全 文 :[收稿日期] 20120616(003)
[基金项目] 北京中医药大学自主选题项目(2011-JYBZZ-XS057)
[第一作者] 李欧,硕士,从事药用植物资源评价与利用研究,E-mail:liou2013@ 126. com
[通讯作者] * 李卫东,副研究员,硕士生导师,Tel:010-84738334,E-mail:liweidong2005@ 126. com
欧李果实多酚含量的差异比较
李欧1,2,李卫东1,2* ,胡璇1,2,郝江波1,2,莫愁1,2
(1. 北京中医药大学中药学院,北京 100102;
2. 北京中医药大学中药材规范化生产教育部工程研究中心,北京 100102)
[摘要] 目的:优选欧李果实多酚的超声提取工艺,对京欧 1 号、京欧 2 号及 B7-1 不同品种欧李的果皮、果肉、果汁等部
位的多酚含量进行比较分析。方法:采用单因素试验考察乙醇体积分数、料液比、提取时间和提取温度对欧李果实多酚超声
提取效果的影响,通过正交试验优选其提取工艺。比较不同品种欧李果实中不同部位多酚含量的差异。结果:最佳超声提取
条件为 25 倍量 40%乙醇于 70 ℃下提取 75 min,多酚提取量 16. 3 mg·g - 1。3 个品种欧李中多酚含量大小均为果皮 >可食部
分(去核的果实)>果肉 >果汁。结论:不同品种欧李的果皮、果肉中多酚含量存在差异,为欧李的综合利用及产业深加工提
供理论依据。
[关键词] 欧李;多酚;提取;品种
[中图分类号] R283. 6 [文献标识码] A [文章编号] 1005-9903(2012)22-0053-04
Difference Comparison of Content of Polyphenol from Fruit of Cerasus humilis
LI Ou1,2,LI Wei-dong1,2* ,HU Xuan1,2,HAO Jiang-bo1,2,MO Chou1,2
(1. School of Chinese Pharmacy,Beijing University of Chinese Medicine,Beijing 100102,China;
2. Engineering Research Center of Good Agricultural Practice for Chinese Crude
Drugs of Education Ministry,Beijing University of Chinese Medicine,Beijing 100102,China)
[Abstract] Objective:To optimize ultrasonic assisted extraction technology of polyphenol from fruit of
Cerasus humilis,and compare the content of polyphenol from peel,pulp,juice and other parts in Jingou 1,Jingou
2 and B7-1 of different varieties of C. humilis. Method:Single factor test was used to investigate influence of the
concentration of ethanol, solid-liquid ratio,extraction time and temperature on ultrasonic extraction effect of
polyphenol from fruit of C. humilis,and extraction technology was optimized by orthogonal test. Difference of the
content of polyphenol was compared,which were in different parts of fruit from different varieties of C. humilis.
Result:Optimal ultrasonic assisted extraction conditions were as follows: extracted 75 min with 25 times the
amount of 40% ethanol at 70 ℃,under these conditions, yield of pilyphenol was up to 16. 3 mg· g - 1 . The
content of polyphenol was in order of peel > edible parts (removal kernal) > pulp > juice in three varieties.
Conclusion:It suggested that difference in the content of polyphenol from peel and pulp among different varieties
were found,and this study provided a theoretical basis for comprehensive utilization and depth processing industry
in peel of C. humilis in the future.
[Key words] Cerasus humilis;polyphenol;extraction;variety
欧李是我国特有的果药兼用型树种,其根系强
大,防风固沙效果显著[1],具有抗旱、耐寒、耐瘠薄
特性。其果实颜色艳丽、香气宜人、风味独特、营养
丰富,尤其钙含量为各类水果中之首,是天然保健水
·35·
第 18 卷第 22 期
2012 年 11 月
中国实验方剂学杂志
Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae
Vol. 18,No. 22
Nov.,2012
DOI:10.13422/j.cnki.syfjx.2012.22.046
果[2]。其种仁是“药食两用”中药材郁李仁的主要
来源,具有很好的综合开发利用前景。
多酚为医药、食品、化妆品中很有前景的一类天
然抗氧化剂和自由基清除剂,具有抗辐射、抗衰老、
抗肿瘤、降血脂等药理作用[3-5]。欧李中酚类物质
含量较高,其中类黄酮类的水溶性红色素花色苷质
量分数约为 1. 1%,是樱桃、草莓的 3 ~ 4 倍[6]。对
葡萄[7]、番石榴[8]、杏[9]等水果的研究表明,其不同
品种及不同部位中多酚含量存在差异,而目前有关
欧李的类似报道尚未见。
京欧 1 号和京欧 2 号是本课题组历经 11 年选
育的欧李新品种,于 2009 年 7 月,通过了北京市林
木品种审定委员会审定[10-11]。本试验以京欧 1 号、
京欧 2 号及待审品种 B7-1 为试验材料,运用单因素
试验和正交试验对欧李多酚进行超声提取工艺优
化,研究欧李不同品种及其不同部位中多酚含量的
差异,为欧李的综合开发利用提供理论依据。
1 材料
752 型紫外可见光分光光度计(上海光谱仪器
有限公司) ,SL 型电热恒温水浴锅(上海树利仪器仪
表有限公司) ,JYL-C010 型九阳料理机(九阳股份有
限公司)。
试验地点位于北京市昌平区,欧李品种京欧 1
号、京欧 2 号及待审定品种 B7-1 于 2005 年 4 月定
植,按常规管理,于 2011 年 7 ~ 8 月采集 3 个欧李品
种的果实,放于冰壶中带回实验室,所有果实在 - 40
℃条件下冷冻保存,经北京中医药大学李卫东副研
究员 鉴 定 为 Cerasus humilis (Bge) sok.;Folin
Ciocaltecus Phenol 试剂(美国 Sigma 公司) ,没食子
酸对照品(购自国药集团,F20110104) ,试剂均为国
产分析纯。
2 方法和结果
2. 1 标准曲线的建立 配制0. 904 3 g·L - 1没食子
酸对照品溶液,精密吸取 30,60,90,120,150,180
μL 于试管中,加入 0. 2 mL 的 Folin-Ciocalteu 试剂,
充分振荡后静置 3 ~ 4 min,分别加入 10% Na2CO3
溶液 1. 0 mL,加水至体积 8 mL,摇匀置于 35 ℃恒温
水浴中反应 1 h;同时做空白试剂对照溶液。于波长
400 ~ 900 nm 进行光谱扫描,结果在 670 nm 处有最
大吸收。于 670 nm 下测定吸光度(A) ,以提取量对
A 进行直线回归,得回归方程 Y = 0. 005X + 0. 005 4
(R2 = 0. 998 7)。
2. 2 果肉多酚的提取与测定 将欧李去果柄、果
核,可食部分打浆。精确称取 5 g 样品,加入适当提
取溶剂进行超声提取,过滤,定容,按 2. 1 项下方法
进行显色反应,测定 A,计算多酚质量浓度及提
取量。
多酚提取量(以没食子酸计)= m1V1 /MV
式中 m1 为样液中多酚的质量;V1 为样液体积;
V 为测定取样液的体积;M 为称样量。
2. 3 单因素试验
2. 3. 1 乙醇体积分数考察 多酚类物质在极性溶
剂中溶解性良好,结合安全角度考虑,确定选择亲水
性有机溶剂乙醇作为提取溶剂。采用体积分数分别
为 30%,40%,50%,60%,70%,80%的乙醇溶液作
为提取溶剂,固定提取温度 50 ℃,提取时间 30 min,
料液比 1∶ 25。结果多酚提取量依次为 12. 7,13. 2,
15. 8,14. 9,13. 3 mg·g - 1(n = 3)。说明乙醇体积分
数为 50%时,多酚提取量达最大;之后随乙醇体积
分数增加,多酚提取量反而下降,可能是由于溶剂与
多酚极性的相似程度降低导致。故选择乙醇体积分
数 40% ~ 60%进行下一步优选。
2. 3. 2 料液比考察 固定乙醇体积分数 40%,提
取时间 30 min,提取温度 50 ℃。考察不同料液比
(1∶ 10,1∶ 15,1 ∶ 20,1 ∶ 25,1 ∶ 30)对欧李果肉多酚提
取的影响,结果多酚提取量依次为 10. 0,11. 5,
12. 5,12. 8,12. 9 mg·g - 1。说明随料液比的增大,多
酚的提取量增加。但料液比 1∶ 30 仅比 1∶ 25 条件下
的多酚提取量高 0. 1 mg·g - 1。
2. 3. 3 提取温度考察 温度太高会影响多酚分子结
构的稳定性,加速多酚类化合物的氧化影响活性,欧
李多酚中主要成分红色素,高温下长时间加热不稳
定[12],故选择 40,50,60,70 ℃作为考察温度,固定乙
醇体积分数 40%,提取时间 30 min,料液比 1∶ 25。结
果多酚提取量依次为 12. 3,12. 6,13. 1,13. 5 mg·g - 1。
说明随提取温度的升高,多酚提取量增加。
2. 3. 4 提取时间考察 固定乙醇体积分数 40%,
提取温度 50 ℃,料液比 1 ∶ 25,考察提取时间为 30,
45,60,75,90 min 对试验的影响。结果多酚提取量
依次为 7. 7,11. 8,12. 3,12. 4,12. 2 mg·g - 1。说明多
酚提取量随提取时间不断延长而增加,于提取 75
min 时达最大;之后随提取时间增加,多酚提取量反
而下降。
2. 4 多酚提取工艺优化 根据单因素试验结果,选
取料液比、乙醇体积分数、提取时间、提取温度为考
察因素,按 L9(3
4)设计进行正交试验,重复 3 次试
验。因素水平见表 1,试验安排及结果见表 2。
·45·
第 18 卷第 22 期
2012 年 11 月
中国实验方剂学杂志
Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae
Vol. 18,No. 22
Nov.,2012
表 1 欧李多酚超声提取工艺优选正交试验因素水平
水平
A
料液比
B 乙醇体积
分数 /%
C 提取时间
/min
D 提取温度
/℃
1 1∶ 20 40 60 50
2 1∶ 25 50 75 60
3 1∶ 30 60 90 70
表 2 欧李多酚超声提取工艺优选正交试验安排
No. A B C D
多酚提取量
/mg·g - 1
1 1 1 1 1 14. 2
2 1 2 2 2 15. 1
3 1 3 3 3 14. 4
4 2 1 2 3 16. 3
5 2 2 3 1 14. 7
6 2 3 1 2 15. 3
7 3 1 3 2 15. 8
8 3 2 1 3 16. 0
9 3 3 2 1 14. 7
K1 14. 6 15. 4 15. 2 14. 5
K2 15. 4 15. 2 15. 4 15. 4
K3 15. 5 14. 8 15. 0 15. 5
R 0. 9 0. 6 0. 4 1. 0
由表 2 中极差可知,各因素对多酚提取量的影
响顺序为提取温度 >料液比 >乙醇体积分数 >提取
时间。根 据 K 值 初 步 确 定 最 佳 提 取 条 件 为
A3B1C2D3。但 A3B1C2D3 不在正交试验组合中,为考
察最优条件的重复性,按优选工艺进行验证试验。
结果欧李果肉中多酚提取量 16. 0 mg·g - 1,比正交
试验表中最佳组合 A2B1C2D3 条件下的提取量低,可
能是因为有交互作用存在。综合分析,确定料液比
1∶ 25,乙醇体积分数 40%,提取时间 75 min,提取温
度 70 ℃为最佳提取条件。
2. 5 不同品种欧李果实中不同部位的多酚含量比
较 将欧李洗净晾干,分离欧李的果皮、果肉、可食
部分(去核后的果实)和果汁,粉碎后按优选的提取
工艺进行提取,按 2. 1 项下方法测定,结果见表 4。
表 4 不同品种欧李果实中不同部分的
多酚含量差异(珋x ± s,n = 3) mg·g - 1
品种 果肉 可食部分 果皮 果汁
京欧 1 号 9. 8 ± 0. 56 13. 2 ± 0. 32 33. 5 ± 0. 57 3. 5 ± 0. 18
京欧 2 号 7. 8 ± 0. 72 12. 0 ± 0. 88 29. 6 ± 1. 26 3. 0 ± 0. 10
B7-1 11. 4 ± 0. 28 13. 7 ± 1. 38 26. 2 ± 0. 33 3. 7 ± 0. 11
由表 4 可知,3 个欧李品种的不同部位中多酚
含量均呈显著性差异,其中果皮多酚含量最高,可食
部分(去核后的果实)次之,再次是果肉,果汁多酚
含量最低。不同品种欧李果汁中多酚含量无显著性
差异。3 个欧李品种的果肉、果皮中多酚含量有显
著性差异,果肉中 B7-1 品种的多酚最高,京欧 2 号
最低;果皮中京欧 1 号最高,B7-1 最低。可食部分
中多酚含量表现出京欧 2 号最低,与京欧 1 号、B7-1
存在显著性差异,京欧 1 号与 B7-1 之间无显著性
差异。
3 讨论
李学强等对欧李果皮、果肉中单宁提取工艺优
化研究中,在未进行单因素考察基础上直接采用正
交试验设计方法[13],存在一定的盲目性。对欧李果
肉中单宁提取条件的优化表明,各因素对提取工艺
的影响顺序为料液比 >提取温度 >提取时间 >溶剂
体积分数[14]。本试验在单因素考察的基础上进行
正交设计,使试验安排更合理、稳定。
葡萄[15]、甜樱桃[16]、蓝莓[17]等水果中,酚类物
质与品种的关系已有较多研究,本研究首次对欧李
果实中多酚含量在不同品种间的差异进行研究。结
果欧李不同部位多酚含量存在显著性差异,其中果
皮中多酚含量最高,果肉次之,果汁含量最低,与张
晋芬等在梨、苹果及香蕉上的研究结果相同[18]。果
皮、果肉多酚含量在 3 个欧李品种间存在显著差异,
与荔枝类似研究相似[19]。京欧 1 号、京欧 2 号及
B7-1 种植在同一地方,采用相同的栽培管理,其果
皮、果肉多酚含量差异可能是由遗传造成的。本研
究为欧李的综合利用及产业深加工提供理论依据。
[参考文献]
[1] 姜英淑,陈书明,王秋玉,等 . 碳酸盐和干旱胁迫对欧
李生理特性的影响[J].林业科学,2009,45(3) :19.
[2] 张美莉,邓秋才,杨海霞,等 . 内蒙古欧李果肉和果仁
中营养成分分析[J]. 氨基酸和生物资源,2007,29
(4) :18.
[3] 王雪飞,张华 .多酚类物质生理功能的研究进展[J].
食品研究与开发,2012,33(2) :211.
[4] 朱开梅,赵磊,顾生玖 . 香蕉皮多酚提取方法及生物
活性的研究进展[J]. 中国实验方剂学杂志,2010,16
(16) :219.
[5] 吴正平 . 茶多酚对小鼠高脂血症与脂肪肝的预防作
用[J].中国实验方剂学杂志,2010,16(2) :94.
[6] 毕红霞,陈玮,薛勇,等 . 欧李红色素的光谱特性研究
[J].郑州工程学院学报,2003,24(2) :48.
·55·
李欧,等:欧李果实多酚含量的差异比较
檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶
[7] 刘金豹,杜中军,翟衡 . 葡萄浆果中的主要多酚化合
物及影响因素[J].中外葡萄与葡萄酒,2003(2) :22.
[8] 冯卫华,于立梅,秦艳,等 . 番石榴果皮及果肉多酚的
提取研究[J].食品科技,2011,36(8) :190.
[9] 王华磊,冯建荣,樊新民,等 . 新疆 17 个杏品种的抗
氧化指标与总酚含量的测定[J]. 果树学报,2008,25
(6) :828.
[10] 李卫东,刘志国,魏胜利,等 .早熟欧李新品种‘京欧 1
号’[J].园艺学报,2010,37(4) :679.
[11] 李卫东,刘志国,魏胜利,等 .中熟欧李新品种‘京欧 2
号’[J].园艺学报,2010,37(5) :847.
[12] 卢奎,李建伟,毕红霞,等 . 欧李红色素的性质和应用
[J].食品科学,2004,12(12) :78.
[13] 李学强,李秀珍,张国海 . 溶剂法提取欧李果皮中单
宁的工艺参数优化[J]. 四川农业大学学报,2009,27
(4) :462.
[14] 李学强,李秀珍 .成熟欧李果肉中单宁提取条件的优
化[J].生物学通报,2009,44(2) :46.
[15] 王美丽,吴鲁阳,张振文,等 . HPLC 法测定不同葡萄
品种成熟过程中单体酚的变化[J]. 西北农林科技大
学学报:自然科学版,2007,35(4) :134.
[16] 王贤萍,段泽敏,戴桂林,等 . 甜樱桃主要栽培品种多
酚含量的测定与品质分析[J]. 中国农学通报,2011,
27(13) :173.
[17] 胡雅馨,李京,惠伯棣 . 蓝莓果实中主要营养及花青
素成分的研究[J].食品科学,2006,27(10) :600.
[18] 张晋芬,袁冰,冷平,等 .梨、苹果和香蕉中 8 种多酚类
物质的微波提取与高效液相色谱法测定[J]. 分析测
试学报,2008,27(12) :1371.
[19] 王敏,陈磊,黄雪松 . 荔枝中多酚含量的测定[J]. 食
品与发酵工业,2010,36(2) :172.
[责任编辑 仝燕]
[收稿日期] 20120819(004)
[通讯作者] * 林以宁,博士,副教授,从事中药制剂及质量评价研究,Tel:025-86185126,E-mail:lynzyb@ 163. com
复方黄柏抗炎止痛巴布剂的基质处方优选
林以宁 * ,钱方
(中国药科大学中药学院,南京 211198)
[摘要] 目的:优选复方黄柏抗炎止痛巴布剂的基质处方。方法:以持黏力为指标,选取聚丙烯酸钠、羧甲基纤维素钠、
三氯化铝和甘油的用量为考察因素,采用正交设计法优化复方黄柏巴布剂的基质配比。结果:最佳基质配方为聚丙烯酸钠-羧
甲基纤维素钠-三氯化铝-甘油 13∶ 6∶ 6∶ 100。结论:按优选配方制得的复方黄柏抗炎止痛巴布剂具有良好的初黏力、持黏力、皮
肤追随性,且基质与复方提取物具有良好的相容性。
[关键词] 巴布剂;正交试验;基质
[中图分类号] R283. 6 [文献标识码] A [文章编号] 1005-9903(2012)22-0056-03
Optimization of Matrix Prescription for Compound Huangbai
Anti-inflammatory Analgesic Cataplasm
LIN Yi-ning* ,QIAN Fang
(School of Chinese Materia Medica,China Pharmaceutical University,Nanjing 211198,China)
[Abstract] Objective:To optimize matrix prescription of compound Huangbai anti-inflammatory analgesic
cataplasm. Method:With holding adhesive power as index, the amount of sodium polyacrylate, sodium
carboxymethyl cellulose, aluminum trichloride and glycerol were chosen as factors, matrix formulation of
compound Huangbai anti-inflammatory analgesic cataplasm was optimized by orthogonal design. Result:Optimal
matrix formulation of sodium polyacrylate-sodium carboxymethyl cellulose-aluminum trichloride-glycerol was 13 ∶ 6 ∶
·65·
第 18 卷第 22 期
2012 年 11 月
中国实验方剂学杂志
Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae
Vol. 18,No. 22
Nov.,2012