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七叶鬼灯檠挥发油
及不同提取物抑菌活性的研究
王 健1，2，黄 慧1，王喆之1，张 媛1，*
(1.药用资源与天然药物化学教育部重点实验室，陕西师范大学生命科学学院，陕西西安 710062;
2.安康学院农学与生命科学院，陕西安康 725000)
摘 要:研究了七叶鬼灯檠根状茎的挥发油及不同提取物的体外抑菌活性，为七叶鬼灯檠资源开发利用提供科学依
据。采用滤纸片法和牛津杯法对七叶鬼灯檠根状茎挥发油及其甲醇、丙酮和乙酸乙酯提取物体外抑菌能力进行评价。
结果表明，七叶鬼灯檠根状茎挥发油表现出较强的抑菌活性，对肺炎克雷伯氏菌抑制作用最强，其次为巨大芽孢杆菌
和粘红酵母，抑菌圈直径分别为(29.11 ± 0.31)、(26.77 ± 0.35)、(26.20 ± 0.62)mm。在不同溶剂提取物中，丙酮提取物
和甲醇提取物均有明显的抑菌效果，解脂假丝酵母对提取物最敏感。七叶鬼灯檠的挥发油及提取物含有天然抑菌活
性物质，具有光谱的抑菌效果，值得进一步开发利用。
关键词:七叶鬼灯檠，挥发油，提取物，抑菌活性
Study on antimicrobial activities of the essential oil
and various extracts of Rodgersia aesculifolia Batalin
WANG Jian1，2，HUANG Hui1，WANG Zhe－zhi1，ZHANG Yuan1，*
(1.Key Laboratory of Ministry of Education for Medicinal Resources and Natural Pharmaceutical Chemistry，
College of Life Sciences，Shaanxi Normal University，Xi’an 710062，China;
2.College of Agriculture and Life Sciences，Ankang University，Ankang 725000，China)
Abstract:Examined the antimicrobial activities of the essential oil and various extracts of Rodgersia aesculifolia
Batalin.Disc diffusion method and agar well － diffusion method were used to evaluate the in vitro antimicrobial
activities of the essential oil and various extracts(methanol extract，acetone extract and acetoacetate extract)of R.
aesculifolia，respectively.The results indicated that the essential oil showed strong antimicrobial activity against
Klebsiella pneumoniae subsp.Pneumoniae(with(29.11 ± 0.31)mm inhibition zone diameter).The oil was found to
possess high antimicrobial activities against Bacillus megaterium(26.77 ± 0.35)mm and Rhodotorula glatinis(26.20
± 0.62)mm. Among the different extracts，acetone and methanol extracts exhibited significant antimicrobial
activities against all tested microbial species，especially against Candida lipolytica.The essential oil and extracts of
R.aesculifolia has potential utilities as a natural antibacterial substance，and it is of worth for further study.
Key words:Rodgersia aesculifolia Batalin;essential oil;extract;antimicrobial activity
中图分类号:TS201.2 文献标识码:A 文 章 编 号:1002－0306(2013)01－0074－04
收稿日期:2012－07－02 * 通讯联系人
作者简介:王健(1969－) ，男，博士，副教授，主要从事植物基因工程及
转基因植物研究。
基金项目:陕西省自然科学基金(2011K－16－02－01) ;陕西省教育厅自
然科学专项基金(11JK0610) ;安康学院高层次人才专项基
金(AYQDZR200926)。
七叶鬼灯檠(Rodgersia aesculifolia Batalin)为虎
耳草科(Saxifragaceae)鬼灯檠属多年生草本植物，以
根状茎入药，称作索骨丹［1］。七叶鬼灯檠药用历史悠
久，作为我国传统的民间草药用于治疗跌打损伤、月
经不调和风湿性关节炎等症［2－3］。目前国内外有关
七叶鬼灯檠的研究主要集中在资源调查、化学成分
分析及药理药效等方面。对于七叶鬼灯檠抑菌活性
的研究，许多学者已经开展了一些有益的工作。七
叶鬼灯檠的酸水解提取液对金黄色葡萄球菌、绿脓
杆菌、大肠杆菌、福氏痢疾杆菌均有抑制作用，而醋
酸乙酯、丙酮提取液则对肺炎克雷伯氏菌和胸膜肺
炎杆菌等有一定的抑制作用［4］。胡振英等［5］研究了
七叶鬼灯檠不同溶剂提取物对畜禽常见病原菌的抑
制作用，结果表明丙酮和乙酸乙酯提取物的抑菌效
果最显著。蔡正军等［6］对七叶鬼灯檠乙醇提取物及
其五个萃取部位进行抑菌研究，发现乙醇提取物和
乙酸乙酯萃取部位对受试菌均有较强的抑菌活性，
在受试菌中对绿脓杆菌的抑制活性最强。韩建华
等［7］研究发现七叶鬼灯檠对小麦赤霉病菌、玉米大斑
病菌和辣椒疫霉病菌均有较强的抑菌活性，对菌丝
生长的抑制率分别为 68.31%、100%、88.76%，对受
DOI:10.13386/j.issn1002-0306.2013.01.029
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试菌孢子萌发抑制作用均达 100%。由于同一植物
不同提取部位对病菌的抑制程度不同，同一植物相
同溶剂的提取物对不同的病原菌的抑制能力也有差
异［8－9］，七叶鬼灯檠不同提取物的抑菌活性值得深入
研究。为了更好的利用秦巴山区丰富的七叶鬼灯檠
资源，本文采用滤纸片法和牛津杯法评价了七叶鬼
灯檠根状茎的挥发油及其不同提取物对 8 种常见菌
的体外抑菌活性，以期为开发新型植物源抑菌剂提
供科学依据。
1 材料与方法
1.1 材料与仪器
七叶鬼灯檠于 2008 年 10 月初采自陕西户县，经
陕西师范大学生命科学学院田先华教授鉴定为虎耳
草科鬼灯檠属植物七叶鬼灯檠(Rodgersia aesculifolia
Batalin )。 白 色 葡 萄 球 菌 (Staphylococcus
epidermidis)、凝结芽孢杆菌(Bacillus coagulans)、巨大
芽孢杆菌 (Bacillus megaterium)、解脂假丝酵母
(Candida lipolytica )、粘 红 酵 母 (Rhodotorula
glatinis)、酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae) 西安
微生物所;肺炎克雷伯氏菌(Klebsiella pneumoniae
subsp. Pneumoniae)、表皮葡萄球菌(Staphylococcus
epidermidis) 北京微生物所;二甲基亚砜、无水硫酸
钠、甲醇、丙酮、乙酸乙酯 均为国产分析纯;盐酸四
环素、制霉菌素 Wolsen公司;其他试剂均为国产分
析纯。
TU－1810 紫外分光光度计 北京普析通用仪器
有限责任公司;BS－1EA振荡培养箱 国华电器有限
公司;FZ102 微型植物粉碎机 黄骅市中兴有限责任
公司;Q /BKYY31－2000 型电热恒温鼓风干燥箱 上
海跃进医疗器械厂;SL202N型药物电子天平 上海明
桥精密科学仪器有限公司;超净工作台 苏州净化设
备有限公司;RII旋转蒸发仪 瑞士 BUCHI公司。
1.2 实验方法
1.2.1 样品制备 挥发油的提取［10］:将新鲜的七叶
鬼灯檠根状茎自然阴干，粉碎，称取 250g放入共水蒸
馏装置中进行提取，提取时间 6h，收集的挥发油用无
水硫酸钠干燥，密封，4℃保存备用。
不同溶剂提取物的制备［11］:采用索氏提取的方
法，用石油醚对七叶鬼灯檠根状茎粉末脱脂至无色，
然后依次用乙酸乙酯、丙酮和甲醇分别索氏提取 8h，
将相应的提取物旋转蒸发回收溶剂，浓缩液用干燥
箱烘干(45～50℃) ，分别得七叶鬼灯檠根状茎的乙酸
乙酯、丙酮和甲醇提取物。
1.2.2 七叶鬼灯檠根状茎挥发油及不同溶剂提取物
的抑菌活性检测
1.2.2.1 培养基的制备 牛肉膏蛋白胨培养基(适用
于细菌) :精确称取蛋白胨 10g、牛肉膏 3g、氯化钠
5g、琼脂 15～20g，配制 1000mL 培养基，调节 pH7.0～
7.2，微波加热使充分溶解混匀，分装，121℃ 灭
菌 20min。
豆芽汁蔗糖培养基(适用于酵母) :称取新鲜豆
芽 100g，放入烧杯中，加蒸馏水煮沸约 30min，用纱布
过滤，然后定容至 1000mL，再加入蔗糖 50g，琼脂
15～20g，煮沸熔化，分装，121℃灭菌 20min。
1.2.2.2 菌悬液的制备 菌种活化:取实验菌种在相
应培养基斜面上活化。其中细菌在 37℃培养 24h
(肺炎克雷伯氏菌 30℃) ，酵母菌在 28℃培养 48h。
菌悬液的制备:在无菌条件下，取活化的菌种用
适量无菌生理盐水(0.9%)稀释，使菌悬液浓度为
106～108CFU /mL。
1.2.2.3 样品溶液的制备 分别将甲醇提取物、丙酮
提取物和乙酸乙酯提取物用二甲基亚砜配制成
150mg /mL的溶液，同时配制浓度为 0.5mg /mL 盐酸
四环素和制霉菌素的二甲基亚砜溶液作阳性对照。
上述样品溶液皆用 0.45μm滤膜过滤除菌。
1.2.2.4 七叶鬼灯檠根状茎挥发油的抑菌活性检测
方法 采用滤纸片法［12］。将各菌种接种于牛肉膏蛋
白胨培养基(酵母接种于豆芽汁培养基) ，培养
18～24h后，制备成浓度为 106 ～107cfu /mL 的菌悬液。
取 0.1mL菌液均匀涂布于平板上，取已灭菌的直径
为 6mm 滤纸片，浸于 15μL 的挥发油(已用 0.45μm
滤膜过滤除菌) ，贴于平板上，以盐酸四环素(细菌)
和制霉菌素(酵母)作为阳性对照。4℃放置 2h 后，
于 37℃恒温培养 24h(酵母在 28℃恒温培养 48h)。
测其抑菌圈直径。实验重复 3 次。
1.2.2.5 七叶鬼灯檠根状茎不同溶剂提取物的抑菌
活性检测方法 采用牛津杯法［12］。涂平板后，等距
离放入 3 个灭菌的牛津杯(规格 10mm × 7.8mm ×
6mm) ，逐一加入各样液 50μL，分别以 DMSO 或 PBS
为阴性对照，以盐酸四环素(细菌)和制霉菌素(酵
母)作为阳性对照。4℃放置 2h后，细菌 37℃恒温培
养 24h(酵母 28℃恒温培养 48h)。测量抑菌圈直径。
实验重复 3 次。
2 结果与分析
2.1 七叶鬼灯檠根状茎挥发油的抑菌活性分析
如表 1 所示，七叶鬼灯檠根状茎挥发油对表皮
葡萄球菌、巨大芽孢杆菌、凝结芽孢杆菌、肺炎克雷
伯氏菌、白色葡萄球菌、酿酒酵母、粘红酵母和解脂
假丝酵母具有不同强度的抑制作用。其中，对肺炎
克雷伯氏菌抑制作用最强，抑菌圈直径达到(29.11 ±
0.31)mm，其次为巨大芽孢杆菌，抑菌圈直径为
(26.77 ± 0.35)mm，抑菌活性均与阳性对照盐酸四环
素相当(p ＞ 0.05)。挥发油对表皮葡萄球菌的抑菌效
果(抑菌圈直径为(22.67 ± 0.61)mm)显著强于阳性
对照盐酸四环素(p ＜ 0.05)。七叶鬼灯檠根状茎挥发
油对受试的 3 种酵母也有一定的抑制作用，其中对
粘红酵母的抑菌作用最强，抑菌圈直径达到(26.20 ±
0.24)mm，与阳性对照盐酸四环素相当(p ＞ 0.05)。
2.2 七叶鬼灯檠根状茎不同提取物的抑菌活性分析
如表 2 所示，七叶鬼灯檠根状茎的甲醇提取物、
丙酮提取物和乙酸乙酯提取物对表皮葡萄球菌、巨
大芽孢杆菌、凝结芽孢杆菌、肺炎克雷伯氏菌、白色
葡萄球菌、粘红酵母、解脂假丝酵母具有不同强度的
抑菌活性，而对酿酒酵母均未表现出抑制作用。其
中，丙酮提取物的抑菌效果最强，对供试菌种(酿酒
酵母除外)均有明显的抑菌效果，对解脂假丝酵母的
76
表 2 七叶鬼灯檠根状茎不同提取物的抑菌圈直径(mm，n = 3)
Table 2 Diameter of inhibition zone of different extracts from R.aesculifolia(mm，n = 3)
菌种 甲醇提取物 丙酮提取物 乙酸乙酯提取物 四环素 /制霉菌素 DMSO
表皮葡萄球菌 19.62 ± 0.53 21.81 ± 0.35* 17.14 ± 0.37* 19.94 ± 0.04 －
巨大芽孢杆菌 18.88 ± 0.53* 19.78 ± 0.28* 19.06 ± 0.52* 23.92 ± 0.12 －
凝结芽孢杆菌 16.94 ± 0.75* 18.96 ± 0.57* 15.68 ± 0.65* 27.12 ± 0.11 －
肺炎克雷伯氏菌 19.12 ± 0.42* 24.52 ± 0.62* 21.42 ± 0.26 22.21 ± 0.39 －
白色葡萄球菌 14.62 ± 0.46* 18.34 ± 0.61* 13.42 ± 0.46* 24.74 ± 0.21 －
酿酒酵母 － － － 25.08 ± 0.14 －
粘红酵母 19.56 ± 0.28* 21.72 ± 0.29* 12.26 ± 0.19* 25.64 ± 0.27 －
解脂假丝酵母 21.57 ± 0.37 25.10 ± 0.52* 20.89 ± 0.74* 23.82 ± 0.09 －
抑菌活性最强，抑菌圈直径达到(25.10 ± 0.52)mm，
比阳性对照制霉菌素(抑菌圈直径为(23.82 ±
0.09)mm)的抑菌效果更为显著(p ＜ 0.05)。另外，对
常见的呼吸道感染菌表皮葡萄球菌和肺炎克雷伯氏
菌的抑制效果也显著强于阳性对照(p ＜ 0.05) ，其抑
菌圈直径分别达到(21.81 ± 0.35)mm 和(24.52 ±
0.62)mm。甲醇提取物的抑菌效果相对丙酮提取物
较弱，对解脂假丝酵母和表皮葡萄球菌的抑制作用
较为明显，抑菌圈直径分别为(21.57 ± 0.37)mm 和
(19.62 ± 0.53)mm，与阳性对照相当(p ＞ 0.05)。乙
酸乙酯提取物的抑菌活性相对最弱，对供试菌种的
抑菌活性普遍低于阳性对照(p ＜ 0.05) ，仅对肺炎克
雷伯氏菌的抑菌作用相当于阳性对照盐酸四环素
(p ＞ 0.05)。
表 1 七叶鬼灯檠根状茎挥发油的抑菌圈直径(n = 3)
Table 1 Diameter of inhibition zone
of R.aesculifolia essential oil(n = 3)
菌种
挥发油
(mm)
四环素 /制霉
菌素(mm)
DMSO
表皮葡萄球菌 22.67 ± 0.61* 19.89 ± 0.01 －
巨大芽孢杆菌 26.77 ± 0.35 28.62 ± 0.21 －
凝结芽孢杆菌 25.29 ± 0.78* 28.27 ± 0.43 －
肺炎克雷伯氏菌 29.11 ± 0.31 28.20 ± 0.12 －
白色葡萄球菌 25.62 ± 0.44* 28.70 ± 0.72 －
酿酒酵母 22.36 ± 0.51* 25.32 ± 0.14 －
粘红酵母 26.20 ± 0.24 28.40 ± 0.17 －
解脂假丝酵母 19.36 ± 0.31* 23.34 ± 0.89 －
注:“－”表示无抑菌活性;“* ”表示与阳性对照比较差异显著
p ＜ 0.05;表 2 同。
3 讨论
本实验对七叶鬼灯檠根状茎的挥发油及其不同
溶剂提取物的抑菌活性进行了初步研究。结果表
明，七叶鬼灯檠根状茎的挥发油对供试的 8 种菌均
有较强抑菌活性，尤其对表皮葡萄球菌的抑制作用
显著强于阳性对照。据报道鬼灯檠挥发油的化学成
分较为复杂，包括多种脂肪酸类化合物、烷烃类化合
物、萜类化合物、胺类化合物、醛酮类化合物，以及少
量的芳香族化合物和氧化物［13］，其抑菌活性物质的
分离鉴定以及抑菌机理还有待于进一步研究。另
外，七叶鬼灯檠丙酮提取物和甲醇提取物均表现出
较强的抑菌活性，其中丙酮提取物对常见的呼吸道
感染菌表皮葡萄球菌和肺炎克雷伯氏菌有极强的抑
制作用，抑菌效果优于阳性对照。由于七叶鬼灯檠
丙酮提取物及其甲醇提取物的抑菌谱较广，抑菌作
用强，可初步推测中等极性的丙酮提取部位和较大
极性的甲醇提取部位为七叶鬼灯檠抑菌作用的主要
活性部位。研究表明鬼灯檠属植物的根状茎中含有
岩白菜素、7－甲氧基岩白菜素、鬼灯檠酯、麦角甾醇、
紫丁香酸、没食子酸、熊果苷、谷甾醇、芳樟醇和槲皮
素等化学物质［14－16］。其主要成分岩白菜素具有抗炎、
抗溃疡、护肝、抗凝血、止咳等功效［17］。因此，我们推
测岩白菜素为七叶鬼灯檠根状茎提取物的主要抑菌
成分，但其抑菌活性还有待进一步的研究证实。
4 结论
七叶鬼灯檠根状茎的挥发油及提取物含有天然
抑菌活性物质，具有光谱的抑菌效果，值得进一步开
发利用。本研究为新型植物源抑菌药物的筛选、抑
菌谱测定和提取过程的追踪提供了可供参考的数据
资料，为深入研究七叶鬼灯檠的抑菌活性物质、进一
步开发利用该资源提供了理论依据。
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(下转第 84 页)
84
选出配方 2 最佳参数为面粉配料比为 0.92∶1，加水量
为 40%，加水温度为 36.15℃，预期值为 0.395671;验
证实验平均响应值为 0.382640，与预测值相符度为
96.71%;优选出配方 3 最佳参数为面粉配料比为
0.5∶1，加水量为 48%，加水温度为 37.77℃，预期值为
0.477964;验证实验平均响应值为 0.546933，与预测
值相符度为 98.28%。本研究结果可为后期杂粮杂
豆食品开发奠定技术研究基础。
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