全 文 ：江西农业学报　2009, 21(9):55 ～ 58ActaAgriculturaeJiangxi
云南高海拔地区甜樱桃花粉生活力的研究
张丽娜 ,赵贵铭 ,武绍波＊
　 　收稿日期:2009-07-26
基金项目:云南省科技厅 2008年度应用基础研究项目 “大樱桃坐果机理研究 ”。
作者简介:张丽娜(1983-),女 ,山西长治人,在读硕士生 ,从事果树生理及栽培学研究。 ＊通讯作者:武绍波。
(云南农业大学园林园艺学院 ,云南 昆明 650201)
摘　要:采用花粉离体萌发法和染色法测定甜樱桃的生活力, 目的在于选择花粉生活力强的品种作为授粉品种 , 以提高
坐果率 ,确保产量和品质。结果表明:拉宾斯花粉的生活力最高 ,达 70%以上, 98-1A和南阳红的花粉发芽率最低 , 分别为
10% ～ 15%, 其他品种的花粉发芽率在 30% ～ 60%,因此 ,拉宾斯可以作为其他甜樱桃的理想授粉树;南阳红和 98-1A由于
花粉生活力较低 ,一般不建议用做授粉树。
关键词:甜樱桃;花粉生活力;授粉;离体萌发法;染色法
中图分类号:S662.5　文献标识码:A　文章编号:1001-8581(2009)09-0055-04
StudyonPolenViabilityofSweetCherryinHigh-altitudeAreasofYunnanProvince
ZHANGLi-na, ZHAOGui-ming, WUShao-bo＊
(ColegeofLandscapeandHorticulture, YunnanAgriculturalUniversity, Kunming650201, China)
Abstract:Inthisstudy, thepolenviabilityofsweetcherryinhigh-altitudeareasofYunnanprovincewastestedbyisolatedpol-
lengerminationmethodandstainingmethod, aimingtochoosevarietieswithstrongpollenviabilityaspolinationvarieties, inorderto
enhancefruitsettingrate, yieldandquality.TheresultsshowedthatthepolenviabilityofLapinswasthehighest, beingover70%,
whilethatof98-1AandNanyanghongwasthelowest, being10% ～ 15%, andthatofothervarietiesrangedfrom30%to60%.So
Lapinscanbeusedasanidealpolinationvariety;Nanyanghongand98-1Ashouldnotbeusedaspolinationvarietiesduetotheir
lowpolenviability.
Keywords:Sweetchery;Pollenviability;Polination;Isolatedgerminationmethod;Stainingmethod
　　甜樱桃(PrunuspseudocerasusL.)为蔷薇科李亚科
李属樱桃亚属落叶乔木果树。原产于亚洲西部和欧洲东
南部 ,樱桃成熟时颜色鲜红 ,玲珑剔透 ,味美形娇 ,营养丰
富 ,医疗保健价值颇高 ,又有 “含桃 ”的别称 ,深受消费者
的喜爱 ,目前已发展成为世界性果树[ 1] 。
我国作为果树栽培的樱桃有中国樱桃、甜樱桃 、酸
樱桃和毛樱桃 ,其中甜樱桃俗称大樱桃[ 2] 。樱桃成熟期
早 ,有早春第一果的美誉 。我国樱桃产量为 3500万 kg,
人均只有 29 g,相当于每人有大樱桃 3个或中国樱桃 15
～17个。我国栽培的甜樱桃品种主要为欧美品种 ,由于
欧洲甜樱桃一般需 7.2 ℃以下低温 900 ～ 1400 h方可完
成冬季休眠 ,限制了在我国南方的大面积栽培 ,但在海拔
高的南方地区(本试验以云南省昭通市鲁甸县为例)适
宜甜樱桃的栽培 ,可见有广阔的市场前景。目前存在的
问题是甜樱桃多数品种自花结实率很低 ,需要异花授粉
才能正常结果 [ 2] 。
研究表明:花粉是种子植物的雄配子体 ,在有性繁
殖中发挥着重要作用。采集的花粉和贮存的花粉 ,在使
用之前必须作生活力的鉴定 ,以评价花粉是否有授精能
力 。所以 ,在常规育种工作中 ,对花粉生活力进行测定 ,
可以成为其以后分析坐果率高低的重要依据 ,对生产实
践也具有一定的指导意义 。
1　材料与方法
1.1　试验时间 、地点　本实验的花粉于 4月 10日用透
明纸包好后阴干 ,待花粉完全散出后 ,冷藏于室内;实验
于 13日在园艺实验室进行 。
1.2　试验材料
1.2.1　98-1 A　品种来源:中国农业科学院郑州果树
研究所选育的新品系 ,是那翁的实生后代[ 3] 。栽培习性:
树体健壮 ,成枝率较高 ,分枝角度大 ,幼树易形成中果枝、
短果枝和花束状结果枝 ,所以幼树进入结果期早 ,极丰
产。平均单果重 8.1 g,果实宽心形或肾形 ,果实乳黄色 ,
向阳面着红晕 ,开花整齐 ,成熟期一致。可与红灯同时期
采收 ,也可推迟采收 5 d左右 ,不落果 ,自花不实。
1.2.2　早大果　品种来源:乌克兰品种 ,由山东省果树
研究所引进 。栽培习性:树体生长势中庸 ,干性较弱 ,中
心干上的侧生分枝 ,基角角度较大。果实性状:果实个
大 ,果肉硬 ,无畸形果 ,平均单果重 7.8 g,最大 13 g。花
期比红灯晚 5 d,成熟期比红灯早 5d。 5月上旬成熟 ,成
熟后在树上可挂果半月 ,硬度不变 ,高抗裂果 [ 4] 。
1.2.3　雷佶娜　品种来源:德国品种。栽培习性:树体
健壮 ,分枝角度较小 ,枝条较粗壮直立 ,干性中等。萌芽
率高 ,成枝率中等。果实性状:果实较大 ,果个均匀一致 ,
单果重 7 ～ 9 g,果实心脏形 ,紫红色 ,果皮中厚 ,缝合线内
凹[ 5] 。果柄较短 ,采前不落果 ,耐贮运性较好 ,自花不实。
6月上旬成熟 ,极晚熟 ,早果丰产 ,连续结果能力强 ,抗裂
果性能强。
1.2.4　拉宾斯　品种来源:1965年加拿大夏陆研究站
用先峰和斯得拉杂交育成 。栽培习性:树势强健 ,树姿较
直立。果实性状:果实大型 ,平均单果重 8 g。果形近圆
形或卵圆形。果梗中短中粗 ,不易萎缩。成熟时果皮紫
红色 ,有光泽 ,美观 ,果皮厚韧 [ 6] 。果肉红色 ,肥厚 ,风味
佳 ,品质上等 。抗采前落果 ,自花结实并可作其他品种授
粉树 ,早果丰产性均佳 ,裂果轻。
1.2.5　红灯　品种来源:大连市农业科学研究所于 1963
年以那翁、黄玉杂交育成 , 1973年定名。在辽宁大连及
山东各地均有栽培 ,为甜樱桃的主栽品种之一 ,也是目前
我国设施和露地栽培的主栽品种[ 7] 。栽培习性:树势强
健 ,生长旺盛 ,幼树直立性强 ,成龄树半开张 , 1 ～ 2年生
枝直立粗壮。叶片特大 ,椭圆形 ,较宽 ,在新梢上呈下垂
状着生 。果实性状:果实大型 ,平均单果重 9.2 g,大者 12
g。果实肾脏形 ,整齐 。果梗粗短。果皮红色至紫红色 ,
富有光泽 ,色泽艳丽 ,外形美观。果肉淡黄 ,半软 、汁多 ,
酸甜适口 ,可溶性固形物含量 14% ～ 15%。核大 ,离核 。
肉质肥厚 ,可食部分 92.9%。果实发育期 40 ～ 45d,继大
紫之后成熟。
1.2.6　南阳红　品种来源:日本品种 ,中国农业科学院
郑州果树研究所引进保存 。栽培习性:树势强 ,发育旺盛
直立 ,枝条粗壮 ,成枝率高 ,花期晚 ,结果较晚 ,花芽多位
于中位。果实性状:果实大 ,单果重 7 ～ 9 g,果实椭圆形 ,
缝合线明显 ,果肉黄色 ,阴面有红晕 ,外观美丽 ,果肉硬而
多汁 ,含糖量 14% ～ 16%,味道醇厚可口 ,产量低。
1.2.7　斯克乃德斯　品种来源:美洲品种。栽培习性:
树势强健 ,枝条粗壮 。果实性状:果实大 ,平均单果重 7
g,心脏形 ,紫红色 ,光泽艳丽 ,果肉红色 ,质硬 ,致密 ,风味
极佳 ,可溶性固形物含量 15%,皮厚而韧 ,较抗裂果 ,耐
贮运[ 8] 。自花结实率高 ,早果性 、丰产性突出。盛果期
后注意疏花疏果 ,以提高单果重。
1.2.8　先锋 　品种来源:曾译名凡 。由加拿大夏地农
业研究所育成。在欧、美、亚洲各国均有栽培。 1983年
中国农业科学院郑州果树研究所引入 。栽培习性:树势
强健 ,枝条粗壮。丰产性较好 ,抗寒性强。很少裂果。需
异花授粉 ,花粉量较大 [ 9] ,是一个极好的授粉品种。经
多点试栽 ,其早果性、丰产性甚好 ,且果个大、耐贮运。果
实性状:果实大型 ,平均单果重 8.5g,大者 10.5 g。果形
肾脏形 。果皮紫红色 ,光泽艳丽 ,厚而韧 。果肉玫瑰红
色 ,肉质脆硬 ,肥厚 ,汁多 ,酸甜可口 ,含可溶性固形物
17%。风味好 ,品质佳 ,可食部分 92.1%。在山东半岛 6
月中旬 、鲁中南地区 6月上中旬成熟 ,耐贮运 。
1.3　试验用具与药品　用具:显微镜 、1/100天平、载玻
片 、盖玻片 、培养皿 、镊子、玻璃棒、电炉、烧杯、橡皮头滴
管 、干燥器、恒温培养箱、量筒 、量瓶等 。药品:碘 、碘化
钾 、氯化 三苯基四氮唑 (TTC)、Na2HPO4 · 2H2O、
KH2PO4、联苯胺、α-萘酚 、碳酸钠 、过氧化氢 、蔗糖 、琼
脂、蒸馏水、硼酸。
1.4　试验方法　在正常条件下 ,花粉在雌蕊柱头上所具
有的萌发能力 ,就是花粉的生活力。在杂交工作中 ,往往
由于需要应用经贮藏的花粉 ,或经运输邮寄的花粉 ,因此
在杂交前检查是否具有生活力是十分必要的 。其原理是
人工创造一个适于花粉发芽的环境条件 ,从而鉴定花粉
发芽能力的强弱 ,或用染色法是通过染色液使有活力的
花粉上色来测定花粉的活力 。
1.4.1　花粉发芽法　培养基的制备:在 200 mL的烧杯
中加入 100 mL蒸馏水 ,再加入 1%琼脂(0.15 g琼脂),
在酒精灯上加热 ,使之完全熔解 ,然后加入 15%蔗糖(15
g蔗糖),制成 15%的糖液。注意在熬制时要用玻璃棒不
断搅拌 ,使其融化均匀 ,还可加入微量柱头渗出液 、维生
素等以形成花粉粒发芽的最适环境条件 。本实验加入了
100mg/L硼酸(2 mg硼酸),以促进花粉的萌发 。
需要注意的是:在熬制培养基时 ,应在烧杯上的液
面处贴上一纸条或用玻璃铅笔沿液面划线标记。当液面
在熬制过程中因水分蒸发下降时 ,应及时添加蒸馏水 ,以
保持液面的稳定和培养基的标准浓度 ,并将熬制好的培
养基溶液连烧杯放入盛有 35 ℃热水的容器中 ,防止冷却
凝固 ,以备随后使用 。
用品消毒:发芽实验时所用的载玻片 、盖玻片 、镊子
等都要在消毒柜中消毒或在 100 ℃条件下煮沸 20 min,
冷却后取出用酒精棉球擦干放在大培养皿中备用 ,经过
消毒过的载玻片使用时要尽量减少和手指接触的面积 ,
以减少污染 。花粉的播种与检查:用滴管吸取培养基溶
液 ,立即滴一滴于载玻片的中央(直径 1.5 ～ 2.0 mm),使
成为一表面完整的球面(球面越薄越好 ,否则透光性差 ,
影响在显微镜下观察),当凝固后再进行花粉的播种 。
播花粉时 ,用经酒精消毒过的发丝蘸取花粉 ,轻轻
震动在培养基的表面 。一要注意发丝不能过重地接触培
养基表面 ,避免破坏培养基的表面;二要注意花粉的分布
要松散、均匀 ,不能密集成堆;三要注意适宜的播种数量。
经验证明 ,花粉太稀 ,影响发芽 ,播种太稠也影响发芽 ,一
般情况下 ,一个显微镜视野以分布 50 ～ 100粒花粉粒为
宜。播好后将载玻片放置于培养皿中 ,该培养皿要事先
在皿内放好滤纸或棉垫并加水用于保湿 。每种花粉做 3
组即 3个载玻片 。
而后要在培养皿上用玻璃铅笔标号 ,并进行记录 ,
记录内容包括花粉种类 、采粉时间 ,播种时间。然后集中
放在一个大的瓷盘中 ,用纱布覆盖后加盖 ,放于 25 ℃的
温箱内培养 。实验表明:花粉在播 8 h后 ,发芽数不再有
明显增加 [ 10] 。在播后 12 h在低倍显微镜下检查发芽情
况 ,直至花粉粒发芽数不再增加为止 ,记载花粉发芽数 ,
以明确不同花粉的发芽速度和发芽进程 。
分别观察 3个视野 ,每个视野花粉粒数 50 ～ 100粒 ,
花粉发芽标准将花粉管长度已超过花粉粒直径 2倍的看
56 江　西　农　业　学　报　　　　　　　　　　　　 　　　　　　21卷
做发芽正常的花粉 [ 11] 。记录发芽情况于表 1。
1.4.2 　染色观察法
1.4.2.1　碘 -碘化钾染色法　 (1)试剂配制:称取 0.5
g碘化钾溶于少量蒸馏水中 ,再加入 1 g碘片 ,加水至 100
mL,即成碘 -碘化钾溶液 ,贮藏于棕色瓶中备用。(2)操
作步骤:取少量花粉振播到用棉球擦净的普通载玻片上 ,
然后加水一滴 ,使花粉散开 ,再加一滴或两滴碘 -碘化钾
溶液 ,盖上盖玻片 ,置于显微镜下 ,观察不同的 3个视野 ,
凡花粉粒被染成蓝色的表示具有生活力 ,呈现黄褐色为缺
少生活力的花粉[ 12] 。分别统计 3个视野 ,记录染色情况于
表 2。
1.4.2.2　氯化三苯基四氮唑(TTC)法　凡具有生活力的
花粉 ,在其呼吸作用过程中都有氧化还原作用 ,而无生活
力的花粉则无此反应 ,因此当 TTC渗入有生活力的花粉
时 ,其脱氢酶在催化去氢过程中与 TTC结合 ,使无色的
TTC变成 TTF而呈红色。 (1)试剂配制:①磷酸盐缓冲液
的配置:在 100mL的蒸馏水中溶解 0.832 g的 Na2HPO4·
2H2O和 0.273 g的 KH2PO4 ,调整 pH值为 7。②TTC溶液
配置:取 0.05 g的 TTC溶 解 磷 酸 盐 缓 冲 液
中 ,放于棕色瓶中备用 。(2)操作步骤:取少量花粉于
1.5 mL的离心管中 ,滴入 0.5%TTC染色液 ,置于 35 ～ 40
℃下 15 ～20min后 ,取出装有花粉的离心管 ,在滴管取 1 ～
2滴含有花粉的染色液于载玻片上 ,盖上盖玻片 ,在低倍镜
下检查 ,凡被染成红色的均为有生活力的花粉 ,不着色或
者着色浅的为无生活力的花粉 [ 12] 。分别统计 3个视野 ,记
录染色情况于表 2。
1.4.2.3　B.C.夏尔达考夫染色法(过氧化氢染色法)　
(1)试剂配制:A液:称 0.25 g联苯胺溶于 100 mL50%酒
精中 ,装于棕色瓶中备用。B液:称 0.15 gα-萘酚溶于
100 mL50%酒精中 ,装于棕色瓶备用。 C液:称 0.25 g碳
酸钠溶于 100 mL蒸馏水中 ,装于棕色瓶备用 。在使用前
将 A、B、C三种溶液等量混合配成混合液后装于棕色瓶中
备用。再配制 0.3%过氧化氢液装于棕色瓶备用。(2)操
作步骤:用镊子挑取少量花粉于载玻片上 ,滴 1滴混合液
和 1滴过氧化氢液 ,用玻璃棒将溶液和花粉拌匀 ,盖上盖
玻片 , 3 ～4 min后在低倍镜下观察 。呈紫红色者为有生活
力花粉 ,无色或呈黄色的为无生活力花粉[ 13] 。分别统计 3
个视野 ,记录染色情况于表 2。
2　结果与分析
2.1　花粉发芽法对不同品种测定结果的分析　4月 15日
进行花粉发芽试验 , 4月 16日记录试验结果如表 1。由表
1可以看出各种樱桃品种采用花粉发芽法的发芽率:拉宾
斯的花粉发芽率为 74.01%,居首位 ,南阳红和 98-1A的
花粉发芽率最低 ,为 12.90%和 13.36%。从采集时间上
看 ,采集时间越长 ,其花粉发芽率越低。
表 1　12h后离体花粉萌发记录
品种 花粉采集时间
第一视野
总数 发芽数 发芽率(%)
第二视野
总数 发芽数 发芽率(%)
第三视野
总数 发芽数 发芽率(%)
平均发
芽率(%)
98-1A 3/13 64 9 14.06 80 10 12.50 58 8 13.79 13.45
早大果 3/15 73 26 35.62 50 20 40.00 60 22 36.67 37.43
雷佶娜 3/15 58 18 31.03 76 22 28.95 68 20 29.41 29.80
拉宾斯 3/17 58 43 74.14 65 48 73.85 54 40 74.07 74.02
红灯 3/20 54 26 48.15 75 34 45.33 50 23 46.00 46.49
南阳红 3/25 49 5 10.20 56 9 16.07 50 6 12.00 12.76
斯克乃德斯 3/25 58 33 56.90 74 42 56.76 61 34 55.74 56.47
西尔维亚 3/25 59 30 50.85 78 39 50.00 64 34 53.13 51.33
先峰 3/25 63 19 30.16 73 23 31.51 56 18 32.14 31.27
2.2　几种染色方法对不同品种测定结果的分析　4月 16、
17日进行测定并记录于表 2 ～表 4。由表中可以看出:3种
方法处理的结果显示 TTC染色法与过氧化氢物染色法差
异明显。从总体上看 ,拉宾斯的花粉生活力最高 , 98-1A
和南阳红花粉生活力最低 ,早大果、雷佶娜、红灯 、斯克乃
德斯、西尔维亚中等。
表 2　染色法检查花粉生活力记录(I-KI染色法)
品种 第一视野总数 发芽数 发芽率(%)
第二视野
总数 发芽数 发芽率(%)
第三视野
总数 发芽数 发芽率(%)
平均发芽率
(%)
98-1A 52 7 13.46 56 8 14.29 47 7 14.89 14.21
早大果 60 25 41.67 50 18 36.00 68 22 32.35 36.67
雷佶娜 54 15 27.78 58 18 31.03 52 16 30.77 29.86
拉宾斯 55 40 72.73 54 44 81.48 58 43 74.14 76.12
红灯 50 26 52.00 54 26 48.15 78 30 38.46 46.20
南阳红 74 9 12.16 55 7 12.73 81 10 12.35 12.41
斯克乃德斯 52 32 61.54 66 32 48.48 54 35 64.81 58.28
西尔维亚 63 38 60.32 56 25 44.64 59 26 44.07 49.68
先峰 46 11 23.91 67 23 34.33 56 18 32.14 30.13
57　9期　　　　　　　　　　　　张丽娜等:云南高海拔地区甜樱桃花粉生活力的研究
表 3　染色法检查花粉生活力记录(TTC染色法)
品种 第一视野总数 发芽数 发芽率(%)
第二视野
总数 发芽数 发芽率(%)
第三视野
总数 发芽数 发芽率(%)
平均发芽率
(%)
98-1A 58 8 13.79 64 8 12.50 73 9 12.33 12.87
早大果 73 20 27.40 54 20 37.04 66 22 33.33 32.59
雷佶娜 75 19 25.33 69 22 31.88 86 29 33.72 30.31
拉宾斯 74 54 72.97 68 56 82.35 55 44 80.00 78.44
红灯 84 35 41.67 59 29 49.15 61 28 45.90 45.57
南阳红 61 6 9.84 50 6 12.00 76 10 13.16 11.66
斯克乃德斯 68 35 51.47 84 47 55.95 65 35 53.85 53.76
西尔维亚 79 42 53.16 51 26 50.98 65 36 55.38 53.18
先峰 56 15 26.79 86 27 31.40 64 20 31.25 29.81
表 4　染色法检查花粉生活力记录(过氧化氢物染色法)
品种 第一视野总数 发芽数 发芽率(%)
第二视野
总数 发芽数 发芽率(%)
第三视野
总数 发芽数 发芽率(%)
平均发芽率
(%)
98-1A 69 7 10.14 54 5 9.26 78 8 10.26 9.89
早大果 67 23 34.33 79 30 37.97 56 18 32.14 34.82
雷佶娜 47 16 34.04 59 18 30.51 56 20 35.71 33.42
拉宾斯 56 35 62.50 51 38 74.51 75 55 73.33 70.11
红灯 53 28 52.83 77 35 45.45 63 28 44.44 47.58
南阳红 66 7 10.61 72 9 12.50 57 8 14.04 12.38
斯克乃德斯 86 42 48.84 51 30 58.82 70 38 54.29 53.98
西尔维亚 77 40 51.95 53 26 49.06 66 33 50.00 50.33
先峰 73 23 31.51 85 25 29.41 66 19 28.79 29.90
2.3　不同实验方法对同一品种测定结果的分析　由图
1可以看出:拉宾斯的花粉生活力在各品种中是最高的;
早大果 、雷佶娜、红灯、斯克乃德斯 、西尔维亚居中;南阳
红和 98-1A最低。
图 1　9个品种离体花粉萌发率和染色率的比较结果
3　讨论
通过测定甜樱桃品种花粉的生活力为科学依据 ,
来配置授粉树 ,能较准确的找出优良授粉树。本实验
采用了 4种方法测定甜樱桃花粉生活力 ,其中染色法
的 3种方法主要采用的是化学方法 ,简便 、快捷且直
观 ,而培养基发芽法为花粉的萌发创造了一个适合的
环境 ,我们在显微镜下可以清楚的观察花粉的萌发情
况 ,结果更加准确、可靠 ,在类似测定花粉生活力的实
验中 ,最适合的方法为 TTC染色法 [ 14] 。
4　结论
总体上看培养基发芽法为花粉的萌发创造了一个
适合的环境 ,我们在显微镜下可以清楚地观察花粉的萌
发情况 ,因此结果更加准确 。但花粉发芽法操作步骤多
而复杂 ,而染色法简便快捷 。培养基花粉发芽法和染色
法测定花粉生活力各有优缺点。
在染色法中 , I-KI染色法:凡花粉粒被染成蓝色的
表示具有生活力 ,呈黄褐色为缺少生活力的花粉。有无
活力的花粉颜色区分明显 ,统计结果方便、快捷。 TTC和
过氧化氢物染色法颜色区分不明显 ,且配制和染色需一
定条件 ,但可作为辅助染色法。
在测定的甜樱桃品种中拉宾斯的花粉生活力最高 ,
达 70%以上;西尔维亚、斯克乃德斯、红灯 、早大果、雷佶
娜居中 ,在 30% ～ 60%之间;98 -1A和南阳红最低 ,为
12% ～15%。因此在云南昭通鲁甸高海拔地区 ,拉宾斯
可以做其他甜樱桃理想的授粉树 。
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58 江　西　农　业　学　报　　　　　　　　　　　　 　　　　　　21卷
3　讨论
不同的 RNA提取方法各有优缺点 ,应对不同物种的
特性选择或改良相应的方法 。SDS-苯酚法和优化 SDS
-苯酚法残留的 DNA可用 DNA酶除去 ,其质量与产量
与凯基 Trizol试剂法相近 ,但成本增加 ,提取周期延长 。
SDS-苯酚法和优化 SDS-苯酚法本身提取时间加上酶
解时间 ,使得提取周期较长 ,如时间充裕可以考虑此两种
方法。凯基 Trizol试剂法成本较高(每个样品约 3元),
但效率高 ,提取周期短 ,耗费人工较少 ,且缓冲液可以长
期存放 ,如果将人工计入成本 ,则不失为一种经济的方
法 ,本研究结果与候义龙的结果一致[ 7] ,但李晓毓等 [ 8]
认为 Trizol法提取的 RNA质量较差 ,在做反转录等后续
操作也未获成功 ,这可能是由于所选的物种的差异引起
的 。不同植物及同一种植物不同的部位都具有各自的特
点 ,适宜的 RNA提取方法应在熟练掌握基本操作原理的
基础上 ,根据材料自身的特点 ,进行具体的摸索和完善。
本试验建立了适于桃树叶片总 RNA提取的方法 ,利
用此方法获得的总 RNA完整性较好 ,纯度和产量均较
高 ,蛋白、多糖及酚类等去除较彻底 ,适于进一步的果树
病毒 RT-PCR检测 ,对桃等核果类果树无病毒苗的生产
具有十分重要的理论意义和实践意义 。
PDV除在江苏南京霞晖 7号上发现外主要在引进
品种上发现 ,由境外传入可能性较大 ,目前我国出入境检
验机制可能还存在一些漏洞 ,应及早防范高危害性植物
病毒的入侵 。
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(上接第 54页)
此外 ,近几年来 ,野生委陵菜数量逐渐减少 ,除人为
因素外 ,还可能与遗传因素有关 ,研究表明 ,野生委陵菜
单株产种量虽然大 ,但其死种子和胚发育不完全的概率
约为 26.75%,具体原因尚需进一步探讨。
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