全 文 ：北方园艺 2011(14):129 ～ 130 ·生物技术 ·
第一作者简介:詹菁(1984-),女,湖北武汉人 ,硕士,研究方向为园
林植物与观赏园艺, 现从事园林植物育种研究工作。 E-mail:
zhanjing zhanjing@yahoo.com.cn。
收稿日期:2011-04-11
小丑火棘的组织培养与快速繁殖初探
詹 　菁1 , 王 云岳1 , 徐 　远1 , 马广 莹2
(1.杭州蓝海生态农业有限公司 ,浙江萧山 311202;2.浙江省农业科学院花卉研究开发中心 ,浙江萧山 311202)
　　摘　要:以小丑火棘的幼嫩茎段以及顶芽为外植体 ,通过改变植物生长调节物质的质量浓度
及配比进行无菌苗的诱导 、茎段增殖快繁试验 ,旨在建立小丑火棘的组培快繁体系 ,为其工厂化
生产奠定基础。结果表明:小丑火棘理想的无菌苗诱导培养基为 MS+6-BA 1.5 mg/ L+NAA
0.1 mg/L ,诱导率达 94%,且植株强健;最佳的继代增殖培养基为 MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA
0.1 mg/L ,增殖系数高达12。
关键词:小丑火棘;茎段;组织培养;快速繁殖
中图分类号:S 793.903.6　文献标识码:A　文章编号:1001-0009(2011)14-0129-02
　　小丑火棘(Pyracantha fortuneana `Harlequin )为
蔷薇科苹果亚科火棘属植物 ,是由日本培育出的火棘
的栽培变种。它性喜光照 ,耐寒性强 ,在北京以南 、西
安以东的广大地区都可露地越冬[ 1] 。小丑火棘耐盐碱
土能力强 ,在含盐量0.2%土壤中能生长良好 ,耐瘠薄 ,
根系密集。以地被种植 ,可以抵御流水冲刷 ,具有很好
的水土保持功能。此外 ,还能吸附二氧化碳等有毒气
体 ,是优良的生态公益性树种。小丑火棘枝叶茂盛 ,叶
色美观 ,果实鲜红 ,初夏白花繁密 ,入秋红果满枝 ,经久
不落。而且冬季叶片粉红色 ,是优良的观叶兼观果植
物。同时通过合理修剪 ,还可配置成彩叶观果绿篱[ 2] 。
小丑火棘常采用扦插的方式进行种苗繁育 ,但生
根繁殖系数低 ,繁苗速度慢 ,且生根困难 ,满足不了生
产的需求 ,而且多代扦插容易造成性状退化 ,采用组织
培养技术则可以有效地克服这些缺点。目前与其同属
的火棘组织培养已有研究[ 3-4] ,但迄今小丑火棘的组织
培养与快速繁殖鲜有报道 。该研究以小丑火棘的茎段
以及顶芽为外植体 ,通过不同激素以及不同质量浓度
的配比试验 ,对腋芽的高效诱导 、增殖扩繁的影响进行
探讨 ,为小丑火棘组织培养与快速繁殖奠定了基础 。
1　材料与方法
1.1　试验材料
试验材料为杭州蓝海生态农业有限公司种质资源库
内的小丑火棘植株。选取生长旺盛、无病虫害的小丑火
棘 ,剪取植株上部幼嫩的茎段、顶芽 ,长度约 1.5 ～ 2 cm。
1.2　试验方法
选取生长健壮 、无病虫害的小丑火棘幼嫩的茎段
以及顶芽为外植体。先用自来水冲洗干净 ,切除多余
叶片 ,用软毛刷和清洁剂溶液轻轻刷洗干净 ,用 800
mg/L的 84消毒液浸泡 20 min ,再用清水冲洗 0.5 ～
1 h备用 。在无菌条件下用 75%酒精浸泡 30 s ,再用
0.1%的升汞溶液浸泡 8 ～ 10 min ,其间不断摇动使外
植体与升汞充分接触 ,消毒后再用无菌水冲洗 4 ～ 5
次 ,用无菌滤纸吸干外植体表面的水分 ,然后用剪刀将
茎段两端坏死部分切除 ,保持极性接种到无菌苗诱导
培养基上 ,于培养室内进行培养。
1.3　培养基
培养温度为(25±2)℃,光照时间为 16 h/d ,光照
强度约为 2 000 lx。以MS 为基本培养基 ,附加 2种植
物生长调节物质 ,即 6-苄基氨基嘌呤(6-BA)和α-萘乙
酸(NAA)。选择多种不同质量浓度的组合 ,进行小丑
火棘腋芽诱导 、继代增殖对比试验。上述各培养基均
加入3%蔗糖和 0.8%琼脂 ,pH 5.8 ～ 6.0 ,经 121℃高
温灭菌 20 min。2种培养基各配比组合如下:诱导培
养基(1)MS +6-BA 0.5 mg/L;(2)MS +6-BA 0.5
mg/L+NAA 0.1 mg/ L;(3)MS +6-BA 0.5 mg/L +
NAA 0.5 mg/ L;(4)MS+6-BA 1.0 mg/L;(5)MS +
6-BA 1.0 mg/ L+NAA 0.1 mg/ L;(6)MS+6-BA 1.0
mg/L+NAA 0.5 mg/L;(7)MS+6-BA 1.5 mg/ L;(8)
MS+6-BA 1.5 mg/L +NAA 0.1 mg/L;(9)MS +
6-BA 1.5 mg/ L+NAA 0.5 mg/ L。继代增殖培养基
(10)MS +6-BA 1.0 mg/L;(11)MS +6-BA 1.0
mg/L+NAA 0.1 mg/L;(12)MS +6-BA 1.5 mg/L;
(13)MS+6-BA 1.5 mg/L+NAA 0.1 mg/L。
2　结果与分析
2.1　无菌苗的诱导
将外植体接种到编号为(19)的无菌苗诱导培养基
上 ,每种培养基 25瓶 ,每瓶接种的外植体数均为2个 ,于
培养室进行培养。10 d左右 ,部分外植体开始萌发转
绿 ,于20 d时统计萌芽数 ,结果如表 1。(3)号培养基上
的外植体几乎不萌发 ,且在外植体的基部和茎节处出现
大量白色愈伤组织团。(1)、(2)、(6)号培养基萌芽率较
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低且在茎节处有少量愈伤组织出现 ,叶片小且发黄 ,后
渐脱落。(4)、(5)号培养基上 ,茎尖和侧芽萌发较多 ,成
苗率较高 ,但植株生长缓慢 、低矮且茎节数少 ,不利于后
期的增殖培养。(7)、(8)、(9)号培养基上 ,外植体的萌发
及成苗率均较高 ,其中以(8)号培养基最佳 ,萌芽率达
94%,且植株生长旺盛 ,叶片大 ,叶色浓绿。
2.2　继代增殖培养
将小丑火棘诱导培养基上的无菌苗切成带一个侧
芽的小段 ,转接到附加不同成分的增殖培养基上进行
继代培养(表 2)。以 25 d 为周期进行增殖继代培
(10)、(11)号培养基上的小丑火棘茎杆粗壮 ,生长迅
速 ,叶片大而叶色绿 ,苗高和茎节数理想 ,且茎节处腋
芽明显 , 多次继代性况稳定 ,能满足离体快繁的需要 ,
且以(11)号培养基为最佳。(12)、(13)号培养基初代
培养时性状良好 ,苗平均高达 4.6 cm ,但经转代培养
后 ,性状迅速减退 ,绝大多数腋芽不萌发且严重玻
璃化。
表 1　9种培养基对火棘无菌苗诱导的效果
激素组合/mg· L-1 外植体/个 萌芽数/个 诱导率/ %
(1) 50 9 18
(2) 50 11 22
(3) 50 1 2
(4) 50 28 56
(5) 50 32 64
(6) 50 13 26
(7) 50 41 82
(8) 50 47 94
(9) 50 40 80
　　表 2 小丑火棘的增殖继代培养
激素组合 外植体 第 1代 第2代 第 3代
/mg ·L-1 /个 苗高/cm 茎节数/个 苗高/cm 茎节数/个 苗高/cm 茎节数/个
(10) 50 3.9 4.3 4.1 4.4 3.8 4.2
(11) 50 4.2 4.6 4.5 4.6 4.5 4.7
(12) 50 4.5 4.8 3.2 3.2 绝大多数不萌发且玻璃化
(13) 50 4.6 5.0 2.8 3.0 绝大多数不萌发且玻璃化
图 1　小丑火棘的组培再生
注:1外植体;2初代诱导芽;3增殖苗。
3　结论
综上所述 ,适宜小丑火棘无菌苗诱导培养基为MS
+6-BA 1.5 mg/ L+NAA 0.1 mg/L ,适宜茎段增殖继代
的培养基为 MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L。
参考文献
[ 1] 　郑勇平 ,邵春荣 ,徐木水 ,等.小丑火棘扦插繁殖技术[ J] .林业科技
开发 , 2008 ,22(3):101-103.
[ 2] 　潘晓东.小丑火棘的特性及其园林应用[ J] .浙江林业 , 2008
(9):32.
[ 3] 　陈文武 ,李清秀 ,吴江涛 ,等.火棘的茎尖培养与快速繁殖[ J] .北方
园艺 , 2007(9):202-203.
[ 4] 　李玉奇 ,邓光华.观赏植物火棘研究进展[ J] .江西林业科技 , 2005
(1):39-41.
Tissue Culture and Rapid Propagation of Pyracantha fortuneana `Harlequin
ZHAN Jing1 ,WANG Yun-yue1 , XU Yuan1 ,MA Guang-ying2
(1.Hangzhou Blue Ocean Ecolo gical Agricultural Limited Company , Xiaoshan , Zhejiang 311202;2.Research Development Center of
Flower , Zhejiang Academy of Agricultural Sciences , Xiaoshan , Zhejiang 311202)
Abstract:The young stems and terminal buds of Pyracantha fortuneana `Harlequin as the explants ,were cultured
on MS culture media adding different concentration and proportion of phy tohormones to gain comparative culture
media of induction , multiplication and roo ting.The intention w as to build up a tissue regeneration sy stem of
Pyracantha fortuneana `Harlequin and provide technical platfo rm for its industrial production.The results show ed
that the optimum induction culture media was MS+6-BA 1.5 mg/L+NAA 0.1 mg/L , the induction rate was up to
94%;and the optimum subculture proliferation culture media w as MS +6-BA 1.0 mg/L +NAA 0.1 mg/L
proliferation rate w as up to 12.
Key words::Pyracantha fortuneana `Harlequin ;stem;tissue culture;rapid propagation
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