全 文 ：[ 收稿日期] 　2007-09-27
＊[ 通讯作者] 　罗惠善(1964—), 女(朝鲜族), 副教授 , 硕
士 ,研究方向为天然药物化学成分分析.
紫外分光光度法测定翻白草中总黄酮的含量
金泉 ,廉丽花 ,罗惠善＊
(延边大学药学院 , 吉林 延吉 133000)
[ 摘要] 　[ 目的] 探讨翻百草中总黄酮含量的测定方法.[方法] 以硝酸铝 、亚硝酸钠及氢氧化钠为显色
剂 ,利用紫外分光光度计测定翻白草中总黄酮的含量.[结果] 最佳检测波长为 510 nm , 芦丁质量浓度在
20～ 50 mg/ L范围内时 , 吸收度与质量浓度呈良好的线性关系 , 回归方程为 y=7.745 7 x +0.000 9
(r=0.999 6),平均回收率为 99.52%, RSD为 1.23%.[ 结论] 采用紫外分光光度法测定翻白草中总黄
酮的含量简便易行 ,结果稳定可靠.
[ 关键词] 　黄酮类;分光光度法 , 紫外线;植物 , 药用
[ 中图分类号] 　R284.2　　　[ 文献标识码] 　A　　　[文章编号] 　1000-1824(2007)04-0262-02
Determination of total flavanone content in Potentilla discolor bunge by
ultraviolet spectrophotometry
JIN Quan , LIAN Li-hua , LUO Hui-shan＊
(Yanbian University College of Pharmacy , Yanji 133000 , J ilin , China)
ABSTRACT:OBJECTIVE To study assay method of total f lavanone content in Potenti lla discolor bunge.
METHODS With AlCl3-NaNO2-NaOH as chromogenic agent , to tal flavanone content of Potentil la discolor
bunge is determined by ult raviolet spect rophotometry.RESULTS The optimal detective w aveleng th w as 510
nm , and absorbability and mass concentration was satisfactory linear relationship at the mass concentration of
rutin w as in 20 ～ 50 mg/L.The reg ression equation w as y =7.745 7 x +0.000 9(r=0.999 6), and the average
recovery rate w as 99.52% and RSD was 1.23%.CONCLUSION Using ultraviolet spectrophotometry to detect
total f lavanone content in Potenti lla discolor bunge is simple , accurate , and sensitive.
Key words:flavones;spectropho tometry , alt ravionlet;plants , medicinal
　　翻白草(Potenti lla discolor bunge)为蔷薇科植
物的干燥全草 ,含鞣质 ,植株各部分均含黄酮类化合
物[ 1] ,具有降低血脂 、抗菌 、止泻和增强免疫功能的
作用[ 2] .本研究采用紫外分光光度法对翻白草中总
黄酮的含量进行了测定 ,旨在为翻白草药材及制剂
的质量控制提供科学依据.
1　材料
翻白草全草采集于吉林省龙井市铜佛寺镇 ,经
延边大学药学院生药学教研室吕惠子副教授鉴定为
正品翻白草;芦丁对照品购自中国药品生物制品检
定所.电子天平及 753 型紫外分光光度计均为上海
精密科学仪器有限公司产品;REE-52 C型水浴锅为
北京市医疗设备总厂产品;旋转薄膜蒸发器为上海
亚荣生化仪器厂产品;202型电热鼓风恒温干燥箱
为江苏恒丰仪器厂产品.试剂均为AR级.
2　方法与结果
2.1　对照品溶液的制备　精确称取在105 ℃条件
·262· Journal of Medical Science Yanbian Univ ersity　Dec.2007 Vol.30 No.4
下干燥至恒定质量的芦丁标准品 10.0 mg ,置于
100 mL容量瓶中 ,加入 700 mL/L 乙醇适量 ,微热溶
解 ,放冷后再加入 700 mL/L 乙醇稀释至刻度 , 摇
匀 ,得质量浓度为 0.10 g/L 的芦丁对照品溶液 ,低
温保存 ,备用.
2.2　供试品溶液的制备　精确称取翻白草100 g ,
用 700 mL/L 乙醇回流提取 ,回收溶剂得浸膏.将浸
膏用适量水溶解 ,乙醚脱脂 ,置于冰箱中冷却 ,有绿
色沉淀产生 ,将过滤得到的滤液浓缩 ,干燥得到棕黄
色粉末.准确称取已于 105 ℃条件下烘干至恒定质
量的黄酮样品 20.0 mg ,用 700 mL/L 乙醇定容至
100 mL .
2.3　测定波长的选择　精确量取对照品溶液和供
试品溶液各5 mL ,分别置于 25 mL 容量瓶中 ,加入
50 g/L 亚硝酸钠溶液 1.0 mL ,摇匀 ,放置 6 min ,加
入100 g/ L硝酸铝溶液 1.0 mL ,摇匀 ,放置 6min ,加
入40 g/L 氢氧化钠溶液 10.0 mL ,再加入水至刻
度 ,摇匀 ,放置 15 min ,在波长为 200 ～ 700 nm 范围
内扫描 ,结果 2种溶液均在 510 nm 处有最大吸收 ,
其他成分对测定无干扰.
2.4　标准曲线的绘制　分别精确吸取芦丁标准液
0 、1.0 、2.0 、3.0 、4.0 、5.0mL 置于 25 mL 容量瓶中 ,
加入 50 g/L 亚硝酸钠溶液 1.0 mL , 摇匀 , 放置
6min ,加入 100 g/L 硝酸铝溶液 1.0 mL ,摇匀 ,放置
6min ,加入 40 g/L 氢氧化钠溶液 10.0 mL ,加入
700 mL/L乙醇至刻度 ,摇匀 ,放置 15 min ,进样 ,于
波长为510 nm 处测定吸收值(用不含芦丁的空白管
对照调零).得回归方程:y =7.745 7 x +0.000 9
(r=0.999 6), 结果表明 , 测定芦丁质量浓度在
20 ～ 50 mg/ L范围内呈良好的线性关系.
2.5　精确度实验　取对照品溶液于510 nm波长处
测定吸收值 5 次.结果示平均吸收值为 0.252 , RSD
为 0.54%(n=6),表明该方法精确度良好.
2.6　稳定性试验　取供试品溶液 ,于 0 、10 、30 、60 、
90 、120min时测定吸收值.结果表明 ,总黄酮与铝离
子形成的红色络合物在 1 h内稳定 , RSD为 1.21%
(n=6).
2.7　重现性试验 　精确称取药材样品 1.0 g ,
共 5份 ,平行试验 ,于 510 nm 波长处测定吸收值 ,结
果见 RSD为 3.03%.
2.8　加样回收率实验　精确称取于105 ℃条件下
干燥至恒定质量的芦丁对照品 100mg ,置于 100mL
容量瓶中 ,以 700 mL/L 乙醇溶解 ,稀释至刻度 ,摇
匀 ,得芦丁贮备液.取已知总黄酮含量的 5个批次的
样品各 0.5 g ,置于100mL 磨口锥形瓶中 ,加入上述
芦丁贮备液 10 mL ,加入 700 mL/L 乙醇30 mL ,摇
匀 ,测定510 nm波长处吸收值 ,按回归方程进行计
算处理 ,结果见平均加样回收率为 99.52%, RSD为
1.23%(表 1).
表 1　加样回收率实验结果
取样
(g)
样品含量
(mg)
加入量
(mg)
测得量
(mg)
回收率
(%)
平均回收率
(%)
RSD
(%)
0.502 3 3.23 10.00 13.30 100.70
0.501 1 3.22 10.00 13.09 98.70
0.502 0 3.23 10.00 13.32 100.90 99.52 1.23
0.501 3 3.23 10.00 13.15 99.20
0.502 5 3.24 10.00 13.05 98.10
2.9　样品的测定　精确称取研碎的样品0.5 g ,置
于 100mL 磨口锥形瓶中 ,按照 2.2项下方法制备样
品供试液 ,同法平行制备 3份.精确吸取供试品溶液
5 mL , 按照 2.4 项下方法进行操作 , 在波长为
510 nm处测定供试液的吸收值 ,按回归方程进行计
算处理 ,见平均含量为 3.23 mg , RSD为 1.86%.
3　讨论
以芦丁为对照品 ,以硝酸铝 、亚硝酸钠及氢氧化
钠为显色剂 ,利用紫外分光光度计对翻白草中总黄
酮的含量进行测定的方法具有简便易行及结果稳定
可靠等优点 ,同时还可对单个黄酮成分进行分析
测定.
[参　考　文　献]
[ 1] 　钟海军.翻白草的化学成分[ J] .中草药 , 2000 , 31(70):
488.[ 2] 　邹俊利.翻白草的研究进展[ J] .黑龙江医药科学 ,
2006 , 29(4):104.
·263·延边大学医学学报　2007 年 12月　第 30 卷 第 4 期