全 文 :[7]Hansen O B. Rapid production of apple rootstocks by softwood
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术研究 . 贵州林业科技,2012,40 (2):42 - 45.
本文于 2014 - 10 - 29 收到,2014 - 12 - 24 收到修改稿。
* 2013 年内蒙古自治区科技重大专项。
贾海燕电话: (0477)6889698
京欧 1 号、京欧 2 号欧李快繁技术*
贾海燕1,孔德柱1,张吉树2,李相儒2,苏建英2
(1 内蒙古库布其沙漠技术研究院,鄂尔多斯 017418) (2 亿利资源集团沙漠研究院)
摘 要 试验以欧李新品种京欧 1 号、京欧 2 号春季萌发枝且带有腋芽的茎段作为外植体,研究
其扩繁技术。结果表明:京欧 1 号、京欧 2 号诱导最适培养基为 MS + 0. 5 mg /L 6 - BA + 0. 2 mg /L
NAA;最适继代扩繁培养基京欧 1 号为 MS + 0. 5 mg /L 6 - BA + 0. 1 mg /L NAA,京欧 2 号为 MS + 0. 1
mg /L 6 - BA + 0. 1 mg /L NAA;较适宜生根培养基京欧 1 号为 1 /2MS + 0. 2 mg /L NAA + 0. 5 mg /L IAA,
生根率为 53. 7%,京欧 2 号为 1 /2MS + 0. 1 mg /L NAA + 1. 0 mg /L IAA,生根率为 53. 3%;经过炼苗,
2 个品种移栽成活率均在 70%以上。
关键词 欧李 京欧 1 号 京欧 2 号 组织培养 生根 移栽
欧李 [Cerasus humilis (Bge. ) Sok.] 是蔷薇科
樱桃属多年生落叶小灌木,是我国特有的野生果树,
其果 实 矿 质 元 素 铁 和 钙 的 含 量 高,俗 称 “钙
果”[1 - 2]。欧李通常采用种子和扦插等方法进行苗木
繁育,但种子繁殖发芽较难,而扦插繁殖生根较难,
因此常规育苗繁殖系数较低。通过茎尖培养的方法,
可进行规模化生产且变异率低[3]。欧李组织培养研
究起步较晚,焦淑华等[4]以欧李 3 号和欧李 4 号为
试材,初步建立了茎尖组织培养的快繁体系;庄丽
娟等[5]以优质大欧李,任清盛[6]以中华钙果为试材
进行了组培研究。本试验选取的试材是北京中医药
大学选育出的欧李早熟新品种京欧 1 号[7]和中熟新
品种京欧 2 号[8],其早果性、丰产性极强,李卫东
等[9]研究表明,这 2 个品种果实可滴定酸、花青素、
酚类物质和黄酮类物质含量高,是优良的欧李新品
种。本试验初步建立欧李新品种京欧 1 号、京欧 2 号
的组培快繁体系,旨在为促进这 2 个欧李新品种大
面积推广提供技术保障。
1 材料与方法
1. 1 供试材料及处理
试验材料京欧 1 号和京欧 2 号欧李采自亿利资源
集团沙旱生态科技园智能温室裸地栽培区,选取其春
季萌发枝并且带有腋芽的茎段作为外植体,进行无菌
系的建立。将枝条上叶片减掉后 (留下叶柄)剪成几
段,在洗洁精溶液中超声 10 min左右,用蒸馏水清洗
4 ~ 5 遍,在 75%酒精里浸泡 30 s 并超声,之后迅速
移入 0. 1%氯化汞溶液中浸泡 9 min并超声。消毒完毕
后用无菌水冲洗 5 ~ 6 遍,用灭菌滤纸吸干水分。将
消毒后的枝条按照 1 节切 1 段的原则切段,每节有 1
~ 2 个芽,接种到培养基中。
1. 2 试验方法
(1)外植体诱导培养 以 MS 为基本培养基,附
加不同浓度 6 - BA、NAA (表 1)。每个配方接种 30
瓶,每瓶接种 1 段外植体,重复 3 次,生长 28 天后统
计萌芽率。
萌芽率 (%) = (萌芽外植体数 /接种外植体数)
× 100
(2)芽增殖 将成功诱导的芽剪成 1 ~ 2 cm的茎
段,接种在添加生长调节剂的 MS 基本培养基上,设
6 - BA 4 个浓度、NAA 3 个浓度,共 12 个增殖培养基
配方 (表 2)。每个配方接种 20 瓶,每瓶接种 5 株组
培苗,重复 3 次,28 天后统计增殖系数,筛选最优增
殖培养基。
增殖系数 =外植体再生芽总数 /接种外植体数
(3)不定根的诱导 将长势均匀的增殖芽剪成 1
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中国果树 China Fruits 2015 (3) 2015 年 5 月
DOI:10.16626/j.cnki.issn1000-8047.2015.03.016
~ 2 cm的茎段,首先以 MS 为基本培养基,从 NAA、
IBA、IAA 3 种生长素中筛选适宜生根的生长素种类
(表 3);以 0. 1 mg /L NAA + 1. 0 mg /L IAA 2 种生长调
节剂浓度配比为基础,筛选适宜生根的基本培养基类
型 (表 4);以 1 /2MS 为基本培养基,筛选适宜生根
的生长调节剂浓度配比 (表 5)。每个配方接种 20 瓶,
每瓶接种 5 株组培苗,重复 3 次,28 天后统计生根率
和平均生根数。
生根率 (%) = (生根组培苗数 /接种组培苗数)
× 100
培养条件:以上培养基均添加蔗糖 30 g /L、琼脂
7 g /L,pH值 6. 0 ~ 6. 5,培养温度 (25 ± 2)℃,培养
室光照强度 2 000 lx,每天光照 13 ~ 15 h。
(4)组培苗移栽 待组培苗根长 1 ~ 2 cm、苗高 2
~ 3 cm即可移栽。移栽前做炼苗与未炼苗处理。在智
能温室中闭瓶遮阴炼苗 7 天后,继续开瓶炼苗 3 天,5
月底将炼苗和未经过炼苗的生根苗同时移栽至裸地栽
培区 (移栽基质为蛭石 ∶ 珍珠岩 = 1∶ 1),移栽后覆
膜,1 ~ 2 周缓苗后逐渐撤膜。2 个处理各分为 3 组,
每组 60 株。
2 结果与分析
2. 1 芽诱导情况
当外植体接入培养基 7 天后,叶腋处开始萌发生
长,21 天展叶抽梢,并且在新梢上出现新的侧生枝。
由表 1 可知,京欧 1 号和京欧 2 号在 MS + 0. 5 mg /L
6 - BA + 0. 2 mg /L NAA培养基上芽诱导效果较好。
表 1 不同培养基配方芽诱导情况
培养基
序号
生长调节剂 (mg /L) 萌芽率 (%)
6 - BA NAA 京欧 1 号 京欧 2 号
1 0. 5 0. 2 53. 3 46. 7
2 1. 0 0. 1 33. 3 36. 7
3 2. 0 13. 3 10. 0
2. 2 芽增殖情况
按设计的增殖培养基配方培养 14 天后观察 2 个欧
李品种苗增殖培养情况。由表 2 可知,京欧 1 号在 4
号培养基中增值系数最高,但呈现了芽成簇增殖的现
象,且苗生长质量较差,在 3 号培养基 MS + 0. 5 mg /L
6 - BA + 0. 1 mg /L NAA 苗生长健壮,且增殖系数高;
京欧 2 号在 1 号培养基 MS + 0. 1 mg /L 6 - BA + 0. 1
mg /L NAA苗生长良好,抽条快,且枝叶嫩绿色。
表 2 芽增殖配方的筛选
培养基
序号
生长调节剂 (mg /L) 增殖系数
6 - BA NAA 京欧 1 号 京欧 2 号
1 0. 1 0. 1 4. 07 4. 73
2 0. 3 0. 1 4. 43 4. 20
3 0. 5 0. 1 5. 23 4. 67
4 0. 7 0. 1 5. 53 4. 67
5 0. 1 0. 2 3. 37 2. 77
6 0. 3 0. 2 3. 03 3. 37
7 0. 5 0. 2 3. 03 3. 00
8 0. 7 0. 2 3. 50 3. 37
9 0. 1 0. 3 3. 13 3. 07
10 0. 3 0. 3 2. 73 2. 57
11 0. 5 0. 3 2. 93 3. 33
12 0. 7 0. 3 2. 73 2. 43
2. 3 不定根诱导情况
2. 3. 1 生长调节物质的确定
对培养 14 天的组培苗生长状况进行观察。不
同种类生长调节剂及浓度配比对欧李生根的促进作
用不相同 (表 3)。仅 1 种生长调节剂的培养基配
方都表现出了不同程度的生根,但生根率较低,愈
伤组织块大,组培苗生长状况较差,枝条不抽长;
添加了 NAA 和 IAA 的 4 号培养基配方生根率较高,
愈伤组织块较小,组培苗生长良好,根较粗壮;5、
6 号培养基组培苗虽然生根率较高,但愈伤组织较
多,多从其上生根,而不是从组培苗基部生根。根
据试验结果,选取 NAA 和 IAA 为欧李生根培养过
程中的生长调节剂。
2. 3. 2 适宜生根的基本培养基
由表 4 可知,以MS和 1 /2MS为生根基本培养基,
欧李组培苗愈伤组织较少,且较疏松,1 /3MS 和
1 /4MS愈伤组织块较多,块大且致密;以 1 /2MS 为生
根基本培养基时,京欧 1 号、京欧 2 号组培苗生根率
明显高于其他 3 个处理,组培苗生长良好,根较粗
壮。因此,1 /2MS为欧李生根的基本培养基。
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中国果树 China Fruits 2015 (3) 2015 年 5 月
表 3 适宜生根生长调节物质的筛选
培养基
序号
生长调节剂 (mg /L) 愈伤组织 生根率 (%)
NAA IAA IBA 京欧 1 号 京欧 2 号 京欧 1 号 京欧 2 号
1 0. 1 多、致密 多、致密 36. 3 27. 7
2 1. 0 多、致密 多、致密 30. 3 27. 3
3 1. 0 多、致密 多、致密 24. 0 22. 7
4 0. 1 1. 0 较少、疏松 较少、疏松 45. 7 43. 7
5 0. 1 1. 0 较多 较多 40. 3 38. 3
6 1. 0 1. 0 较多 较多 38. 7 37. 7
表 4 适宜生根基本培养基的筛选
培养基
类型
愈伤组织 生根率 (%)
京欧 1 号 京欧 2 号 京欧 1 号 京欧 2 号
MS 较少 较少 45. 5 43. 5
1 /2MS 较少 较少 50. 5 52. 5
1 /3MS 较多 较多 35. 5 31. 5
1 /4MS 较多 较多 27. 5 27. 0
2. 3. 3 最适生长调节剂浓度配比
由表 5 可知,欧李组培苗生根率随 IAA 浓度增加
而增大,其中京欧 1 号、京欧 2 号生根率最高的均是
15 号培养基,但在 15 号培养基上这 2 种欧李生根苗
生长势弱,出现嫩梢不抽长、枯死等现象,并且组培
苗基部生长了大量的致密愈伤组织。从观察结果看,
在生根培养初期,京欧 1 号组培苗生根表现好的是 7
号培养基,京欧 2 号生根表现好的是 10 号培养基,生
根率高,且直接从组培苗基部生根,根粗壮,抽梢
快,平均生根数高,分别为 2. 15、2. 17 条。在生根培
养后期,7 号和 10 号配方组培苗虽有少量愈伤组织,
但根生长良好,京欧 1 号、京欧 2 号生根率分别为
53. 7%、53. 3%,组培苗健壮,生长势好。因此,筛
选最适生根培养基京欧 1 号为 1 /2MS + 0. 2 mg /L NAA
+ 0. 5 mg /L IAA,京欧 2 号为 1 /2MS + 0. 1 mg /L NAA
+ 1. 0 mg /L IAA。
表 5 适宜生根生长调节剂浓度配比的筛选
培养基
序号
生长调节剂 (mg /L) 愈伤组织 生根率 (%) 平均生根数 (条 /株)
NAA IAA 京欧 1 号 京欧 2 号 京欧 1 号 京欧 2 号 京欧 1 号 京欧 2 号
1 0. 05 0. 1 多、绿色 多、绿色 30. 3 28. 7 1. 32 1. 12
2 0. 1 0. 1 多、致密 多 28. 7 29. 3 1. 19 1. 20
3 0. 2 0. 1 多 多 31. 7 33. 0 1. 19 1. 15
4 0. 3 0. 1 较多 多、绿色 33. 7 34. 3 1. 22 1. 25
5 0. 05 0. 5 较多 较多 43. 7 42. 7 1. 79 1. 83
6 0. 1 0. 5 较少 较少 48. 3 44. 7 1. 66 1. 75
7 0. 2 0. 5 少、疏松 较少 53. 7 48. 7 2. 15 2. 05
8 0. 3 0. 5 较少 较少 50. 3 49. 3 2. 13 2. 01
9 0. 05 1. 0 较少 较少、疏松 47. 3 48. 3 2. 11 2. 07
10 0. 1 1. 0 较少、绿色 少、疏松 50. 3 53. 3 1. 99 2. 17
11 0. 2 1. 0 较少 较少 52. 7 53. 7 1. 90 1. 86
12 0. 3 1. 0 较多、致密 较多 53. 7 52. 7 1. 86 1. 88
13 0. 05 1. 5 多、较疏松 多、疏松 56. 7 54. 7 1. 76 1. 83
14 0. 1 1. 5 多 多 55. 0 55. 3 1. 82 1. 80
15 0. 2 1. 5 较多 多、黄绿色 57. 3 56. 0 1. 74 1. 75
16 0. 3 1. 5 多 较多 56. 3 54. 7 1. 76 1. 73
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中国果树 China Fruits 2015 (3) 2015 年 5 月
2. 4 移栽成活率
根据观察结果,京欧 1 号、京欧 2 号组培苗的
缓苗期为 7 ~ 10 天。京欧 1 号炼苗后成活率为
76. 7%,与未炼苗处理 (72. 8%)无显著差异,
京欧 2 号炼苗后成活率为 72. 2%,显著高于未炼苗
处理 (65. 0%)。总体来看,炼苗有利于提高 2 个
品种移栽成活率。
3 小 结
(1)欧李作为小灌木树种,在其组织培养过程
中,最困难的是无菌系的建立。文献报道多采用酒精
和升汞对外植体进行消毒,但本试验前期采用此方法
处理,发现污染率相对较高,且褐化现象较严重。随
后改进试验,清洗外植体,在酒精和升汞消毒处理过
程中加入超声,超声的空化作用使外植体的清洗和消
毒更加彻底,污染率大大降低。
(2)京欧 1 号和京欧 2 号是近年新选育的欧李优
良品种,这 2 个品种成熟的组培扩繁体系目前还未见
报道。本试验结果显示,2 个品种春季萌发枝最适的
芽诱导配方为 MS + 0. 5 mg /L 6 - BA + 0. 2 mg /L NAA;
京欧 1 号最适芽增殖配方为 MS + 0. 5 mg /L 6 - BA +
0. 1 mg /L NAA,京欧 2 号最适芽增殖配方为 MS + 0. 1
mg /L 6 - BA + 0. 1 mg /L NAA;京欧 1 号最适生根培养
基为 1 /2MS + 0. 2 mg /L NAA + 0. 5 mg /L IAA,京欧 2
号最适生根培养基为 1 /2MS + 0. 1 mg /L NAA + 1. 0
mg /L IAA;经过炼苗,2 个品种的移栽成活率均在
70%以上。
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本文于 2015 - 01 - 15 收到,2015 - 03 - 18 收到修改稿。
李钢建电话: (0393)8990955
7 个矮砧甜樱桃品种在豫北地区引种试验
李钢建
(河南省濮阳市市政园林局,457000)
摘 要 2005 年从山东省果树研究所引进 7 个吉塞拉 5 号矮砧甜樱桃品种在豫北地区试种。经
观察,矮砧甜樱桃品种红灯、早大果、萨米脱、甜心在豫北地区表现好,果实品质好,具有明显的矮
化作用和早果性,丰产高效,比鲁东、鲁中地区成熟期提前 7 ~ 10 天,可以提前上市取得较好的经济
效益,在豫北地区可推广栽培。
关键词 甜樱桃 矮砧 吉塞拉 5 号 引种 豫北
濮阳市地处河南省北部,位于华北黄河冲积平
原,适宜甜樱桃种植,由于历史上没有栽植甜樱桃
的习惯和经验,该地区甜樱桃栽植极少。为改变豫
北地区这一现状,2005 年 3 月,我们从山东省果树
研究所引进吉塞拉 5 号矮砧甜樱桃红灯、早大果、
甜心等 7 个品种。经多年栽培观察,吉塞拉 5 号矮砧
甜樱桃品种红灯、早大果、萨米脱、甜心在豫北地
区综合表现良好,适应性强,丰产稳产,果实品质
好,有较好的经济效益,带动周边农业企业、农户
14
中国果树 China Fruits 2015 (3) 2015 年 5 月