全 文 ：收稿日期:2006-04-07;　修订日期:2006-06-19
作者简介:李　瑞(1974-),女(汉族),宁夏隆德人 ,现任南京医科大学药
学院讲师 ,硕士学位 ,主要从事药物新剂型研发工作.
翻白草多糖提取工艺研究
李　瑞 1 , 沈　鸿 2
(1.南京医科大学药学院　210029;　2.南京脑科医院　210029)
摘要:目的 优化翻白草多糖的提取工艺。方法 采用正交实验方法 , 以粗多糖得率和总糖含量为评价指标 , 对翻白草中
多糖提取工艺进行筛选。结果 综合考虑 ,最佳提取工艺为煎煮 2次 , 温度 70℃,加水 12倍量 ,煎煮时间 1 h。 结论 优选
得到的工艺经济 、简单 、稳定 、可行。
关键词:翻白草;　多糖;　正交设计;　提取
中图分类号:R284.2　　文献标识码:A　　文章编号:1008-0805(2006)12-2525-01
ExtractionTechnologyofPolysaccharidesfromPotentiladiscolorBunge
LIRui1 , SHENHong2
(1.SchoolofPharmacy, NanjingMedicalUniversity, Nanjing210029 , China;2.NanjingBrainHospital,
Nanjing210029, China)
Abstract:ObjectiveTooptimizetheextractionprocessofpolysaccharidesfromPotentilladiscolorBunge.MethodsThemethod
forextractionofpolysaccharidesfromPotentiladiscolorBungewasoptimizedwithorthogonalexperimentaldesign.ResultsThe
resultsshowedthatcrudepolysaccharideswereobtainedbythefolowingextactionwithwater(12ml/g)for1h, twotimesat70℃.
ConclusionThisoptimizedprocessiseconomical, simple, stableandeficient.
Keywords:PotentilladiscolorBunge;　Polysaccharide;　Orthogonaldesign;　Extraction
　　翻白草 , 为蔷薇科植物 PotentiladiscolorBunge的干燥全草 ,
具有止血止痢 、清热解毒 、利尿消肿之功效 ,民间用翻白草泡水饮
用治疗糖尿病 , 现代研究通过翻白草水煎剂对动物模型血糖作用
的影响 , 证实了翻白草的降糖作用 , 但对其重要有效成分翻白草
多糖 , 国内外文献很少报道 [ 1 , 2] 。在本文中 , 我们用正交设计方
法对翻白草中多糖提取工艺进行了研究。
1　仪器
翻白草购于南京市药材公司 ,产地广东;所用试剂均为分析
纯。 752分光光度计(上海分析仪器有限公司),分析天平(日本
岛津)。
2　方法与结果
2.1　翻白草多糖的含量测定(硫酸-苯酚法)[ 3]
2.1.1　对照品溶液的制备 精密称取在 105℃干燥至恒重的葡
萄糖对照品 10mg,置 100 ml量瓶中 ,加水溶解并稀释至刻度 ,摇
匀 , 即得。
2.1.2　标准曲线的绘制 精密吸取葡萄糖对照品溶液 0, 0.2,
0.4, 0.6, 0.8, 1.0ml分别置于 10 ml具塞离心管中 , 依次添加蒸
馏水使最终体积为 2.0 ml, 各管再加入 1.0 ml的苯酚试液 , 混
匀 , 迅速加入 5.0ml的浓硫酸 ,摇匀 , 静置 5min,水浴加热 15min
后 , 取出冷却至室温 ,于 490 nm处测定吸收度 , 以多糖的量(C,
μg/ml)为横坐标 ,以吸收度(A)为纵坐标 , 绘制标准曲线。回归
方程如下式:A=0.064 6C-0.003 9, r=0.998 7表明多糖在 3 ～
13μg/ml范围内具有良好线形关系。
2.1.3　样品溶液的制备 每份 20 g翻白草饮片按下表安排实
验 , 重复两次。提取液经过滤 、浓缩至 1∶ 1(g/ml)后 , 加 95%乙
醇 , 使其含醇量达 80%, 静置过夜 , 减压过滤 , 沉淀用无水乙醇
洗涤 , 真空干燥 ,得多糖粗品 , 称重计算得率 , 再取其中一部分 ,干
燥至恒重 , 精密称取 10 mg, 置 50 ml量瓶中 ,加水溶解并稀释至
刻度 , 摇匀 ,即得。
2.1.4　样品溶液的测定 精密吸取样品溶液 1 ml,照 2.1.2项下
操作 , 测定吸收度 , 计算总糖含量。
2.2　提取条件的优选 选用正交设计表 L9(34)[ 4] , 安排实验 ,
因素水平见表 1。
表 1　提取工艺优化的因素水平
因素 A　煎煮次数　
B
煎煮温度 T/℃
C
　加水量 /倍　
D
　煎煮 t/h　
1 1 70 8 0.5
2 2 80 10 1
3 3 90 12 1.5
以粗多糖得率和总糖含量为指标 ,用正交实验方法对翻白草
中多糖提取工艺进行优化。结果见表 2。
表 2　正交实验结果
组号 A B C D 粗多糖得率(%)总糖含量(%)
1 1 1 1 1 3.04 10.72
2 1 2 2 2 5.67 15.13
3 1 3 3 3 7.11 14.61
4 2 1 2 3 6.79 19.37
5 2 2 3 1 7.91 16.34
6 2 3 1 2 6.92 18.46
7 3 1 3 2 9.28 19.29
8 3 2 1 3 6.78 17.85
9 3 3 2 1 9.62 15.38
K1 15.82 19.11 16.74 20.57
粗 K2　 21.62 20.36 22.08 21.87
多 K3　 25.68 23.65 24.3 20.68
糖 k1　 5.27 6.37 5.58 6.86
得 k2　 7.21 6.79 7.36 7.29
率 k3　 8.56 7.88 8.10 6.89
R 3.29 1.51 2.52 0.43
SS 16.37 3.67 10.07 0.35
K1 40.46 49.38 47.03 42.44K2 54.17 49.32 49.88 52.88
总 K3　 52.52 48.45 50.24 51.83
糖 k1　 13.49 16.46 15.68 14.15
含 k2　 18.06 16.44 16.63 17.63
量 k3　 17.51 16.15 16.75 17.28
R 4.57 0.31 1.07 3.48
SS 37.35 0.18 2.06 22.03
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LISHIZHENMEDICINEANDMATERIAMEDICARESEARCH 2006VOL.17NO.12 时珍国医国药 2006年第 17卷第 12期
将正交实验结果进行方差分析。结果见表 3。
表 3　方差分析表
因素 方差来源 离差平方和 自由度 方差 F P
粗多糖 A　　 16.37 2 8.19 47.25 <0.05
得率　 B　　 3.67 2 1.83 10.58C　　 10.07 2 5.03 29.05 <0.05
　D(误差) 0.35 2 0.17
总糖　 A　　 37.35 2 18.67 206.80 <0.01
含量　 　B(误差) 0.18 2 0.09C　　 2.06 2 1.03 11.42
D　　 22.03 2 11.01 121.98 <0.01
分析可知 , 以粗多糖得率为评价指标 , 各因素对提取效果的
影响程度依次为 A>C>B>D, A因素和 C因素影响差异有显著
性 , 直观分析表明粗多糖得率最高的工艺为 A
3
B
3
C
3
D
2
, 即煎煮 3
次 , 温度 90℃,加水 12倍量 , 煎煮时间 1 h;以总糖含量为评价指
标 , 各因素对提取效果的影响程度依次为 A>D>C>B, A因素
和 D因素影响差异有显著性 , 直观分析表明总糖含量最高的工
艺为 A2B1C3D2 ,即煎煮 2次 , 温度 70℃, 加水 12倍量 ,煎煮时间 1
h;综合上述考查指标 , 以总糖含量为主要指标并结合提取周期 、
节能降耗等全面考察 , 故我们采用 A2B1C3D2工艺 , 并进行验证
实验 , 粗多糖得率为 7.93%(n=2), 总糖含量 20.05%(n=2),
表明 A2B1C3D2工艺是可行的。
3　讨论
水提醇沉是多糖提取中较常用的工艺 ,本实验优化了水提取
工艺 , 经过优化的工艺经济 , 简单 、稳定 、可行 , 使多糖的含量升
高 , 该研究结果为翻白草多糖的工业化提取 , 以及进一步的精制
提供了依据。
取按优化工艺制得的翻白草多糖 , 总糖含量为 19.97%, 进
行对四氧嘧啶糖尿病大鼠血糖的影响的预实验 [ 5] , 结果表明 , 翻
白草多糖 100 mg/kg有明显降血糖作用(P<0.01),结果提示翻
白草多糖提取工艺可行 ,翻白草多糖具有良好的降糖活性 , 且毒
副作用小 ,有一定的开发价值。
参考文献:
[ 1 ] 　孟令云 ,朱黎霞 ,郑海洪 ,等.翻白草对高血糖动物模型的作用研究
[ J] .中国药理学通报 , 2004, 20(5):588.
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用 [ J] .江西中医学院学报 , 2005 , 17(2):53.
[ 3 ] 　张惟杰.复合多糖生化研究技术 [ M] .上海:上海科技出版社 ,
1987:6.
[ 4 ] 　邓　勃.分析测试数据的统计处理方法 [ M].北京:清华大学出版
社 , 1995:203.
[ 5 ] 　BrodafNB.DiabetesMellitusandVbesity.Baltimone[ M] .London:
WiliamsandWilkings, 1982:273.
收稿日期:2006-02-28;　修订日期:2006-08-26
作者简介:王小莉 (1974-),女(汉族),江苏南京人 ,现任江苏省中西医结
合医院药剂师 ,主要从事调节药剂工作.
冰醋酸涂剂稳定性实验及剂型改革
王小莉 , 谢景峰
(江苏省中西医结合医院 ,江苏 南京　210028)
摘要:目的 研究冰醋酸涂剂的稳定性及贮存期 , 并探索进行剂型改革 。方法 通过各贮存温度下含量的测定 , 研究原剂
型的贮存期;并用经验加速实验法 、经典加速实验法 ,研究新剂型的稳定性和贮存期。结果 原剂型在冷藏条件下有效期
只有 20 d。将冰醋酸与 75%乙醇分两 A、B两部分包装 , 可极大地延长其贮存期。新剂型在温度 40℃、相对湿度 75%条
件下放置 3个月 , 含量为 98.37%,经典加速实验测得 25℃时的贮存期为 6年。结论 原剂型不适合批量生产;新剂型有
效期暂定为 2年。
关键词:冰醋酸涂剂;　稳定性;　医院制剂
中图分类号:R283.6　　文献标识码:B　　文章编号:1008-0805(2006)12-2526-01
　　冰醋酸涂剂为《中国医院制剂规范》收载的品种 [ 1] , 主要用
于指甲霉菌病。但高浓度的醋酸与乙醇易发生酯化反应 ,使醋酸
含量下降而影响疗效。为此 , 我们重新考察冰醋酸涂剂的稳定性
(含量)和贮存条件 , 并对其剂型进行重新设计与改造。
1　仪器与条件
1.1　仪器 酸碱滴定管 , 气相色谱仪(AgilentGC6890), 生化霉
菌培养恒温箱(LMX-90A, 镇江医疗器械厂), 恒温水浴箱
(DK— S26,上海精宏仪器设备厂)。
1.2　药品 冰醋酸涂剂(自制 , 20 ml/瓶), 其它试剂均为分析纯。
1.3　气相色谱条件 柱:30m×250μm×0.25μmnominal, 柱温:
50℃, 进口温度:200℃, 检测温度:180℃, 流动相:N2。
1.4　测定条件 含量测定按该制剂含量测定项下之规定测定。
2　方法与结果
根据国家新药审批办法中对稳定性实验的具体要求 ,并根据
该药的特殊性 , 采用不同温度的恒温法实验 , 以确定该制剂的贮
存温度和贮存期。
取供试品 18份 , 置所设定温度的恒温箱(或冷藏箱)内 ,每隔
一定时间取 3份样品 ,测定其含量 ,与 0 d数据比较 ,结果见表 1。
表 1　不同温度下冰醋酸涂剂稳定性实验数据 %
时间 t/d 不同温度的相对含量
20℃　　　　　　　10℃　　　　　　　2℃
0 100 100 100
5 93.06 96.98
10 88.34 94.57 96.61
15 84.87 92.40
20 81.90 90.45 94.21
25 79.42 88.60
30 91.53
35 90.40
40 89.27
经气相色谱分析 ,样品中的成分主要为水 、乙醇 、乙酸和醋酸
乙脂。
　 20℃为原质量标准所规定的贮存温度(阴凉处), 10℃与 2℃
为药品冷藏所常用的温度。表 1数据表明 , 冰醋酸涂剂在 20℃
时极不稳定。在 10℃、 2℃条件下贮存期亦分别只有 20 d和
35 d。
3　剂型改革的设想
冰醋酸与乙醇(75%)分 A(冰醋酸 6g,容器容积为 20 ml)、
B(75%乙醇≥15 ml)两部分包装。使用时 , 将 B液加入 A容器
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时珍国医国药 2006年第 17卷第 12期 LISHIZHENMEDICINEANDMATERIAMEDICARESEARCH 2006VOL.17NO.12