全 文 ：＊基金项目:湖北省教育厅 2000年重点资助项目(2000A09008);湖北
民院中青年学术基金项目重点资助
　作者单位:1.湖北民族学院医学院生物化学教研室 ,恩施 445000;
2.武汉科技大学医学院;3.河南濮阳教育学院生物系
　作者简介:侯建军(1967-),男 , 土家族 ,湖北省恩施自治州人 ,副
教授 ,硕士 ,主要从事人体及动物生物化学研究。
文章编号:1001-0580(2003)08-0944-02　　中图分类号:R151.4　　文献标识码:A 【实验研究】
火棘对 D-半乳糖小鼠抗氧化作用的影响＊
侯建军1 ,魏文科1 ,黄惠2 ,武模戈3
　　摘　要:目的　研究火棘对 D-半乳糖所致衰老小鼠的抗氧化作用。方法　将小鼠随机分为 4组 , 分别喂以标准
饲料(空白对照组和 D-半乳糖对照组)及标准饲料中添加 15%和 30%的火棘果实粉(分 D-半乳糖火棘组Ⅰ 、Ⅱ2
组), 同时各 D-半乳糖组小鼠每天颈背皮下注射 D-半乳糖 80 mg/ kg ,连续给药造模 42 d 后 , 根据试剂盒说明分别检
测各相关抗氧化指标(MDA , SOD, GSH-Px , GSH)。结果　D-半乳糖火棘组Ⅰ 、Ⅱ两组小鼠心 、肝 、脑的 MDA 含量降
低 ,红细胞 、肝 、脑 SOD的活性升高 ,全血 、肝 GSH-Px活性和 GSH 含量升高 ,胸腺指数回升。结论　火棘有一定的抗
氧化作用 ,并能延缓由 D-半乳糖所致衰老小鼠的衰老过程。
关键词:火棘;D-半乳糖;衰老小鼠模型;抗氧化
Antioxidation effects of pyracantha on aging mice model induced by overdose of D-galactose　HOU Jian-jun , WEI Wen-ke ,
HUANGHui , et al.School of Medicine , Hubei Institute for Nationalities(Enshi 445000 , China)
Abstract:Objective　To study the anti-aging of pyracantha on aging mice model induced with overdose of D-galactose.
Methods　Four groups of mice were fed respectively with standard diet(2 control groups), 85% standard diet plus 15% pyracantha
(group Ⅰ), and 70% standard diet plus 30% pyracantha(group Ⅱ), while the aging model was induced by subaxillary injection of D
-galactose 80 mg/kg for 42 days , the MDA , SOD , GSH-Px , GSH were determinated according to the technical manual of reagent.
Results　At the end of the experiment , the contents of Malondialehyde(MDA)in liver , heart and brain of group Ⅰ and Ⅱ deceased
significantly contrast to D-galactose control group , and the activities of superoxide dismatase(SOD)in red blood cell , liver and brain
increased , the activities of glutathione peroxidase(GSH-Px)and the contents of glutathione(GSH)increased in blood and liver , and
the thymus weight index increased , too.Conclusion　It was suggested that Pyracanthy had some antioxidation and might prolong the
aging process of mice model induced by overdose of D-galactose.
Key words:pyracantha fortuneana;D-galactose;aging model;antioxidation
　　衰老可能是代谢过程中不断产生的自由基的摧毁性连锁
反应的结果。H2O2、OH·、HOO·、R·、RO·、ROO·等自由基会使
细胞膜脂质过氧化 ,产生过氧化脂质(LPO),损伤核酸和蛋白
质 ,加速机体衰老。体内的超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘
肽过氧化物酶(GSH-Px)等抗氧化酶系与维生素 C(VC)、维
生素 E(VE)等物质均能起到消除自由基 、达到抗氧化平衡的
作用〔1〕当自由基代谢失调时 ,则需要补充外源性抗氧化剂加
以调节和治疗 。研究表明 , 野生植物火棘〔Pyracantha for-
tuneana(Maxim.)Li〕火棘总提取物具有清除氧自由基 、增强免
疫力 、增强体力和促进消化功能等作用〔2 , 3〕。 近几年研究发
现 ,火棘具有很大的药用价值及食用开发价值。对火棘化学
成分研究表明 , 火棘含有丰富的黄酮类化合物和植物 SOD、
VC、VE、不饱和脂肪酸 、比较齐全的氨基酸和大量有益的微量
元素〔4〕。本研究拟探讨火棘的抗氧化作用 , 以便为进一步开
发火棘资源提供理论依据。现将研究结果报道如下。
1　材料与方法
1.1　火棘的来源　野生火棘果实于 2001年 2 月采自湖北省
恩施市双河乡大溪村 ,挑选上好果实并风晒干磨粉。
1.2　实验动物　取封闭群昆明种雌性小鼠 80 只 , 由湖北医
科大学(现武汉大学医学院)实验动物中心提供 , 体重 18 ～ 22
g。平衡喂养 1 周后随机分为空白对照组 , 喂以标准饲料(为
湖北省医学科学院动物饲料中心提供);D-半乳糖组 , 喂以
标准饲料:D-半乳糖火棘组Ⅰ ,喂以标准饲料中添加 15%的
火棘果实粉;D-半乳糖火棘组Ⅱ ,喂标准饲料中添加 30%的
火棘果实粉 , 各 D-半乳糖造模组每天颈背皮下注射 D-半
乳糖 80 mg/ kg ,空白对照组同法给生理盐水。每组实验动物
各 20 只 , 4 组均自由饮水 ,实验室温度控制在(20±2)℃, 自然
光照。按上述要求持续给药和喂养42 d〔8〕。
1.3　试剂及测定方法　MDA , SOD, GSH -Px , GSH 测定试剂
盒全部由南京建成生物所提供 , SOD、GSH-Px、GSH 等测定方
法参考试剂盒说明 , 各组织的 MDA 含量用硫代巴比妥酸
(TBA)比色分析法测定 。
1.4　数据分析　实验数据采用 SPSS FOR WINDOWS 10.0 软
件进行 t 检验统计处理。
2　结果
2.1　火棘对小鼠心 、脑 、肝MDA 的影响(表 1)　经过 42 d 给
药和饲养后 , 于末次给药后 24 h , 颈椎脱臼处死动物。用 TBA
比色法测定各组织的 MDA含量 , D-半乳糖组各组织的 MDA
与空白对照组间差异均有显著性意义(P <0.01)。 D-半乳
糖火棘组Ⅰ的心 、肝MDA 与 D-半乳糖组间差异有显著性意
义(P<0.05), D-半乳糖火棘组 Ⅰ 、Ⅱ组间比较各组织的
MDA差异无显著性意义。但 D-半乳糖火棘组Ⅱ各组织的
MDA与 D-半乳糖组间差异均有显著性意义(P<0.01)。
2.2　火棘对小鼠红细胞 、肝 、脑 SOD活性的影响(表 2)　在
末次给药后 24 h 按试剂盒说明书分别测定各组小鼠红细胞 、
肝 、脑 SOD的活性。结果表明:D-半乳糖组各组织 、红细胞
SOD活力水平显著低于空白对照组(P <0.01), D-半乳糖火
944 中国公共卫生 2003年第 19卷第 8期　　Chin J Public Health 2003 Vol.19 No.8
棘组Ⅰ的红细胞 、肝 SOD活力与 D-半乳糖组间差异有显著
性意义(P<0.05)。 D-半乳糖火棘组Ⅱ各组织和红细胞的
SOD活力均显著高于 D-半乳糖组(P<0.01)。
表 1　火棘对小鼠心 、肝 、脑组织
MDA 含量的影响( x ±s , μmol/ L)
组　别 心 肝 脑
空白对照 98.25±10.18 141.54±12.71 123.83±13.41
D-半乳糖组 159.49±11.24a 258.34±13.91a 229.71±12.72a
D-半乳糖火棘组Ⅰ 121.32±13.14b 209.91±11.56b 221.47±11.23
D-半乳糖火棘组Ⅱ 119.56±12.23c 199.81±14.81c 182.11±10.81c
　　注:与空白对照组比较 , a P <0.01;与 D-半乳糖组比较 , b P<
0.05 , c P<0.01;n=20
表 2　火棘对小鼠红细胞 、肝 、脑组织
SOD活性的影响( x±s , μU/ L)
组　别 红细胞 肝 脑
空白对照 1 589±41 843±12.8 651±11.4
D-半乳糖组 1 008±29a 624±11.3a 523±12.7a
D-半乳糖火棘组Ⅰ 1 126±24b 712±10.6b 538±13.4
D-半乳糖火棘组Ⅱ 1 289±32c 788±12.1c 609±11.5c
　　注:与空白对照组比较 , a P <0.01;与 D-半乳糖组比较 , b P<
0.05 , c P<0.01;n=20
2.3　火棘对小鼠全血 、肝 、GSH-Px 活性和 GSH 合量的影响
(表 3)　在末次给药后 24h , 断颈处死小鼠 , 按试剂盒说明书
分别测定 GSH-Px 活性和 GSH 的含量。结果无论是 D-半
乳糖组肝 、全血 GSH-Px 的活力水平还是GSH 的含量均显著
低于空白对照组(P<0.01), D-半乳糖火棘组Ⅰ肝的 GSH-
Px的活力和 GSH 含量较 D-半乳糖组都有显著回升(P <
0.05), 全血此 2项指标有回升趋势但差异不显著(P>0.05)。
而在 D-半乳糖火棘组Ⅱ无论全血还是肝脏的 GSH-Px活力
和GSH 含量均显著高于 D-半乳糖组(P<0.05)。
表 3　火棘对小鼠全血 、肝脏 GSH-Px活性
与 GSH含量的影响( x ±s)
组 　别
GSH-Px活性(U/ml)
全血 肝
GSH的含量(mg/ 100ml)
全血 肝
空白对照 13.12±1.95 60.23±5.04 20.71±2.35 7.73±0.56
D-半乳糖组 7.57±1.52a 38.45±4.32a 13.62±1.91a 4.98±0.28a
D-半乳糖火棘组Ⅰ 8.68±1.61 47.29±3.43b 14.22±2.52 6.01±0.46b
D-半乳糖火棘组Ⅱ 10.45±1.49b 49.41±4.14b 16.49±1.93b 6.56±0.32b
　　注:与空白对照组比较 , a P<0.01;与 D-半乳糖组比较 , b P<
0.05 , c P<0.01;n=20
2.4　火棘对小鼠胸腺重量的影响　在末次给药后 24 h , 剖取
各小鼠胸腺 ,按胸腺重 mg/(10g·bw)计算胸腺指数。结果 , 空
白对照组的胸腺指数为 22.43±1.54 , D-半乳糖组为 15.89±
1.46 , D-半乳糖火棘组 Ⅰ为 17.65±1.34 , D-半乳糖火棘组
Ⅱ为 20.33±1.69。经统计学分析表明 , D-半乳糖组的胸腺
指数显著低于空白对照组(P<0.05), D-半乳糖火棘组Ⅰ的
胸腺指数较 D-半乳糖组有回升的趋势 , 但差异无显著性意
义;D-半乳糖火棘组 Ⅱ的胸腺指数显著高于 D-半乳糖组
(P <0.05)。
3　讨论
D-半乳糖所致的衰老小鼠各抗氧化指标均显著高于或
低于空白对照组 , 提示 D-半乳糖造模成功。火棘饲养动物
42d 后 ,饲料中添加15%火棘果实粉的 D-半乳糖火棘Ⅰ 组
的部分过氧化指标如心 、肝 、脑的 MDA 含量和红细胞 、肝的
SOD活性 、肝的 GSH-Px 的活性 、GSH 含量均有明显改善。饲
料中添加 30%的火棘果实粉饲养 42d 后 , D-半乳糖所致各
过氧化指标与 D-半乳糖组比较均有显著性意义 , 并能恢复
甚至接近正常水平 , 提示火棘在改善机体物质代谢紊乱及延
缓机体衰老等方面具有一定的作用。大量的研究资料显示 ,
衰老过程中组织细胞中脂质过氧化水平逐渐升高〔1〕。本实验
所选用的若干过氧化指标基本上反映了机体衰老过程的真实
情况。火棘所表现出来的抗氧化作用 , 与其含有丰富的黄酮
类物质 、SOD活性物质 、丰富的 VC 、VE 及微量元素如 Cu 、Zn、
Mn等有关〔4〕 , 尤其是本实验材料火棘采自全国高硒区湖北恩
施市双河乡 , 火棘也表现出一定的硒富集能力。 VC 可影响
SOD的活性 , 扑灭氧自由基 ,在消除其毒性方面对 SOD起补
充作用〔9〕。 Se-GSH-Px是机体抗脂质过氧化作用酶性防御
体系的主要成分之一 , VC、VE 增加 Se在肠道中吸收 , 表现出
与 Se 的协同作用〔1〕。多数黄酮类化合物的药理作用与其抗
氧化效应有关〔11〕。Mn 、Zn、Cu 、Fe 等都是有效的氧自由基清
除剂 , 多种微量元素可协同完成清除自由基从而起到抗氧化
作用。因此 , 火棘抗氧化作用是火棘中各种黄酮类物质 、SOD
活性物质 、硒等微量元素以及 VC 、VE等协同作用的结果。
参考文献:
〔 1〕　朱怀荣 ,侯建军.魏文科 ,等.医学细胞分子生物学[M] .北京:
人民卫生出版社 , 2000.86-97.
〔 2〕　贵州省中药研究所.贵州中药资源[ M] .北京:中国医药科技出
版社 ,1992.702-703.
〔 3〕　柴立 ,郑亚玉 ,谢宝忠.赤阳子营养成分及保健作用研究[ J] .贵
阳中医学院学报 , 1988 ,(1):39-41.
〔 4〕　王军宪 ,牛娟芳 ,尤晓娟.秦岭产火棘果实的成分分析[ J] .西北
药学杂志 ,1994 , 9(5):204-206.
〔 5〕　侯建军 ,薛惠 ,李玉山,等.火棘对高脂饮食大鼠血脂和血液流
变学影响[ J] .中国公共卫生 , 2002 ,18(9):1059-1060.
〔 6〕　侯建军 ,魏文科.火棘通便润肠作用的药理研究[ J] .中国临床
医药杂志 ,2002 , 3(6):81-83.
〔 7〕　侯建军 ,魏文科.火棘抗疲劳的实验研究[ J] .武汉科技学院学
报 ,2002 , 15(5):66-68.
〔 8〕　龚国请 ,徐鲅本.小鼠衰老模型的研究[ J] .中国药科大学学报 ,
1991 , 22(2):101-103.
〔 9〕　NishikimM.Oxidation of ascorbic acid with superoxide anion generated
by the Xanthing -oxidase system[ J] .Biochem Biophys Res Com ,
1975 , 63:463-467.
〔10〕　Cupp M S.Ascorbate interacts with sodium selenium to increase glu-
tathione peroxidase act ivity in Se-deficient chick duodena cultural in
vitro[ J] .Biol Trace Elem Res ,1989 , 20(1-2):87-91.
〔11〕　Grygleuski T.Flavoniids as anti-oxidants evaluated by in vitro and in
situ liver chemiluminescence[ J] .Biochem Pharmacol , 1987 , 36:717-
721.
收稿日期:2002-11-25 (任旭红编辑　蔡天德校对)
945中国公共卫生 2003年第 19卷第 8期　　Chin J Public Health 2003 Vol.19 No.8