全 文 :收稿日期:2009-04-27; 修订日期:2009-12-26
作者简介:陈海娟(1979-),女(汉族),青海西宁人 ,现任沈阳药科大学在
读硕士研究生 ,青海师范大学生命与地理科学学院讲师 , 学士学位 ,主要
从事中药资源的开发和利用工作.
*通讯作者简介:孙启时(1945-), 男(汉族),吉林松源人 , 现任沈阳药科
大学博士生导师 ,教授 , 硕士学位 ,主要从事中药资源的开发与利用及中
药材 GAP研究工作.
青海产两种不同种红景天的药理作用研究比较
陈海娟1 , 2 ,周晓棉 3 ,贾凌云 1 ,孙启时1*
(1.沈阳药科大学中药学院 ,辽宁 沈阳 110016;
2.青海师范大学生命与地理科学学院 ,青海 西宁 810008;
3.沈阳药科大学生命科学与生物制药学院 ,辽宁 沈阳 110016)
摘要:目的 考察青海产两种不同种红景天醇提物浸膏粉活血化淤 、抗缺氧和抗衰老作用。方法 对比研究了青海产狭叶
红景天和唐古特红景天对胶原诱导的血小板聚集 ,胶原蛋白与肾上腺素混合诱导剂致小鼠肺血栓死亡的影响以及对小
鼠常压耐缺氧 , 小鼠断头后喘息时间的影响和对老年小鼠血清中 SOD活性和 MDA含量的影响。结果 在相等的剂量条
件下(生药材), 狭叶红景天活血化淤作用强于唐古特红景天 ,而唐古特红景天抗缺氧能力强于狭叶红景天;此外 ,二者均
有显著抗衰老作用。结论 不同种的红景天表现出的药理作用强度不一 , 在红景天的食用和药用价值开发中应合理应
用。
关键词:红景天; 活血化淤; 抗缺氧; 抗衰老
中图分类号:R285.5 文献标识码:B 文章编号:1008-0805(2010)02-0491-02
景天科红景天属植物为多年生草本或亚灌木植物 ,全世界的
红景天属植物约有九十多种 , 我国有 73种 , 分布于西南 、华中 、西
北 、华北以至东北。目前国内外对红景天属植物的研究只限于少
数几种 , 对其药理活性方面的研究报道并不多。有关狭叶红景天
的现代药理作用研究主要集中在抗缺氧 、抗辐射 、降血糖等方面 ,
未见到有关唐古特红景天药理作用的研究报道。青海是红景天
的主产区之一 , 尤以狭叶红景天 RhodiolaKirilowii和唐古特红景
天 Rhodiolaalgida储藏量大。 本研究首次对青海产狭叶红景天
和唐古特红景天的活血化淤 ,抗缺氧和抗衰老作用进行了研究比
较 , 以期为红景天的合理开发和利用提供参考。
1 材料与仪器
1.1 动物 昆明种小鼠 ,雌雄兼用 , 购自沈阳药科大学实验动物
中心 [合格证号:SCXK(辽)2003-008] 。
1.2 药物 狭叶红景天原植物采集于青海河南县吉岗山 , 唐古特
红景天原植物采集于青海倒淌河 ,经沈阳药科大学孙启时教授鉴
定为景天科红景天属狭叶红景天RhodiolaKirilowi和唐古特红景
天 Rhodiolaalgida。狭叶红景天浸膏粉的制备:70%乙醇回流提
取 , 浓缩得浸膏 ,每克相当于生药 9.74g;唐古特红景天浸膏粉的
制备:70%乙醇回流提取 , 浓缩得浸膏 , 每克相当于生药 7 g。大
株红景天胶囊 , 0.38 g/粒 , 批号 20070301江苏康缘药业股份有
限公司产品;阿司匹林 , 50 mg/片 , 批号 20080605维康医药集团
沈阳延风制药有限公司产品。
1.3 试剂 枸橼酸钠 , 041126,天津市天河化学试剂厂;胶原按文
献方法 [ 1]制备。盐酸肾上腺素注射液 1 ml:1mg0807152上海禾
丰制药有限公司产品;D-半乳糖 080927 Sigma公司生产;上海生
化试剂公司分装;SOD测定试剂盒 100T20081216南京建成生物
工程研究所产品;MDA测定试剂盒 100T, 20081216, 南京建成生
物工程研究所产品。
1.4 仪器 LDZ4-0.8自动平衡微型离心机 , 北京医用离心机厂
产品;LG-KOALA血小板聚集分析仪 , 北京世帝科学仪器公司产
品;721-2000型分光光度计 , 山东高密彩虹分析仪器有限公司产
品。
2 方法和结果
取昆明种小鼠随机分组 ,对照组(0.5%CMC-Na),唐古特红
景天低 、中 、高剂量组(55, 110, 220 mg/kg)、狭叶红景天低 、中 、高
剂量组(40, 80, 160mg/kg), 大株红景天胶囊组(600 mg/kg), 阿
司匹林组 6 mg/kg, 每组 10只。 各组动物分别灌胃给予相应药
物 , 给药容积为 0.2ml/10g体质量 ,连续给药 7 d。
2.1 对胶原诱导的血小板聚集的影响 [ 1 , 2] 末次给药后 1h摘除
眼球取血 ,用 3.8%枸橼酸钠(1∶9)抗凝 , 聚集剂胶原按照文献
[ 1]方法制备。使对照组(50±10)%血小板聚集率的胶原溶液
体积为 10μl,常规制备贫血小板血浆和富血小板血浆 , 用 LG-
KOALA血小板聚集分析仪测定各组样品血小板聚集率 , 并求出
聚集抑制率。
聚集抑制率(%)=(对照组聚集率-给药组聚集率)/对照组
聚集率 ×100%
以聚集率为指标进行组间比较 ,显著性检验。
结果如表 1所示 , 小鼠连续 7 d灌胃给予狭叶红景天 160
mg/kg,与正常对照组比较 , 对胶原诱导的小鼠血小板聚集有显
著抑制作用 ,其余各组有一定的作用趋势。
表 1 红景天浸膏粉对胶原诱导的血小板聚集率的影响 ( x±s)
组别 剂量 C/mg· kg-1 血小板聚集率(%) 抑制率(%)
对照 - 41.4±11.4 -
唐古特红景天(高) 220 34.3±11.1 17.1
唐古特红景天(中) 110 37.2±12.8 10.1
唐古特红景天(低) 55 40.5±4.8 1.4
狭叶红景天(高) 160 25.3±6.2* 38.8
狭叶红景天(中) 80 38.5±6.8 7.0
狭叶红景天(低) 40 37.0±11.1 10.6
大株红景天胶囊 600 34.8±17.4 15.9
阿司匹林 6 23.3±5.4*** 43.7
与对照组比较 , *P<0.05, ***P<0.001;n=10
2.2 对胶原蛋白与肾上腺素混合诱导剂致小鼠肺血栓死亡的影
响 [ 3] 末次给药后 1h分别尾静脉注射胶原蛋白(500 μg/ml)与
肾上腺素(20 μg/ml)混合诱导剂 , 记录各组小鼠在 3min内死亡
数 , 计算药物对小鼠肺血栓的保护率。
结果如表 2所示 , 小鼠连续 7 d灌胃给予狭叶红景天 80、160
mg/kg,和唐古特红景天 220 mg/kg, 与正常对照组比较 , 对胶原
蛋白与肾上腺素混合诱导剂致小鼠肺血栓死亡有显著的保护作
用。
·491·
LISHIZHENMEDICINEANDMATERIAMEDICARESEARCH 2010VOL.21NO.2 时珍国医国药 2010年第 21卷第 2期
表 2 红景天浸膏粉对胶原-肾上腺素混合诱导剂
致小鼠肺血栓死亡的影响( x±s)
组别 剂量 C/mg· kg-1 死亡数 /动物数 抑制率(%)
对照 20/20 0
唐古特红景天(高) 220 17/20* 15
唐古特红景天(高) 110 18/20 10
唐古特红景天(中) 55 18/20 10
狭叶红景天(低) 160 14/20** 30
狭叶红景天(中) 80 16/20* 20
狭叶红景天(低) 40 19/20 5
大株红景天胶囊 600 17/20* 15
阿司匹林 6 12/20** 40
与对照组比较 , *P<0.05, **P<0.01;n=10
2.3 对小鼠常压耐缺氧的影响 [ 4] 末次给药后 1h分别将小鼠分
别放入盛有 10 g钠石灰的 250ml广口瓶中 ,瓶盖周围涂以凡士林
以密闭。每瓶一鼠 ,观察并记录小鼠在缺氧条件下存活时间。
结果如表 3所示:小鼠连续 7 d灌胃给予唐古特红景天 220
mg/kg,与正常对照组比较 ,能显著延长常压缺氧小鼠的存活时间。
表 3 红景天浸膏粉对小鼠常压耐缺氧的影响 ( x±s)
组别 剂量 C/mg· kg-1 存活时间 t/min
对照 - 22.1±9.8
唐古特红景天(高) 220 35.4±14.8*
唐古特红景天(中) 110 33.2±20.0
唐古特红景天(低) 55 30.8±18.9
狭叶红景天(高) 160 33.1±17.6
狭叶红景天(中) 80 32.8±17.0
狭叶红景天(低) 40 28.2±14.8
大株红景天胶囊 600 27.3±11.8
与对照组比较 , *P<0.05;n=10
2.4 对小鼠断头后喘息时间的影响 [ 5] 末次给药后 1 h后 ,用锋
利剪刀在小鼠耳下部快速断头 ,记录张口喘息时间。
结果如表 4所示 ,小鼠连续 7天灌胃给予唐古特红景天 110,
220mg/kg,与正常对照组比较 , 能显著延长断头小鼠喘息时间。
表 4 红景天浸膏粉对小鼠断头后喘息时间的影响 ( x±s)
组别 剂量 C/mg· kg-1 喘息时间 t/s
对照 27.0±3.4
唐古特红景天(高) 220 32.1±3.8**
唐古特红景天(中) 110 31.8±6.1*
唐古特红景天(低) 55 27.2±3.7
狭叶红景天(高) 160 26.8±3.4
狭叶红景天(中) 80 26.8±2.9
狭叶红景天(低) 40 28.9±5.5
大株红景天胶囊 600 27.7±4.1
与对照组比较 , *P<0.05, **P<0.01;n=10
2.5 红景天浸膏粉对老年小鼠血清中 SOD活性和 MDA含量的
影响 [ 6] 各组动物分别灌胃给予相应药物 , 给药容积为 0.2 ml/
10g体重 , 连续给药 10 d, 同时 ,每天皮下注射 5% D-半乳糖 , 0.5
ml/只。末次给药 1h后 , 小鼠眶静脉取血 1ml, 离心分离血清 ,取
30μl测 SOD活性 , 取 10 μl测 MDA含量(按试剂盒说明书步骤
进行)。
结果如表 5所示 , 小鼠连续 7d灌胃给予唐古特红景天 110,
220mg/kg,和狭叶红景天 80, 160 mg/kg, 与模型对照组比较 , 能
显著提高血清中 SOD活性 , 并显著降低血清中 MDA含量。
3 讨论
红景天原为我国传统藏药 ,具有清热解毒 、活血化淤之功效。
现代药理实验证明 , 红景天的药理作用以 “适应原”样作用最为
突出 , 即抗缺氧 、抗疲劳 、抗衰老等。本实验结合红景天的传统和
现代药理作用 , 对青海储藏量较大的狭叶红景天和唐古特红景天
的活血化淤 , 抗缺氧 , 抗衰老的药理作用进行了比较研究。上述
实验结果提示 ,在相等的剂量条件下(生药材), 狭叶红景天活血
化淤作用强于唐古特红景天 ,而唐古特红景天抗缺氧能力强于狭
叶红景天;此外 , 二者均有显著抗衰老作用。
表 5 红景天浸膏粉对老年小鼠血清
中 SOD活性和MDA含量的影响( x±s)
组别 剂量C/mg·kg-1 SOD/U· ml-1 MDA/nmol· ml-1
对照 76.4±8.9 21.0±2.6
唐古特红景天(高) 220 117.3±8.8*** 13.8±0.7***
唐古特红景天(中) 110 104.0±11.0*** 15.9±1.1***
唐古特红景天(低) 55 80.8±6.6 19.2±3.1
狭叶红景天(高) 160 121.6±10.7*** 15.3±0.8***
狭叶红景天(中) 80 91.1±6.3*** 16.2±0.8***
狭叶红景天(低) 40 80.3±5.5 19.3±1.6
大株红景天胶囊 600 121.4±30.5*** 12.9±5.5***
与对照组比较 , ***P<0.001;n=10
《中国高等植物图鉴》记载 , 狭叶红景天 “有破坚 、消积 、止
血 、止泻的功效 , 少量活血养血 , 大量破血 ”, 本实验结果证实了
该药的活血化淤作用 ,其对胶原诱导的小鼠血小板聚集有显著抑
制作用 , 对胶原蛋白与肾上腺素混合诱导剂致小鼠肺血栓死亡有
显著的保护作用。由此可见 ,狭叶红景天是一种用于心脑血管系
统很有开发价值的药源。
缺氧是一种紧张性刺激 , 会引起身体产生各种刺激性反应。
脑和心脏缺氧是造成机体死亡的主要原因。本实验结果显示唐
古特红景天能显著延长小鼠常压缺氧的存活时间和小鼠断头后
的喘息时间。提示深入研究其抗缺氧的机制 ,对于人们适应高山
缺氧环境 ,对于临床和运动医学的需要 , 有着重要的现实意义。
自由基学说是目前普遍接受的衰老学说之一 ,其认为衰老过
程源于代谢产生的自由基和脂质过氧化物(LPO)会破坏生命大
分子物质(核酸 , 蛋白质 , 糖类 , 脂类等)及细胞膜的结构从而导
致衰老 。SOD是机体氧化系统中重要的酶类 , 能对机体代谢中产
生的超氧离子进行歧化反应 ,减轻或消除自由基对机体的损害而
衰老。 MDA作为 LPO的代表产物 , 是衡量机体自由基代谢的敏
感指标。因此 , 用机体 SOD活力上升和 MDA含量下降可作为抗
衰老的指标。本实验研究表明 ,唐古特红景天和狭叶红景天均可
以显著提高血清中 SOD活性 , 并显著降低血清中 MDA含量 , 有
明显的抗衰老作用。由此可以推断唐古特红景天和狭叶红景天
在保健食品和化妆品领域具有很大的开发潜力。
不同种的红景天表现出的药理作用强度不一 ,是否与其所含
的有效成分的含量的差异有关 ,有待于进一步研究。而这种药理
作用强度的差异 ,也为红景天在药品和化妆品等领域的合理开发
和应用提供了参考和依据。
参考文献:
[ 1 ] 冯 洁 ,王嗣岑.复方丹参滴丸对大鼠血小板聚集功能的影响 [ J] .
中国误诊学杂志 , 2006, 6(12):2261.
[ 2 ] 徐叔云 ,卞如濂 ,陈 修.药理学实验方法学 ,第 3版 [ M] .北京:人
民卫生出版社 , 2003:1281.
[ 3 ] DiminoG, SilverMJ.Mouseantithromboticassay:asimplemethodfor
theevalutionofantithromboticactivitybyethyl, alcohol[ J] .Jpharma-
colExpTher.1983, 225:57.
[ 4 ] 倪 尉 ,周 刚 ,胡丽玲 ,等.刺蒺藜提取物抗炎耐缺氧及抗疲劳作
用的实验研究 [ J] .时珍国医国药 , 2007, 18(11):72.
[ 5 ] 吴秀香 ,李淑云 ,马克玲.葡萄籽原花青素耐缺氧作用的实验研究
[ J] .中西医结合心脑血管病杂志 , 2005, 3(6):514.
[ 6 ] 陈 奇.中药药理研究方法学 , 第 2版 [ M] .北京:人民卫生出版
社 , 2006:940.
·492·
时珍国医国药 2010年第 21卷第 2期 LISHIZHENMEDICINEANDMATERIAMEDICARESEARCH 2010VOL.21NO.2