞质内分泌颗粒较多 , 着色深 , 界线较清楚 ,分布较均匀 。 少数细胞核界限清楚 。 实验组小剂量
组与糖尿病对照组相比免疫组织化学改变相近 , 见图 6 。 实验组 (大 、中 、小剂量组 )及药物对照组外分泌部腺泡细胞间亦可见到单个免疫反应阳性细胞 。
3. 2 生化指标检测结 果 实验前后血糖 、总胆 固醇
及甘油三醋的含量见表 1 一表孔
表 l 实验前后血糖水平的比较( m m 心L , 叉 土 、 )
组 别 。 实验前 实验后
正 常 对 照 组 一0 4 .叫5 士 0 4 一7 4 . 5 7 6 土 0 6 2 2 #
糖尿病对照组 一0 18 . 9 17 士 3 . 4 0 0 18 .科7 士 2 ·3 3 9 夸
药 物 对 照 组 10 1 8 .码2 土 一, 2 6 3 6 7 2 6 士 1 9 9 4 ‘“
实验大剂量组 10 1 8 .6 1 5 * 3 一3 1 4 5 . 1 3 2 土 0 以科’御
实验中剂量组 10 1 9 . 8 2 2 士 1 . 2 5 9 5 7 5 6 土 0 8 6 1 ‘钾
实验小剂量组 1 0 1 9 甲3抖 士 2 . 4 2 5 一4 9 7 8 土 2 3 06 ’姗
注 : 与实验前相比 , *P < 0. 05 , 与糖尿病对照组相比 ,
#P < 0. 05
, 与正常组相比 , 兴 p < 0. 05 。
表 2 实验前后血清胆固醇含量的 比较(m m o llL , 见 士刘
组 别 n 实验前 实验后
正 常 对 照 组 一。 一6 8 士 0 2 8 1 . 6 1 土 0 2 2 .
糖尿病对照组 一0 2 3 3 士 0 .6 1 2 . 16 士 0 · 3 3
药 物 对 照 组 一0 2万 6 士 0 .4 8 1 . 8 3 士 0 3 2 ’ 衬
实验大剂量组 10 2. 24 士 0 3 0 t . 59 土 0 . 18 . “
实验中剂量组 1 0 2 . 1 9 土 。一3 9 1 7 7 士 0 . 2 6 ’ #
实验小剂量组 10 2 . 1 8 士 0 . 5 1 1 . 9 3 士 0 ·3 0
注 : 与实验前相比 , *P < 0. 05 , 与糖尿病对照组相比 .
井尸< 0 0 5 0
表 3 实验前后血清甘油三脂含量的比较 (m m 洲L , 贡 土对
组 别 。 实验前 实验后
正 常 对 照 组 1 0 0 . 7 7 土 0 . 16 0 . 62 士 0 . 2 1 “
糖尿病对照组 10 2 . 3 7 士 0 . 6 5 ] , 9 8 士 o , 6 3
药物 对 照 组 10 2 2 6 土 一1 4 0 ·6 2 , 0 . 2 2 ’ 钾
实验大剂量组 10 2 . 4 7 士 1 . 09 0 . 4 9 士 0 1 9 ’ #
实验中剂量组 10 2 2 2 士 0 . 4 1 0 . 9 1 土 0 3 3 ‘ .
实验小剂量组 20 2 . 2 9 土 0 . 3 9 1 7 2 士 0 3 1 ‘
注 : 与实验前相 比 , *P < 0. 05 , 与糖尿病对照组相 比 ,
#尸 < 0 0 5 0
4 讨 论翻 白草 冈始载于《救荒本草 》, 其味甘 、微苦 , 性
平 , 无毒 , 归肝 、胃 、大肠经 , 有清热润燥 、凉血解毒 、止血消肿 、止痢之功效 ; 多用于治疗痢疾 、疟疾 、肿
痛 、各种出血 。 而近年来翻 白草在糖尿病的治疗中取得了 良好的临床效果 。本实验生化检测结果表明 :实验组 (大 、中剂量组 )经翻白草治疗 4周后 , 与实验前相比各组空腹血糖均显著降低 (p < 0. 05 ); 与搪尿病对照组相比大 、中 、小剂量组空腹血糖亦显著降低
(p < 0. 05 )
。 在翻 自草 的 3 个剂量组与药物对照组
(美毗达 : 与实验前相比 p < 0. 05 、与糖尿病对照组相
比尸< 0. 0 5 ) 的降糖效果比较中 , 翻 白草大 、中剂量
组的降血糖疗效比药物对照组好 , 接近正常对照组
的血糖水平 。 比较翻白草 3个剂量组之间的降糖效果 , 小剂量组与正常对照组相比空腹血糖有显著性差异(p < 0. 05 ), 而大 、 中剂量组与正常对照组相比
空腹血糖无差异(p < 0. 05 ), 表明高剂量组降糖效果与中剂量组差不多 , 所以可用中剂量代替高剂量使用 , 可减少用药量 。姜长玲等 闪在临床研究中证明翻白草能明显降低n 型 D M患者的 T G 、 TC 、 L D L - C 、 A户〕B ,也通过阵酬氏纤维蛋白原和血小板的钻附聚集而全面改善其血液流变学差异 。 同年韩永明等 !习的在体实验也证实翻白草组体重明显增加(给药前后比较p < 0- 05 ), 给药
前后体重差值与造模对照组比较(p < 0. 01 ), 翻白草组与实验对照组比较 , 两者之间无显著性差异(p >
0. 05 )
。 本实验生化检测结果表明 , 实验组(大 、中剂量组 )经翻白草治疗 4 周后 , 与实验前相比血脂 (总
1漪
第 () 卷 第 1 期
2 ‘)(一7 年 1 月 辽 宁 中 医 药 大 学 学 报JO U R N AL O F L】A O N 】NG U N IV E R Sll ,Y O F T C M V
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Ja n 二 2 0() 7
中医药治疗缺血性中风研究进展
周仲磊
〔江苏省无锡市滨湖区中医院 , 江苏 无锡 21 41 21 )
关键词 : 缺血性中风 ; 中医药 ; 综述
中图分类号 : R 25 2 文献标识码 : A 文章编号 : 16 7 3一8 4 2X (20() 7)0 1一0 15 7一 0 2
中风病 , 为中医风 、痛 、滕 、月扁四大顽症之首 , 历来受到医学界的重视。 缺血性中风主要是脑动脉粥
样硬化基础上的血栓形成所致 , 它具有发病率高 、病
死率高 、致残率高等特点 。 中医理论对缺血性中风
有独特的认识 , 中医药治疗缺血性 中风又颇具优势 ,
建立了针对性强 、简便 、有较好疗效的治则治法 。 其
总体思路为 “以法立方 , 随证加减 ” 。 现将近几年中
医对缺血性中风的研究综述如下 。
, 病因病机
历代医家立论侧重点不同 , 大体有以下几种认
识 : ¹ 风 : 中风之 “风 ” 有 内外之别 , 唐宋以前多 以外风立论 , 坚持 “ 内虚邪中 ” 之外风说 , 当今部分医
家仍坚持这种观点 , 由 于正气虚弱 , 感受外邪 , 经脉
痹阻 , 营卫失和 , 营气不能达于外 , 则出现肢体麻木
不仁 , 半身不遂 . 营气不能达于内则神 昏 、舌强语寄等症 。 但是大部分医家趋向于 “内风 ” , 即风非外来
之风 , 而是由内所生 , 即张景岳所说之 “非风 ” , 风之产生在于肝肾阴精亏耗 , 阴亏于下 , 风动于上 。º痰 :
痰浊凝脉 , 气血不畅 . 痹阻脑脉 , 神机失用 , 是缺血
性中风 的基本病机 , 同时也是缺 血性 中风的重要 因素 。 痰浊与疲血密不可分 , 往往交互为患 。 一种情
况是由痰致疲 , 由于脉 内痰浊戮凝 、气 血不畅 , 最后
痰癖互阻 ; 一种情况是因癖致痰 , 痰由窟生 ,痛血阻碍津液敷布 , 津凝为痰 。 »痕 : 血行不畅 、痹阻脑脉是缺血性中风的重要病机 , 亦为现代研究所证实 ,
血疲贯穿于缺血性中风发生发展的全过程 , 往往与
气虚 、痰阻 、肾虚相兼为患而成气虚血癖证 、痰癖阻
络证和 肾虚血癖证 。 ¼ 火 (毒 ) : 主要 指内生之火 ,
一则七情六欲刺激心肝火旺 , 或生活失调 , 烦劳过
度 , 虚火内生 , 阴虚火旺 , 气血上逆犯脑 , 震扰脑络 ,
发为中风 。 一则由痰癖互阻而中焦童滞 , 升降失常 ,肝失疏泄 , 气郁化火 , 邪热风火充斥三焦 , 痰浊化热
腑气不通 。 再者 , 脑脉痹阻 日久 , 血疲痰生 , 热结毒
生 , 毒损脑络 , 损伤脑之神机 , 神经失治而生缺血性
中风 。 ½ 虚 : 主要指肾虚 。 本病多发于中老年人 ,
中老年人肾脏渐亏 , 或高年多病 , 久病及肾 , 肾虚则
脏腑功能活动渐衰 , 致气血亏虚 , 血流滞缓而为癖 。肾虚气化失职 , 聚湿成痰 , 最后形成肾虚血痪痰阻 ,
发为中风 。
2 治疗方法
2
.
1 驱风活 络法 本法在唐宋以前被列为中风的
基本治疗法则 ,后来随着 “内风” 学说的兴起和对中
风病理认识的深化 , 驱风活络法的运用受到一定 的限制 , 但是部分医家采用此法治疗缺血性 中风 , 并且
胆固醇 、甘油三醋 )含量均显著减少 (P < 0. 05 ) , 而小
剂量组实验前后血脂无显著差异 (尸 > 0. 05 ) ,表明翻
白草在降低糖尿病动物血糖的同时可纠正其脂类代谢异常 , 翻白草对糖尿病动物降 血脂疗效与所含黄
酮类有关15 。 广西医学院糖尿病科研组证实 , 黄酮
类有促进胰岛素与靶细胞膜上专一受体相结合的作
用 , 能调整糖 、脂肪代谢 。
四氧啼陡是一种特异性胰岛 B 细胞毒剂 , 可选
择性破坏实验动物 的胰岛 B 细胞引 起实验性糖尿
病 。 众多实验性研究表 明 , 有些中药复方或单味
药有刺激 实验动物胰 岛 B 细胞分泌胰岛素及促使受损的胰岛 B 细胞修复和再生等功能 , 从而降低血
糖 。 本实验观察了经翻白草治疗 4 周后糖尿病大鼠
胰岛 B 细胞免疫组化的形态学改变 。 结果表明 , 翻
白草治疗组及药物对照组胰岛 B 细胞免疫组化显示
结果相似 , 没有明显区别 , B 细胞数量减少 , 部分胞
质 内分泌颗粒明 显减少甚 至缺失 , 颗粒着色浅 , 但大剂量组 、 中剂量组及药物对照组与糖尿病对照组
相比 , 部分 B 细胞胞质内分泌颗粒相对较多 ,着色较
深 , 其中以实验大 、 中剂量组这种 阳性细胞较多 , 翻
白草治疗组及药物对照组外分泌部腺泡细胞间见
到单个免疫反应阳性细胞 , 提示翻白草不仅对糖尿
病大鼠受损的胰岛 B 细胞形态结构具有一定的改善
作用 , 还可 以使胰岛再生 , 而且这种作用大 、 中剂量
组相等 。 令
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收稿日期 : 20 6一07 一31
作者简介 : 周仲磊 ( 19 6 5一 ), 男 , 江苏无锡人 , 主治中医师 , 学士 , 研究方向 : 中医内科临床 。
157