全 文 ：第 8 期
第 51 卷第 8期
2012 年 4 月
湖北农业科学
Hubei Agricultural Sciences
Vol． 51 No.8
Apr．，2012
收稿日期：2012－02－06
作者简介：郑永春（1974－），男，吉林抚松人，讲师，硕士，主要从事药用植物栽培选育和加工推广的教学研究，（电话）13944608804（电子信箱）
zhengyongchun2008＠163．com；通讯作者，薛晓丽（1970－），高级实验师，硕士，主要从事药物化学的研究与教学工作，（电话）
13844605718（电子信箱）lilyxue4222＠hotmail．com。
紫叶李（Prunus cerasifera）又名红叶李，为蔷薇
科李属落叶小乔木，原产亚洲西南部，暖温带树种，
喜阳光，为著名色叶观赏类树种，在我国华北以南
地区广为栽培。 文献报道紫叶李叶中花青素含量为
0．525％［1］，表明该树种也可作为潜在的花青素资源。
试验测定了紫叶李浸提液中花青素的含量，为以紫
叶李为代表的色叶类树种花青素的进一步研究，实
现多元化开发以及产业化提供科学依据。
1 材料与方法
1．1 样品采集
于 2010 年 5 月 25 日、7 月 3 日、8 月 26 日、10
月 10 日选择同一株健壮紫叶李植株的上、 下两个
不同部位， 采集其同一纵线水平的外围新鲜成年
叶（舒展柔软、色泽浓艳、洁净无虫洞斑痕）100 g，经
吉林农业科技学院中药学院马尧教授鉴定为蔷薇
科李属紫叶李。 剪掉叶柄，将叶片摊于报纸上置通
风避光阴凉处阴干至叶片颜色为灰紫色， 质地干
脆，揉之即碎并伴有沙沙声为准；将阴干的叶片粉
碎，过 60 目筛，装入贴好标签的塑封袋中（73 g），备
用。
1．2 试剂与仪器
甲醇（色谱纯，Fisher）、乙腈（色谱纯，Fisher）、矢
车菊－3－葡萄糖苷标准品（纯度＞95％，Sigma），其他
常规试剂为分析纯。
高效液相色谱仪， 配备 LC－20AT 泵，SPD－20A
紫外检测器以及 LC－Solution 工作站 （日本岛津）、
AL204 分析天平 （瑞士梅特勒）、UV－1700 紫外－可
见分光光度计 （日本岛津）、LG－08A 高速中药粉碎
机（瑞安市百信药机厂）。
紫叶李叶中花青素含量动态变化的研究
郑永春 a，邵梦茹 a，薛晓丽 b
（吉林农业科技学院，a．中药学院；b．实验中心，吉林 吉林 132101）
摘要：采集不同时期、不同部位紫叶李（Prunus cerasifera）叶，以酸性甲醇（含 1％盐酸，体积比）浸提，以高
效液相色谱法测定提取液中的花青素含量并进行统计分析。 结果表明，同一部位叶花青素含量随着温度
的变化而发生显著的变化；同一时期花青素含量表现为上部位叶中含量高于下部位叶，温度、光照是影
响花青素合成的重要因素。
关键词：紫叶李（Prunus cerasifera）；花青素；高效液相色谱法；温度；光照
中图分类号：Q946．83＋6 文献标识码：A 文章编号：0439－8114（2012）08－1675-03
Dynamic Analysis of Anthocyanidin in Leaves of Prunus cerasifera
ZHENG Yong－chuna，SHAO Meng－rua，XUE Xiao－lib
（a．College of Traditional Chinese Medicine；b． Laboratory Center，Jilin Agricultural Science and Technology University，Jilin 132101，Jilin，China）
Abstract： The leaves of Prunus cerasifera in different periods and positions were collected， and the content of anthocyanidin
in leaf was determined by HPLC after extracted by methanol （containing 1％ HCl，V ／ V）， then the statistics analysis was
analysis carried out． The results showed that the contents of anthocyanidin deposited in the same position changed as temper-
ature changed． The contents in the top position of leaves were higher than in the bottom position of leaves． As a result， illu-
mination and temperature had great influence on the synthesis of anthocyanidin．
Key words： Prunus cerasifera； anthocyanidin； HPLC； temperature； illumination
DOI:10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2012.08.048
湖 北 农 业 科 学 2012 年
1．3 方法
1．3．1 样品提取 将不同时期的上、下两部分叶片
粉末分别准确称量 1．000 g于试管中，加入 20 mL甲
醇溶液（含 1％盐酸，体积比，下同）提取液，轻轻混
匀。 将试管置于 4 ℃避光浸提 12 h，过滤，加入提取
液定容至 50 mL后，冷藏备用。所有样品平行处理 3
份。
1．3．2 检测波长 精确量取 1．3．1 中的提取液 1
mL，用 1％盐酸甲醇溶液定容至 10 mL，进行紫外－
可见光谱扫描，取最大吸收波长为检测波长。
1．3．3 色谱条件 C18 色谱柱 （150 mm × 4．6 mm，
5μm）， 乙腈 ／ 0．4％磷酸 （12 ／ 88， 体积比）， 0．8 mL ／
min，检测波长 520 nm，进样量 20 μL，室温分析。
1．3．4 标准曲线 称取矢车菊－3－葡萄糖苷 10 mg
左右，以上述提取液溶解，制备 1 mg ／ mL 的标准储
备液。 分别量取上述标准储备液 0．01、0．03、0．05、
0．07、0．09 mL，用提取液精密配制浓度为 0．01、0．03、
0．05、0．07、0．09 mg ／ mL 的系列标准溶液， 在上述实
验条件下，注入色谱仪。 以浓度为横坐标，峰面积为
纵坐标， 做标准曲线。 回归方程 y＝9．350 4 e－005×x＋
1．531 4，R＝0．999 9。 矢车菊－3－葡萄糖苷在 0．01～
0．09 mg ／ mL 范围内呈现良好的线性关系。
1．3．5 样品测定 精确量取 1．3．1 中的花青素提取
液 1 mL，用提取液定容至 10 mL，混匀后 ，经 0．22
μm微孔滤膜过滤，并进行 HPLC分析。
2 结果与分析
2．1 花青素的定性鉴定
紫叶李提取液的紫外－可见光谱图见图 1，由图
1 可知， 紫叶李提取液在 515 nm 处有最大吸收峰，
与花青素的最大吸收峰相符，表明样品提取液中含
有花青素。 利用高效液相色谱法确定紫叶李提取液
中含有花青素， 将其保留时间与标准品矢车菊－3－
葡萄糖苷进行比对，结果表明样品在 13．5 min 左右
出单一峰（图 2，图 3），与标准品一致，结果表明紫
叶李提取液中含有花青素。
2．2 紫叶李提取液中花青素动态分析
通过对紫叶李叶上下两个部位不同时期的花
青素含量进行方差分析，结果见表 1。 由表 1 可知，
花青素含量平均值间差异均达 0．01 显著水平，即紫
叶李叶上下两个部位不同时期的花青素含量存在
极显著的变化。 对不同时期紫叶李上下两个部位叶
的花青素含量进行独立样本 t 检验 ［2］，结果见表 2。
由表 2 可知，其花青素含量平均值间差异均达 0．01
显著水平，即同一时期紫叶李上下两部位叶中的花
青素含量也存在极显著的变化。
2．3 紫叶李叶中不同时期不同部位花青素含量的
动态变化分析
由图 4 可知，花青素含量随着时期不同，呈先
上升后下降再上升的趋势。 由于 2010 年春季吉林
气温大幅度低于往年，原本 4 月中旬发芽的紫叶李
推迟到 5 月上旬，5 月 20 号左右第一批叶成年，以
表 1 紫叶李上、下部位叶中花青素含量的方差分析
（F=423.827）
采集时间
10-10
08-26
07-03
05-25
部位
上
下
上
下
上
下
上
下
平均数//mg/g
2.15
1.98
1.71
1.52
1.85
1.62
1.41
1.23
α=0.05
a
a
c
c
b
b
d
d
α=0.01
A
A
C
C
B
B
D
D
图 2 矢车菊－3－葡萄糖苷标准品色谱图
4.304
4.000
3.000
2.000
1.000
0.000
吸
光
度
//A
.u
.
200.00 300.00 400.00 500.00 600.00
波长//nm
图 1 紫叶李提取液光谱扫描图
40
35
30
25
20
15
10
5
0
吸
收
强
度
//m
V
0.0 2.5 5.0 7.5 10.0 12.5 15.0 17.5 20.0 22.5 25.0 27.5
时间//min
13.316
100
75
50
25
0
吸
收
强
度
//m
V
0.0 5.0 10.0 15.0 20.0 25.0 30.0 35.0
时间//min
图 3 紫叶李提取液色谱图
1676
第 8 期
（责任编辑 周有祥）
表 2 不同时期紫叶李叶中不同部位花青素含量的 t 检验表
采集时间
05-25
07-03
08-26
10-10
部位
上
下
上
下
上
下
上
下
平均值//mg/g
1.41
1.23
1.85
1.62
1.71
1.52
2.15
1.98
t
10.67
27.90
10.26
5.93
P
＜0.01
＜0.01
＜0.01
＜0.01
上层叶为例，其花青素含量为 1．41 mg ／ g；从 5 月 25
日至 7月 3日花青素含量逐渐上升，达到 1．85 mg ／ g；
这段时间花青素可能取决于植株本身的生长发育
情况或者其他气候因素。 莫魏［3通过测量同属植物
紫叶矮樱叶花青素含量发现，花青素含量随着叶片
生长发育呈递增趋势。
从 7 月 3 日至 8 月 26 日这段持续高温时期，
花青素含量有所回落；进入秋季后，随着气温的下
降，花青素含量上升明显，10 月 10 日叶花青素含量
高达 2．15 mg ／ g，说明低温条件更有利于花青素的形
成，这与早期研究发现基本一致［3，4］。
由图 5 可知，上位叶的花青素含量明显高于下
位叶，且夏季至冬季花青素含量的动态变化趋势与
日照时数基本一致，这可能与上位叶片接受光强较
下位叶多、大有关。 因此，光照是影响花青素含量的
重要要素，适当延长光照时间或增大光照强度可以
有效增加花青素含量。 这与史宝胜等［5］将长时间处
于弱光条件下的紫叶李置于全光照条件下，发现其
叶片的次生代谢显著增强，多酚、类黄酮、花色素苷
含量均呈急剧增加的结果一致。
3 小结与讨论
同一部位叶花青素含量随着时期的变化而变
化，且各时期花青素含量均存在显著差异。 特别是
低温有利于花青素的形成，因此，温度可能是影响
花青素合成的重要因素。
同一时期花青素含量表现为由上部位叶花青
素含量高于下部位叶，且 4 个时期上下两部位叶花
青素含量均存在显著差异，究其原因，可能是上部
叶受到的光照强度大，光照时间长。 因此适当延长
光照时间或增大光照强度可有效增加花青素含量。
另外有报道称，随光照时间的延长，苯丙氨酸解氨
酶和过氧化物酶酶活性显著增加，从而使叶片中类
黄酮、多酚等物质含量增加，促进花色素苷的合成，
花色素苷、类黄酮、多酚与叶绿素比值均存在显著
上升趋势 ［6］，这可能是紫叶李叶色由绿色逐渐变成
紫红的主要原因所在。 光照可显著增加紫叶李叶片
中可溶性总糖、淀粉含量，且可溶性总糖、淀粉含量
与花色素苷含量之间均呈显著正相关，说明叶片中
的碳水化合物含量的增加可以促进花色素苷的合
成。
综上所述，在开发紫叶李这一色叶树种的花青
素资源时，应选择光照充足的位置进行栽植，才能
使之叶色鲜艳。 采收时则选择当地气温偏低，日照
充足的时期。就吉林省 2010年气候来说，10月上中
旬作为紫叶李叶的最佳采收期。
参考文献：
［1］ 薛晓丽． 紫叶李叶中花青素含量的测定 ［J］． 湖北农业科学，
2010，49（4）：956－958．
［2］ 刘庆武，张小清，罗玉玲，等． 如何用 SPSS、SAS 进行 t 检验的运
算［J］． 湘南学院学报， 2004，6（4）：49－51．
［3］ 莫 魏． 彩叶树种叶片中花青素含量的测定及动态分析［J］． 新
疆农业科学，2007，44（B06）：138－140．
［4］ 李 萍，刘晓芳，黄闽敏，等． 紫叶矮樱叶片色素测定及动态变
化分析［J］． 西北林学院学报，2007，22（5）：23－26．
［5］ 史宝胜，卓丽环，杨建民． 光照对紫叶李叶色发育的影响［J］．东北
林业大学学报，2007，35（4）：16－18．
［6］ 刘国君，仵春涛，徐 斌． 小苹果休眠期枝条花青素和叶绿素的
含量变化与抗寒关系［J］． 北方园艺，2002，44（5）：58－59．
2.50
2.00
1.50
1.00
0.50
0.00
花
青
素
含
量
均
值
//m
g/
g
05-25 07-03 08-26 10-10
紫叶李叶采集时间
图 4 不同部位紫叶李叶中的花青素含量
25
20
15
10
5
0
本
旬
日
均
温
//℃
上层叶
下层叶
日均温
图 5 光照对紫叶李叶中花青素含量动态变化
2.50
2.00
1.50
1.00
0.50
0.00
花
青
素
含
量
均
值
//m
g/
g
05-25 07-03 08-26 10-10
紫叶李叶采集时间
90
80
70
60
50
40
30
20
10
0
本
旬
日
照
时
数
//h
上层叶
下层叶
日照时数
郑永春等：紫叶李叶中花青素含量动态变化的研究 1677