全 文 ：书　［收稿日期］　２０１４－０６－１２；２０１４－１２－１９修回
　［基金项目］　四川省教育厅项目（０９ＺＣ０９７）；成都学院（成都大学）校基金项目（２０１０ＸＪ２２）
　［作者简介］　邱爱东（１９６９－），男，副教授，博士，从事生物化学与分子生物学研究。Ｅ－ｍａｉｌ：ｑｉｕａｄ６９＠１６３．ｃｏｍ
［文章编号］１００１－３６０１（２０１５）０１－００３２－０１３２－０３
红檵木花叶的总黄酮含量与抗氧化活性差异
邱爱东１，芶 琳２，王 羽１，杨 嫒１，肖红梅３，王西瑶３
（１．成都学院（成都大学）生物产业学院，四川 成都６１０１０６；２．四川农业大学 生命科学学院，四川 雅安６２５０１４；
３．四川农业大学 农学院，四川 成都６１０００３）
　　［摘　要］为更好地开发利用红檵木，采用乙醇浸提的方法获得红檵木嫩叶、老叶及花中的总黄酮，并测
定其黄酮含量和总抗氧化活性，以及清除超氧阴离子、羟基自由基和ＤＰＰＨ自由基的能力。结果表明：红檵
木花、嫩叶和老叶中的总黄酮含量分别为 ７．４４％、４．７５％、３．８２％。各部位醇提物浓度在０．００～
０．３５ｍｇ／ｍＬ时，均有抗氧化活性，花的活性最高；浓度在０．０～０．４ｍｇ／ｍＬ时，抑制邻苯三酚自氧化速率和
羟基自由基的清除率低于２０％；当浓度大于１．５μｇ／ｍＬ时，对 ＤＰＰＨ 的清除率均大于５０％，老叶在
７．５μｇ／ｍＬ时的清除率可达９０％，各部位均表现出一定的抗氧化活性，且随浓度的增加，抗氧化能力增强。
［关键词］红檵木；花；叶；黄酮；抗氧化活性
［中图分类号］Ｓ３８ ［文献标识码］Ａ
Ｄｉｆｅｒｅｎｃｅｓ　ｏｆ　Ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ　Ｃｏｎｔｅｎｔｓ　ａｎｄ　Ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ　Ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ　ｆｒｏｍ
Ｆｌｏｗｅｒｓ　ａｎｄ　Ｌｅａｖｅｓ　ｏｆ　Ｌｏｒｏｐｅｔａｌｕｍ　ｃｈｉｎｅｎｓｅ
ＱＩＵ　Ａｉｄｏｎｇ１，ＧＯＵ　Ｌｉｎ　２，ＷＡＮＧ　Ｙｕ１，ＹＡＮＧ　Ｙｕａｎ１，ＸＩＡＯ　Ｈｏｎｇｍｅｉ　３，ＷＡＮＧ　Ｘｉｙａｏ３
（１．Ｃｏｌｌｅｇｅ　ｏｆ　Ｂｉｏ－ｉｎｄｕｓｔｒｙ，Ｃｈｅｎｇｄｕ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｃｈｅｎｇｄｕ，Ｓｉｃｈｕａｎ　６１０１０６；２．Ｃｏｌｌｅｇｅ　ｏｆ　Ｂｉｏｌｏｇｙ　ａｎｄ　Ｓｃｉｅｎｃｅ，
Ｓｉｃｈｕａｎ　Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒｅ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｙａ’ａｎ，Ｓｉｃｈｕａｎ　６２５０１４；３．Ｃｏｌｌｅｇｅ　ｏｆ　Ａｇｒｏｎｏｍｙ，Ｓｉｃｈｕａｎ　Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒｅ
Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｃｈｅｎｇｄｕ，Ｓｉｃｈｕａｎ６１１１３０，Ｃｈｉｎａ）
　　Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｔｏ　ｐｒｅｆｅｒａｂｌｙ　ｄｅｖｅｌｏｐ　ａｎｄ　ｕｔｉｌｉｚｅ　Ｌ．ｃｈｉｎｅｎｓｅ，ｔｏｔａｌ　ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ　ｗｅｒｅ　ｇａｉｎｅｄ　ｆｒｏｍ　ｔｅｎｄｅｒ
ｌｅａｖｅｓ，ｏｌｄ　ｌｅａｖｅｓ　ａｎｄ　ｆｌｏｗｅｒｓ　ｂｙ　ｅｔｈａｎｏｌ　ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　ｍｅｔｈｏｄ，ｔｈｅｎ　ｔｈｅ　ｆｌａｖｏｎｏｉｄ　ｃｏｎｔｅｎｔ　ａｎｄ　ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ
ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ　ｗｅｒｅ　ｄｅｔｅｃｔｅｄ，ａｓ　ｗｅｌ　ａｓ　ｔｈｅ　ｓｃａｖｅｎｇｉｎｇ　ａｃｔｉｖｉｔｙ　ｏｆ　ｓｕｐｅｒｏｘｉｄｅ　ａｎｉｏｎ，ｈｙｄｒｏｘｙｌ　ｒａｄｉｃａｌ　ａｎｄ　ＤＰＰＨ
ｒａｄｉｃａｌ．Ｒｅｓｕｌｔｓ：Ｔｏｔａｌ　ｆｌａｖｏｎｏｉｄ　ｃｏｎｔｅｎｔｓ　ｗｅｒｅ　ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ　７．４４％，４．７５％ａｎｄ　３．８２％ｉｎ　ｆｌｏｗｅｒｓ，ｔｅｎｄｅｒ
ｌｅａｖｅｓ　ａｎｄ　ｏｌｄ　ｌｅａｖｅｓ，ｗｈｉｃｈ　ｗａｓ　ｔｈｅ　ｈｉｇｈｅｓｔ　ｉｎ　ｆｌｏｗｅｒｓ．Ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ　ａｃｔｉｖｉｔｙ　ｃｏｕｌｄ　ｂｅ　ｄｅｔｅｃｔｅｄ　ｗｈｅｎ　ｔｈｅ
ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ　ｗａｓ　０～０．３５ｍｍ／ｍＬ，ａｎｄ　ｉｔ　ｗａｓ　ｔｈｅ　ｈｉｇｈｅｓｔ　ｉｎ　ｆｌｏｗｅｒｓ；Ｔｈｅ　ｓｃａｖｅｎｇｉｎｇ　ｒａｔｅ　ｏｆ　ｐｙｒｏｇａｌｉｃ
ａｃｉｄ　ａｎｄ　ｈｙｄｒｏｘｙｌ　ｒａｄｉｃａｌ　ｗａｓ　ｌｏｗｅｒ　ｔｈａｎ　２０％ ｗｈｅｎ　ｔｈｅ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ　ｗａｓ　０～０．４ｍｇ／ｍＬ；Ｓｃａｖｅｎｇｉｎｇ
ｒａｔｅ　ｏｆ　ＤＰＰＨ　ｒａｄｉｃａｌ　ｗａｓ　ｏｖｅｒ　５０％ｗｈｅｎ　ｔｈｅ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ　ｗａｓ　ｏｖｅｒ　１．５μｇ／ｍＬ，ａｎｄ　ｉｔ　ｃｏｕｌｄ　ｂｅ　ｏｖｅｒ　９０％
ｗｈｅｎ　ｔｈｅ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ　ｗａｓ　７．５μｇ／ｍＬ　ｉｎ　ｏｌｄ　ｌｅａｖｅｓ，ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ　ａｃｔｉｖｉｔｙ　ａｐｐｅａｒｅｄ　ｉｎ　ｖａｒｉｏｕｓ　ｐａｒｔｓ，ａｎｄ　ｉｔ
ｉｎｃｒｅａｓｅｄ　ｗｉｔｈ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ　ｉｎｃｒｅａｓｉｎｇ．
Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ：ＬｏｒｏｐｅｔａＬｕｍ　ｃｈｉｎｅｎｓｅ；ｆｌｏｗｅｒｓ；ｌｅａｖｅｓ；ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ；ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ　ａｃｔｉｖｉｔｙ
　　红檵木（ＬｏｒｏｐｅｔａＬｕｍ　ｃｈｉｎｅｎｓｅ　ｖａｒ．ｒｕｂｒｕｍ）
是金缕梅科（ＨａｍａｍｅＬｉｄａｃｅａｅ）檵木属植物，其根、
叶、花、果均可入药，能解热、止血、通经活络［１］。也
是檵木属植物中最为常见、应用最广的一个变种。
唐克华［２］、王辉等［３］的研究显示，红檵木叶含有丰富
的黄酮类化合物，而黄酮类化合物具有多种生物活
性，尤其是近年来，黄酮类化合物清除自由基、抗氧
化活性的作用越来越受到人们的重视［４－５］。许钢
等［６］的研究表明，大麦麦叶中的黄酮类化合物具有
较强清除自由基的能力。崔永明等［７］的研究结果也
显示，甘草总黄酮对４种食用油脂（菜籽油、大豆油、
花生油、猪油）均有良好的抗氧化效果，尤其对猪油
具有较强的抗氧化作用，并呈量效关系。由于生物
体在需氧代谢中产生的超氧阴离子和羟基自由基在
某些病理状态下得不到及时的清除，可损伤生物膜
结构及功能，进而诱发许多疾病［８］。因此，清除体内
自由基对预防和治疗许多疾病有着重要的意义。由
于红檵木树枝优美，花叶色彩艳丽，在我国广泛作为
一种观赏性植物，因此，很多研究聚焦于红檵木栽培
品种的选育与系统分类以及栽培生理、育苗技术、组
织培养、光合特性与叶色素含量变化等方面，对其功
能成分的研究还很缺乏，从而限制了红檵木的深度
开发利用。试验选用来源广泛的红檵木为研究对
象，通过对其不同部位总黄酮含量的比较分析，确定
含黄酮量较高的部位，并进一步测定各部位总黄酮
的抗氧化活性和清除自由基的能力，为红檵木在植
物源化妆品、保健品、食品和医药等方面的开发利用
提供理论依据。
１ 材料与方法
１．１ 材料
红檵木：选用品种为生长健壮，无病虫害的尖叶
双面红。红檵木的花、嫩叶（小枝顶部１～３片叶
子）、老叶均于５月采于成都温江。
　贵州农业科学　２０１５，４３（１）：１３２～１３４
　Ｇｕｉｚｈｏｕ　Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ　Ｓｃｉｅｎｃｅｓ
仪器：ＦＷ８０型高速万能粉碎机（北京市永光明
医疗仪器厂），低速离心机（安徽中科中佳科学仪器
有限公司），ＤＫ－８Ｄ三孔电热恒温水槽（上海齐欣科
学仪器有限公司），ＥＳＪ－Ｂ系列多功能电子分析天平
（沈阳龙腾电子有限公司），Ｖ－１１００Ｄ型可见分光光
度计（上海美谱达仪器有限公司），ＵＶ－１２００型紫
外／可见分光光度计（上海美谱达仪器有限公司）。
试剂：１，１－二苯基－２－三硝基苯肼（ＤＰＰＨ，购于
Ｓｉｇｍａ－Ａｌｄｒｉｃｈ公司），芦丁标准品（购于 Ｓｉｇｍａ－
Ａｌｄｒｉｃｈ公司），无水乙醇、浓硫酸、磷酸钠、钼酸铵、
邻苯三酚、三羟甲基氨基甲烷（Ｔｒｉｓ）、盐酸、抗坏血
酸（ＶＣ）等均为国产分析纯。
１．２ 样品的预处理及其乙醇提取物的制备
红檵木的花、嫩叶和老叶经阴干，粉碎，过６０目
筛备用。采用乙醇提取法［９］，分别称取样品各
０．５ｇ，按１∶３０的料液比加入６０％乙醇溶液，５０℃
浸提２ｈ，４　０００ｒ／ｍｉｎ离心１０ｍｉｎ，收集上清液，重
复３次，合并上清液浓缩，６０％乙醇定容，得浓度为
１０ｍｇ／ｍＬ的醇提物。
１．３ 红檵木花、叶总黄酮的含量测定
按文献［９］的方法，绘制芦丁标准曲线。依回归
方程计算各样品的总黄酮含量。
１．４ 总抗氧化活性的测定
采用磷钼络合物法［１１－１２］，用６０％乙醇将各样品
分别配制成浓度为０．０５ｍｇ／ｍＬ、０．１ ｍｇ／ｍＬ、
０．２ｍｇ／ｍＬ和０．３ｍｇ／ｍＬ的溶液，用 ＶＣ作参照。
各样品置于９５℃恒温水浴９０ｍｉｎ后，在６９５ｎｍ波
长下测定吸光度。所有测定平行进行３次，取平均
值。
１．５ 清除自由基的能力测定
１．５．１ 超氧阴离子 参照文献［１３－１５］，用６０％乙
醇将各样品配制成浓度为０．０５ｍｇ／ｍＬ、０．１ｍｇ／
ｍＬ、０．２ｍｇ／ｍＬ、０．３ｍｇ／ｍＬ和０．４ｍｇ／ｍＬ的溶
液。取各样品０．１ｍＬ，分别加入９ｍＬ　０．２ｍｏＬ／Ｌ
的Ｔｒｉｓ－ＨＣＬ缓冲液（ｐＨ　８．２，含１ｍｍｏＬ／Ｌ的ＥＤ－
ＴＡ）。ＶＣ溶液作参照，于３２１ｎｍ处测定吸光度，计
算每分钟的抑制率，重复３次。
抑制率＝［（Ａｏ－Ａｓ）／Ａｏ］×１００％
式中，Ａｏ为空白对照值，Ａｓ为样品的均值。
１．５．２ 清除羟基自由基 按文献［１６］，分别测定
红檵木各部位清除羟基自由基的能力。
１．５．３ 清除ＤＰＰＨ 自由基 按汪海波等［１７］的方
法，测定不同浓度红檵木各部位对ＤＰＰＨ自由基活
性的影响，并计算其清除率。
２ 结果与分析
２．１ 红檵木的黄酮含量
以芦丁为标准品绘制标准曲线得回归方程ｙ＝
０．１２２ｘ＋０．０１６１，Ｒ２＝０．９９７　９。以此推算红檵木
花、嫩叶、老叶黄酮含量分别为７．４４％、４．７５％、
３．８２％。红檵木花醇提物黄酮含量较高，与王辉
等［４］的测定结果相似。
２．２ 红檵木花叶总黄酮的抗氧化活性
由图１可知，ＶＣ溶液和红檵木各部位醇提物均
具有抗氧化活性，且在０．００～０．３０ｍｇ／ｍＬ随浓度
的增加，抗氧化活性增强，且红檵木花的抗氧化活性
高于ＶＣ溶液。
吸
光
度
Ab
so
rb
an
ce
浓度/（mg/mL）
Concentration
0
0.5
1
1.5
2
2.5
3
0 0.05 0.1 0.15 0.2 0.25 0.3
VC
花
嫩叶
老叶
图１ 红檵木乙醇提取液总抗氧化活性
　　　Ｆｉｇ．１　Ｔｏｔａｌ　ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ　ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ　ｏｆ　ｅｔｈａｎｏｌ
ｅｘｔｒａｃｔｓ　ｆｒｏｍＬ．ｃｈｉｎｅｎｓｅ
２．３ 红檵木花叶总黄酮清除自由基的能力
２．３．１ 超氧阴离子 由图２Ａ可见，ＶＣ溶液和红
檵木各部位醇提物均表现出对邻苯三酚自氧化速率
有一定的抑制作用，在０．０～０．４ｍｇ／ｍＬ随浓度增
加而增大，其抑制率均在２０％以下，远低于ＶＣ溶液
最高６０％的抑制率。
２．３．２ 羟基自由基 由图２Ｂ可知，红檵木各部位
及ＶＣ溶液均有一定的清除羟基自由基的能力，但都
不超过２０％。其中，嫩叶浓度为０．４ｍｇ／ｍＬ时，清
除率可达２２％。
抑
制
率
/%
Sc
av
en
gi
ng
ac
tiv
ity
10
20
30
60
40
50
70
0
浓度/（mg/mL）
Concentration
0 0.1 0.2 0.3 0.4
抑
制
率
/%
Sc
av
en
gi
ng
ac
tiv
ity
0
4
8
12
16
20
24
抑
制
率
/%
Sc
av
en
gi
ng
ac
tiv
ity
60
40
50
70
80
100
90
0 0.05 0.1 0.15 0.2 0.25 0.3 0.35 0.4
浓度/（mg/mL）
Concentration
0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
浓度/（μg/mL）
Concentration
VC 花 嫩叶 老叶
A B C
图２ 不同浓度红檵木花叶总黄酮对Ｏ－２ ·、·ＯＨ和ＤＰＰＨ·的抑制率
Ｆｉｇ．２　Ｓｃａｖｅｎｇｉｎｇ　ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ　ｏｆ　ｅｔｈａｎｏｌ　ｅｘｔｒａｃｔｓ　ｆｒｏｍＬ．ｃｈｉｎｅｎｓｅ　ｏｎ　Ｏ－２ ·，·ＯＨ　ａｎｄ　ＤＰＰＨ·
·３３１·
　邱爱东 等　红檵木花叶的总黄酮含量与抗氧化活性差异
　ＱＩＵ　Ａｉｄｏｎｇ　ｅｔ　ａｌ　Ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｓ　ｏｆ　Ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ　Ｃｏｎｔｅｎｔｓ　ａｎｄ　Ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ　Ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ　ｆｒｏｍ　Ｆｌｏｗｅｒｓ　ａｎｄ　Ｌｅａｖｅｓ　ｏｆ　Ｌｏｒｏｐｅｔａｌｕｍ　ｃｈｉｎｅｎｓｅ
２．３．３ ＤＰＰＨ自由基 由图２Ｃ可知，红檵木各部
位及ＶＣ溶液均对 ＤＰＰＨ 自由基有较强的清除作
用，且随着浓度的增加，清除能力变强。当老叶总黄
酮浓度为７．５μｇ／ｍＬ时，清除率达到９０％；嫩叶总
黄酮其次，当浓度超过１０μｇ／ｍＬ 时，清除率为
８６％；当花总黄酮浓度为１０μｇ／ｍＬ时，清除率为
７０％。各部位清除率均超过 ５０％。ＶＣ 浓度为
１０μｇ／ｍＬ时，清除率为８３％。
３ 结论与讨论
黄酮类化合物是以２－苯基色原酮为母核，以
Ｃ６－Ｃ３－Ｃ６为基本碳架而衍生的一系列化合物。在
植物界广泛分布，大多与不同糖结合成苷类或碳糖
基的形式存在，但也有以游离苷元的形式存在。由
于其具有清除自由基、抗氧化活性等许多药理作用，
而备受人们关注［５－６］。试验以来源广泛的红檵木为
材料，选取其不同部位作为研究对象，采用乙醇浸提
的方法，得到各部位总黄酮。含量检测显示，红檵木
花黄酮含量最高，为７．４４％；嫩叶次之，为４．７５％；
老叶为３．８２％。以 ＶＣ作为参照，发现在０．００～
０．３０ｍｇ／ｍＬ，红檵木花总黄酮的抗氧化活性高于
ＶＣ，而在清除超氧阴离子方面，尽管红檵木各部位
均表现出一定的抑制邻苯三酚自氧化速率，但抑制
率未超过２０％，而ＶＣ的抑制率可达到６０％。
进一步考察红檵木各部位对羟基自由基和
ＤＰＰＨ自由基的清除能力时发现，红檵木各部位对
羟基自由基具有一定的清除作用，包括 ＶＣ在内，清
除率均在２０％以下；对ＤＰＰＨ自由基的清除结果显
示，红檵木各部位都有较强的清除作用，清除率均在
５０％以上，尤其是老叶，清除能力达９０％。通过比
较红檵木各部位黄酮对３种自由基的清除能力发
现，花、嫩叶和老叶的黄酮对超氧阴离子和羟基自由
基的清除能力没有显著差异；老叶和嫩叶中的黄酮
对ＤＰＰＨ自由基的清除能力没有显著差异，但均高
于红檵木花。
有研究显示［１８－２０］，不同种类的黄酮类化合物清
除自由基的能力与它们的分子结构具有相关性。刘
如龙等［２１］的研究也提示，红檵木花中黄酮类物质种
类较多，成分较复杂。试验结果揭示，红檵木各部位
中总黄酮含量分布不同，同时也预示红檵木各部位
含有抗氧化活性成分，其不同部位抗氧化能力存在
一定差异，而这些差异与不同部位含有黄酮化合物
的种类及含量的不同有着密切的关系。这些研究将
为红檵木的开发和利用提供有益的参考。
［参 考 文 献］
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（责任编辑：孙小岚）
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