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木梨幼叶提取物抑菌作用研究



全 文 :收稿日期: 2002- 06- 25
木梨幼叶提取物抑菌作用研究
熊大胜 郭春秋 曾文虎 盛建新
(常德师范学院生物系 , 湖南 常德 415000)
摘 要 用木梨 (Pyrus xerophila)幼叶提取物对几种常见微生物进行抑菌试验 ,结果表明:木梨幼叶提取物对多种
微生物有明显的抑制作用 ,对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、枯草杆菌及青霉菌的最低抑菌浓度分别为 0. 25% , 4% ,
4% , 8% ,且能耐高温短时的热处理。
关键词 木梨幼叶提取物 ;抑菌作用 ;最小抑菌浓度
Studies on the Antimicrobial Effect of the Extracts of Pyrus xerophila Leaves
Xiong Dasheng , Guo Chunqiu, Zeng Wenhu, Sheng Jianxin
( Biolog y Depar tment of Changde Teacher s Co lleg e, Changde 415000)
Abstract  The antimicrobial experiment of the ex t racts of P. xerophila leav es was studied. It
w as found tha t the ex t racts of P. xerophila leav es could ef fectivety inhibit the g row th of a series
microo rganism. The anticrobial minimum dlosages ex t racts of P. xerophila were as follow:
Staphylococcus aureus 0. 25% , Ebcherichia col i 4% , Bacillus subitil is 4% , Penicil lium sp. 8% .
The ex t racts w ere characterized by thei r heat stable abi li ty.
Key words  Ex tract of Pyrus xerophila leav es; Antimicrobial ef fect; Anticrobial minimum dosages
  木梨 ( Pyrus xerophila )又名酸梨、野梨、棠梨 ,
蔷薇科梨属 ( Pyrus )野生落叶乔木 ;分布在山西、陕
西、甘肃、河南、宁夏、青海等省区 [1, 2 ] ,生于海拔 500
~ 2 000 m的山坡及灌丛中 ,抗旱、抗寒、抗碱及抗
梨锈病的能力强 ,是西北地区梨的主要砧木 [2 ]。湖南
民间称木梨为棠儿梨 ,用其幼叶泡茶 ,能消炎、止渴、
泻火 ,棠儿梨幼叶茶在夏日三伏天 ,自然条件下敞放
6~ 7 d不馊。对果实的开发利用目前集中在梨果
上 ,对梨叶的开发利用研究甚少 ,笔者从木梨幼叶中
提取抑菌物质 ,用几种常见的微生物接种 ,进行抑菌
作用研究 ,以期为梨叶的开发利用找到新的途径。
1 材料与方法
1. 1 供试菌种
金黄葡萄球菌 ( Staphylococcus aureus ) ;大肠杆
菌 ( Escherichia coli ) ;枯草杆菌 ( Bacil lus subitilis
) ;青霉菌 ( Penicillium sp. ) ;黑曲霉 ( Aspergillus
niger ) ;啤酒酵母菌 ( Saccaromyces cerev isiae )
上述菌种均由常德师范学院生物系微生物教研
室提供。
1. 2 培养基
细菌用牛肉蛋白胨培养基 ,霉菌用蔡氏培养基 ,
酵母菌用酵母膏培养基。
1. 3 木梨幼叶提取物的制备
木梨幼叶采自常德师范学院生物系生物园。 制
备方法:木梨幼叶— →洗净脱水—→粉碎— →固液
比 1∶ 20加水 , 90℃水浴浸提 3 h— →初滤— →乙酸
乙酯 80℃萃取 2 h—→ 95%乙醇除多糖— →真空浓
缩干燥。
1. 4 菌种活化及菌悬液制备
上述供试菌种原种均用适宜的培养基平板活
化 ,扩大培养 ,用无菌生理盐水配制成 107~ 108
CFU /mL的菌液 ,备用。
1. 5 抑菌实验方法
1. 5. 1 滤纸片法测定抑菌作用
取直径 6 mm的滤纸片 ,放入 8%的木梨幼叶
提取液中浸泡 16 h, 120℃下湿热灭菌备用。将上述
供试菌液各取 0. 5 m L与相应的固体培养基在超净
第 22卷第 2期
2003年 4月               中 国 野 生 植 物 资 源Chinese Wild Plant Resources            Vo l. 22 No. 2April 2003
工作台内制成含菌平板 ,取含浸出汁的滤纸片贴在
含菌平板上 ,每皿贴 5片 ,每菌做 3次重复。细菌置
37℃、霉菌及酵母菌置于 27℃的生化培养箱内培养
48 h。测定 24、 48 h后滤纸片的抑菌圈大小 ,比较抑
菌效果。
1. 5. 2 最低抑菌浓度 ( Mic)测定
配制上述菌种分别所需的培养基 ,准确量取
9 mL分装试管 ,加入 8% , 4% , 2% , 1% , 0. 5% ,
0. 25%木梨幼叶提取物系列浓度液 ,每管 1 mL,制
成木梨幼叶提取液浓度系列培养基 , 120℃湿热灭
菌 ,冷却后 ,每系列接一个菌种 ,每系列做 3次重复。
细菌置 37℃、霉菌及酵母菌置 27℃的生化培养箱内
培养 48 h。 观察菌种生长情况 ,以完全没有菌生长
的最低浓度为最低抑菌浓度。
2 结果与分析
2. 1 木梨幼叶提取物的抑菌效果
滤纸片法测定抑菌作用 ,每处理 3次重复均值
见表 1。
表 1 木梨幼叶提取液对供试菌种的抑制效果
供试菌种 抑菌直径 ( mm)
24 h 48 h
金黄色葡萄球菌 9. 3 9. 3
大肠杆菌 9. 8 10. 8
枯草杆菌 6. 2 6. 2
青霉菌 6. 3 4. 2
黑曲霉菌 4. 2 0. 0
酵母菌 4. 8 3. 0
  由表 1可知 8%木梨幼叶提取液对金黄色葡萄
球菌、大肠杆菌有较强的抑制作用 ,而对枯草杆菌抑
制效果相对差些 ,对酵母菌及青霉菌也有抑制作用 ,
但抑制效果较差。
2. 2 木梨幼叶提取液对供试菌种的 Mic
上述各供试菌种 ,每系列 3次重复均值见表 2。
表 2 木梨幼叶提取液对供试菌种的最低抑制浓度
供试菌种 最低抑菌浓度 ( M ic)
金黄色葡萄球菌 0. 25
大肠杆菌 4. 00
枯草杆菌 4. 00
青霉菌 8. 00
黑曲霉菌 —
酵母菌 —
  注: “— ”表示无抑制作用。
由表 2可知 ,木梨幼叶提取液对金黄色葡萄球
菌的 Mic为 0. 25% ,对大肠杆菌及枯草杆菌的 Mic
均为 4% ,对青霉菌的 Mic为 8% 。
3 讨 论
木梨幼叶提取物对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌
及枯草杆菌都有较强的抑制作用 ,最低抑菌浓度分
别为 0. 25%、 4%、 4% ,对真菌 (青霉菌 )也有一定的
抑制效果 , Mic为 8% ,且该提取物的热稳定性强。
因为 8%的木梨幼叶提取物是经 120℃湿热灭菌后
表现出的抑菌作用 ,说明高压湿热处理对木梨幼叶
提取物的抑菌能力没有影响。 木梨幼叶泡茶 ,能消
炎、止渴、泻火 ,能在夏日三伏天敞放 6~ 7 d不馊 ,
可能与该幼叶中含有较强的抑菌物质有关。
参考文献:
[1 ] 中国科学院植物研究所 .中国高等植物图鉴 (第二册 ) .北京:科
学出版社 , 1983.
[ 2 ] 华南农学院 .果树栽培学各论 (南方本 ,下册 ) .北京: 农业出版
社 , 1986.
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