全 文 ：湖 北 农 业 科 学 2010 年
收稿日期：2009－10－01
作者简介：薛晓丽（1970－），女，吉林永吉人，实验师，硕士，从事药物化学的教学与研究工作，（电话）13844605718（电子信箱）
lilyxue4222＠hotmail．com。
第 49 卷第 4 期
2010 年 4 月
湖北农业科学
Hubei Agricultural Sciences
Vol． 49 No.4
Apr．，2010
紫叶李（Prunus ceraifera cv． Pissardii），又名红
叶李，蔷薇科（Rosaceae）李属落叶乔木。 叶为紫红
色，是良好的彩色观叶树种，具有很高的欣赏价值，
为典型的彩色园林树种。 近年来在我国的园林绿化
方面有较为广泛的应用，相关的科学研究也在深入
开展［1－3］。 目前，对紫叶李的研究较多地放在栽培管
理、病虫害防治等方面 ［4－6］，对于紫叶李叶片中天然
色素——花青素的研究较少，尤其使用高效液相色
谱来测定紫叶李叶提取液中花青素含量的研究国
内尚未见报道。本文以紫叶李叶为试验材料，80％乙
醇为溶剂，采用超声的方法进行提取，使用高效液
相色谱仪对提取液中的花青素进行定性、 定量分
析，希望对紫叶李叶中天然色素的进一步开发提供
参考。
1 材料与方法
1．1 材料
1．1．1 试验材料 紫叶李（采于吉林农业科技学院
药植院内），经专家鉴定为三年生（2006~2009 年）紫
叶李，2009 年 8 月 30 日采叶片洗净放阴凉处阴干
至恒重，用粉碎机粉碎，过 50 目筛，置于干燥器内
备用。
1．1．2 试剂 矢车菊－3－葡萄糖苷 （Sigma， 纯度＞
95％），乙腈（色谱纯，Fisher），磷酸（优级纯），超纯
水，乙醇、甲醇、盐酸（均为分析纯）。
1．1．3 仪器 岛津高效液相色谱仪，岛津 LC－20AT
泵， 岛津 SPD－20A 紫外检测器； 岛津 UV－1700 紫
外－可见光光度计；KQ－250DB 超声波清洗器；梅特
紫叶李叶中花青素含量的测定
薛晓丽
（吉林农业科技学院实验管理中心，吉林 吉林 132101）
摘要：建立高效液相色谱法测紫叶李叶提取液中花青素的成分及含量的方法。 提取用 80％乙醇为溶剂
结合超声的方法，定性、定量分析使用 HPLC 法。 采用岛津 VP－ODS C18（4．6 mm×150 mm）色谱柱；以
4％磷酸∶乙腈（V∶V＝88∶12，pH 值 2．0）为流动相，流速 0．8 mL ／ min；柱温：30℃；检测波长：520 nm。 花青素
标准品的进样浓度在 0．031～3．100 mg ／ mL 的范围内呈现良好的线性关系，R2＝0．999 9， 精密度 （RSD＝
1．954％）高，加标回收率平均值为 97．29％。 高效液相色谱法精密度高，是测定紫叶李叶中花青素含量的
准确、简洁、有效的检测方法。
关键词：高效液相色谱法；紫叶李叶；花青素；含量
中图分类号：S687 文献标识码：A 文章编号：0439－8114（2010）04－0956-02
Determination of the Contents of Anthocyanidin in Prunus cerasifera Leaves
XUE Xiao－li
（Laboratorial Managing Center， Jilin Agricultural Science and Technology College，Jilin 132101， Jilin， China）
Abstract： The components and contents of anthocyanidin in Prunus cerasifera leaves were analyzed by HPLC． The antho-
cyanidin was ultrasonic extracted by 80％ ethylalcohol， separated on SHIMADZU VP－ODS C18 column in 4％ Phosphate-
acetonitrile（pH＝2．0，V ／ V＝88∶12） at 30℃ and 0．8 mL/min， and detected at 520nm． The results showed that there was a good
linear range of 0．031~3．100 mg/mL （R2＝0．999 9）， the content of anthocyanidin in Prunus cerasifera leaves was 26．234 mg
（RSD＝1．954％）， the average recovery was 97．29％． In a conclusion， HPLC was an actually， simple， and effective method to
detect anthocyanidin．
Key words： HPLC； Prunus cerasifera leaves； anthocyanidin； content
DOI:10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2010.04.043
第 4 期
表 1 精密度试验结果（n=5）
编号
峰面积
1
891 616
2
906 534
3
869 124
4
913 816
平均值
893 662
5
887 218
RSD
1.954%
勒 AL204 电子天平； 密理博 Q3 超纯水；BUCHIR－
Ⅱ旋转蒸发仪；雷磁 pHS－25酸度计。
1．2 方法
1．2．1 提取方法 准确称取 5．000 g 处理好的紫叶
李叶干粉→用石油醚渗漉→用乙酸乙酯渗漉→溶
于 150 mL 80％乙醇→称重→超声提取 20 min（3
次， 间隔 30 min）→称重→用 80％乙醇补充损失的
质量→抽滤→减压蒸馏至浸膏→1％盐酸甲醇溶液
溶解浸膏定容至 10 mL 容量瓶中→过 0．22 μm 滤
膜，备用。
1．2．2 花青素定性 准确移取 0．1 mL 提取液于 10
mL容量瓶中，1％盐酸甲醇溶液定容， 用紫外－可见
光光度计进行光谱分析， 设定波长 400~600 nm，扫
描范围-3．99~3．99Abs。
1．2．3 花青素定量 根据紫外－可见光光度计扫描
400~600 nm 范围内的最大吸收峰，用高效液相色谱
仪测定保留时间与标准品对比， 制作标准曲线，采
用外标法定量。
标准曲线的绘制： 精密称取矢车菊－3－葡萄糖
苷标准品适量溶于 1％盐酸甲醇溶液中， 配制成
3．100 mg ／ mL 的标准储备液。 取标准储备液 0．01、
0．05、0．10、0．20、1．00 mL 定容至 1 mL 的 1％盐酸甲
醇溶液中， 配制成浓度分别为 0．031、0．155、0．310、
0．620、3．10 mg ／ mL 的系列标准溶液，将标准溶液用
0．22 μm滤膜过滤， 在下述色谱条件下进样 10 μL。
以矢车菊－3－葡萄糖苷浓度为纵坐标， 峰面积为横
坐标进行线性回归分析，绘制标准曲线：f（X）＝1．102
5×10－7X＋0．142 0，R2＝0．999 9，说明矢车菊－3－葡萄糖
苷的浓度与吸光度在 0．031～3．100 mg ／ mL 的范围内
呈现良好的线性关系。
1．2．4 色谱条件 岛津 VP－ODS C18（4．6 mm×150
mm）； 流动相为 4％磷酸 ∶乙腈 （V∶V＝88∶12，pH 值
2．0），流速为 0．8 mL ／ min，0．45 μm滤膜抽滤，等梯度
洗脱 ； 柱温 30℃ ； 检测波长 520 nm； 灵敏度
1．0AUFS；进样量 10 μL。
1．2．5 提取液中花青素含量的计算 提取液中花
青素含量计算公式如下：x％＝ A·c·V
As·m·103
×f×100％
式中： x—花青素含量；A—样品中花青素峰面
积；c—标准溶液中花青素的浓度（mg/mL）；V—样品
最终定容体积 （mL）；As—标准溶液中花青素峰面
积；m—试样质量（g）；f —稀释倍数。
1．2．6 精密度试验 取浓度为 0．155 mg ／ mL 的标准
溶液，在上述色谱条件下连续重复进样（n＝5），每次
10 μL，记录每次花青素的峰面积，计算峰面积RSD。
1．2．7 加标回收率试验 称取已知花青素含量的
紫叶李叶粉末 3 份， 每份 5．000 g， 分别加入 0．310
mg ／ mL 的标准溶液 0．8、1．0、1．2 mL，按 1．2．1 的方法
提取、定容、过滤，在上述色谱条件下进样 10 μL。记
录每个样品浓度，计算加标回收率及平均值。
2 结果与分析
2．1 光谱扫描
将花青素的标准品 1％盐酸甲醇溶液在紫外－
可见光光度计上 400~600 nm 波段进行扫描， 得到
花青素光谱图， 最大吸收峰所对应的波长为 520
nm，即为花青素的最佳检测波长。 将紫叶李叶提取
液 3 份在波长 400~600 nm 波段扫描， 对扫描图进
行峰检出发现分别在 522、528、520 nm 处有较强的
吸收峰，说明提取液中含有花青素，因此，选择 520
nm为检测花青素的最佳波长。
2．2 花青素定量分析
图 1 为花青素标准品色谱图， 保留时间 6．306
min。 图 2为紫叶李叶提取液的色谱图，其中第 7 个
峰的保留时间是 6．253 min， 与花青素的保留时间
6．306 min 比较接近，可以断定此峰为花青素。 将样
品中花青素的峰面积代入标准曲线，得出样品中花
青素的含量为 2．623 4 mg ／ mL，代入 1．2．5公式，得出
提取液中花青素的质量为 26．234 mg， 提取率为
0．524 7％。
2．3 精密度试验结果
精密度试验结果表明，0．155 mg ／ mL 的标准溶
液的峰面积 RSD 为 1．954％（n＝5），说明该检测方法
精密度高，具体见表 1。
2.5
0.0
m
V
（ ×
10
）
0.0 2.5 5.0 7.5 10.0 12.5
保留时间//min
2.291
6.306
图 1 花青素标准品色谱图
图 2 紫叶李叶提取液色谱图
7.5
5.0
2.5
0.0
m
V
（ ×
10
）
0.0 2.5 5.0 7.5 10.0 12.5
保留时间//min
2.
31
8
3.
73
3
2.
84
1
3.
10
2
4.
95
8
5.
55
7
6.
25
3
7.
80
7
7.
86
7
9.
60
8
10
.2
75
12
.3
65
薛晓丽：紫叶李叶中花青素含量的测定 957
湖 北 农 业 科 学 2010 年
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2．4 加标回收率试验结果
加标回收率试验结果表明，花青素的平均回收
率为 97．29％，RSD 为 0．72％（n＝3），说明该检测方法
精密度高，重现性好，适合用于紫叶李中花青素的
定性、定量分析。 结果见表 2。
3 小结
采用高效液相色谱法可以准确测定紫叶李叶
提取液中花青素的含量。 试验条件采用岛津 VP－
ODS C18（4．6 mm×150 mm）色谱柱，以 4％磷酸－乙
腈（pH值 2．0，V∶V=88∶12）为流动相，流速为 0．8 mL ／
min，柱温：30℃，检测波长：520 nm。 精密度（RSD＝
1．954％）高，回收率平均值为 97．29％。 说明高效液
相色谱法可以准确测定紫叶李叶中花青素的含量，
且此法简单、快捷、准确率高。
在 5．000 g 紫叶李叶中花青素的含量为 26．234
mg，提取率为 0．524 7％。 说明紫叶李这一彩色欣赏
树种中含有丰富的花青素资源，使得紫叶李不仅成
为观赏树种，其叶所含有的丰富花青素还可以提供
大量的天然色素。
参考文献：
［1］ 曹海军． 紫叶稠李在园林中的应用［J］． 农业知识，2005（5）：39．
［2］ 洪 丽，庞松龄． 彩叶树种的分类与园林绿化中的应用［J］． 北
方园艺，2008（3）：182－183．
［3］ 王光全，黄 勇，孟庆杰，等． 紫叶稠李色素提取及测定研究［J］．
食品科学，2007，28（7）：178－181．
［4］ 郝 香． 紫叶李栽培技术［J］． 中国果菜， 2008（6）：13－14．
［5］ 湛文礼． 紫叶李秋冬扦插育苗［J］． 中国林业， 2007（12）：44．
［6］ 王友国． 紫叶李栽培管护技术［J］．河北农业科技，2008（10）：40．
表 2 加标回收率试验（n=3）
编号
1
2
3
样品含量
mg
2.626 8
2.624 1
2.621 0
加对照品量
mg
0.248 0
0.310 0
0.372 0
测得值
mg
2.866 9
2.928 2
2.981 7
回收率
%
96.81
98.09
96.96
平均回收率
%
97.29
RSD
%
0.72
收稿日期：2009－11－10
基金项目：江西省教育厅科技项目（GJJ10022）；江西省数字国土重点实验室开放研究基金（DLLJ201014）
作者简介：陈竹安（1978－），男，福建大田人，讲师，硕士，主要从事地图制图学与地理信息工程研究，（电话）15079449168（电子信箱）zachen＠163．com。
第 49卷第 4期
2010年 4月
湖北农业科学
Hubei Agricultural Sciences
Vol． 49 No.4
Apr．，2010
基于 CASS的大幅面纸质地形图土地面积量算及
精度分析
陈竹安 1，罗亦泳 2，张立亭 1
（1．东华理工大学地球科学与测绘工程学院，江西 抚州 344000；2．东华理工大学长江学院，南昌 330013）
摘要：针对传统的解析法和图解法土地面积量算方法存在的缺点，特别是无法高精度的量算大幅面纸质
地形图土地面积的问题，本文将 CASS 应用于大幅面纸质地形图土地面积量算中，从而提高土地面积量
算的精度。
关键词：土地面积量算；CASS；精度分析
中图分类号：P217 文献标识码：B 文章编号：0439－8114（2010）04－0958-03
Precision Analysis and Measuring Methods of Land Area in Large Paper Topographic
Map Based on CASS
CHEN Zhu-an1，LUO Yi－yong2，ZHANG Li－ting1
（1．Faculty of Geoscience and Survey Engineering， East China Institute of Technology，Fuzhou 344000，Jiangxi，China；
2．Yangtze College， East China University of Technology，Nanchang 330013，China）
Abstract： Due to some disadvantages in the traditional analytical and graphic method for measuring land area， especially in
measuring the land area in large paper topographic map precisely， the application of CASS in measuring the land area in
large paper topographic map was discussed to improve the measuring accuracy．
Key words： calculation of land area； CASS； precision analysis