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不同生长期山里红叶片绿原酸含量的变化



全 文 :赵 权. 不同生长期山里红叶片绿原酸含量的变化[J]. 江苏农业科学,2013,41(4) :239 - 240.
不同生长期山里红叶片绿原酸含量的变化
赵 权
(吉林农业科技学院,吉林吉林 132101)
摘要:以山里红叶为试验材料,研究不同生长期山里红叶片绿原酸含量的变化。结果表明,山里红叶中绿原酸含
量呈现先增长后下降的趋势,即从 7 月 25 日开始呈增加的变化趋势,至在 8 月 10 日达到最大,为 240. 5 μg /g,然后开
始下降,至 9 月 27 日达到最低值,为 90. 4 μg /g。
关键词:山里红;叶片;绿原酸
中图分类号:S567 文献标志码:A 文章编号:1002 - 1302(2013)04 - 0239 - 02
收稿日期:2012 - 10 - 18
基金项目:国家工业与信息化部长白山道地药材生产技术公共服务
平台建设项目。
作者简介:赵 权(1967—) ,男,吉林永吉人,博士,副教授,主要从事
植物资源方面的研究。E - mail:zhaoquanbs@ 163. com。
山里红(Crataegus pinnatifida Bge. var. major N. E. Br.)
属蔷薇科山楂属植物,为山楂的变种[1 -2],果实质硬肉薄,味酸
涩,生于山坡林缘、河岸灌丛,分布于黑龙江、吉林、辽宁、内蒙
古、河南、河北、山东、山西、陕西、浙江等地,主要为野生,现已
用作绿化或防风固沙等。山里红叶片中能分离出槲皮素、金丝
桃苷、异槲皮素、芸香苷、牡荆素、绿原酸等[3]。绿原酸是由咖
啡酸与奎尼酸生成的缩酚酸,是植物体在有氧呼吸过程中经
莽草酸途径产生的一种苯丙素类化合物,相对分子量为
354. 3,熔点 208 ℃,易溶于水、醇、丙酮等溶剂。绿原酸药用
历史悠久,具有抗菌、抗病毒、保肝利胆之功效等。绿原酸及
其衍生物清除自由基的效果比抗坏血酸、咖啡酸和生育酚
(维生素 E)更强,具有抗菌、抗病毒、增高白血球、保肝利胆、
抗肿瘤、降血压、降血脂、兴奋中枢神经系统等作用[4 - 5]。目
前,利用 HPLC技术对山楂果实和叶片中绿原酸含量进行分
析检测已有报道[6 - 8],但是对山里红果实和叶片中绿原酸含
量的检测鲜见报道,特别是关于山里红生长期叶片中绿原酸
含量的变化未见报道。本试验以山里红的叶片为材料,探讨不
同时期山里红叶片中绿原酸含量的变化趋势,为山里红的叶
片中绿原酸综合开发利用和叶片最佳采收期提供理论依据。
1 材料与方法
1. 1 材料
本试验于 2012 年在吉林农业科技学院南校区进行,所用
山里红采自南校区,选择长势好的山里红分别于 2011 年 7 月
25 日、8 月 10 日、8 月 26 日、9 月 11 日、9 月 27 日采收叶片,
放入 - 80 ℃冰箱冷藏,备用。
1. 2 药品和试剂
绿原酸对照品(中国药品生物制品检定所,批号 110753 -
200212)、95%乙醇(分析纯)、甲醇(色谱纯)、乙腈(色谱
纯)、0. 4%磷酸、蒸馏水。
1. 3 试验方法
1. 3. 1 绿原酸的提取 绿原酸的提取参考任丽平等的方
法[6,9]。用研钵将干燥的山里红叶研碎,称取 5. 0 g,用石油醚
脱脂后加乙酸乙酯 100 mL,超声波提取 30 min,提取 2 次,控
制温度在 35 ℃左右,过滤,合并滤液,定容于 200 mL;用旋转
蒸发仪蒸馏,用色谱甲醇定容于 5 mL;将提取溶液用
0. 22 μm 滤膜过滤,取 20 μL上样。
1. 3. 2 标准曲线的绘制 将绿原酸标准品溶于甲醇,配成浓
度均为 0. 092 mg /mL的标准储备液。吸取标准储备液 1、3、
7、9、15 mL,用甲醇稀释至 50 mL容量瓶中,用 0. 2 μm滤膜过
滤,取 10 μL上样。以绿原酸浓度为纵坐标,峰面积为横坐标
进行线性回归分析,绘制绿原酸的标准曲线。
1. 3. 3 色谱条件 高效液相条件参考任丽平的方法[6]。
VP - ODS C18柱(4. 6 mm × 150 mm) ,流动相为乙腈 ∶ 0. 4%
磷酸 = 17 ∶ 83,0. 45 μm 滤膜抽滤,梯度洗脱,流速
1. 0 mL /min,柱温 25 ℃,检测波长 327 nm,灵敏度 0. 5 AUFS。
2 结果与分析
由图 2 可知,绿原酸标品的保留时间为 6. 24 min。不同
时期山里红叶绿原酸的保留时间分别是 6. 231、6. 146、
6. 109、6. 207、6. 276 min,与绿原酸标准品的保留时间
6. 24 min 比较接近,可以断定此峰为绿原酸。
将各样品中绿原酸的峰面积代入标准曲线,计算得出各样
品中绿原酸的含量(图 3)。由图 3 可见,随着叶片的生长,绿
原酸含量不断变化,呈先增长后下降的趋势,从 7 月 25 日至 8
月 10日逐渐上升,于 8 月 10 日达到最高,为 240. 5 μg /g;8 月
10—26 日开始缓慢下降,8 月 26 日至 9 月 27 日开始急剧下
降,于 9 月 27 日达到最低,为 90. 4 μg /g。
—932—江苏农业科学 2013 年第 41 卷第 4 期
DOI:10.15889/j.issn.1002-1302.2013.04.049
3 结论
研究不同时期植物有效成分的变化,对确定目标产物最
佳采收期具有重要意义。本试验对吉林地区 7 月 25 日至 9
月 27 日山里红叶片中绿原酸含量变化进行检测分析,得到了
8 月 10 日绿原酸含量达到最高(240. 5 μg /g)的结论。而英
锡相认为,2 个不同产地(辽中、辽阳)山里红叶从开花前期,
即从 2006 年 5 月 20 日至 10 月 22 日,绿原酸含量于 10 月
16—22 日最高,约 3 mg /g,比本研究高出 10 倍以上,而且不
同产地含量差别很大[3]。胡志国等采用高效液相色谱技术
对山东、河南、江苏、云南、河北等 5 个产地山楂果实中绿原酸
含量进行检测,其绿原酸含量在 29. 06 ~ 32. 21 mg /g 之间,比
吉林地区山里红绿原酸含量约高 100 倍[7]。本试验所用高效
液相检测方法已用于检测长白忍冬、金银花、山葡萄种子等的
绿原酸含量,方法基本合理。本试验山里红叶片中绿原酸含
量较低,可能是由当年的气候条件、提取工艺不合理、高效液
相条件不合理等造成的,今后还应加强研究,为合理开发山里
红资源提供借鉴。
参考文献:
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—042— 江苏农业科学 2013 年第 41 卷第 4 期