全 文 ：2007年12月第4卷第36期·药物研究·
中国医药导报 CHINAMEDICALHERALD
垂盆草系景天科植物垂盆草的新鲜或干燥的全草,味
甘、淡、性凉,具有清热解毒、利尿消肿、排脓生肌之效。化学
研究表明,垂盆草主要含有糖类、黄酮类[1]、氰苷类成分等[2,3]。
药理学研究表明,垂盆草具有抑制炎性渗出,减少肝细胞损
伤的作用,能显著降低肝炎患者血清谷丙转氨酶[4~6],临床广
泛用于急性肝炎、迁移性肝炎及慢性肝炎活动期的治疗。目
前临床应用的垂盆草制剂(如冲剂、颗粒剂、片剂等)中有效
成分含量差别很大[7]。本文经过对其有效成分进行 HPLC法
含量控制,提高其提取率,从而促进垂盆草制剂的临床应用。
1仪器与试药
1.1仪器
Waters2487高效液相色谱仪,附有 2487紫外分光检测
器,Breeze色谱工作站,20μl自动进样阀。
1.2试剂
磷酸(无锡阳山生化有限责任公司),甲醇(上海诚心化
工有限公司),均为GR。
1.3对照品
异鼠李素对照品(中国药品生物制品检定所,批号110860-
200407)。
1.4样品
垂盆草提取物(自制;批号20060701,20060702,20060703)
2方法与结果
2.1色谱条件
DiamonsilC18(150mm×4.6mm,5μm)色谱柱;流动相为
甲醇-0.4%磷酸(55︰45);流速1.0ml/min;检测波长360nm;
灵敏度 0.1Aufs;进样体积 20μl;理论塔板数以异鼠李素峰
计不低于5382。
2.2对照品溶液的制备
精密称取异鼠李素对照品约 14.1mg,置于 250ml的量
瓶中,加甲醇溶解,定容至刻度,摇匀,备用,作为储备液。精
密吸取储备液 6ml,置于 25ml的量瓶中,用流动相稀释成
每1ml中含13.5μg异鼠李素的对照品溶液。
2.3供试品溶液的制备
精密称取0.4g干浸膏,加入甲醇20ml和50%盐酸5ml,
加热回流 1.5h,过滤,滤液以 0.45μm的微孔滤膜过滤,用
甲醇定容至50ml,即得。
2.4测定方法
分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各20μl,注入液相
色谱仪,按上述色谱条件测定峰面积,见图1。按外标法计算,即
得。
图1垂盆草中异鼠李素含量测定图谱(1号峰为山柰酚,2号峰为异鼠李素)
HPLC法测定垂盆草提取物中异鼠李素的含量
麻佳蕾,李群力*,许玲玲
(金华职业技术学院医学院,浙江金华 321007)
[摘要]目的:用HPLC法测定垂盆草提取物中异鼠李素的含量。方法:采用ODS-C18(150mm×4.6mm,5μm)色谱柱,
流动相为甲醇-0.4%磷酸(55︰45);流速1.0ml/min;检测波长360nm。结果:异鼠李素浓度在2.82~28.20μg/ml范围
内线性良好,r=0.9998(n=8),平均回收率为100.18%,RSD为1.73%(n=9)。结论:本法可用于控制垂盆草中有效成分
的含量,简便、准确、灵敏度高。
[关键词]垂盆草;提取物;含量测定;HPLC
[中图分类号]R917 [文献标识码]B [文章编号]1673-7210(2007)12(c)-160-02
ContentdeterminationofisorhamnetinintheextractofSedumsarmentosum
BungebyHPLC
MAJia-lei,LIQun-li*,XULing-ling
(MedicalColegeofJinhuaProfessionandTechnologyColege,Jinhua321007,China)
[Abstract]Objective:TodevelopamethodforthecontentdeterminationofisorhamnetininSedumsarmentosumBunge.
Methods:ThesampleswereanalyzedonanODS-C18columnwithmobilephaseofmethanol-0.4%phosphoricacid (55︰
45)atflowrate1.0ml/minanddetectivewavelengthof360nm.Results:Thestandardcurveswerelinearrelationshipat
therangeof2.82~28.20μg/ml(r=0.9998).Theaveragerecoverywas100.18%(RSD=1.73%).Conclusion:Themethodcan
beusedtodeterminethecontentofisorhamnetininSedumsarmentosumBunge.Themethodissimple,accurateandsuitable
forthequalityevaluationofSedumsarmentosumBungeextract.
[Keywords]SedumsarmentosumBunge;Extract;Contentdetermination;HPLC
[基金项目]浙江省金华市技术创新重点项目(计划编号:2005-1-140)
[作者简介]麻佳蕾(1981~),女,药物分析硕士,从事药学教学与研究。
*[通讯作者]李群力(1969~),女,副教授,从事药学教学与研究。
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2007年12月第4卷第36期 ·药物研究·
CHINAMEDICALHERALD 中国医药导报
2.5标准曲线及线性范围
精密量取对照品储备液,用流动相稀释配制成浓度分
别为 2.82、5.64、11.28、14.10、22.56、28.20μg/ml的系列标
准溶液,分别进样20μl,测定。以峰面积(Y)对浓度(X)绘制
回归曲线,经回归分析,得回归方程:Y=862034X-245120,
r=0.9998,其浓度在 2.82~28.20μg/ml范围内线性关系良
好。
2.6稳定性试验
取同一批供试品溶液,分别在0、3、4、6h进样,测得峰面
积的RSD为2.63%,结果表明本品的供试溶液在6h内稳定。
2.7精密度试验
对同一供试品溶液进行数次测定,按峰面积计算日内精
密度,其 RSD为 0.99%,表明方法的精密度能满足含量测定
要求。
2.8加样回收率试验
称取0.2g的浸膏9份,分别加入标准储备液2、4、10ml,
配成高、中、低三个浓度各 3份,按照 “2.3供试品溶液的制
备”项下配制成供试液,计算每个浓度的平均加样回收率,分
别为 101.91%、98.88%、99.76%,RSD分别为 1.26%、1.53%、
2.39%。三个浓度的总平均回收率为100.18%,RSD=1.73%(n=
9),表明方法回收率良好。见表1。
表1垂盆草中异鼠李素回收率试验(n=9)
2.9重现性试验
取5批样品,按垂盆草有效成分提取方法进行提取,测
定酸水解后异鼠李素的含量,结果 5批样品的平均含量为
0.1478%,RSD为2.48%。
2.10样品含量测定
精密吸取供试品溶液20μl进样测定,结果见表2。
表2 样品含量测定结果
3讨论
本方法将文献中[8]所用的指标成分由垂盆草苷改为异鼠
李素,因前者极不稳定,很难保证方法的重现性和稳定性,且
其对照品制备烦琐又无处可购。
本方法可用于控制垂盆草中有效抗肝炎成分的含量,提
高有效成分得率和药材的利用率。
[参考文献]
[1]StevensJF,HartH,ElemaET,etal.FlavonoidvariationinEurasian
SedumandSempervivum[J].Phytochemistry,1996,41:503-512.
[2]NahrstedtA,WaltherA,WrayV.Sarmentosinepoxide,anewcyanogenic
compoundfromSedumcepaea(Crassulaceae)[J].Phytochemistry,1982,
21:107-110.
[3]ZhangH,XuR,HuZ,etal.SynthesisofAglyconAnaloguesofSarmen-
tosinandTheirBioactivityofLymphocyteProliferation[J].BioorgMed
ChemLet,2002,12:3543-3545.
[4]郭佳,史又新.垂盆草降谷丙转氨酶的机理探讨[J].上海中医药杂志,
1991,11(4):47-48.
[5]方瑞英,史忠阳.原代培养大鼠肝细胞中观察十种中药的抗肝毒作用
[J].现代应用药学,1995,12(1):5.
[6] 薛继艳,魏怀玲,刘耕陶,等.垂盆草对小鼠和大鼠肝脏脂质过氧化损
伤的保护作用[J].中西医结合肝病杂志,1993,3(1):14.
[7]苏志恒,华会明.垂盆草化学成分及药理作用研究进展[J].中药研究与
信息,2005,7(8):19-20.
(收稿日期:2007-10-18)
对照品
加入量
(μg)
112 279.7 113.3 100.44 101.91 1.26 100.18 1.73
276.1 115.9 102.77
277.4 115.6 102.52
338 510.6 338.8 100.13 98.88 1.53
496.5 336.1 99.32
488.6 328.9 97.20
64 735.6 574.8 101.91 99.76 2.39
707.1 548.2 97.19
722.8 565.0 100.17
样品测得
量(μg)
对照品实
测值(μg)
回收率
(%)
平均回
率(%)
RSD(%)
总平均回
收率(%)
RSD(%)
批号 含量(%)
20060701 0.1525
20060702 0.1498
20060703 0.1506
激活引起自身消化外,有研究显示胰腺的微循环障碍,多种
细胞因子、炎性介质参与的炎症反应也是导致胰腺细胞损伤
的重要原因[1,2]。
生长抑素是一种广泛分布于脑、胃肠道、内外分泌腺等
组织的环状多肽,具有多种生物学效应。生长抑素可以抑制
垂体生长激素的分泌及胰、胆及胃肠道消化酶的分泌,松弛
Oddis括约肌,保护细胞功能等。在急性胰腺炎的治疗中,生
长抑素减轻 SAP内毒素血症,抑制淀粉酶、磷脂酶 A2的分
泌及减少细胞因子 IL-1、IL-6、IL-12和 TNF-α等的释放,
调节免疫反应,不但可以减轻胰腺的损伤,而且可以防止多
器官功能衰竭的发生[3]。
参芎注射液具有改善胰腺及其他器官微循环的作用,并
且能抑制自由基的生成,有效清除氧自由基,能通过抗氧化、
抑制炎症等作用对胰腺因微循环障碍,多种细胞因子、炎性介
质参与的炎症反应导致的胰腺细胞损伤,发挥一定保护作用[3]。
我们的研究显示,在治疗 SAP过程中,生长抑素和参芎
注射液的联合应用较单独使用生长抑素在 APACHEⅡ评分
方面有一定的改善。笔者推测两者的联合应用可能会起到一
定协同作用。对生长抑素和参芎注射液联合治疗 SAP的进
一步研究可能会对SAP治疗方案的改进具有一定的意义。
[参考文献]
[1]SchaferC,TietzAB,GokeB.Pathophysiologyofactueexperimentalpan-
creatitis:lessonsfromgeneticalyengineeredanimalmodelsandnew
molecularapproaches[J].Digestion,2005,71(3):162-172.
[2]张群华,蔡端,吴树强,等.急性坏死性胰腺炎大鼠的炎症介质变化和生
长抑素的作用[J].中华医学杂志,1997,77(5):355-358.
[3]巫协宁.奥曲肽和柴芍承气汤、丹参治疗重症胰腺炎的作用机制[J].胃
肠病学,1999,35(3suppl):S15-S19.
(收稿日期:2007-10-30)
(上接第94页)
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