全 文 ：Ｊ．ＳＨＡＮＸＩ　ＡＧＲＩＣ．ＵＮＩＶ．（Ｎａｔｕｒａｌ　Ｓｃｉｅｎｃｅ　Ｅｄｉｔｉｏｎ）
学报（自然科学版）２０１２，３２（４） ００２９２１
收稿日期：２０１２－０５－３０　　　修回日期：２０１２－０６－１８
作者简介：高莹（１９８９－），女（汉），山西运城人，在读硕士，研究方向：真菌病害及生物防治。
通讯作者：郝晓娟，副教授，硕士生导师。Ｔｅｌ：０３５４－６２８６８０６；Ｅ－ｍａｉｌ：ｘｉａｏｊｕａｎｈａｏ＠１２６．ｃｏｍ
基金项目：国家自然科学基金青年基金（３１０００８７３）；山西省青年基金（２０１００２１０３１－１）；山西农业大学博士后基金
欧李酸腐病病原菌鉴定及其生物学特性研究
高莹，魏少刚，谈静惠，郝晓娟，李新凤，王建明
（山西农业大学 农学院，山西 太谷０３０８０１）
摘　要：对欧李上一种新病害欧李酸腐病进行了病原菌鉴定并对病原菌生物学特性进行了研究。欧李酸腐病发生在
欧李果实成熟期，果实腐烂变酸，病部产生白色霉层。病原菌在ＰＤＡ培养基上呈白色粉状，分生孢子长筒形、末端钝
圆，大小为４．５～１０μｍ×３．３～７．５μｍ，根据病原菌的形态特征将其鉴定为白地霉（Ｇｅｏｔｒｉｃｈｕｍ　ｃａｎｄｉｄｕｍ）。生物学
特性研究结果表明该菌生长的适宜温度范围为２０～３０℃，最适温度为２５℃，最适ｐＨ为６～７，１２ｈ光暗交替条件下生
长最快，适宜生长的最佳碳源为葡萄糖和果糖，最佳氮源为牛肉浸膏。
关键词：欧李；酸腐病；白地霉；生物学特性
中图分类号：Ｓ４３６．６　　文献标识码：Ａ　　文章编号：１６７１－８１５１（２０１２）０４－０３２８－０５
Ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ　ａｎｄ　Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ　Ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓ　ｏｆ　ｔｈｅ　Ｐａｔｈｏｇｅｎ　Ｃａｕｓｉｎｇ　Ｓｏｕｒ　ｒｏｔ　ｏｆ　Ｇｅｒａｓｕｓ　Ｈｕｍｉｌｉｓ
Ｇａｏ　Ｙｉｎｇ，Ｗｅｉ　Ｓｈａｏｇａｎｇ，Ｔａｎ　Ｊｉｎｇｈｕｉ，Ｈａｏ　Ｘｉａｏｊｕａｎ，Ｌｉ　Ｘｉｎｆｅｎｇ，Ｗａｎｇ　Ｊｉａｎｍｉｎｇ
（Ｃｏｌｌｅｇｅ　ｏｆ　Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒｅ，Ｓｈａｎｘｉ　Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｔａｉｇｕ　Ｓｈａｎｘｉ　０３０８０１，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｓｏｕｒ　ｒｏｔ　ｉｓ　ａ　ｎｅｗ　ｄｉｓｅａｓｅ　ｏｆ　Ｇｅｒａｓｕｓ　Ｈｕｍｉｌｉｓ　ａｎｄ　ｔｈｅ　ｃａｓｕａｌ　ａｇｅｎｔ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｄｉｓｅａｓｅ　ｗａｓ　ｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄ．Ｉｎ　ｔｈｅ　ｐａｐｅｒ，
ｔｈｅ　ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ　ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｐａｔｈｏｇｅｎ　ｗｅｒｅ　ｓｔｕｄｉｅｄ．Ｔｈｅ　ｄｅｃａｙ　ｗａｓ　ｍｏｒｅ　ｐｒｅｖａｌｅｎｔ　ａｓ　ｆｒｕｉｔ　ｉｎｃｒｅａｓｅｓ　ｉｎ　ｍａｔｕｒｉｔｙ．
Ｗｈｉｔｅ　ｍｏｕｌｄ　ａｐｐｅａｒｅｄ　ｏｎ　ｉｎｆｅｃｔｅｄ　ｆｒｕｉｔｓ．Ｔｈｅ　ｆｒｕｉｔｓ　ｗｅｒｅ　ｒｏｔｔｅｎ　ａｎｄ　ｈａｄ　ｓｏｕｒｎｅｓｓ．Ｔｈｅ　ｍｙｃｅｌｉｕｍ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｐａｔｈｏｇｅｎ　ｗａｓ
ｗｈｉｔｅ　ａｎｄ　ｐｏｗｄｅｒｙ　ｏｎ　ＰＤＡ　ｍｅｄｉｕｍ．Ｔｈｅ　ｓｈａｐｅ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｃｏｎｄｉｕｍ　ｗａｓ　ｌｏｎｇ　ｃｙｌｉｎｄｒｉｃａｌ　ａｎｄ　ｔｉｐ　ｄｕｌｅｄ．Ｔｈｅ　ｓｉｚｅ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｃｏｎ－
ｄｉｕｍ　ｗｅｒｅ　４．５～１０μｍ×３．３～７．５μｍ．Ｔｈｅ　ｓｔｒａｉｎ　ｗａｓ　ｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄ　ａｓ　Ｇｅｏｔｒｉｃｈｕｍ　ｃａｎｄｉｄｕｍｂａｓｅｄ　ｏｎ　ｔｈｅ　ｍｏｒｐｈｏｌｏｇｉｃａｌ
ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓ．Ｔｈｅ　ｒｅｓｅａｒｃｈ　ｏｆ　ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ　ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓ　ｓｈｏｗｅｄ　ｔｈａｔ　ｔｈｅ　ｓｕｉｔａｂｌｅ　ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ　ｆｏｒ　ｍｙｃｅｌｉａｌ　ｇｒｏｗｔｈ　ｗａｓ
２０～３０℃，ｔｈｅ　ｏｐｔｉｍｕｍ　ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ　ｗａｓ　２５℃．Ｔｈｅ　ｓｕｉｔａｂｌｅ　ｐＨ　ｖａｌｕｅ　ｆｏｒ　ｍｙｃｅｌｉａ　ｇｒｏｗｔｈ　ｗａｓ　６～９．Ｔｈｅ　ｓｐｅｅｄ　ｏｆ
ｇｒｏｗｔｈ　ｗａｓ　ｆａｓｔｅｒ　ｕｎｄｅｒ　ｔｈｅ　ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ　ｏｆ　ａｌｔｅｒｎａｔｉｎｇ　ｌｉｇｈｔ　ａｎｄ　ｄａｒｋ．Ｆｏｒ　ｍｙｃｅｌｉａｌ　ｇｒｏｗｔｈ，ｔｈｅ　ｍｏｓｔ　ｓｕｉｔａｂｌｅ　ｃａｒｂｏｎ
ｓｏｕｒｃｅ　ｗａｓ　ｇｌｕｃｏｓｅ　ａｎｄ　ｆｒｕｃｔｏｓｅ，ａｎｄ　ｔｈｅ　ｍｏｓｔ　ｓｕｉｔａｂｌｅ　ｎｉｔｒｏｇｅｎ　ｓｏｕｒｃｅ　ｗａｓ　ｂｅｅｆ　ｅｘｔｒａｃｔ．
Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ：Ｇｅｒａｓｕｓ　Ｈｕｍｉｌｉｓ；ｓｏｕｒ　ｒｏｔ；Ｇｅｏｔｒｉｃｈｕｍ　ｃａｎｄｉｄｕｍ；ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ　ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓ
　　欧李（Ｇｅｒａｓｕｓ　Ｈｕｍｉｌｉｓ）是蔷薇科樱桃属多年
生落叶小灌木，因１００ｇ果肉中含钙达６０～７０
ｍｇ，高于其它水果，得名“钙果”［１］。其抗旱性极
强，耐盐碱，耐贫瘠，适应性强，从２０世纪８０年代
开始步入人工栽培的行列［２］。随着国家对生态环
境建设工作的加强和对欧李研究与开发利用的不
断深化，欧李将在水土保持生态环境建设中发挥重
要作用［３］。随着栽培技术的日益成熟，欧李开始在
我国大面积种植，病害发生也日益严重。到目前为
止，对欧李病害的报道甚少［４，５］，对欧李酸腐病的
病原菌鉴定、病害流行规律及防治措施等均未见报
道，给该病的防治造成了一定困难。本文对欧李酸
腐病的病原菌进行了鉴定和生物学特性研究，以期
为该病的防治提供依据。
１　材料与方法
１．１　病害症状观察与病原菌分离
　　于２０１１年８月在山西省晋城市高平、泽州等
地的欧李种植基地采集病果，按常规方法进行菌株
分离，单孢纯化后试管保存备用。
１．２　致病性测定
取健康欧李果实，接种前用７５％无水乙醇对
DOI:10.13842/j.cnki.issn1671-8151.2012.04.012
果实进行表面消毒。将分离获得的菌株在ＰＤＡ
上培养７ｄ后，制成浓度为１×１０６ 个·ｍＬ－１的孢
子悬浮液，分别采用针刺和无伤两种处理方式［６］，
喷雾接种，每处理设５个重复，以无菌水为对照。
接种处理完后置于２５℃下保湿培养。对接种发病
的欧李进行病原菌再分离［７］。
１．３　病原菌的鉴定
将科赫氏法则验证后的菌株接种在ＰＤＡ平
板上，于２５℃下恒温培养。测定菌落生长速度，７
ｄ后观察菌落培养性状，观察菌丝、分生孢子、分生
孢子梗［８］，结合病害症状，参照《真菌鉴定手册》［９］
对病原菌进行鉴定。
１．４　病原菌的生物学特性测定
１．４．１　不同温度对菌丝生长的影响
将直径６ｍｍ的菌饼接种至ＰＤＡ平板后分别
置于１５℃、２０℃、２５℃、３０℃、３５℃下培养，８ｄ
后用十字交叉法测量菌落直径。每处理重复３次。
１．４．２　不同ｐＨ值对菌丝生长的影响
用无菌的１ｍｏｌ·Ｌ－１的 ＮａＯＨ 和 ＨＣｌ将
ＰＤＡ培养基ｐＨ 值分别调至３．０、４．０、５．０、６．０、
７．０、８．０、９．０、１０．０、１１．０共９个梯度［１０］，把直径６
ｍｍ菌饼分别接种到上述不同梯度ｐＨ 值的ＰＤＡ
平板上，于２５℃下恒温培养。其它同１．４．１。
１．４．３　不同光照条件对菌丝生长的影响
设置连续光照、连续黑暗、１２ｈ光照黑暗交替
３种不同光照条件［１１］，光源距培养基２５ｃｍ，２５℃
下恒温培养。其它同１．４．１。
１．４．４　不同碳、氮源对菌丝生长的影响
以Ｃｚａｐｅｋ培养基为基础培养基，分别加入含
碳量相同的葡萄糖、Ｄ－果糖、可溶性淀粉、Ｄ－半乳
糖、乳糖替换蔗糖，以不加碳源为对照；同样以
Ｃｚａｐｅｋ培养基为基础培养基，分别加入含碳量相
同的硫酸铵、尿素、甘氨酸、Ｌ－天冬酰胺、牛肉浸膏、
Ｌ－胱氨酸替换硝酸钠，以不加氮源为对照［１２，１３］。
接种直径６ｍｍ菌饼，２５℃下恒温培养。其他同
１．４．１。
２　结果与分析
２．１　病害症状观察
　　该病害主要发生于欧李果实生理成熟期。果
实被侵染后，表面出现白色或褐色的水渍状斑点，
随着病斑的扩展，病部产生致密白色霉层（图１）。
后期果实腐烂变酸，大量汁液自伤口流出，进一步
引起果实整体腐烂，病果带有酸臭味。
图１　欧李酸腐病的症状
Ｆｉｇ．１　Ｓｙｍｐｔｏｍ　ｏｆ　ｓｏｕｒ　ｒｏｔ　ｏｎ　Ｇｅｒａｓｕｓ　Ｈｕｍｉｌｉｓ
２．２　致病性测定
离体接种结果表明，３ｄ后针刺接种的欧李果实
出现病斑，比无伤处理的早２～３ｄ。发病初期出现
水渍状斑点，并产生白色霉层，随后病斑逐渐扩展，
最终造成整个果实腐烂并散发出酸臭气味（图２）。
其症状与田间自然发病情况一致。对接种发病后的
病果进行再分离，得到与接种菌相同的菌株。
图２　接种５ｄ后欧李果实的发病症状
Ｆｉｇ．２　Ｓｙｍｐｔｏｍ　ｏｆ　Ｇｅｒａｓｕｓ　Ｈｕｍｉｌｉｓ　ｏｎ　ｆｒｕｉｔ　ｉｎ　５ｄａｙｓ
ａｆｔｅｒ　ｉｎｏｃｕｌａｔｉｏｎ
２．３　病原菌的鉴定
病原菌在ＰＤＡ上于２５℃下培养约８ｄ时铺
满平板，菌丝短绒状，菌落白色，边缘整齐，表面粉
状 （图３Ａ）。在显微镜下可观察到有横隔的菌丝，
有的为二叉分枝。病原菌产孢量丰富，菌丝成熟后
９２３３２（４） 高莹等：欧李酸腐病病原菌鉴定及其生物学特性研究
断裂为长筒形、末端钝圆的单个或成链状排列分生
孢子（图３Ｂ），孢子大小为４．５～１０μｍ×３．３～７．５
μｍ。根据《真菌鉴定手册》将该病原菌鉴定为白地
霉（Ｇｅｏｔｒｉｃｈｕｍ　ｃａｎｄｉｄｕｍ）［１４］。
图３　病原菌的形态特征
Ｆｉｇ．３　Ｍｏｒｐｈｏｌｏｇｙ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｐａｔｈｏｇｅｎ（Ａ：Ｃｏｌｏｎｙ　ｍｏｒｐｈｏｌｏｇｙ；Ｂ：Ｃｏｎｉｄｉａ　４０×）
２．４　病原菌的生物学特性测定结果
２．４．１　温度对菌丝生长的影响
该病原菌在１５～３５℃温度范围内均可生长，
适宜生长温度范围为２０～３０℃，２５℃是其最适生
长温度，菌丝生长最好（图４）。
图４　不同温度对菌丝生长的影响
Ｆｉｇ．４　Ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ　ｏｎ　ｍｙｃｅｌｉａｌ　ｇｒｏｗｔｈ
２．４．２　光照对菌丝生长的影响
由图５可看出，光照对欧李酸腐病病原菌菌丝
生长有较大影响，１２ｈ光暗交替条件下菌丝生长最
快，８ｄ时可达８．４ｃｍ，显著差异于其余两个处理，１２
ｈ光暗交替为该病原菌菌丝最适生长光照条件。
２．４．３　ｐＨ对菌丝生长的影响
该病原菌在ｐＨ值３～１１间均可生长，ｐＨ 值
为６和７的时菌丝生长最快，８ｄ时菌落直径可达
８．０ｃｍ。ｐＨ为３时，菌丝生长速度明显减慢，８ｄ
时菌落直径为６．５ｃｍ；ｐＨ为１１时，菌丝生长速度
最慢，受到明显抑制，８ｄ时菌落直径仅为４．８ｃｍ
（图６）。
０３３ 山 西 农 业 大 学 学 报（自然科学版） ２０１２
图５　光照对菌丝生长的影响
Ｆｉｇ．５　Ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　ｉｌｕｍｉｍａｔｉｏｎ　ｏｎ　ｍｙｃｅｌｉａｌ　ｇｒｏｗｔｈ
图６　不同ｐＨ对菌丝生长的影响
Ｆｉｇ．６　Ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｐＨ　ｏｎ　ｍｙｃｅｌｉａｌ　ｇｒｏｗｔｈ
２．４．４　不同碳、氮源对菌丝生长的影响
在供试的６种碳源中，菌丝在以葡萄糖和果糖
为碳源的查氏培养基中生长最快，８ｄ时菌落直径
分别可达７．８ｃｍ和７．６ｃｍ，两者无显著差异。其
次为半乳糖，８ｄ时菌落直径可达７．１ｃｍ。在不加
碳源的培养基中菌丝生长最慢，８ｄ时仅４．９ｃｍ
（图７）。由图８可看出，在供试的７种氮源中，牛
肉浸膏和硝酸钠为氮源以及不加氮源的培养基菌
丝生长最好，８ｄ时菌落直径分别可达７．９ｃｍ、７．９
ｃｍ和８．１ｃｍ；其次为天门冬氨酸，８ｄ时菌落直径
为７．３ｃｍ，对硫酸铵、尿素、膀胱氨酸和甘氨酸的
利用较差。以硝酸钠为氮源的培养基和ＣＫ长出
的菌落稀疏，以牛肉浸膏为氮源长出的菌落茂密。
图７　不同碳源对菌丝生长的影响
Ｆｉｇ．７　Ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｃａｒｂｏｎ　ｓｏｕｒｃｅｓ　ｏｎ　ｍｙｃｅｌｉａｌ　ｇｒｏｗｔｈ
１３３３２（４） 高莹等：欧李酸腐病病原菌鉴定及其生物学特性研究
图８　不同氮源对菌丝生长的影响
Ｆｉｇ．８　Ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｎｉｔｒｏｇｅｎ　ｓｏｕｒｃｅｓ　ｏｎ　ｍｙｃｅｌｉａｌ　ｇｒｏｗｔｈ
３　结论与讨论
根据欧李酸腐病的症状、病原菌形态学特征以
及致病性测定的结果，将欧李酸腐病的病原菌鉴定
为白地霉（Ｇｅｏｔｒｉｃｈｕｍ　ｃａｎｄｉｄｕｍ）。欧李酸腐病在
国内属首次报道。该病原菌最适生长温度２５℃，
最适光照条件为１２ｈ光暗交替，最适ｐＨ为６～７，
其中温度和光照条件的研究结果与蔡学清等［１５］的
结果相似，但是与其最适ｐＨ为８～１０的研究结果
有所不同，可能与欧李果实偏酸有关。欧李酸腐病
菌的生长对温度、ｐＨ、光照和氮源的要求不严格，
在较大范围内都能生长，说明该病原菌有较好的环
境适应能力。该病原菌在不加任何氮源的和以硝
酸钠为氮源Ｃｚａｐｅｋ培养基上生长快却表面稀疏，
在以牛肉浸膏为氮源的培养基上长势最好，可能成
分复杂的有机氮源更加利于该病原菌的营养生长。
欧李果实中果糖含量最高，其次为蔗糖和葡萄糖。
最适宜该病原菌生长的碳源为果糖和葡萄糖，这与
果实成熟期果糖和葡萄糖含量达最大值一致［１６］。
酸腐病一般发生于果实的成熟期，由于各种原
因造成的果皮损伤更容易使病原菌侵入，是果实贮
运时常见却难防治的病害［１７，１８］。欧李酸腐的发生
会使欧李果实腐烂，且易侵染，收获期可造成严重
损失。欧李通常在夏秋季收获成熟果实，且在华北
地区欧李果熟期较长［１９］，此时的温度较有利于欧
李酸腐病菌生长，给欧李酸腐病的防治带来了一定
的难度。对欧李酸腐病的病原菌鉴定及生物学特
性的研究尚属首次，本研究结果可为进一步研究和
防治欧李酸腐病提供相关理论依据。
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（编辑：马荣博）
２３３ 山 西 农 业 大 学 学 报（自然科学版） ２０１２