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PP_(333)对欧李微体快繁的影响



全 文 :第 34卷 第 1期 东 北 林 业 大 学 学 报 Vo .l 34 No. 1
2006年 1月 JOURNAL OF NORTHEAST FORESTRY UN IVERSITY Jan. 2006
PP333对欧李微体快繁的影响
钟士传
(临沂师范学院 ,临沂 , 276003)
  摘 要 研究了不同质量浓度的 PP333对欧李试管苗生长及生根的影响。试结果表明:PP333可抑制欧李试管苗的生长 , 使繁殖系数和嫩梢长度都受到影响。在继代培养时 , 培养基中加入 0. 1 m g L - 1PP333有利于形成壮苗。
当 PP333质量浓度超过 0. 5m g L -1 L时 , 在常温下能达到种质保存的目的。生根培养基中加入 0. 10 ~ 0. 05 mg
L - 1PP333能明显诱导生根。关键词 PP333;欧李;试管苗;生长;生根分类号 Q949. 751. 8
Effect of Pac lobutrazol on M icropropaga tion of Prunus hum ilis /Zhong Shichuan(L iny i Norm a l University, L iny i
276003, P. R. China) / /Journal o fNo rtheast Forestry University. - 2006, 34(1). - 40 ~ 41
A study was conducted to de term ine e ffec ts of pac lobutrazo l(PP
333
) w ith differen t concentrations on the grow th and
roo ting o f tissue cu ltured shoo ts o fPrunus hum ilis. Resu lts showed tha t PP333 cou ld restrain the g row th o f cultured shoo ts
and a ffect the breed ing coe fficien t a sw e ll as the leng th o f y oung shoots. D ifferen t concentrations o f PP333 added to the sub-
culturem edia had various e ffec ts. Young shoots w ere propitious to becom e stronger at 0. 1m g L- 1 of PP333 , ge rm p lasm
could be stored a t norm a l tem pe ra ture w ith PP333 above 0. 5m g L - 1 , and rooting media w ith the concentra tions of PP333
between 0. 01 and 0. 05m g L - 1 could induce rooting obv iously.
K ey words PP333;P runus hum ilis(Bge. );T issue cultured shoo ts
  PP333(Paclobutrazol, 多效唑)可由植物根 、茎 、叶吸收 , 然
后经木质部传导到幼嫩的分生组织部位 , 抑制赤霉素的合
成 [ 1] 。具体作用部位 , 首先是阻抑贝壳杉烯形成贝壳杉烯—
19—醇 , 二是阻抑贝壳杉烯— 19—醇形成贝壳杉烯— 19醛;
三是阻抑贝壳杉烯— 19—醛形成贝壳杉烯— 19—酸 , 作用机
理是抑制这三个部位酶促反应中酶的活性 [ 2] 。 PP333目前在
农业中得到广泛应用。 近年来 , PP333又开始在植物组织培养
中应用 , 并取得了一定的效果。 为此 , 笔者将 PP333应用在欧
李(P runus hum ilis (Bge)又名钙果)试管苗的生长及生根上 ,
现将试验结果报道如下。
1 材料与方法
1. 1 供试材料
用欧李继代繁殖的试管苗;15% PP333可湿性粉剂 (江苏
扬州桥头农药厂生产 )。
1. 2 试验方法
①以 MS为基本培养基 , 附加 BA 0. 4m g L- 1 、NAA 0. 04
m g L - 1 、蔗糖 30 g L - 1 , 琼脂 7 g L - 1;设置 PP333质量浓度
为 0、0. 1、0. 5、1. 0、1. 5、2. 0、3. 0 m g L - 1的 7个处理 , 4次重
复。每瓶接 7个外植体 , 培养 28 d, 调查试管苗繁殖系数 , 嫩
梢长度及形态观察 , 叶绿素含量测定。
②以 MS为基本培养基 , 附加 IAA 3. 0 mg L - 1、蔗糖 20 g
L - 1、琼脂 7 g L -1;设置 PP333质量浓度为 0、 0. 01、 0. 05、
0. 10 mg L - 1的 4个处理 , 重复 3次。每瓶接 8个长度大于 2
cm的嫩梢 ,培养 20 d, 调查生根情况。
③培养基条件 , 培养温度 20℃ ±3℃, 光照强度 3 000 lx
左右 , 每天光照 10 ~ 12 h。
作者简介:钟士传 ,男 , 1950年 9月生 ,山东省临沂师范学院农林
学院 ,教授。
收稿日期:2005年 4月 4日。
责任编辑:戴芳天。
2 结果与分析
2. 1 PP333对欧李试管苗生长的影响
本试验培养时间自 2004年 11月 21日开始至 12月 11
日 ,调查试验结果见表 1。
表 1 PP333对欧李试管苗生长的影响
处理号 PP333质量浓度 /m g L - 1 繁殖系数 嫩梢长度 /cm
1 0 8. 1 1. 32
2 0. 1 6. 9 0. 87
3 0. 5 4. 3 0. 37
4 1. 0 3. 9 0. 32
5 1. 5 3. 9 0. 30
6 2. 0 3. 6 0. 29
7 3. 0 3. 5 0. 27
  试验结果经方差分析表明 , 欧李试管苗的嫩梢长度处理
间差异极显著(F0. 01 =4. 01;F =27. 2**)。用 LSD法进行多
重比较证明 ,处理 1、2比其他处理的嫩梢长度差异极显著 , 处
理 3、4、5、6、7这 5个处理间差异不显著。欧李试管苗的繁殖
系数处理间差异显著(F0. 05 =2. 66;F =3. 75*)。用 LSD法进
行多重比较 , 结果证明处理 1、 2较其他处理差异极显著。 其
他处理间差异不显著 , 与嫩梢长度得出结果相同。不加 PP333
的处理无论是繁殖系数还是嫩梢长度都是最大的 , 但是长出
嫩 梢叶节间距离较长 , 苗子弱 , 对生根移栽不利 。加 PP
333
0. 01m g L - 1的处理繁殖系数和嫩梢长度稍低于不加 PP333
的处理 , 但嫩梢粗壮 ,作为生根苗效果好。当 PP333质量浓度
超过 0. 1m g L - 1时 , 欧李试管苗的生长严重受到抑制(见图
1),从试验看欧李试管苗受 PP333抑制程度比其他植物更严
重。由于 PP333抑制了植株顶端分生组织合成赤霉素的作
用 [ 3] ,导致植株矮化 、茎杆变粗 , 节间缩短 , 茎杆纵切面细胞
由长方形变为近似球型 , 细胞壁明显加厚 (见图 2)。叶片密
集而小 , 是由于 PP333促进细胞分裂 ,使细胞排列层次增多 , 叶
DOI牶牨牥牣牨牫牱牭牴牤j牣cnki牣dlxb牣牪牥牥牰牣牥牨牣牥牨牪
片保卫细胞也明显增多 [ 4]。 有研究通过扫描电镜与透射电
镜观察到 PP333处理的试管苗叶片厚度增加 , 维管束直径增
粗 , 表皮细胞密度增加 ,气孔开度变小 [ 5] 。
图 1 PP333对欧李试管苗生长的影响
(左为处理组 ,右为对照组)
a对照组
b处理组
图 2 PP333对欧李试管苗幼茎纵切面细胞形态的影响
用 PP333处理的试管苗叶色浓绿 , 经测定加 PP333 0. 5 m g
L - 1与不加 PP333的叶绿素总量分别为 1. 27%和 1. 06%, 叶绿
素增加 19. 81%。在试验中还发现 , 当 PP333质量浓度超过
1. 5m g L - 1时 , 试管苗易产生玻璃化现象。
2. 2 PP333对欧李试管苗根诱导的影响
试验结果经方差分析表明 , PP
333
不同质量浓度对欧李试
管苗生根影响差异显著(F
0. 05
=4. 76, F =7. 14*)。
用 LSD法多重比较证明 , 加 PP333 0. 05 mg L - 1的处理 ,
即 MS+IAA 3m g L - 1 +PP
333
0. 05 mg L - 1 +蔗糖 20 g
L - 1
+琼脂 7 g L- 1的处理为好。培养 20 d, 试管苗生根率达
80%以上 ,且根系粗壮 , 当 PP333质量浓度增加到 0. 1 mg L - 1
时 ,试管苗生根率反而下降。这可以说高质量浓度的 PP333不
仅抑制欧李嫩梢生长也能抑制生根。欧李每株生根个数经方
差分析表明 , 处理间差异不显著。因此 , 在欧李试管苗生根
时 ,生根培养基中加入 0. 01 ~ 0. 05 m g L - 1的 PP333 , 对提高
生根率是有利的 , PP333可以用于试管苗生根培养 [ 6] 。
表 2 不同质量浓度 PP333对欧李试管苗根诱导影响
PP333质量浓度 /mg L- 1 生根率% 每株根数 /条
0 61. 1 1. 7
0. 01 68. 7 2. 0
0. 05 83. 4 2. 1
0. 10 44. 4 2. 3
2. 3 PP333对欧李种质保存的影响
种质资源又称遗传资源 , 习惯上也叫品种资源。在常温
(20℃±5℃)条件下 ,可通过在培养基中加入 0. 5~ 2. 5mg
L -1的 PP
333
抑制欧李试管苗生长 ,避免试管苗早衰 , 从而减少
继代接种次数。在本试验中发现 , 欧李试管苗生长 30 d后便
出现嫩梢生长点死亡现象。温度愈高 , 时间愈长 ,生长点死亡
率愈高;夏季培养 50 d, 嫩梢死亡率 70%以上。而加 0. 05 mg
L -1PP333的试管苗培养 80 d, 嫩梢死亡率有 11. 2%, 所以减
少继代次数 , 能使保存期延长 4、5个月。
3 小结与讨论
在欧李试管苗继代培养时 , 以 MS为基本培养基 , 附加
BA 0. 4m g L - 1、NAA 0. 04 mg L - 1、蔗糖 30 g L -1 、琼脂 7
g L - 1时 ,加入 0. 1 m g L - 1的 PP333有利于壮苗。 PP333质量
浓度在 0. 5m g L -1以上时 ,试管苗生长严重受到抑制 ,得到
的能进行生根的苗数极少 , 只有利于种质保存。试验结果表
明 ,随 PP333质量浓度的增加 , 欧李试管苗的嫩梢长度和繁殖
系数逐渐降低 , 这与 PP333的作用机理是一致的。在试验中还
发现 ,当 PP
333
质量浓度超过 1. 5 mg L- 1时 , 易出现玻璃化
苗。
生根培养基中加入 0. 01 ~ 0. 05 mg L - 1PP333 , 能有效地
促进欧李试管苗生根。加 PP333比不加的生根率提高 12. 4%
~ 36. 5%,植株和根系较粗壮。
参 考 文 献
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41第 1期                钟士传:PP333对欧李微体快繁的影响