全 文 ：　青海农林科技 ·试　验　研　究· 2008年第 1期　
水栒子组织培养的研究＊
蒲海萍 ,黄　洁
(城南苗圃 ,青海　西宁　810001)
　　　　摘　要:取水栒子驯化种的当年生带叶芽茎段为外植体 , 接种于不同激素配比的 MS培养基上。结果表明 ,
不定芽诱导的最佳培养基为 MS+BA2.0单位 mg· l-1 ,下同;不定芽增殖最佳培养基为 MS+BA2.0+NAA0.5;
不定根诱导最佳培养基为 1/2MS+NAA0.5。
关键词:水栒子;不定芽;组织培养;激素
中图分类号:S603　　　　文献标识码:A　　　　文章编号:1004-9967(2008)01-0031-02
StudyonTissueCultureofCotoneastermultiforus
PUHai-ping, HUANGJie
(XiningChengnanNursery, XiningQinghai810001, China)
　　Abstract:BudstickwithleafofCotoneastermultiforusinayeartobeasexternalimplantationtissue.It
wasinoculatedonMStissueculturemediumofdiferenthormoneratio.Theresultsshowedthebesttissue
culturemediumofadventitiousbudinducewasMS+BA2mg· l-1 , thebesttissueculturemedium of
adventitiousbudenrichmentwasMS+BA2.0+NAA0.5, thebesttisueculturemediumofadventitiousroot
inducewas1/2MS+NAA0.5
Keywords:Cotoneastermultiforus;Adventitiousbud;Tisueculture;Hormone
　　水栒子 (Cotoneastermultiflorus)属蔷薇科栒
子属落叶灌木〔1〕 ,它根系庞大 ,冠形优美 ,枝繁叶
茂 ,花多色白 ,梨果红色 ,是优良的水土保持和观
赏性树种 ,在园林绿化方面是较具开发潜力的青
海野生植物之一。多年来 ,水栒子一直依赖传统
的播种繁殖 ,繁殖速度较慢 ,形不成规模。截至目
前 ,国内未见有关水栒子的组培快繁技术方面的
报道。为此 ,于 2006年开展了水栒子组培快繁研
究 ,并于当年获得了一套完整的水栒子组织培养
技术。
1　材料与方法
1.1　实验材料
西宁市植物园野生水栒子驯化种 ,当年生嫩
枝枝条 。
1.2　实验材料的消毒处理
将采集来的水栒子当年生枝条为外植体 ,去
除叶片留少许叶柄 ,截成 10cm长段 ,用 100倍的
洗衣粉溶液浸泡 10min后 ,在流水下将泡沫冲洗
干净 ,再用纯净水冲洗 3 ～ 4次 ,放入超净工作台
备用。在超净工作台中 ,将截好的栒子嫩枝在切
割盘中切成 1cm带芽茎段 ,用 75%的酒精浸泡
30s,用无菌水冲洗 2 ～ 3次 ,之后用 0.1%的升汞
溶液灭菌 6min,用无菌水冲洗 5 ～ 6次后备用 。
1.3　接种和培养条件
把消毒好的茎段插接于备好的培养基上后 ,
放置在培养间培养 。培养温度为 25 ±2℃,光照
强度为 1500Lux,光照时间 12h/d。
1.4　实验方法
1.4.1　不定芽的诱导培养
本实验以 MS为基本培养基。培养基中均加
入蔗糖 30g· l-1 、琼脂 6.4g·l-1、pH值均为 5.8。
在不定芽诱导阶段采用 6— BA六个浓度处理 ,分
别为 1、2、3、4、5、6mg· l-1(单位后同)。
1.4.2　不定芽的增殖培养
将从腋芽处产生的不定芽用快刀片切下分别
转接到增殖和壮苗培养基上。增殖和壮苗培养基
配方采用 6-BA六个浓度梯度处理 ,分别为 0.3、
0.6、0.8、1.0、2.0、3.0mg· l-1(单位后同), NAA
两个浓度梯度处理 ,分别为 0.2、0.5mg· l-1。
1.4.3　不定根诱导
将叶片数 5片以上 ,高度 5cm以上 ,生长健
壮的大芽 ,切下转接到生根培养基上 ,观察比较苗
的生根情况。生根培养基配方以 1/2MS为基本
培养基 ,采用 NAA四个浓度梯度处理 ,分别为 0、
0.02、0.5、1mg· l-1(单位后同)。
2　结果分析
31
＊　收稿日期:2007-06-04
　作者简介:蒲海萍(1981-),女 ,青海湟中人 ,目前主要从事温室花卉组培快繁技术研究及瓶苗炼苗移栽工作。
　电话:0971-3930863
2.1　不定芽诱导培养基的筛选
接入培养基上的茎段 15d后腋芽处生出嫩黄
绿色小芽 ,继续培养 ,颜色逐渐由嫩黄绿色转为嫩
绿色 , 5d左右可看到腋芽明显增殖。由实验可看
出 ,在同一培养条件下 ,在 MS+6-BA3上丛生芽
诱导速度最快 ,分化率最大 ,但不定芽玻璃化现象
严重 ,不利于扩大繁殖 。在 MS+6-BA2上不定芽
诱导相对较快 ,且生长健壮 ,因此 MS+6-BA2培
养基为水栒子不定芽诱导的最佳培养基。从表 4
中可看出 ,随着 6-BA浓度的增大 ,增殖倍数呈现
低一高一低的变化规律(表 1)。
2.2　增殖阶段培养基的筛选
将健壮的不定芽转移到增殖培养基上 ,转接
20d后 ,各继代培养基上均出现了不同程度的不
定芽 , 40d后出现了明显的差异 ,比较不同培养基
上不定芽增殖情况:与其它培养基相比 MS+6 -
BA3.0+NAA0.5中不定芽增殖倍数最多 ,但叶片
颜色为墨绿色 ,丛生芽细弱且玻璃化现象严重 ,
MS+6-BA2.0+NAA0.5中丛生芽相对较多 ,颜
色黄绿偏绿 ,不定芽生长健壮。 (详细情况见表
2)
表 1 初代培养分化情况表
培养基 接种数量 增殖数量 增殖倍数
MS+6-BA1 50 0 0
MS+6-BA2 50 32 3
MS+6-BA3 50 15 1
MS+6-BA4 50 2 0
MS+6-BA5 50 0 0
MS+6-BA6 50 0 0
表 2 继代培养增殖情况表
培养基号 接种数 增殖系数 玻璃化 不定芽颜色
MS+6-BA0.3+NAA0.2 100 2 无玻璃化现象 黄绿偏黄
MS+6-BA0.6+NAA0.2 100 2.5 无玻璃化现象 黄绿偏黄
MS+6-BA0.8+NAA0.2 100 2.8 无玻璃化现象 黄绿
MS+6-BA1.0+NAA0.2 100 3.5 无玻璃化现象 黄绿
MS+6-BA2.0+NAA0.2 100 4.5 无玻璃化现象 黄绿偏绿
MS+6-BA3.0+NAA0.2 100 5.6 1/3的不定芽玻璃化 墨绿
MS+6-BA0.3+NAA0.5 100 1 无玻璃化现象 黄绿偏黄
MS+6-BA0.6+NAA0.5 100 1.5 无玻璃化现象 黄绿偏黄
MS+6-BA0.8+NAA0.5 100 3 无玻璃化现象 黄绿
MS+6-BA1.0+NAA0.5 100 3.8 无玻璃化现象 黄绿
MS+6-BA2.0+NAA0.5 100 6.5 无玻璃化现象 黄绿偏绿
MS+6-BA3.0+NAA0.5 100 7 1/10的不定芽玻璃化 墨绿
2.3　生根培养基的筛选
不定芽在生根培养基上 18d后根萌动 , 25d
后生成 1cm长的白色小根 4 ～ 5条 , 30d后根长至
4 ～ 5cm。分别调查各培养基上的生根情况 ,其中
在 1 /2MS+NAA0.5培养基上水栒子生根速度最
快 ,数量最多 ,平均根长最长 ,且根系粗壮(见表
3)。
3　炼苗
生根瓶苗闭盖瓶炼 3d,开盖瓶炼 3d后 ,取出
清洗附着在根部的培养基 ,将根系部分在 2000倍
农用链霉素和 1000倍的多菌灵的混合溶液中浸
泡 30s之后栽植到装有黑土的营养钵中 ,浇足水 ,
适当遮光。 15d后 ,叶面施一次磷 、钾肥。 30d后
可定植到大田中 。
4　小结
通过以上试验 ,可小结如下 。
4.1　水栒子不定芽诱导的最佳培养基为 MS+
BA2.0。
4.2　水栒子不定芽增殖的最佳培养基为 MS+
BA2.0+NAA0.5。
表 3 水栒子组培苗生根情况观测统计表
培养基 接种数 (个) 萌动时间(d) 平均根数(条) 平均根长(cm)
1/2MS 100 23 3 1.25
1/2MS+NAA0.02 100 20 3.5 2.35
1/2MS+NAA0.5 100 18 4.8 2.55
1/2MS+NAA1.0 100 20 3.1 2.3
4.3　水栒子不定根诱导的最佳培养基为
1 /2MS+NAA0.5。
参考文献:
〔1〕西宁市植物志编辑委员会.西宁植物志〔M〕.北京:
中国藏学出版社 , 1999.273.
〔2〕曹孜义 , 等.实用植物组织培养教程 〔M〕.兰州:甘肃
农业技术出版社 , 1996.
〔3〕陈振光 , 等.园艺植物立体培养学〔M〕.北京:中国农
业出版社 , 1996.
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